Induksi Kalus dan Regenerasi Dioscorea composita Hemsl
Hnyrcri, luni 1994. hlrn. 15-17
ISSN 0854-8587
Vol. I.No. 1
Induksi Kalus dan Regenerasi Dioscorea composita Hemsl
ISNAINI
NURWAHYUNI' DAN PUSPA DEWI TJONDRONEGORO
Jurusnn Biologi FMIPA IPB, / I . Raya Pajajarnn. Bogor 16144
Diterim 2 Mei 1994/Di.~jui18 Juni 1994
Callus induction and planlet regeneration of D. composira Hemsl are described. Nodal cuttings and young sctds of D. conrpodfa wert induced to produce callus and planlets on modified
MS medium, tJmt are supplemented with various conclentrations of p w t b rg(&tors and 0.8%
agar. In the culture ofnodal segments, 8 single plantlet was produced by the proliferation of
axiilnry buds and was not from the undifferentiated callus. However, from seed cultures,
anhayogenic d u s was able to be q p c r a t c d to plantlets after subculturing into regeneration
mcdiurn.
PENDAHULUAN
Dioscorea composita merupakan satu dari 650 jenis
Diorcorca (Courney, 1967; Ayensu, 1972) yang krasal
deri Meksiko Selatm. Tattarnan ini tumhuh normal pada
ketinggiaa LSO4Wg.-1962)denyan variari Jan komhtnari aukrin, ritakinin dan senyawa organik kompleks.
Kumhinuc u t pcngatur tumhuh dengan canein hidrolinat
J~laporkanmemacu pcrnhcntukan kalus emhriogcnik
(Orafo, 1988). Namun medium hasal MS naja dapat
digunrkan untuk mikruprg.grs~I).crlrrm haik dcngm pm
pcrlakuan k d d a p c4.spl.n (Mancell n dl.. 1978) nmupun
.mpa peWw (Ammtmto, 19154).
'l'cnults untuk Korcsp&nw
BAHAN DAN METODE
Buhrm. D, contpositcr diperold dari Laboratorium Fisiolopi Tumbuhaa, Jutusan Biologi FMIPA IPB.
Penyiapan Medium untuk Pertumbuhnn. Medium
kultur ymg disiapkan idah malium kultur huku hatang.
medium kultur biji. medium regcnerari. dun medium
parakana yang dip8datk.n dengan agar 0.8 % dm diatur
pH nya mbajadi 5.8. Medium kultur buku hatang merupakm beberapa kombinui medium ba.sal MS dengan air
kdapa(0, 75, Jur 150 mln) dan 2.4-D (0, 0.5, 1.0. 1.5.
2.0, 2.5, dm 3.O.mgll) *tau NAA (0, 0.5, d m 1.O) dm
BAP (0, 0.5, l.O, 1.5, 2.0, 2.5, dan 3.0). Medium kultur
hiji mudr marupkan behenpa medium hrul MS h g m
NAA (1.0, 3.0. dan 5.0 mg11) dan BAP (0. I mg11).
Sedmgkan medium regeaensi merupakan medium basal
MS deagan sukrolu (45 gll) dur 2.4-D (0.5 mg11) yrng
dikenal rehagai MS 45 (Viana den Mantell, 1989).
Medium ini digunakan ubagai medium regenerui dari
kalur yang diperoleh dari buku batang dan b i j i mud.
Medium patakaran meruykan medium basal MS yang
dipericaya dcagan 0. I mgfl N M (Chaturvdi. 1975).
Paniliban Eksplan. Eksplrn huku hatang diamhil dari
huku brtang kc-2 srmpai 5 dari bagian apikal tanaman.
Setiap buku batang kemudian dipotony scpanjaag 1.5
mmpi 2.0 cm dan dicuci hnnrrut-turut denpan detergut,
d m 0 1 70% dunr 30 Jaik. Clomx 20% dan 10%(hchm
&if d i u m hipoklorit 5.25%) aruring-masing scl.mr 10
mcnit rerta HgCIl 0.1 % selama 5 menit. Ekspl~n
kemudian dibilas dengan .Irluda rteril tiga kali rebelum
dimam pulr medium kulrur huku hrlmp.
