UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR YANG DIISOLASI DARI TANAH DAERAH WONOGIRI Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Daerah Wonogiri Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 Secara In Vitro.

UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR
YANG DIISOLASI DARI TANAH DAERAH WONOGIRI
TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7
SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Oleh :

RATNA LESTARI
K100130073

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017

UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR
YANG DIISOLASI DARI TANAH DAERAH WONOGIRI
TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7
SECARA IN VITRO


SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta

Oleh :

Ratna Lestari
K100130073

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
ii

KATA PENGANTAR


Assalamu’alaikum Wr. Wb
Dengan memanjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah
memberikan nikmah dan hidayah-Nya, sehingga penulis mampu menyelesaikan
penulisan skripsi dengan judul μ “UJI ANTIKANKER EKSTRAK

METANOL JAMUR YANG DIISOLASI DARI TANAH DAERAH
WONOGIRI TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7
SECARA IN VITRO”, sebagai prasyarat untuk memperoleh gelar strata satu
farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Terselesainya penulisan skripsi ini, tak luput dari bantuan dan dukungan
dari berbagai pihak. Oleh karena itu penulis ingin mengucapkan terimakasih
kepada :
1.

Azis Saifudin, M.Sc., PH.D., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta dan selaku dosen pembimbing.

2.


Bu Maryati, Ph.D., Apt. selaku penguji skripsi

3.

Bu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku penguji skripsi

4.

Ayah dan Ibu tercinta yang selalu memberikan dukungan baik mental,
spriritual dan finansial untuk kelancaran studi penulis.

5.

Safira Sarah Rosita dan Nina Sri Wulan selaku tim peneliti.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna, saran dan

kritik yang membangun sangat penulis harapkan. Penulis berharap semoga skripsi
ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang memerlukan dan bagi pembaca.
Wassalamu’alaikum Wr.Wb.
Surakarta, 23 Januari 2017


Penulis

v

DAFTAR ISI

Halaman
JUDUL SKRIPSI .................................................................................................... ii
PENGESAHAN SKRIPSI ..................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ............................................................................................ v
DAFTAR ISI .......................................................................................................... vi
DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. ix
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... xi
DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................... xii
ABSTRAK ........................................................................................................... xiii
ABSTRACT ........................................................................................................... xiv
BAB I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
A.


Latar Belakang Masalah ....................................................................1

B.

Rumusan Masalah .............................................................................3

C.

Tujuan Penelitian ...............................................................................3

D.

Tinjauan Pustaka ...............................................................................3

E.

1.

Tanah ........................................................................................3


2.

Jamur ........................................................................................4

3.

Kanker ......................................................................................4

4.

Sel Kanker MCF-7 ...................................................................7

5.

Uji Sitotoksisitas .......................................................................7

6.

MTT assay ................................................................................7


Keterangan Empiris..........................................................................8
vi

BAB II. METODE PENELITIAN .......................................................................... 9
A. Kategori Penelitian dan Rancangan Penelitian ................................9
1.

Kategori Penelitian ...................................................................9

B. Variabel Penelitian ...........................................................................9
C. Alat dan Bahan .................................................................................9
D. Tempat Penelitian ..........................................................................10
E.

Jalannya Penelitian .........................................................................10

F.

Analisis Data ..................................................................................18


G. Kromatografi Lapis Tipis ...............................................................18
BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ..................................... 20
A. Pengambilan Sampel ......................................................................20
B. Skrining Primer ..............................................................................21
C. Ekstraksi .........................................................................................25
D. Uji Sitotoksik Terhadap Sel Kanker Payudara MCF 7 ..................26

E.

1.

Pemeliharaan sel MCF 7 dan metode uji MTT assay ............26

2.

