Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase oleh Ekstrak Air dan Etanol Anting-anting (Acalypha indica L.)

AKTIVITAS INHIBISI XANTIN OKSIDASE OLEH EKSTRAK
AIR DAN ETANOL ANTING - ANTING (Acalypha indica L.)

KHAIRRUNNISA

DEPARTEMEN BIOKIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2013

ABSTRAK
KHAIRRUNNISA. Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase oleh Ekstrak Air dan
Etanol Anting-anting (Acalypha indica L.). Dibimbing oleh ANNA P ROSWIEM
dan WARAS NURCHOLIS
Penyakit gout merupakan suatu penyakit akibat terjadinya penimbunan
kristal mononatrium urat di dalam tubuh sehingga menyebabkan nyeri sendi
(arthritis gout). Anting-anting merupakan tanaman obat asli Indonesia yang biasa
digunakan untuk menurunkan kadar asam urat dalam tubuh. Tujuan dari
penelitian ini adalah mengidentifikasi kandungan fitokimia, menguji aktivitas
sitotoksik, dan inhibisi enzim xantin oksidase secara in vitro oleh ekstrak air dan

etanol anting-anting (Acalypha indica L.). Dalam penelitian ini, pada ekstrak air
dan etanol anting-anting dilakukan uji fitokimia dengan metode Harborne, uji
sitotoksisitas dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT), dan uji inhibisi
enzim xantin oksidase secara dengan metode spektrofotometri. Uji fitokimia
ekstrak air dan etanol anting-anting, masing-masing memperlihatkan adanya
senyawa flavonoid, tanin, saponin, alkaloid dan steroid. Hasil analisis probit
ekstrak air dan etanol dari anting-anting menunjukkan nilai konsentrasi letal 50
(LC50) masing-masing sebesar 446.619 dan 159.629 ppm. Penghambatan xantin
oksidase tertinggi dilakukan oleh ekstrak air 450 ppm sebesar 66.78%, ekstrak
etanol 150 ppm sebesar 65.84%, dan alopurinol 150 ppm sebesar 74.09%. Ekstrak
etanol anting-anting 150 ppm berpotensi sebagai bahan herba untuk alternatif
pengobatan asam urat.

Kata kunci : xantin oksidase, asam urat, anting-anting, inhibisi

ABSTRACT
KHAIRRUNNISA. Xantin Oxidase Inhibitory Activity by Water and Ethanol
Extract of Anting-anting (Acalypha indica L.). Under the direction of ANNA P
ROSWIEM and WARAS NURCHOLIS
Gout is a disorder in which sodium urate crystals are deposited in and aroud

joints. Anting-anting is an original plant of Indonesia that often used in gout
therapy The aim of this research for identify phytochemical contents, testing
cytotoxic activity and xanthine oxidase inhibition test by water and ethanol extract
of anting-anting. In this research, it committed phytochemical test by Harborne
Method, cytotoxic test by Brine Shrimp Lethality Test (BSLT), and inhibition test
of xanthine oxidase activity by spectrofotometry method. The phytochemical
assay result of water and ethanol extract of anting-anting, each of them showed us
an existing flavonoid, tannin, saponin, alkaloid and steroid compound. The result
of probit analysis of the water and ethanol extract of anting-anting indicated the
lethal concentration value 50 (LC50) respectively 446.629 and 156.629 ppm.
Highest inhibition by water extract 450 ppm as 66.78%, ethanol extract 150 ppm
as 65.84%, and allopurinol 150 ppm as 74.09%. Ethanol extracts of anting-anting
still can said to be potential as inhibitor of xantin oksidase and can be use as anti
uric acid herb.

Keywords : xanthine oxidase, gout, anting-anting, inhibition

AKTIVITAS INHIBISI XANTIN OKSIDASE OLEH EKSTRAK
AIR DAN ETANOL ANTING - ANTING (Acalypha indica L.)

KHAIRRUNNISA

Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains pada
Departemen Biokimia

DEPARTEMEN BIOKIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2013

Judul Skripsi : Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase oleh Ekstrak Air dan Etanol
Anting-anting (Acalypha indica L.)
Nama
: Khairrunnisa
NIM
: G84080069

Disetujui,
Komisi Pembimbing

Dr. Anna P Roswiem, MS
Ketua

Waras Nurcholis, S. Si, M. Si
Anggota

Diketahui,

Dr. Ir. I Made Artika, M.App. Sc
Ketua Departemen Biokimia

Tanggal lulus :

PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas rahmat dan
pertolongan-Nya penulis dapat menyelesaikan penelitian ini. Penelitian ini
berjudul “Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase oleh Ekstrak Air dan Etanol Antinganting (Acalypha indica L.)”. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Februari

sampai dengan Mei 2012 di Laboratorium Pusat Studi Biofarmaka.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Anna P Roswiem, MS
dan Bapak Waras Nurcholis S.Si, M.Si selaku komisi pembimbing atas segala
kesabaran dan keikhlasan dalam memberikan bimbingan, arahan, dan masukan
bagi penulis. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada seluruh staf
Biofarmaka, khususnya Bu Nunuk, Bu Ina, Bu Wiwi, Mas Endi, Mas Nio, dan
Pak Zaim atas bantuan dan arahannya selama melakukan penelitian. Terima kasih
pula penulis ucapkan kepada keluarga, teman-teman Biokimia 45, Sofi, Elsha,
Eka, Wulan yang telah memberikan semangat dan masukannya untuk penelitian
ini. Semoga karya ilmiah ini dapat bermanfaat dan mampu meningkatkan iman
dan taqwa kita kepada Tuhan pencipta alam semesta.

Bogor, Januari 2013

Khairrunnisa

RIWAYAT HIDUP
Khairrunnisa dilahirkan di Bogor pada tanggal 10 April 1990 dari Ayah
Syamsurizal dan Ibu Aam Aminah. Penulis merupakan anak pertama dari tiga
bersaudara. Penulis menyelesaikan pendidikan jenjang menengah atas di SMA

Negeri 1 Leuwiliang pada tahun 2008. Pada tahun yang sama penulis melanjutkan
pendidikan jenjang perguruan tinggi di Institut Pertanian Bogor (IPB) melalui
jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI IPB). Penulis diterima sebagai
mahasiswa Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam IPB. Pada tahun 2011 penulis melaksanakan kegiatan praktik lapangan di
Balai Lingkungan Pertanian dengan karya ilmiah berjudul Mikrob Tanah Sebagai
Pendegradasi Klorpirifos Dalam Tanah. Penulis dan kawan-kawan mendapat dana
program kreativitas mahasiswa bidang penelitian pada tahun 2011 dengan judul
Inhibisi Xantin Oksidase secara In Vitro oleh Ekstrak Suruhan (Peperomia
pellucida (L.) Kunth) dan dengan judul yang sama kami berhasil menjadi salah
satu peserta PIMNAS XXV di Yogyakarta. Di bidang organisasi, penulis juga
pernah menjadi anggota pengurus himpunan profesi Community of Research and
Education in Biochemistry (CREBs) pada periode 2010/2011.

DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL ........................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... ix
PENDAHULUAN ............................................................................................ 1

TINJAUAN PUSTAKA..................................................................................... 1
Anting-anting ...............................................................................................
Asam Urat ....................................................................................................
Xantin Oksidase ...........................................................................................
Alopurinol ....................................................................................................
Uji Sitotoksisitas dengan Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) ......................

