Aktivitas Nitrogenase azospirillum sp. dan Efektivitas aimbiotiknya dengan jagung
Vol. I, No. 2
Hmyati, W b t t 1994, hlm. 51-54
ISSN 0854-8587
Aktivitas Nitrogenase AzospiriZZum sp.
dan Efektivitas Simbiotiknya dtngan Jagung
MAN RUSMANA' DW D. DODIT HADUAYA
Jurusan BioIogi FMIPA IPB, Jalan
Raya Pojojajaran, Bogor 16144
Diterimo 24 September 1994Disetujui 7 November 1994
N k q p m Actlvlty
~
and Symbldk Effectlvlnaa of AzuupirUh rp. wltb Corn. FlltJ #t d tollr
~IVO b o w d A
Z - ~b.on phnt rootr ard A
d ~ i j ~ rp,
~ r l r
ud
O m d t r u q S i r e c u q@imam& PlnrJ,aurr ~IVPU~~UI(,
d Z.0 m y # tldf*6m d d a d
~ d o m l ywere tmted for tbairablUty to 6s .Itrossr on the bucr d t b l r A m t y h e B d . c t k .
ActMtf (ARA), Ail L o b a b w d tklr a p b l U t y to mduce acetylene, d each U t e bad
d ~ t A R A d e p e n d h g d l l I b ~ a n d L o r t rTarckEbdird.tawitb
.
MgbARAwwe
~ B W
hoerLtsdtoZla~totcrtWshrbiotledlccIvitJlwrrursdoa~bvcrdhorS~t
& v ~ t a n d i b d r yB b~m i r r r p r a d d b y f ? e r b e k t e s w r e , ~ t b a m ~ s l c o m t d
FrrU#aerq ARA did mot m l a t e with riaMotk activity.
--
PBNDMIULUAN
wHlu-*
dlluii
akw sumpst
tenuk
~~
tamman
sera1ia (Ouno' 1W).Stkin pa& 0A t v a ,
sp. daprt jugs diisald &ri ri&fa non Gmmineat (Oarno
QB Ahnc 1991).
hwpir&
sp. terdapat di tanab sckitar okar, permtrkaan
akar dm di &lam akar (Venkaterwarlu dan Raq 1983).
Pertuetbuhaa A z w p i U h sp. sangat baik pad8 d i u m yang
mcngrndung asam malat, eecun suksinat atau asam p i ~ v a t ,
dan &up baik p d a medium yang menganduag galaktorrs dm
metrt, sedan@
peda medium yeng mengandung glukosa
dm arrta d t n t perhrmbuhmnya kurang baik (Okon et aL,
197%Konds dm IbWcadale, 1984).
Asosiasi antan AzqiriUium sp. dengan tanomen dldugg
W f b t simbiosis karcna Araspitihm mp. menggunakm
rtnyawa malat h
~amber
i karbon untuk patumbubannya.
Dugpan ini diperkuat d e w adrnya aktivitas nitrogenaw
A z a ~ p w i l hsp. yang tumbub &lam kalw tebu (Berg et aL,
1980). Kcadaan tersebut analog dcngan Rhizdbium sp. yang
tumbuh pada kalus kodelei (Bednmki dan Reporter, 1978).
AzasphiUum sp. menambat nitrogen pada kondisi
mikroacrofil. Nitrogeh yang ditambat tersebut akan diserap
oleb tanaman dalam bentuk NOj- dan NH4' (Rao, 1982).
Selain mempunyai kemampuan untuk menambat N2,
hapirillum sp. marnpu mengbasilkan zat pengatur tumbub
seperti IAA ( 1 . 2 Ace& Acid), giberelin, auksin, serta
senyawa yang menyerupai sitokinin (Venkateswarlu dan Rao,
1983).
Dari percobaan ini telab diperoleb beberapa isolat
Azmpirillum sp. dari rbizosfer dan akar beberapa tanaman,
yang kemudian diuji aktivitas e n z h nitrogenasenya dengan
cma rcduksi asetilena (Aktivitas Reduksi Asetilena = ARA).
Salain itu j u p Guji penprubnya
psmmrbubrn
japng (&a -).