Biji m;d. ( 1-2 minggu setelah penyerhukan) distcrilkan
dmgm mcronJ.mnya hertumt-turut JaIam Clorox 10%
Jan 5 % muring-maring =lama limn mcnit. mlanjutnya
dicuci r k W MItiga kali. Biji terachut dilukai nlah
utu u h y a dcagan ujung skalpl. kcmudim diuruh pula
d i u m kultur hiji.
Buku hturg &n biji mud^ ditamm p d khzn(tr
~
nucam perlakuan medium denpan ncpuluh ulangan Jan diinkuhuikan dalam mngan dcngan penyinark 1000 lux
( 16 jam/h.ri) pub nuhu 25 2 Z'C.
Pengunatan. Penyamatan meliputi scgala pcruhahan
p'da eksplan di dalam kultur yaitu pemhzntukan Jan
perrumhuhan kalur, tuna. akar. Jan planlet. Kalur yang
terhcntuk ditumhuhkan pad. rncdtum MS 45 dan tunas
16
NURWAHYUNI D A N TJONDRONEGORO
yang tsrbzntuk dipindnhkan prdir MS yrng diperkaya
dengan 0.I mgll NAA. Masing-masing diamnti krmampuannya untuk kregenerrrsi dm krakar.
HASIL
Pengilruh A i r Kelupa dan 2,443. Eksplan huku hatang
yang Jitumhuhkan pada medium rnenunjukkan bahwa
hampir remua perlakuan medium M S dengan kornbinasi
a i r kelapa (0. 75. Jan 150 mlll) Jan 2.4-D (0. 0.5, 1.0,
1.5. 2.0, 2.5. dan 3.0 mpll) dapat menghasilkan kalus
(Tahzl I).Medium M S dengan a i r kelapa 150 mlll yang
dikomhinasikan dengan semua kon.wntrasi 2.4-D paling
haik untuk pemkntukan kalus. Kalus ini tumhuh h y a k
.ukali dengan ukuran hcr;.r (diameter mtara 3.9-5.0 cm).
Jenis kalusnya nonamhriogenik dengan tekstur lembekhzrair dan pada permukaannya terdapat sedikit kalus
f i b Perlakuan yang J i k r i k v n ini tidak ccxok untuk
menginduksi kalus organogenik dan emhriogenik. Data
lengkap hesil penelition ini ada p d a pnulis (Nuwahyuni
dim Tjondronagoro. 1993).
Tahel 1. Penganrh Air Kelapa dan 2.4-D Jalam M d i u m
MS terhrdrp Pemhentukan Kdus pada Kultur
Buku Brtang D. crm~p~.vittr
Air
kelapa
(mlll)
0
0.5
1 .O
1.5
2.0
2.5
Tabel 3. Pertumhuhan Eksplan Biji Do cc~rriposircrpada
Medium MS Diperkaya dmgan NAA dm BAP
Pzrlnkuan
NAA Jan BAP
( mpll)
1.0 dan 0.1
3.0 dan 0.1
5.0 Jarr 0.1
Pertumhuhan Kultur 9€
Kaius
Akar
Tunas
90
..
-
80
80
.
I
0
..
0
Planlet
..
o
0
Pertumbuhon pado Medium Subkultur (MS 45).
Pa& d i u m ~ubkulturkalus dari buku batang perlakuan
d i u m US dengan kombinasi air k d a p dm 2.4-D .wrta
medium MS dengan kombinasi N A A dan BAP tidak
m e m h t u k planlet. Dalrrm kultur MS 45 ini. kalusfriqblr
dari eksplan huku hatang dalam medium MS yang diperkaya dengan a i r kelapa dan 2.4-D dapat krdifetensiasi
menjadi akar serahut sedangkon dari kalus kompak yang
terbentuk pada medium MS dangan komhinasi N A A Jan
BAP tumhuh menjadi tunas abnormal. Namun kalus drri
h i j i nampaknya cocok untuk diregcnerasi kan pad.
medium ini sehinggr Japat diperoleh 7- 10 planlet per
hotol kultur. Planlet kemudian diaklimatisasikan drn
herhasil ditumhuhkan di p ~ b tc r i s i campurrn tanah Jan
prsir dengan pmPndingan I:I.