1
2
3
4
4

BAHAN DAN METODE ................................................................................. 4
Bahan dan Alat ............................................................................................. 4
Metode Penelitian......................................................................................... 5
HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................................... 6
Kadar Air ..................................................................................................... 6
Ekstrak Air dan Etanol Anting-anting ........................................................... 6
Fitokimia Ekstrak air dan etanol Anting-anting .............................................. 7

Sitotoksisitas pada Larva Udang .................................................................... 7
Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase oleh Ekstrak Air dan Etanol .................... 8
SIMPULAN DAN SARAN .............................................................................. 9
Simpulan ...................................................................................................... 9
Saran ............................................................................................................ 9
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 9
LAMPIRAN ................................................................................................... 13

DAFTAR TABEL
Halaman
1

Rendemen ekstrak air dan etanol anting-anting ........................................ 7

2

Kandungan fitokimia ekstrak air dan etanol anting-anting ....................... 7

3

Nilai LC50 ekstrak air dan etanol anting-anting ....................................... 8

4

Daya inhibisi ekstrak air dan etanol anting-anting terhadap enzim xantin
oksidase .................................................................................................. 8

DAFTAR GAMBAR
Halaman
1

Tanaman anting-anting ........................................................................... 2

2

Lintas katabolisme nukleotida purin ....................................................... 3

3

Pengubahan xantin menjadi asam urat ................................................... 3

4

Mekanisme inhibisi xantin oksidase oleh alopurinol .............................. 4

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1

Diagram alir penelitian ......................................................................... 14

2

Prosedur ekstraksi................................................................................. 15

3

Kadar air simplisia anting-anting .......................................................... 16

4

Rendemen ekstrak anting-anting ........................................................... 16

5

Fitokimia anting-anting......................................................................... 17

6

Uji sitotoksik menggunakan larva udang A. salina ................................ 18

7

Hasil perhitungan analisi probit ............................................................ 19

8

Uji aktivitas inhibisi xantin oksidase ..................................................... 19

9

Pembuatan kurva standar xantin ........................................................... 20

10 Data hasi uji enzimatis ekstrak anting-anting ........................................ 21
11 Analisis statistika inhibisi xantin oksidase oleh ekstrak air dan etanol
anting-anting ......................................................................................... 23

PENDAHULUAN
Penyakit asam urat (gout) sudah dikenal
sejak 2000 tahun yang lalu dan menjadi salah
satu penyakit tertua yang dikenal manusia.
Prevalensi artritis pirai pada populasi di USA
diperkirakan
13.6/100000
penduduk,
sedangkan di Indonesia sendiri diperkirakan
1.6-13.6/100000 orang, prevalensi ini
meningkat seiring dengan meningkatnya umur
(Tjokroprawiro et al. 2007).
Tingginya kadar asam urat dalam darah
pada penderita gout maupun hiperurisemia
diakibatkan oleh faktor produksi asam urat
berlebihan, obesitas, diabetes yang disertai
dengan tekanan darah tinggi (Utami et al.
2009). Asam urat merupakan hasil akhir
katabolisme purin dalam tubuh. Pada kondisi
patofisioligis dapat terjadi peningkatan kadar
asam urat dalam darah melewati batas normal,
yang disebut hiperurisemia (Edward 2001).
Obat sintetik yang biasa dikonsumsi untuk
mengobati asam urat adalah alopurinol.
Alopurinol merupakan obat medis yang
digunakan untuk menghambat kerja enzim
xantin oksidase. Namun penggunaan obat ini
memberikan efek samping, seperti reaksi
alergi kulit, nyeri kepala, serta kerusakan hati
dan ginjal (Tjay et al. 2002). Oleh karena itu,
perlu obat alternatif yang memiliki aktivitas
pengobatan lebih baik dan efek samping yang
rendah.
Penelitian penghambat aktivitas xantin
oksidase telah banyak dilakukan pada
berbagai tanaman obat yang berpotensi
sebagai obat antigout. Penelitian yang
dilakukan Kong et al. (2000) melaporkan
bahwa ekstrak metanol Cinnamomum cassia,
Chrysanthemum indicum, dan Lycopus
europaeus memiliki aktivitas menghambat
xantin oksidase lebih besar dari 50%.
Senyawa 6-aminopurin yang berasal dari daun
gandum memiliki daya inhibisi yang kuat
dengan nilai IC50 10.89 µM (Hsieh et al.
2007). Hasil penelitian Iswantini dan
Darusman (2003) menunjukkan peran ekstrak
kasar flavonoid herba sidaguri
sebagai
penghambat aktivitas xantin oksidase dengan
daya inhibisi terkuat bila dibandingkan
dengan produk jamu komersial antigout
lainnya yang beredar di pasaran. Kemampuan
ekstrak kasar flavonoid sidaguri sebagai
penghambat aktivitas xantin oksidase
mencapai 55.29% melalui mekanisme inhibisi
kompetitif (Hidayat 2007).
Anting-anting, merupakan gulma yang
sangat umum ditemukan tumbuh liar di
pinggir jalan, lapangan rumput, maupun di

lereng gunung (Muslimah 2008). Tanaman ini
digunakan oleh masyarakat Indonesia dalam
terapi antigout. Hasil penelitian Kartika
(2004), menunjukkan bahwa tanaman antinganting (Acalypha indica L.) mengandung
saponin, tanin, flavonoid, acalyphine, dan
minyak atsiri. Kandungan senyawa flavonoid
dan alkaloid berpotensi mampu menghambat
xantin oksidase (Milian et al. 2004). Namun,
kajian ilmiah tentang potensi anting-anting
sebagai inhibitor enzim xantin oksidase belum
banyak dilakukan. Oleh karena itu pada
penelitian ini akan digali potensi ekstrak
tanaman Anting-anting (Acalypha indica L.)
sebagai alternatif obat untuk mengatasi
penyakit asam urat.
Tujuan dari penelitian ini adalah
mengidentifikasi
kandungan
fitokimia,
menguji aktivitas sitotoksik, dan inhibisi
enzim xantin oksidase secara in vitro oleh
ekstrak air dan etanol anting-anting (Acalypha
indica L.). Hipotesis penelitian ini adalah
senyawa bioaktif dari ekstrak air dan etanol
tanaman anting-anting (Acalypha indica L.)
memiliki potensi sebagai inhibitor enzim
xantin oksidase. Penelitian ini dilakukan
untuk memberi informasi ekstrak air dan
etanol anting-anting (Acalypha indica L)
dapat digunakan sebagai obat alternatif
penyakit gout.
TINJAUAN PUSTAKA
Anting-anting (Acalypha indica L.)
Anting-anting (Gambar 1) merupakan
gulma yang sangat umum ditemukan sebagai
tumbuhan liar di pinggir jalan, lapangan
rumput maupun lereng gunung. Herba
semusim, tegak, tinggi 30-50 cm, bercabang.
Helaian daun berbentuk bulat telur sampai
lanset, tipis, ujung dan pangkal runcing, tepi
bergerigi, panjang 2-8 cm, lebar 1,5- 3,5 cm,
berwarna hijau, bunga majemuk, berkelamin
satu, keluar dari ketiak daun, kecil-kecil
dalam rangkaian berbentuk bulir, buahnya
kotak, bulat, hitam. Biji bulat panjang,
berwarna coklat. Akarnya tunggang, berwarna
putih kotor. Anting-anting ini dapat
diperbanyak dengan biji (Dalimartha 2006).
Anting-anting termasuk dalam divisi
Spermatophyta, subdivisi Angiospermae,
kelas Dicotyledoneae, ordo Euphorbiales,
family Euphorbiaceae, genus Acalypha, dan
spesies Acalypha indica L. (Kartesz 2000).
Herba anting-anting ini memiliki berbagai
nama diantaranya ceka mas (Melayu), lelatang,
kucing-kucingan, rumput kekosongan (Sunda),