Irolat-blat Aaqifilhm rp, te&t
d a p t dipakai se-i
sum& plasma nvtfah unluk p l i t i a n
selanjutnya.
BAHAN DAN METODE
PqpmbUan Contob, Contob leash diambil dad daetab
rbiul~fet bescrta akat tanamamye. Contom tanab twsebut
dimasukkan kc &lam kantung-kantung plastik &n diberi label
yang menyetdran nomar cundi contoh tanab yang memberikan
kcterangan meagenai lokasi dsn waktu pengambilannya.
IloluiAzsp. Metode iroiasi yang dipikai yaitu
metode penyuburan yang menggunekrn medium semipadat
Ntb (Nitrogen free bromthymol) (Dobeminer et aL, 1976).
Bebcrapa potongan kecil akar (0.5-1.0 cm) dicuci menggunakan deterjen sampai bersib. Setelab potongan akar
tersebut dibiles &ngan air stcril . sebanyak tiga kali,
diinokulasikan ke dalam medium semipadat Nfb. Untuk
isojasi dari tanab, beberapa miligram contab tanah diinokulasikan ke dalam medium semipadat Nfb. Setelab diinkubui
selarna dua sampai empet bari pada subu kamar (28-30°C),
pembentukan pellice1 di bawah permukaan medium diamati.
Apabila pellicel terbentuk, biakan digoreskan &ngan metode
kuadran pada medium agar cawan Nfb yang menganduag
ekstrak khamir, amonium klorida dan congo r d (Okon et aL,
1977). Koloni yang tumbuh terpisah dan menunjukkan
morfologi koloni yang berbeda diamati menggunakan
mikroskop dengan perbesaran 1OOO kali. Koloni-koloni yang
terdiri dari sel yang berbentuk spiral diinokulasikan ke dalam
medium semipadat Nib. Setelab diinkubasi, pellice1 yeag
terbentuk diamati dan biakan disimpan p d a medium agar
miring.
Aktivitas Nitragcaase. Kemampuan isolat-isolat menambat N2 diukur berdasarkan aktivitas nitrogenase &lam
mereduksi asetilena (Barber et al., 1976). Pengukuran ARA
Hmyati, W b t t 1994, hlm. 51-54
ISSN 0854-8587
Aktivitas Nitrogenase AzospiriZZum sp.
dan Efektivitas Simbiotiknya dtngan Jagung
MAN RUSMANA' DW D. DODIT HADUAYA
Jurusan BioIogi FMIPA IPB, Jalan
Raya Pojojajaran, Bogor 16144
Diterimo 24 September 1994Disetujui 7 November 1994
N k q p m Actlvlty
~
and Symbldk Effectlvlnaa of AzuupirUh rp. wltb Corn. FlltJ #t d tollr
~IVO b o w d A
Z - ~b.on phnt rootr ard A
d ~ i j ~ rp,
~ r l r
ud
O m d t r u q S i r e c u q@imam& PlnrJ,aurr ~IVPU~~UI(,
d Z.0 m y # tldf*6m d d a d
~ d o m l ywere tmted for tbairablUty to 6s .Itrossr on the bucr d t b l r A m t y h e B d . c t k .
ActMtf (ARA), Ail L o b a b w d tklr a p b l U t y to mduce acetylene, d each U t e bad
d ~ t A R A d e p e n d h g d l l I b ~ a n d L o r t rTarckEbdird.tawitb
.
MgbARAwwe
~ B W
hoerLtsdtoZla~totcrtWshrbiotledlccIvitJlwrrursdoa~bvcrdhorS~t
& v ~ t a n d i b d r yB b~m i r r r p r a d d b y f ? e r b e k t e s w r e , ~ t b a m ~ s l c o m t d
FrrU#aerq ARA did mot m l a t e with riaMotk activity.
--
PBNDMIULUAN
wHlu-*
dlluii
akw sumpst
tenuk
~~
tamman
sera1ia (Ouno' 1W).Stkin pa& 0A t v a ,
sp. daprt jugs diisald &ri ri&fa non Gmmineat (Oarno
QB Ahnc 1991).
hwpir&
sp. terdapat di tanab sckitar okar, permtrkaan
akar dm di &lam akar (Venkaterwarlu dan Raq 1983).