3.0
Ratio sitokinin Jan auksin dalrm medium menentukan
tipe prtumhuhan d m perkemhangan ckrplan yang ditanam (Murashigc dan Skcwp. 1962). Ternyata pemilihm
jenir ut pengatur tumhuh dan jenir eksplrn jug* ikut
herpengaruh. Hal ini terhukti pada eksplan buku hatany
k: kalrur, -: ekrplrn tiJ& turnhuh
yang hanyr numpu tumhuh minjadi kalus pad. medium
Pcngrruh B A P dun N A A . Percohaan medium MS
US yaag diperkaya dengan a i r kelrpa (sumber sitokinin)
dcngan kornhinari ritokinin BAP dun N A A lehih bervadan 2.4-D (Tiahel 1). 2!at p g a t u r turnhuh y.np diharikan
riasi (7"irbcl 2). Pad8 behemp. pcrlakuur dipcnleh kalru
t e r p i d . 2.4-0. hiasmy. J p p t m yinisaut pbmbcntukan
komprk. tunas, akrr. kajus J.n turua ncrt. planlet. Tunur
krluc emhriogenik D. nlcrta. Sdanpkun. nitokinin I M P
tunggal tehntuk JIri pcrtumbuhm tunwv dcsiler.
mengindukri proliferasi merirtem apikrlnys Jan j u y r
memacu perturnhuhan tunas aksiler (Salisbury dan Ross.
Tvhel 2. Rcspons Eksplan Buku Butmng D. cornposirn
1992).
tcrhwdap N A A dPn BAP &lam Medium US
Pad. komhinrsi perlakuun N A A dan BAP, pembcrian
BAP 1 .O dan I.5 mpll (Taahzl 2) dapat rnemacu pzrtumNAA
BAP (mpll)
huhut tunas Pksilcr s e s u i dengan pendapat Salisbury Jm
( mpll)
Ross (1992) Jur hwil dwri komhinasi prlakuur yang lain
0
0.5
1.O
1.5
2.0
2.5
3.0
hervrriasi. a ini rnungkin dixhahkan karcna pcnganth
h o m m cndogcn yrny jumlohnya hcrvarimi psdP eksplan
yang dikulturkan. Namun, tidak ad. ~ t u p u nprlukuun
Jalam penelitirn i n i yrng Japat mcmacu proses multiplikrri t u n u aknilcr. Ammimto (1982) mendaptkan #urn
tunas per eksplrn. redangkan d a r i h a r i l percohaan ini
k: kaluri. t: t
. a: rkar
hanyr Jihasi1k.n rutu tunas srja.
C3ulY tunus yu)g mulai bcnlrun Jtlrrkukur pemlrharuu,
Percchun induksi kalus Jan rcyenemsi p.J. R. c'rl~rnp~.virct ini mmunjukkan hwil yang hervarirqi. Komhinrqi ut
~ m p adwnnyr
i
hijru drn memhuka. Tunas yrng mcmpunyal 2 - 4 huku hatang Jipindahkrn kc medium
penlacur tumhuh yang diherikan hanyr mampu menurnpcrakarsn ?ampi tcrhcntuk plunld. Ek-splm huku h t ~ g huhkm cksplln huku h t m g mcnjuli kalua nonemhtiiigenik, akar. drn tunas tunegal. Pcrlaku~nkomhinasi N A A
yrnp frekucnsi tumhuhnya tingyi unwk herkcmhang
Jrlrm kultur adwlrh yrng h s r a ~dari
i huku kc-3 dun 4.
dan BAP hanya nlampu menghasilkm wtu trnamrn per
r
dan 2.443
huku hatang. ~Jwngkanperlakuan a ~ kelapa
Iikuplan h ~ jrnuda
i
y mp dllukai J r p t memhtuk kalus
cmhr~opcnikpadw t i c t i p komhiruzl N A A Jm BAP. Nam~ r h kmcnyhr\tllian plunlct. Kultur hiji &pat rnemhcntuk
paknyia Liticpwtm pcrtun~huhrnkalus k h n d l n g tangsung
k a l u s cmhr~ogcnckpwdw tned~ump n p dccohwkan dwn
Jcnprn kon.wntrrsc N A A (Trhcl 2 ) .
k a l u 5 tcrschut swngat r c s p o n s t l untuk tumhuh ttlcnjadi
hchcmp planlet puda i~wdiutnrcycncrasi .