2

rumput bolong-bolongan, anting-anting (Jawa)
(Dalimartha 2006).
Daun, batang, dan akar tanaman ini
mengandung saponin dan tanin. Batangnya
juga mengandung flavonoid dan daunnya
mengandung minyak atsiri. Bagian yang
digunakan adalah seluruh bagian tumbuhan
sebagai obat, baik dalam bentuk kering atau
segar. Herba ini bermanfaat sebagai
antiradang, antibiotik, diuretik, pencahar, dan
penghenti pendarahan (Dalimartha 2006).
Penelitian yang telah dilakukan berkaitan
dengan tanaman anting-anting antara lain
penelitian Hermawan (2002) mengatakan
bahwa rebusan akar anting-anting memiliki
aktivitas hipoglikemik yang lebih besar
dibandingkan obat pembanding (Daonil) pada
tikus Sprague dawley yang dinduksi aloksan.
Menurut Armansyah et al (2010), ekstrak
etanol daun Acalypha indica L. berpotensi
sebagai hepatoprotektif. Ekstrak dengan dosis
50, 100, dan 200 mg/ kg bb dapat menurukan
kadar SGPT dan SGOT pasca pemberian
parasetamol.

Gambar 1 Tanaman anting-anting
Asam Urat
Asam urat termasuk asam lemah dan
merupakan kristal putih yang tidak berbau,
tidak berasa, dan sangat sukar larut dalam air
(Price & Wilson 2006). Menurut Wisesa dan
Suastik (2006), asam urat diketahui memiliki
fungsi sebagai antioksidan dan mungkin
merupakan antioksidan yang paling penting
dalam plasma dengan kontribusi sampai 60%
dari seluruh aktivitas pembersihan radikal
bebas dalam serum manusia.
Urat yakni bentuk asam urat yang larut
dalam darah dapat menangkap superoksida,
radikal hidroksil, oksigen tunggal dan juga
mempunyai kemampuan untuk kelasi logamlogam transisi (Johnson et al. 2003). Namun
demikian asam urat juga bersifat prooksidatif
pada kondisi tertentu, khususnya bila
antioksidan lain berada dalam level yang
rendah. Diketahui asam urat
dapat
merangsang oksidasi Low Density Lipoprotein
(LDL) in vitro yang merupakan langkah kunci
dalam progresivitas arterosklerosis. Efek

merusak asam urat pada sel endotel
diperkirakan melalui aktivasi leukosit dan
terdapat korelasi yang konsisten antara
peningkatan konsentrasi asam urat dengan
marker inflamasi di sirkulasi (Johnson et al.
2003).
Gout didefinisikan sebagai penyakit atau
sindrom yang disebabkan oleh adanya
pembengkakan
atau
inflamasi
karena
menumpuknya kristal mononatrium urat pada
tulang sendi sebagai akibat dari tingginya
kadar asam urat dalam darah (Johnstone
2005). Penyakit asam urat umumnya
menyerang lebih banyak laki-laki daripada
perempuan. Perempuan memiliki hormon
estrogen yang ikut membuang asam urat
melalui urin (Mansjoer et al. 2004). Pada lakilaki, sebelum pubertas kadarnya sekitar 3.5
mg/dL. Setelah pubertas, kadarnya meningkat
secara bertahap dan dapat mencapai 5.2
mg/dL (Price & Wilson 2006). Pada
perempuan kadar asam urat biasanya tetap
rendah, baru pada usia pramenopause
kadarnya di dalam darah rata-rata sekitar 4
mg/dL. Setelah menopause, kadarnya
meningkat lagi sampai 4.7 mg/dL.
Hiperurisemia adalah peningkatan kadar asam
urat serum di atas nilai normal, pada laki-laki
di atas 7 mg/dL dan pada perempuan di atas 6
mg/dL (Price & Wilson 2006). Hiperurisemia
dapat
menimbulkan
penyakit
gout
(Dalimartha 2006).
Nukleotida purin, di dalam tubuh manusia
akan
diuraikan melalui suatu lintas
metabolisme yang ditunjukkan oleh Gambar
2. Pelepasan gugus fosfat pada adenosin mono
fosfat (AMP) dilakukan oleh enzim
5’nukleotidase.
Adenilat
menghasilkan
adenosin,
yang kemudian
mengalami
deaminasi menjadi inosin. Inosin kemudian
dihidrolisis
menghasilkan
basa
purin
hipoxantin
dan
d-ribosa.
Hipoxantin
dioksidasi berturut-turut menjadi xantin dan
kemudian asam urat oleh xantin oksidase
(Nelson & Cox 2004).
Katabolisme guanosin mono fosfat (GMP)
juga menghasilkan urat sebagai produk akhir
(Gambar 2). GMP pertama-tama dihidrolisis
menghasilkan nukleosida guanosin, yang
kemudian diuraikan menghasilkan guanin
bebas. Guanin mengalami pembebasan
hidrolitik gugus aminonya menghasilkan
xantin, yang diubah menjadi asam urat oleh
xantin oksidase (Nelson & Cox 2004).
Asam urat adalah produk akhir yang
diekskresi dari katabolisme purin pada hewan
primata. Akan tetapi, pada banyak vertebrata
lainnya, asam urat mengalami degradasi

3

lanjutan menjadi alantoin, oleh enzim urat
oksidase (Nelson & Cox 2004).
Gout dikelompokan menjadi dua, yaitu
primer dan sekunder. Gout primer disebabkan
oleh kelainan metabolik. Gout sekunder
disebabkan oleh keadaan hiperurisemia akibat
penyakit, penurunan fungsi ginjal, peningktan
degradasi asam nukleat, peningkatan produksi
purin, konsumsi alkohol, atau karena obatobatan tertentu (Murray et al. 2003).
Pengobatan gout, didasarkan pada usaha
untuk menurunkan produksi asam urat atau
meningkatkan ekskresi asam urat oleh ginjal
sehingga
obat-obatan
tersebut
dapat
digolongkan menjadi dua, yaitu golongan
urikostatik (inhibitor xantin oksidase) dan
urikosurik (Price & Wilson 2006).
Contoh obat golongan urikostatik adalah
alopurinol. Efek samping alopurinol adalah
mual, muntah, dan diare. Selain itu dapat juga
menimbulkan neuritis perifer, depresi sumsum
tulang, dan kadang-kadang anemia aplastik
(Katzung 2010).
Probenesid dan sulfinpirazon merupakan
obat urikosurik yang digunakan untuk
menurunkan kadar asam urat melalui
peningkatan ekskresi asam urat di tubulus
ginjal dengan menghambat reabsorbsinya.
Efek samping yang sering terjadi pada
pengobatan dengan terapi urikosurik adalah
iritasi saluran pencernaan, dermatitis alergi,
dan ruam kulit (Katzung 2010).

Gambar 2 Lintas katabolisme nukleotida purin
(Nelson & Cox 2004).