Pertuetbuhaa A z w p i U h sp. sangat baik pad8 d i u m yang
mcngrndung asam malat, eecun suksinat atau asam p i ~ v a t ,
dan &up baik p d a medium yang menganduag galaktorrs dm
metrt, sedan@
peda medium yeng mengandung glukosa
dm arrta d t n t perhrmbuhmnya kurang baik (Okon et aL,
197%Konds dm IbWcadale, 1984).
Asosiasi antan AzqiriUium sp. dengan tanomen dldugg
W f b t simbiosis karcna Araspitihm mp. menggunakm
rtnyawa malat h
~amber
i karbon untuk patumbubannya.
Dugpan ini diperkuat d e w adrnya aktivitas nitrogenaw
A z a ~ p w i l hsp. yang tumbub &lam kalw tebu (Berg et aL,
1980). Kcadaan tersebut analog dcngan Rhizdbium sp. yang
tumbuh pada kalus kodelei (Bednmki dan Reporter, 1978).
AzasphiUum sp. menambat nitrogen pada kondisi
mikroacrofil. Nitrogeh yang ditambat tersebut akan diserap
oleb tanaman dalam bentuk NOj- dan NH4' (Rao, 1982).
Selain mempunyai kemampuan untuk menambat N2,
hapirillum sp. marnpu mengbasilkan zat pengatur tumbub
seperti IAA ( 1 . 2 Ace& Acid), giberelin, auksin, serta
senyawa yang menyerupai sitokinin (Venkateswarlu dan Rao,
1983).
Dari percobaan ini telab diperoleb beberapa isolat
Azmpirillum sp. dari rbizosfer dan akar beberapa tanaman,
yang kemudian diuji aktivitas e n z h nitrogenasenya dengan
cma rcduksi asetilena (Aktivitas Reduksi Asetilena = ARA).
Salain itu j u p Guji penprubnya
psmmrbubrn
japng (&a -).
Irolat-blat Aaqifilhm rp, te&t
d a p t dipakai se-i
sum& plasma nvtfah unluk p l i t i a n
selanjutnya.
BAHAN DAN METODE
PqpmbUan Contob, Contob leash diambil dad daetab
rbiul~fet bescrta akat tanamamye. Contom tanab twsebut
dimasukkan kc &lam kantung-kantung plastik &n diberi label
yang menyetdran nomar cundi contoh tanab yang memberikan
kcterangan meagenai lokasi dsn waktu pengambilannya.
IloluiAzsp. Metode iroiasi yang dipikai yaitu
metode penyuburan yang menggunekrn medium semipadat
Ntb (Nitrogen free bromthymol) (Dobeminer et aL, 1976).
Bebcrapa potongan kecil akar (0.5-1.0 cm) dicuci menggunakan deterjen sampai bersib. Setelab potongan akar
tersebut dibiles &ngan air stcril . sebanyak tiga kali,
diinokulasikan ke dalam medium semipadat Nfb. Untuk
isojasi dari tanab, beberapa miligram contab tanah diinokulasikan ke dalam medium semipadat Nfb. Setelab diinkubui
selarna dua sampai empet bari pada subu kamar (28-30°C),
pembentukan pellice1 di bawah permukaan medium diamati.
Apabila pellicel terbentuk, biakan digoreskan &ngan metode
kuadran pada medium agar cawan Nfb yang menganduag
ekstrak khamir, amonium klorida dan congo r d (Okon et aL,
1977). Koloni yang tumbuh terpisah dan menunjukkan
morfologi koloni yang berbeda diamati menggunakan
mikroskop dengan perbesaran 1OOO kali. Koloni-koloni yang
terdiri dari sel yang berbentuk spiral diinokulasikan ke dalam
medium semipadat Nib. Setelab diinkubasi, pellice1 yeag
terbentuk diamati dan biakan disimpan p d a medium agar
miring.
Aktivitas Nitragcaase. Kemampuan isolat-isolat menambat N2 diukur berdasarkan aktivitas nitrogenase &lam
mereduksi asetilena (Barber et al., 1976). Pengukuran ARA