KULTUR JARINGAN DIOSCOREA COMPOSITA HEMSL
17
D A n A R PUSTAKA
Nurwahvuni,
.
N. dan POD.Tjondronegoro. 1993.
Ammirato, 'V.
1982. Growth and Morphogznzsis in
Cultures of the Monocot Yam!. Diosct~redr.p. 169- 170.
I n A. Fugiwara (d.).
Planr Tissue Culture, Tokyo:
Induksi Kalus dan Rzgenerasi Tanaman Diosc-ot-ccr
composircr Hzmsl. Bogor: Lemhaga Penzlitian IPB
(tidak dipuhlikilsiknn).
Osifi~,E.O. 1988. Somatic Emhryopen~sisin Dios-corea.
J. Plcrnr Physiol. 133(3):378-380.
Salisbury, F. and C.W. Ross. 1992. Pfcrnt Phvsiolci~v.
4th ad. Belmont. California: Wadsworth publishing c;.
Seyupta, J., G.C. Mitra, and A.K. Shrrrnu. 1989.
Steroid Formation During Morphogenasis i n Callus
r
Cultures o f Dioscorccr florihunncr . J . P l n ~ i Physiol.
135( 1):27-30.
Sudirrrto, F. Chuiriuni, S.hi. Rositrr, dun
Wahid.
1985. Perkemhangan Penelitian Budidaya Tanvman
Bahan Baku P i l Kont rasapsi. Jurntrl Pencliritrn rltrtr
Pcngcmhcrnxcrrr Pcncrnicrrz 4 3 ) :7 1-76.
.Maruzcn.
Ammirtrto, P.V. 1984. Yams. p. 3 2 7 - 3 5 4 . I n P.V.
Amrnirato. D.A. Evans. W.R. Sharp. and Y. Yamada.
(d.),
Handbook of Planr Cell Culture. Vol. 3. New
York: Macmillan.
Ayenqu, E.S.. 1972. Anatomy of monocotyledon.^. VI.
Dio.c-cu~realcs.New York: Oxford.
Chaturvedi, h1.C. 1975. Propagation of D. jlorihun~kl
from in M'trt) Culture of Single Node Stem Segments.
Cum. Sci. 44: 839-84 1.
Chuturvedi, hl.C, A. K. S h a m , h.I. S h a m , and R.N.
h w d . 1982. Morphogmcsis. Micropropgation. and
Germplasm Preservation of Economic Plants by Tissue
Culture. p. 687488. In A. Fugiwan (4.
Phnr
).f i e ~ e s u t
CuLurc. Tokyo: Marnun.
Couney, D.C. 1967. Krtnr. London: Longmans, G r a n
and Co.
b u l , B., S. J. Stohs, and E.J. Staha. 1969. DioscorzoTissur: Culture: III. Influence of Various Factors on
Diosgenin Production by Dioscoreo delroidca and
Suspension Cultures. Loyiia 32(3):147- 159.
Mantell, S.I!., S.Q. iiayue, and A. P. Whitehall.
1978. Clonal Multiplicatim of Dioscwna alas L. and
Dit~scoretrrr~undctmPoir. Yams by Tissue Culture. I .
Hen. Sci.S3:95-98.
Murrrshigc, S . and
Skw~g. 1962. A Revisal Mulium
'
for Rapid Growth and Bioasli~yswith Tobacco Tissue
Cultures. Phyriol. Plmrnt. 15:473-4%.
Stohs,
J.S., B.G. Kurel, and E.J. Stuhu. 1969. The
Metabolism of 14 C-Cholesterol. Phytoc-lzotr. 8: 16791686.
Tjondroneyoro, POD.199 1. Pemhentukun Diosgenin
pada Kultur Kalus Dio.vc-orccr hulhifkrtr L. Disertasi.
Bogor: Fakultrrs Pasca Sar-jvna IPB (tiduk dipuhlikwsikan).
van S t d c , C.G.G.J. 198 1. Florcr. Jukrrtrr: PT Pradnya
Pammita.
Via-,
A.hf. and S.II. Mantell. 1989. Callus Induction
and Embryos of the Seed Propagated Yams Diosctrrra
contpusita Hemsl and D. cuyo~sisLam. Pllrnr Cell,
li.csuc twi Orxcrtr Cuburc 16: I 13- 122.