Xantin Oksidase
Peristiwa timbulnya gout tak terlepas dari
peran serta enzim xantin oksidase. Enzim ini
mampu mengubah xantin menjadi asam urat
melalui reaksi oksidasi seperti ditunjukkan
oleh Gambar 3. Xantin oksidase merupakan
suatu kompleks enzim yang terdiri dari
molibdenum, FAD dan Fe2S2 sebagai pusat
reaksi redoks. Enzim ini terdiri dari dua
subunit identik yang saling berhadapan,
memiliki 1332 residu asam amino dengan
bobot molekul sekitar 270000 Da. Selain
fungsi katalisis mengubah hipoxantin menjadi
xantin maupun xantin menjadi asam urat,
telah ditemukan fungsi lain dari enzim ini
dalam mengkatalisis reduksi nitrat dan nitrit
menjadi nitrit oksida (Millar et al. 2002) dan
sekaligus menyebabkan pembentukan radikal
superoksida yang dapat menyebabkan
peradangan (Bodamyali et al. 2002).
Xantin oksidase berperan penting dalam
katabolisme purin. Enzim ini mempunyai 2
bentuk, yaitu xantin oksidase dan xantin
dehidrogenase. Enzim xantin dehidrogenase
dapat dikonversi menjadi xantin oksidase pada
mamalia, baik dalam reaksi reversibel maupun
ireversibel. Enzim xantin oksidase merupakan
enzim yang tersebar luas dalam beberapa
spesies, dari bakteri hingga manusia. Enzim
xantin oksidase di dalam tubuh manusia
terdapat pada hati, jika enzim ini terdapat
diluar hati mengindikasikan kerusakan fungsi
hati (Hille 2006).
Enzim xantin oksidase mengatalisis
oksidasi hipoxantin menjadi xantin lalu
menjadi asam urat yang berperan penting
dalam penyakit gout (Gambar 3). Pada saat
bereaksi dengan xantin untuk membentuk
asam urat, atom oksigen ditransfer dari
molibdenum ke xantin. Perombakan pusat
molibdenum yang aktif terjadi dengan
penambahan air. Selama proses oksidasi,
molekul oksigen bertindak sebagai akseptor
elektron menghasilkan radikal superoksida
(O2*) dan hidrogen peroksida (Rhamdani
2004).

Gambar 3 Pengubahan xantin menjadi asam
urat (Hille 2006).

4

Alopurinol
Alopurinol berguna untuk mengobati gout
sekunder. Obat
ini
bekerja
dengan
menghambat xantin oksidase, yang mengubah
hipoxantin menjadi xantin dan selanjutnya
menjadi asam urat. Mekanisme umpan balik
alopurinol menghambat sintesis purin yang
merupakan prekusor xantin. Alopurinol
sendiri mengalami biotransformasi oleh enzim
xantin oksidase menjadi aloxantin yang masa
paruhnya lebih panjang daripada alopurinol,
itu sebabnya alopurinol yang masa paruhnya
pendek cukup diberikan satu kali sehari
(Gunawan & Sulistia 2007).
Alopurinol merupakan suatu analog
hipoxantin (dengan atom N dan C pada posisi
7 dan 8 saling bertukar), digunakan secara
luas untuk mengatasi penyakit pirai (Stryer
2000). Mekanisme kerja alopurinol, awalnya
bertindak sebagai substrat dan kemudian
sebagai inhibitor xantin oksidase. Oksidase ini
akan menghidroksilasi alopurinol menjadi
aloxantin (oksipurinol). Sintesis urat dari
hipoxantin dan xantin segera menurun setelah
pemberian alopurinol. Oleh karena itu,
konsentrasi hipoxantin dan xantin serum
meningkat, sedangkan kadar urat menurun,
xantin dan hipoxantin ini lebih mudah larut
(dalam urin) (Stryer 2000). Mekanisme
inhibisi xantin oksidase oleh alopurinol
terlihat pada Gambar 4.
Tjay et al. (2002) menyatakan bahwa obat
ini mempunyai efek samping terutama reaksi
alergi kulit, nyeri kepala, serta kerusakan hati
dan ginjal. Selain itu, Pacher et al. (2006)
menyebutkan efek samping alopurinol yang
umum adalah gastrointestinal distess, reaksi
hipersensitif, dan skin rash. Reaksi
hipersensitif terjadi setelah beberapa bulan
atau tahun setelah pengobatan. Efek ini biasa
terjadi pada individu dengan kelainan ginjal.
Gejala keracunan alopurinol meliputi demam,
rash vaskulitis, eosinofilia, dan kerusakan
fungsi ginjal.

Gambar 4 Mekanisme inhibisi xantin oksidase
oleh alopurinol (Stryer 2000).

Uji Sitotoksisitas dengan Brine Shrimp
Lethality Test (BSLT)
Uji potensi hayati dapat dilakukan dengan
menggunakan metode BSLT. Metode ini
sering digunakan untuk menentukan nilai
sitotoksisitas dari suatu bahan alam. Melalui
uji BSLT dapat diketahui nilai Lethal
Concentration (LC50) senyawa bioaktif pada
sampel terhadap larva udang. Nilai LC50
adalah konsentrasi yang dibutuhkan untuk
mematikan 50% dari populasi larva udang
total (Meyer et al.1982).
Metode uji potensi hayati BSLT memiliki
beberapa keunggulan, diantaranya waktu
pelaksanaan cepat, biaya relatif murah,
sederhana, tidak memerlukan teknik aseptis,
tidak memerlukan peralatan khusus, dan
hanya membutuhkan sedikit sampel uji
(Meyer et al.1982).
Pertimbangan pemilihan larva udang
sebagai hewan uji didasarkan karena telur
Artemia memiliki daya tahan yang lama
(dapat tetap hidup dalam kondisi kering,
selama beberapa tahun). Disamping itu, telur
Artemia lebih cepat dan mudah menetas
dalam waktu 48 jam, sehingga dapat
dihasilkan larva udang dalam jumlah besar
yang siap untuk diuji (Carballo et al. 2002).
Alasan lain yang menyebabkan dipilihnya
larva udang sebagai hewan uji adalah, karena
larva udang memiliki membran kulit yang
tipis, sehingga kematian suatu larva akibat
efek sitotoksik dari senyawa bioaktif dapat
dianalogikan dengan kematian sebuah sel
dalam organisme (Fenton 2002).
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan adalah
campuran daun dan batang tanaman antinganting (Acalypha indica L.) yang berasal dari
daerah Ciawi (Bogor), akuades, etanol 70%,
kloroform, NH4OH, H2SO4 2 M, pereaksi
Meyer,
pereaksi
Wagner,
pereaksi
Dragendorf, asam asetat anhidrat, H2SO4
pekat, serbuk Mg, HCl pekat, amil alkohol,
larutan besi(III) klorida, NaOH 1N, telur
Artemia salina L., bufer fosfat 0.05 M pH
7.5, xantin, enzim xantin oksidase, HCl 0.58
M, alopurinol.
Alat yang digunakan adalah neraca
analitik, tabung reaksi, gelas piala, labu takar,
pipet volumetrik, cawan porselin, oven,
eksikator, rotary evaporator, pinggan
porselin, penangas air, vial, mikropipet, kaca
pembesar, dan spektofotometer UV-VIS.