ISSN 0854-8587
Vol. I.No. 1
Induksi Kalus dan Regenerasi Dioscorea composita Hemsl
ISNAINI
NURWAHYUNI' DAN PUSPA DEWI TJONDRONEGORO
Jurusnn Biologi FMIPA IPB, / I . Raya Pajajarnn. Bogor 16144
Diterim 2 Mei 1994/Di.~jui18 Juni 1994
Callus induction and planlet regeneration of D. composira Hemsl are described. Nodal cuttings and young sctds of D. conrpodfa wert induced to produce callus and planlets on modified
MS medium, tJmt are supplemented with various conclentrations of p w t b rg(&tors and 0.8%
agar. In the culture ofnodal segments, 8 single plantlet was produced by the proliferation of
axiilnry buds and was not from the undifferentiated callus. However, from seed cultures,
anhayogenic d u s was able to be q p c r a t c d to plantlets after subculturing into regeneration
mcdiurn.
PENDAHULUAN
Dioscorea composita merupakan satu dari 650 jenis
Diorcorca (Courney, 1967; Ayensu, 1972) yang krasal
deri Meksiko Selatm. Tattarnan ini tumhuh normal pada
ketinggiaa LSO4Wg.-1962)denyan variari Jan komhtnari aukrin, ritakinin dan senyawa organik kompleks.
Kumhinuc u t pcngatur tumhuh dengan canein hidrolinat
J~laporkanmemacu pcrnhcntukan kalus emhriogcnik
(Orafo, 1988). Namun medium hasal MS naja dapat
digunrkan untuk mikruprg.grs~I).crlrrm haik dcngm pm
pcrlakuan k d d a p c4.spl.n (Mancell n dl.. 1978) nmupun
.mpa peWw (Ammtmto, 19154).
'l'cnults untuk Korcsp&nw
BAHAN DAN METODE
Buhrm. D, contpositcr diperold dari Laboratorium Fisiolopi Tumbuhaa, Jutusan Biologi FMIPA IPB.
Penyiapan Medium untuk Pertumbuhnn. Medium
kultur ymg disiapkan idah malium kultur huku hatang.
medium kultur biji. medium regcnerari. dun medium
parakana yang dip8datk.n dengan agar 0.8 % dm diatur
pH nya mbajadi 5.8. Medium kultur buku hatang merupakm beberapa kombinui medium ba.sal MS dengan air
kdapa(0, 75, Jur 150 mln) dan 2.4-D (0, 0.5, 1.0. 1.5.
2.0, 2.5, dm 3.O.mgll) *tau NAA (0, 0.5, d m 1.O) dm
BAP (0, 0.5, l.O, 1.5, 2.0, 2.5, dan 3.0). Medium kultur
hiji mudr marupkan behenpa medium hrul MS h g m
NAA (1.0, 3.0. dan 5.0 mg11) dan BAP (0. I mg11).
Sedmgkan medium regeaensi merupakan medium basal
MS deagan sukrolu (45 gll) dur 2.4-D (0.5 mg11) yrng
dikenal rehagai MS 45 (Viana den Mantell, 1989).
Medium ini digunakan ubagai medium regenerui dari
kalur yang diperoleh dari buku batang dan b i j i mud.
Medium patakaran meruykan medium basal MS yang
dipericaya dcagan 0. I mgfl N M (Chaturvdi. 1975).
Paniliban Eksplan. Eksplrn huku hatang diamhil dari
huku brtang kc-2 srmpai 5 dari bagian apikal tanaman.
Setiap buku batang kemudian dipotony scpanjaag 1.5
mmpi 2.0 cm dan dicuci hnnrrut-turut denpan detergut,
d m 0 1 70% dunr 30 Jaik. Clomx 20% dan 10%(hchm
&if d i u m hipoklorit 5.25%) aruring-masing scl.mr 10
mcnit rerta HgCIl 0.1 % selama 5 menit. Ekspl~n
kemudian dibilas dengan .Irluda rteril tiga kali rebelum
dimam pulr medium kulrur huku hrlmp.
Biji m;d. ( 1-2 minggu setelah penyerhukan) distcrilkan
dmgm mcronJ.mnya hertumt-turut JaIam Clorox 10%
Jan 5 % muring-maring =lama limn mcnit. mlanjutnya
dicuci r k W MItiga kali. Biji terachut dilukai nlah
utu u h y a dcagan ujung skalpl. kcmudim diuruh pula
d i u m kultur hiji.
Buku hturg &n biji mud^ ditamm p d khzn(tr
~
nucam perlakuan medium denpan ncpuluh ulangan Jan diinkuhuikan dalam mngan dcngan penyinark 1000 lux
( 16 jam/h.ri) pub nuhu 25 2 Z'C.
Pengunatan. Penyamatan meliputi scgala pcruhahan
p'da eksplan di dalam kultur yaitu pemhzntukan Jan
perrumhuhan kalur, tuna. akar. Jan planlet. Kalur yang
terhcntuk ditumhuhkan pad. rncdtum MS 45 dan tunas
16
NURWAHYUNI D A N TJONDRONEGORO
yang tsrbzntuk dipindnhkan prdir MS yrng diperkaya
dengan 0.I mgll NAA. Masing-masing diamnti krmampuannya untuk kregenerrrsi dm krakar.
HASIL
Pengilruh A i r Kelupa dan 2,443. Eksplan huku hatang
yang Jitumhuhkan pada medium rnenunjukkan bahwa
hampir remua perlakuan medium M S dengan kornbinasi
a i r kelapa (0. 75. Jan 150 mlll) Jan 2.4-D (0. 0.5, 1.0,
1.5. 2.0, 2.5. dan 3.0 mpll) dapat menghasilkan kalus
(Tahzl I).Medium M S dengan a i r kelapa 150 mlll yang
dikomhinasikan dengan semua kon.wntrasi 2.4-D paling
haik untuk pemkntukan kalus. Kalus ini tumhuh h y a k
.ukali dengan ukuran hcr;.r (diameter mtara 3.9-5.0 cm).
Jenis kalusnya nonamhriogenik dengan tekstur lembekhzrair dan pada permukaannya terdapat sedikit kalus
f i b Perlakuan yang J i k r i k v n ini tidak ccxok untuk
menginduksi kalus organogenik dan emhriogenik. Data
lengkap hesil penelition ini ada p d a pnulis (Nuwahyuni
dim Tjondronagoro. 1993).
Tahel 1. Penganrh Air Kelapa dan 2.4-D Jalam M d i u m
MS terhrdrp Pemhentukan Kdus pada Kultur
Buku Brtang D. crm~p~.vittr
Air
kelapa
(mlll)
0
0.5
1 .O
1.5
2.0
2.5
Tabel 3. Pertumhuhan Eksplan Biji Do cc~rriposircrpada
Medium MS Diperkaya dmgan NAA dm BAP
Pzrlnkuan
NAA Jan BAP
( mpll)
1.0 dan 0.1
3.0 dan 0.1
5.0 Jarr 0.1
Pertumhuhan Kultur 9€
Kaius
Akar
Tunas
90
..
-
80
80
.
I
0
..
0
Planlet
..
o
0
Pertumbuhon pado Medium Subkultur (MS 45).
Pa& d i u m ~ubkulturkalus dari buku batang perlakuan
d i u m US dengan kombinasi air k d a p dm 2.4-D .wrta
medium MS dengan kombinasi N A A dan BAP tidak
m e m h t u k planlet. Dalrrm kultur MS 45 ini. kalusfriqblr
dari eksplan huku hatang dalam medium MS yang diperkaya dengan a i r kelapa dan 2.4-D dapat krdifetensiasi
menjadi akar serahut sedangkon dari kalus kompak yang
terbentuk pada medium MS dangan komhinasi N A A Jan
BAP tumhuh menjadi tunas abnormal. Namun kalus drri
h i j i nampaknya cocok untuk diregcnerasi kan pad.
medium ini sehinggr Japat diperoleh 7- 10 planlet per
hotol kultur. Planlet kemudian diaklimatisasikan drn
herhasil ditumhuhkan di p ~ b tc r i s i campurrn tanah Jan
prsir dengan pmPndingan I:I.