5

Metode Penelitian
Penyiapan Sampel
Bahan baku anting-anting diperoleh dari
daerah Ciawi, Bogor. Kegiatan sortasi basah
yang merupakan tahap awal penelitian ini,
bertujuan memisahkan kotoran atau bahanbahan asing lainnya dari tanaman yang akan
diteliti.
Pekerjaan
dilanjutkan
dengan
pencucian untuk menghilangkan tanah dan
pengotor lainnya yang masih menempel pada
bahan yang sudah disortasi basah. Tahap
berikutnya adalah perajangan pada daun dan
batang tanaman anting-anting yang bertujuan
mempermudah proses pengeringan. Daun dan
batang anting-anting kemudian dikeringkan
menggunakan oven pada suhu 50ºC. Daun dan
batang anting-anting kemudian dihaluskan
hingga diperoleh simplisia anting-anting
kering berukuran 80 mesh.
Penentuan Kadar Air (AOAC 1984)
Cawan porselin dikeringkan dalam oven
pada suhu 105ºC selama 30 menit, lalu cawan
didinginkan di dalam eksikator selama 30
menit dan ditimbang bobot kosongnya.
Sampel ditimbang sekitar 3 g dan dimasukkan
ke cawan porselin. Sampel beserta cawannya
dipanaskan pada suhu 105ºC selama 3 jam di
dalam oven. Setelah didinginkan dalam
eksikator selama 30 menit, cawan beserta
isinya ditimbang. Penentuan kadar air
dilakukan sebanyak 3 kali ulangan sampai
diperoleh bobot konstan.
Kadar air =
x 100%
keterangan :
A = bobot sampel awal (g)
B = bobot sampel sesudah dikeringkan (g)
Ekstraksi Air dan Ekstraksi Etanol (BPOM
RI 2004)
Simplisia anting-anting diekstraksi dengan
nisbah sampel dan pelarut (air atau etanol
70%) = 1:10, menggunakan metode maserasi
selama 24 jam sambil sekali-sekali diaduk
selama 6 jam pertama. Maserat dipisahkan
dan proses diulangi 2 kali dengan jenis dan
jumlah pelarut yang sama. Semua maserat
dikumpulkan dan diuapkan dengan rotary
evaporator dengan suhu 40ºC hingga
diperoleh ekstrak kental.
Uji Fitokimia (Harborne 1987)
Uji Alkaloid. Sebanyak 0.05 g ekstrak
anting-anting dilarutkan dalam 10 mL
kloroform dan 4 tetes NH4OH, kemudian
disaring dan filtratnya dimasukkan ke dalam
tabung reaksi bertutup. Ekstrak kloroform

dalam tabung reaksi dikocok dengan 6 mL
H2SO4 2 M dan lapisan asamnya dipisahkan
ke dalam tabung reaksi yang lain. Lapisan
asam ini diteteskan pada lempeng tetes dan
ditambahkan pereaksi Meyer, Wagner, dan
Dragendorf yang akan menimbulkan warna
berturut-turut putih, coklat, dan merah jingga.
Uji Triterpenoid dan Steroid. Sebanyak
0.05 g ekstrak anting-anting dilarutkan dengan
25 mL etanol panas 50ºC, kemudian disaring
ke dalam pinggan porselin dan diuapkan
sampai kering. Residu dilarutkan dengan eter
dan dipindahkan ke dalam tabung reaksi, lalu
ditambahkan 3 tetes asam asetat anhidrat dan
1 tetes H2SO4 pekat (Uji Lieberman
Burchard). Warna merah atau ungu
menunjukkan adanya triterpenoid dan warna
hijau atau biru menunjukkan adanya steroid.
Uji Flavonoid. Sebanyak 0.05 g ekstrak
anting-anting ditambahkan 100 mL air panas
kemudian dididihkan selama 5 menit dan
disaring. Filtrat yang diperoleh kemudian
diambil sebanyak 5 mL, ditambah dengan
serbuk Mg 0.05 g, 1 mL HCl pekat, dan 1 mL
amil alkohol. Campuran kemudian dikocok
kuat-kuat. Uji positif ditandai dengan
munculnya warna merah, kuning, atau jingga
pada lapisan amil alkohol.
Uji Saponin. Sebanyak 0.05 g ekstrak
anting-anting ditambahkan 100 mL air panas
kemudian dididihkan selama 5 menit dan
disaring. Sebanyak 5 mL filtrat dikocok dalam
tabung reaksi tertutup selama 10 detik
kemudian dibiarkan selama 10 menit. Adanya
saponin ditunjukkan dengan terbentuknya
buih stabil.
Uji Tanin. Sebanyak 0.05 g ekstrak
anting-anting ditambahkan 100 mL air panas
kemudian dididihkan selama 5 menit dan
disaring. Sebagian filtrat yang diperoleh
ditambah
larutan
besi(III)
klorida.
Terbentuknya
warna hitam
kehijauan
menunjukkan adanya tanin.
Uji Sitotoksisitas Terhadap A. salina
(Meyer et al. 1982)
Penetasan Telur. Telur A. salina
ditimbang sebanyak 50 mg kemudian
dimasukkan ke dalam wadah yang berisi air
laut yang sudah disaring. Setelah diaerasi,
kista dibiarkan selama 48 jam di bawah
pencahayaan lampu agar menetas sempurna.
Uji Sitotoksisitas pada A. salina.
Sebelum dilakukan uji sitotoksisitas, terlebih
dulu dibuat larutan ekstrak standar dengan
konsentrasi 2000 ppm. Sebanyak 10 ekor
larva A. salina dimasukkan ke dalam vial
yang berisi air laut lalu ditambahkan larutan

6

ekstrak (air dan etanol) sehingga konsentrasi
akhirnya menjadi 10, 100, 500, dan 1000 ppm
(Lampiran 6). Pengamatan dilakukan setelah
24 jam dengan menghitung jumlah larva yang
mati dari total larva yang dimasukkan ke
dalam vial. Pengolahan data persen mortalitas
kumulatif digunakan analisis probit LC50
dengan selang kepercayaan 95%.
Uji Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase
Secara In Vitro (Tamta et al. 2005 yang
dimofikasi)
Kurva Standar. Larutan substrat (xantin)
dibuat pada berbagai konsentrasi (0.1, 0.2,
0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7 mM), kemudian diukur
serapannya menggunakan spektrofotometer
UV pada panjang gelombang 293 nm. Kurva
hubungan antara konsentrasi dan serapan
dibuat. Persamaan kurva linear tersebut
digunakan untuk menghitung aktivitas xantin
oksidase.
Inhibisi Aktivitas Xantin Oksidase. Uji
daya inhibisi ekstrak air dan etanol antinganting pada xantin oksidase dilakukan pada
kondisi optimumnya seperti yang dilaporkan
oleh Iswantini & Darusman (2003). Kondisi
optimum tersebut adalah pada suhu inkubasi
20ºC, pH 7.5, konsentrasi xantin oksidase 0.1
unit/ml, konsentrasi xantin 0.7 mM, waktu
inkubasi selama 45 menit, dan pada panjang
gelombang 293 nm.
Ekstrak dimasukkan ke dalam tabung
reaksi dengan variasi konsentrasi berdasarkan
hasil uji BSLT. Variasi konsentrasi untuk
ekstrak etanol adalah 150, 300, dan 450 ppm
sedangkan untuk ekstrak air adalah 50, 150,
dan 300 ppm. Ekstrak tersebut kemudian
ditambah larutan bufer kalium fosfat 50 mM
pH 7.5 sebanyak 1.9 mL. Campuran kemudian
ditambah 1 mL xantin 0.7 mM dan xantin
oksidase 0.1 unit/mL sebanyak 0.1 mL lalu
diinkubasi pada suhu 20ºC selama 45 menit.
Setelah
diinkubasi,
campuran
segera
ditambahkan HCl 0.58 M sebanyak 1 mL
untuk menghentikan reaksinya. Campuran
diukur
serapannya
menggunakan
spektrofotometer
UV
pada
panjang
gelombang 293 nm untuk melihat seberapa
besar sisa xantin yang tidak bereaksi dalam
sampel uji. Daya inhibisi dibandingkan
dengan alopurinol dengan konsentrasi 150
ppm.
Analisis Data.
Data kuantitatif yang diperoleh diuji
dengan analisis sidik ragam (ANOVA) untuk
mengetahui pengaruh perlakuan terhadap
parameter yang diukur. Penentuan beda nyata
diantara perlakuan digunakan uji beda nyata

Duncan’s Multiple Range Test (DMRT) pada
taraf uji 5% (Mattjik & Sumertajaya 2006).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kadar Air
Sampel yang digunakan pada penelitian ini
adalah simplisia dari campuran daun dan
batang anting-anting. Penentuan kadar air
berguna untuk menyatakan kandungan zat
dalam tumbuhan sebagai persen bahan kering.
Menurut Winarno (2002), kadar air yang baik
adalah kurang dari 10%. Kadar air rerata yang
diperoleh dari simplisia anting-anting adalah
4.21% (Lampiran 3). Dengan demikian,
simplisia dengan kadar air tersebut dapat
disimpan dalam jangka waktu cukup lama,
karena kemungkinan bahan rusak oleh jamur
pada saat penyimpanan sangat kecil.
Ekstrak Air dan Etanol Anting-anting
Isolasi senyawa yang terkandung dalam
simplisia anting-anting dilakukan melalui
ekstraksi pelarut dengan cara maserasi.
Pelarut yang digunakan pada penelitian ini
adalah air dan etanol 70%. Kedua pelarut ini
dipilih berdasarkan ketertarikan senyawa aktif
yang diduga dapat menginhibisi xantin
oksidase yang ingin diambil dari anting-anting,
yakni alkaloid dan flavonoid. Kedua senyawa
tersebut dapat bersifat polar atau semipolar,
sehingga digunakan air yang bersifat polar
dan etanol 70% yang bersifat semipolar.
Alasan lain adalah adanya peraturan yang
dikeluarkan oleh BPOM RI (2010) mengenai
cairan penyari untuk keperluan farmakologi
menyebutkan hanya boleh menggunakan air
atau etanol.
Hasil penelitian ini, menunjukkan bahwa
rendemen ekstrak air dan etanol anting-anting,
adalah sebesar 19.04% dan 14.85% (Tabel 1).
Rendemen ekstrak air yang lebih tinggi jika
dibandingkan rendemen ekstrak etanol,
menunjukkan bahwa senyawa metabolit
sekunder pada anting-anting lebih banyak
yang bersifat polar dibandingkan senyawa
yang bersifat semipolar.
Sriwahyuni
(2010)
menyebutkan
rendemen anting-anting yang diekstrak
dengan etil-asetat, diklorometana, dan
petroleum eter, masing-masing sebesar 14.9%,
13.3%, dan 6.3%. Nilai ini lebih rendah dari
rendemen ekstrak air dan etanol yang
diperoleh pada penelitian ini. Perbedaan
rendemen yang diperoleh dapat disebabkan
oleh perbedaan metode ekstraksi yang
dilakukan, perbedaan usia anting-anting yang

7

digunakan, dan perbedaan kandungan
metabolit sekunder yang terdapat pada antinganting.
Tabel 1 Rendemen rerata ekstrak air dan
ekstrak etanol 70% anting-anting
Sampel
Rerata rendemen (%)
Ekstrak air
19.04 ± 9.25
Ekstrak etanol 70%
14.85 ± 1.50
n=3

Fitokimia Ekstrak Air dan Etanol
Anting-anting
Uji fitokimia bertujuan untuk menguji
keberadaan golongan senyawa metabolit
sekunder seperti alkaloid, flavonoid, saponin,
tanin, steroid, dan triterpenoid dalam sampel.
Uji pendahuluan ini dilakukan untuk
mengetahui ada tidaknya flavonoid dan
senyawa-senyawa lain yang diduga dapat
berperan dalam menginhibisi xantin oksidase.
Hasil penelitian ini, menunjukkan bahwa
baik ekstrak air maupun etanol anting-anting
keduanya positif mengandung flavonoid, tanin,
alkaloid, steroid, dan saponin serta negatif
untuk trierpenoid (Tabel 2). Meskipun
kandungan kimia pada kedua ekstrak antinganting adalah sama, namun sifat dari senyawa
kimia pada kedua ekstrak tersebut berbeda.
Senyawa kimia pada ekstrak air bersifat polar
sedangkan senyawa kimia pada ekstrak etanol
bersifat
semipolar.
Kartika
(2004)
menyebutkan
bahwa ekstrak kasar daun
anting-anting mengandung flavonoid, alkaloid,
saponin, tanin, acalyphine, minyak atsiri, dan
asam galat. Menurut Hermawan (2002),
ekstrak kasar metanol air akar anting-anting
mengandung triterpenoid dan tanin, ekstrak
air akar mengandung alkaloid dan ekstrak etil
asetatnya mengandung tanin, alaloid, dan
steroid.
Uji fitokimia memberikan tanda hasil yang
spesifik untuk setiap ujinya (Lampiran 5). Uji
alkaloid menunjukkan hasil positif untuk
kedua ekstrak. Hasil positif ditandai dengan
terbentuknya endapan berturut-turut berwarna
putih, cokelat, dan merah setelah penambahan
pereaksi Meyer, Wagner, dan Dragendorf. Uji
positif bahan mengandung tanin, ditandai
dengan terbentuknya warna hitam setelah
penambahan FeCl3, sedangkan uji positif
untuk saponin ditandai dengan terbentuknya
buih yang stabil dalam waktu 10 menit setelah
pengocokkan.
Uji
triterpenoid
kedua
ekstrak
menunjukkan hasil negatif. Keduanya tidak
menunjukkan perubahan warna menjadi
merah atau ungu setelah penambahan pereaksi

uji. Uji steroid menunjukkan hasil positif pada
kedua ekstrak yang ditandai dengan
terbentuknya warna hijau. Steroid bisa
terdapat dalam bentuk glikosida (Harborne
1987). Adanya gula yang dapat larut dalam
air, maka dalam ekstrak air dapat
teridentifikasikan steroid bila steroid dalam
sampel terdapat dalam bentuk glikosida.
Flavonoid merupakan metabolit sekunder
yang terdapat pada vakuola tanaman.
Flavonoid memiliki banyak fungsi pada
tanaman, salah satunya sebagai zat warna
pada bunga. Peran lain dari flavonoid adalah
sebagai
antioksidan
yang
mampu
mengkompleks logam berat, juga mampu
mengikat protein dengan spesifitas yang tinggi
(Andersen & Markham 2006). Hasil uji
fitokimia menunjukkan ekstrak anting-anting
mengandung flavonoid.
Senyawa bioaktif dari beberapa jenis
tanaman obat dilaporkan mempunyai aktivitas
biologis yang berguna dalam pengobatan
penyakit gout melalui inhibisi enzim xantin
oksidase.
Penelitian
Yulianto
(2008)
menyebutkan bahwa rosela yang memiliki
kandungan bioaktif flavonoid, saponin, tanin,
serta ciplukan yang mengandung alkaloid,
saponin, tanin, flavonoid, dan steroid mampu
menghambat aktivitas xantin oksidase.
Berdasarkan hasil penelitian tersebut dan hasil
uji ekstrak anting-anting pada penelitian ini,
maka, diduga komponen bioaktif dari antinganting yang memiliki aktivitas antigout
melalui inhibisi enzim xantin oksidase pada
penelitian ini adalah flavonoid dan alkaloid.
Tabel 2 Kandungan fitokimia ekstrak air dan
etanol anting-anting
Ekstrak
Uji fitokimia
Air
Etanol 70%
Flavonoid
+
++
Tanin
+
+
Alkaloid
+
++
Triterpenoid
Steroid
+
++
Saponin
++
++
Keterangan : tanda (+) menunjukkan senyawa metabolit
sekunder serta tingkat intensitas warna sedangkan (-)
menunjukkan tidak terdapat senyawa metabolit sekunder
pada ekstrak