3.0
Ratio sitokinin Jan auksin dalrm medium menentukan
tipe prtumhuhan d m perkemhangan ckrplan yang ditanam (Murashigc dan Skcwp. 1962). Ternyata pemilihm
jenir ut pengatur tumhuh dan jenir eksplrn jug* ikut
herpengaruh. Hal ini terhukti pada eksplan buku hatany
k: kalrur, -: ekrplrn tiJ& turnhuh
yang hanyr numpu tumhuh minjadi kalus pad. medium
Pcngrruh B A P dun N A A . Percohaan medium MS
US yaag diperkaya dengan a i r kelrpa (sumber sitokinin)
dcngan kornhinari ritokinin BAP dun N A A lehih bervadan 2.4-D (Tiahel 1). 2!at p g a t u r turnhuh y.np diharikan
riasi (7"irbcl 2). Pad8 behemp. pcrlakuur dipcnleh kalru
t e r p i d . 2.4-0. hiasmy. J p p t m yinisaut pbmbcntukan
komprk. tunas, akrr. kajus J.n turua ncrt. planlet. Tunur
krluc emhriogenik D. nlcrta. Sdanpkun. nitokinin I M P
tunggal tehntuk JIri pcrtumbuhm tunwv dcsiler.
mengindukri proliferasi merirtem apikrlnys Jan j u y r
memacu perturnhuhan tunas aksiler (Salisbury dan Ross.
Tvhel 2. Rcspons Eksplan Buku Butmng D. cornposirn
1992).
tcrhwdap N A A dPn BAP &lam Medium US
Pad. komhinrsi perlakuun N A A dan BAP, pembcrian
BAP 1 .O dan I.5 mpll (Taahzl 2) dapat rnemacu pzrtumNAA
BAP (mpll)
huhut tunas Pksilcr s e s u i dengan pendapat Salisbury Jm
( mpll)
Ross (1992) Jur hwil dwri komhinasi prlakuur yang lain
0
0.5
1.O
1.5
2.0
2.5
3.0
hervrriasi. a ini rnungkin dixhahkan karcna pcnganth
h o m m cndogcn yrny jumlohnya hcrvarimi psdP eksplan
yang dikulturkan. Namun, tidak ad. ~ t u p u nprlukuun
Jalam penelitirn i n i yrng Japat mcmacu proses multiplikrri t u n u aknilcr. Ammimto (1982) mendaptkan #urn
tunas per eksplrn. redangkan d a r i h a r i l percohaan ini
k: kaluri. t: t
. a: rkar
hanyr Jihasi1k.n rutu tunas srja.
C3ulY tunus yu)g mulai bcnlrun Jtlrrkukur pemlrharuu,
Percchun induksi kalus Jan rcyenemsi p.J. R. c'rl~rnp~.virct ini mmunjukkan hwil yang hervarirqi. Komhinrqi ut
~ m p adwnnyr
i
hijru drn memhuka. Tunas yrng mcmpunyal 2 - 4 huku hatang Jipindahkrn kc medium
penlacur tumhuh yang diherikan hanyr mampu menurnpcrakarsn ?ampi tcrhcntuk plunld. Ek-splm huku h t ~ g huhkm cksplln huku h t m g mcnjuli kalua nonemhtiiigenik, akar. drn tunas tunegal. Pcrlaku~nkomhinasi N A A
yrnp frekucnsi tumhuhnya tingyi unwk herkcmhang
Jrlrm kultur adwlrh yrng h s r a ~dari
i huku kc-3 dun 4.
dan BAP hanya nlampu menghasilkm wtu trnamrn per
r
dan 2.443
huku hatang. ~Jwngkanperlakuan a ~ kelapa
Iikuplan h ~ jrnuda
i
y mp dllukai J r p t memhtuk kalus
cmhr~opcnikpadw t i c t i p komhiruzl N A A Jm BAP. Nam~ r h kmcnyhr\tllian plunlct. Kultur hiji &pat rnemhcntuk
paknyia Liticpwtm pcrtun~huhrnkalus k h n d l n g tangsung
k a l u s cmhr~ogcnckpwdw tned~ump n p dccohwkan dwn
Jcnprn kon.wntrrsc N A A (Trhcl 2 ) .
k a l u 5 tcrschut swngat r c s p o n s t l untuk tumhuh ttlcnjadi
hchcmp planlet puda i~wdiutnrcycncrasi .