Sitotoksisitas pada Larva Udang
Pengujian sitotoksisitas dari ekstrak air
dan etanol anting-anting
diperoleh nilai
konsentrasi letal 50 (LC50) masing-masing
sebesar 446.619 dan 159.629 ppm (Tabel 3).
Nilai LC50 ini menunjukkan bahwa ekstrak
tersebut memiliki potensi bioaktif karena

8

menurut Meyer et al. (1982) suatu senyawa
memiliki potensi bioaktif jika nilai LC50-nya
di bawah 1000 ppm. Semakin rendah nilai
LC50 akan menunjukkan efek farmakologis
yang tinggi, sedangkan semakin tinggi LC50
menunjukkan bahwa sampel tersebut memiliki
efek farmakologis yang rendah. Perbedaan
nilai LC50 ini dikarenakan ekstrak etanol
memiliki kandungan fitokimia yang lebih
banyak dan bersifat lebih toksik daripada
ekstrak air.
Penelitian Halimah (2010) menunjukkan
tingkat sitotoksisitas anting-anting yang
diekstrak dengan pelarut berbeda terhadap
larva udang. Anting-anting yang diekstrak
dengan n-heksana, etanol 96% dan kloroform
memiliki nilai LC50 masing-masing sebesar
57.0933 ppm, 73.4575 ppm, dan 149.374
ppm. Ekstrak air dan etanol pada penelitian ini
memiliki nilai LC50 yang lebih tinggi daripada
ekstrak n-heksana, etanol 96% dan kloroform.
Tabel 3 Nilai LC50 ekstrak air dan etanol
anting-anting
Sampel
LC50 (ppm)
Ekstrak air
446.619
Ekstrak etanol 70%
159.629
Aktivitas Inhibisi Xantin Oksidase oleh
Ekstrak Air dan Etanol
Uji inhibisi pada xantin oksidase
dilakukan oleh ekstrak air dan etanol antinganting
dengan
menggunakan
varian
konsentrasi. Perbedaan konsentrasi didasarkan
pada nilai LC50. Nilai LC50 masing-masing
ekstrak akan dijadikan sebagai batas
konsentrasi tertinggi pada penentuan ragam
konsentrasi ekstrak dalam uji enzimatik
aktivitas xantin oksidase. Hal ini dikarenakan
pada formulasi obat akan lebih aman jika
konsentrasinya dibuat di bawah nilai LC50.
Pengujian pada konsentrasi beragam ini
digunakan
untuk
melihat
pengaruh
penambahan konsentrasi ekstrak pada
peningkatan daya inhibisi. Selain itu juga
dilakukan pengamatan aktivitas enzim tanpa
penambahan ekstrak (blanko) untuk melihat
pengaruh inhibisi ekstrak tersebut pada
aktivitas enzim.
Prinsip kerjanya yaitu larutan substrat
xantin yang tidak terkonversi menjadi asam
urat akan dibaca oleh spektrofotometer.
Konsentrasi ini nantinya dapat diubah menjadi
konsentrasi xantin yang bereaksi. Dengan
diperolehnya konsentrasi xantin yang bereaksi,
maka akan diketahui seberapa besar aktivitas
xantin oksidase dalam mengubah xantin

menjadi asam urat. Dengan demikian dapat
ditentukan pula seberapa besar persen inhibisi
ekstrak yang diujikan terhadap aktivitas enzim
xantin oksidase. Uji enzimatis dilakukan pada
kondisi optimum seperti yang dilaporkan oleh
Iswantini & Darusman (2003). Kondisi
optimum tersebut adalah pada suhu inkubasi
20ºC, pH 7.5, konsentrasi xantin oksidase 0.1
unit/ml, konsentrasi xantin 0.7 mM, waktu
inkubasi selama 45 menit, dan pada panjang
gelombang 293 nm.
Pembuatan kurva standar perlu dilakukan
sebelum uji enzimatik untuk mengetahui
serapan xantin pada berbagai konsentrasi
Dengan demikian dapat diketahui berapa
jumlah xantin yang dikonversi menjadi asam
urat dalam reaksi enzimatis. Persamaan linier
kurva standar yang diperoleh adalah y =
1.0693x + 0.3989 dan nilai R2 = 0.9931
(Lampiran 9). Y adalah serapan xantin dengan
penambahan ekstrak yang terukur dan x
adalah konsentrasi xantin sisa yang tidak
terkonversi menjadi asam urat.
Tabel 4 menunjukkan daya inhibisi ekstrak
pada masing-masing konsentrasi serta daya
inhibisi alopurinol 150 ppm terhadap enzim
xantin oksidase.
Hasil uji menunjukkan
bahwa semua ekstrak yang diuji memiliki
aktivitas yang lebih rendah dibandingkan
dengan blanko (Lampiran 10). Daya inhibisi
ekstrak air dan etanol menunjukkan bahwa
ekstrak berpotensi menghambat aktivitas
xantin oksidase.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa daya
inhibisi ekstrak air dan etanol meningkat
sesuai peningkatan konsentrasi. Daya inhibisi
tertinggi pada ekstrak, yaitu ekstrak air 450
ppm, sebesar 66.78% dan ekstrak etanol 150
ppm, sebesar 65.84%. Daya inhibisi tertinggi
ditunjukkan oleh alopurinol 150 ppm yang
merupakan inhibitor xantin oksidase dan
digunakan sebagai obat gout, yaitu 74.09%.
Tabel 4 Daya inhibisi ekstrak air dan etanol
anting-anting
terhadap
xantin
oksidase.
Daya inhibisi
Sampel
(%) ± SD
Ekstrak air 150 ppm
10.95 ± 1.19d
Ekstrak air 300 ppm
33.53 ± 7.39c
Ekstrak air 450 ppm
66.78 ± 14.99a,b
Ekstrak etanol 50 ppm
36.76 ± 11.23c
Ekstrak etanol 100 ppm 55.02 ± 13.58b
Ekstrak etanol 150 ppm 65.84 ± 7.57a,b
Alopurinol 150 ppm
74.09 ± 0.78a
Keterangan : Huruf kecil yang mengikuti angka pada
Tabel menunjukkan berbeda nyata pada α = 0.05 melalui
uji DMRT.

9

Daya inhibisi ekstrak air dan etanol antinganting lalu di bandingkan dengan daya
inhibisi alopurinol pada konsentrasi 150 ppm
(Tabel 4). Daya inhibisi ekstrak etanol
(65.84%) jauh lebih besar daripada ekstrak air
(10.95%). Akan tetapi jika dibandingkan
alopurinol pada konsentrasi yang sama, daya
inhibisi kedua ekstrak masih di bawah
alopurinol (74.09%).
Peningkatan daya inhibisi terjadi karena
pada konsentrasi tinggi terdapat lebih banyak
metabolit sekunder dari anting-anting yang
diduga memiliki kemampuan menghambat
aktivitas xantin oksidase. Hasil uji fitokimia
menunjukkan bahwa ekstrak etanol antinganting lebih banyak mengandung senyawa
metabolit sekunder (Tabel 2). Efek sinergis
metabolit sekunder pada ekstrak etanol antinganting seperti alkaloid dan flavonoid membuat
daya inhibisi ekstrak etanol anting-anting
lebih kuat daripada ekstrak airnya. Flavonoid
dan alkaloid terbukti melalui beberapa
penelitian sangat berperan dalam menghambat
kerja xantin oksidase (Yulianto 2008; Milián
et al. 2004).
Beberapa tanaman obat telah diteliti
memiliki kemampuan untuk menghambat
kerja enzim xantin oksidase. Penelitian
sebelumnya
oleh
Wardani
(2008)
menunjukkan bahwa ekstrak air anting-anting
memiliki daya inhibisi yang lebih rendah
daripada ekstrak meniran dan tempuyung.
Ekstrak air meniran pada konsentrasi 150 ppm
memiliki daya inhibisi sebesar 45.86% dan
ekstrak air tempuyung 125 ppm sebesar
14.76%. Ekstrak etanol 70% pada penelitian
ini memiliki daya inhibisi yang lebih tinggi
daripada ekstrak meniran dan ciplukan.
Ekstrak etanol meniran pada konsentrasi 150
ppm memiliki daya inhibisi sebesar 53.71 %
dan ciplukan sebesar 6.27%.
Besarnya daya inhibisi terhadap enzim
xantin oksidase yang ditunjukkan oleh
beberapa tanaman obat berbeda satu sama lain.
Perbedaan tersebut terjadi dikarenakan
beberapa faktor antara lain, adanya perbedaan
senyawa metabolit sekunder yang terkandung
dalam suatu tanaman obat, adanya senyawa
pengganggu, perbedaan metode ekstraksi, dan
perbedaan jenis pelarut yang digunakan
(Kardono 2003).
Analisis statistika menggunakan ANOVA
(α= 0.05) menunjukkan bahwa perlakuan
pemberian ekstrak anting-anting, baik ekstrak
air maupun ekstrak etanol, keduanya
memberikan pengaruh terhadap aktivitas
xantin oksidase (Lampiran 11). Pengaruh
tersebut ditindaklanjuti menggunakan uji

Duncan Multiple Range Test (DMRT) (α=
0.05). Hasil analisis menggunakan uji lanjut
DMRT menunjukkan bahwa daya inhibisi
seluruh ekstrak berbeda nyata. Hasil analisis
statistika menunjukkan daya inhibisi ekstrak
air 450 ppm dan ekstrak etanol 150 ppm tidak
berbeda nyata dengan daya inhibisi alopurinol
150 ppm (74.09%) pada selang kepercayaan
95% (Lampiran 11). Hal ini berarti ekstrak
etanol anting-anting 150 ppm berpotensi
sebagai bahan herba untuk alternatif
pengobatan asam urat.
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Ekstrak air dan etanol anting-anting
mengandung alkaloid, flavonoid, saponin,
tanin, dan steroid. Nilai LC50 ekstrak air dan
etanol masing-masing adalah 446.619 ppm
dan 159.629 ppm. Penghambatan terhadap
aktivitas enzim xantin oksidase tertinggi
ditunjukkan oleh ekstrak air 450 ppm sebesar
66.78% dan ekstrak etanol 150 ppm sebesar
65.84%. Ekstrak etanol anting-anting 150 ppm
berpotensi sebagai bahan herba untuk
alternatif pengobatan asam urat.
Saran
Beberapa hal yang menjadi saran
berdasarkan penelitian ini adalah perlu
dilakukan analisis komponen senyawa yang
berkhasiat antigout pada ekstrak air dan etanol
dari anting-anting. Selain itu, perlu dilakukan
uji in vivo ekstrak anting-anting sebagai herba
antigout.
DAFTAR PUSTAKA
AOAC.1984. Official Methods of Analysis.
Virginia: Association of Official
Analytical Chemistry.
[BPOM RI] Badan Pengawas Obat dan
Makanan Republik Indonesia. 2004.
Ekstrak Tumbuhan Indonesia Vol. 2.
Jakarta: BPOM.
[BPOM] Badan Pengawas Obat dan Makanan.
2010. Acuan Sediaan Herbal,
volume 5 edisi 1. Jakarta: Direktorat
OAI BPOMRI.
Andersen OM, Markam KR. 2006.
Flavonoids Chemistry, Biochemistry
and Applications. Boca Raton : CRC
Press.

10

Armansyah T, Sutriana A, Aliza D, Vanda H,
Rahmi
E.
2010.
Aktivitas
hepatoprotektif ekstrak etanol daun
kucing-kucingan (Acalypha indica L.)
pada tikus putih (Rattus novergicus)
yang diinduksi parasetamol. Jurnal
Ilmiah Ilmu-ilmu Peternakan 6: 292298.
Bodamyali T, Kancler JM, Millar TM,
BlakeDR, Stevens CR. 2002. Redox
Genome interaction in Health and
Disease. Ed J. Fuchs, M. Podda, L.
Packer. New York: Marcel Dekker
Carballo JL, Hernandez-Inda ZL, Perez P,
Gracia-Gravalos M. 2002. A
comparison between two brine
shrimp assays to detect in vitro
cytotoxicity in marine natural
products. Biotechnology 2: 1-5.
Culleton BF, Larson MG, Kannel WB, Levy
D. 2006. Serum uric acid and risk for
cardiovascular disease and death:
The Framingham Heart Study. Ann
Intern Med 131:7-13.
Dalimartha S. 2006. Resep Tumbuhan Obat
untuk Asam Urat. Bogor: Penebar
Swadaya.
Edward NL. 2001. Arthritis and Allied
Condition. 14th ed. Philadelphia:
Lippincot William & Wilkins.
Fenton J. 2002. Toxicology : A Case Oriental
Approach. Boca Raton: ORC Pr.
Gunawan, Sulistia G. 2007. Farmakologi dan
Terapi edisi V. Jakarta: Departemen
Farmakologi dan Terapeutik UI.
Halimah N. 2010. Uji fitokimia dan uji
toksisitas ekstrak tanaman antinganting (Acalypha indica L. ) terhadap
larva udang (Artemia salina L.)
[skripsi]. Malang : Fakultas Sains
dan Teknologi, Universitas Islam
Negeri Maulana Malik Ibrahim.
Harborne JB. 1987. Metode Fitokimia.
Padmawinata
K,
Soediro
I,
penerjemah; Niksolihin S, editor.
Bandung: ITB. Terjemahan dari
Phytochemical Methode.
Hermawan H. 2002. Isolasi dan pencirian
senyawa aktif dari tumbuhan anting-

anting (Acalypha inndica) yang
berpotensi
menurunkan
kadar
glukosa darah [skripsi]. Bogor:
Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Bogor.
Hidayat R. 2007. Kinetika inhibisi flavonoid
dalam sidaguri (Sida rhombifolia L.)
terhadap aktivitas enzim xantin
oksidase [tesis]. Bogor: Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam, Institut Pertanian Bogor.
Hille R. 2006. Structure and function of
xanthine oxidoretuctase. European J
Inorganik Chem 10: 1905-2095.
Hsieh JF, Wu SH, Yang YL, Choong KF,
Chen ST. 2007. The screening and
characterization of 6-aminopurinebased xanthine oxidase inhibitors.
Bioorganic & Medicinal Chemistry
15: 3450-3456.
Iswantini