KULTUR JARINGAN DIOSCOREA COMPOSITA HEMSL
17
D A n A R PUSTAKA
Nurwahvuni,
.
N. dan POD.Tjondronegoro. 1993.
Ammirato, 'V.
1982. Growth and Morphogznzsis in
Cultures of the Monocot Yam!. Diosct~redr.p. 169- 170.
I n A. Fugiwara (d.).
Planr Tissue Culture, Tokyo:
Induksi Kalus dan Rzgenerasi Tanaman Diosc-ot-ccr
composircr Hzmsl. Bogor: Lemhaga Penzlitian IPB
(tidak dipuhlikilsiknn).
Osifi~,E.O. 1988. Somatic Emhryopen~sisin Dios-corea.
J. Plcrnr Physiol. 133(3):378-380.
Salisbury, F. and C.W. Ross. 1992. Pfcrnt Phvsiolci~v.
4th ad. Belmont. California: Wadsworth publishing c;.
Seyupta, J., G.C. Mitra, and A.K. Shrrrnu. 1989.
Steroid Formation During Morphogenasis i n Callus
r
Cultures o f Dioscorccr florihunncr . J . P l n ~ i Physiol.
135( 1):27-30.
Sudirrrto, F. Chuiriuni, S.hi. Rositrr, dun
Wahid.
1985. Perkemhangan Penelitian Budidaya Tanvman
Bahan Baku P i l Kont rasapsi. Jurntrl Pencliritrn rltrtr
Pcngcmhcrnxcrrr Pcncrnicrrz 4 3 ) :7 1-76.
.Maruzcn.
Ammirtrto, P.V. 1984. Yams. p. 3 2 7 - 3 5 4 . I n P.V.
Amrnirato. D.A. Evans. W.R. Sharp. and Y. Yamada.
(d.),
Handbook of Planr Cell Culture. Vol. 3. New
York: Macmillan.
Ayenqu, E.S.. 1972. Anatomy of monocotyledon.^. VI.
Dio.c-cu~realcs.New York: Oxford.
Chaturvedi, h1.C. 1975. Propagation of D. jlorihun~kl
from in M'trt) Culture of Single Node Stem Segments.
Cum. Sci. 44: 839-84 1.
Chuturvedi, hl.C, A. K. S h a m , h.I. S h a m , and R.N.
h w d . 1982. Morphogmcsis. Micropropgation. and
Germplasm Preservation of Economic Plants by Tissue
Culture. p. 687488. In A. Fugiwan (4.
Phnr
).f i e ~ e s u t
CuLurc. Tokyo: Marnun.
Couney, D.C. 1967. Krtnr. London: Longmans, G r a n
and Co.
b u l , B., S. J. Stohs, and E.J. Staha. 1969. DioscorzoTissur: Culture: III. Influence of Various Factors on
Diosgenin Production by Dioscoreo delroidca and
Suspension Cultures. Loyiia 32(3):147- 159.
Mantell, S.I!., S.Q. iiayue, and A. P. Whitehall.
1978. Clonal Multiplicatim of Dioscwna alas L. and
Dit~scoretrrr~undctmPoir. Yams by Tissue Culture. I .
Hen. Sci.S3:95-98.
Murrrshigc, S . and
Skw~g. 1962. A Revisal Mulium
'
for Rapid Growth and Bioasli~yswith Tobacco Tissue
Cultures. Phyriol. Plmrnt. 15:473-4%.
Stohs,
J.S., B.G. Kurel, and E.J. Stuhu. 1969. The
Metabolism of 14 C-Cholesterol. Phytoc-lzotr. 8: 16791686.
Tjondroneyoro, POD.199 1. Pemhentukun Diosgenin
pada Kultur Kalus Dio.vc-orccr hulhifkrtr L. Disertasi.
Bogor: Fakultrrs Pasca Sar-jvna IPB (tiduk dipuhlikwsikan).
van S t d c , C.G.G.J. 198 1. Florcr. Jukrrtrr: PT Pradnya
Pammita.
Via-,
A.hf. and S.II. Mantell. 1989. Callus Induction
and Embryos of the Seed Propagated Yams Diosctrrra
contpusita Hemsl and D. cuyo~sisLam. Pllrnr Cell,
li.csuc twi Orxcrtr Cuburc 16: I 13- 122.