Uji sitotoksik terhadap sel kanker payudara MCF-7 ..............29

Uji Kualitatif ..................................................................................32


BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 34
A. Kesimpulan ....................................................................................34
B. Saran...............................................................................................34
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 35
LAMPIRAN .......................................................................................................... 35

vii

DAFTAR TABEL

Halaman
Tabel 1. Letak geografis di setiap lokasi pengambilan sampel ............................ 12
Tabel 2. Rendemen Hasil Ekstraksi ..................................................................... 25
Tabel 3. Data % sel hidup ekstrak metanol jamur dan media pertumbuhan jamur
pada setiap konsentrasi ........................................................................... 29
Tabel 4. Komposisi media Czapek dox................................................................ 31

viii

DAFTAR GAMBAR


Halaman
Gambar 1. Skema jalannya penelitian ................................................................... 11
Gambar 2. Skema uji sitotoksik ............................................................................ 17
Gambar 3. Pengamatan identifikasi jamur pada cawan Petri pertama dan kedua
ekstrak metanol jamur tanah waduk pada media Czapek dox setelah
14 hari. ................................................................................................ 22
Gambar 4. Pengamatan identifikasi jamur pada cawan Petri pertama dan kedua
ekstrak metanol jamur tanah hutan pada media Czapek dox setelah 14
hari...................................................................................................... 23
Gambar 5. Pengamatan identifikasi jamur pada cawan Petri pertama dan kedua
ekstrak metanol jamur tanah sawah pada media Czapek dox setelah 14
hari...................................................................................................... 24
Gambar 6. Pengamatan identifikasi jamur pada cawan Petri pertama dan kedua
ekstrak metanol jamur peternakan sapi pada media Czapek dox setelah
14 hari. ................................................................................................ 24
Gambar 7. Pengamatan identifikasi jamur pada cawan Petri pertama dan kedua
ekstrak metanol jamur tanah kapur pada media Czapek dox setelah 14
hari...................................................................................................... 25
Gambar 8. Pemanenan sel MCF-7 pada konfluen 80% dan pemisahan sel setelah

diberi tripsin. ...................................................................................... 27
Gambar 9. Reaksi reduksi garam kuning tetrazolium menjadi formazan berwarna
ungu. ................................................................................................... 28
Gambar 10. Perubahan sel MCF-7 dari sel normal dan sel mati setelah diberi
ekstrak. ............................................................................................... 28
Gambar 11. Morfologi sel MCF 7 yang hidup dan mati ....................................... 29
Gambar 12. Grafik pengaruh konsentrasi ekstrak metanol jamur waduk terhadap
% sel hidup MCF-7. ........................................................................... 30
Gambar 13. Pengaruh konsentrasi Czapek dox terhadap % sel hidup .................. 31
ix

Gambar 14. Pengaruh konsentrasi ekstrak metanol jamur hutan, sawah,
peternakan sapi, tanah kapur dan media Czapek dok terhadap
persentase sel hidup. ........................................................................... 32
Gambar 15. Hasil KLT ekstrak jamur tanah waduk pada (A) sinar tampak, (B)
sinar UV 254 nm, (C) sinar UV 366. ................................................. 33

x

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman
Lampiran 1. Foto pengambilan sampel ................................................................ 38
Lampiran 2. Perhitungan rendemen ..................................................................... 39
Lampiran 3. Perhitungan larutan sampel ............................................................. 41
Lampiran 4. Perhitungan IC50 ekstrak metanol jamur tanah hutan..................... 43
Lampiran 5. Perhitungan IC50 ekstrak metanol jamur tanah waduk ................... 44
Lampiran 6. Perhitungan IC50 ekstrak metanol jamur tanah sawah ................... 45
Lampiran 7. Perhitungan IC50 ekstrak metanol jamur tanah peternakan sapi .... 46
Lampiran 8. Perhitungan IC50 ekstrak metanol jamur tanah kapur .................... 47
Lampiran 9. Perhitungan 1C50 ekstrak media pertumbuhan jamur .................... 48
Lampiran 10. Hasil Absorbansi pada ELISA reader ........................................... 49
Lampiran 11. Skema 96 plate well ...................................................................... 50

xi

DAFTAR SINGKATAN

DMEM

μ Dulbecco’s Modified Eagle Medium

DMSO

: Dimethyl Sulfoxide

ELISA

: Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay

FBS

: Foetal Bovine Serum

IC50

: Inhibitory Concentration 50

KLT

: Kromatografi Lapis Tipis

LAF

: Laminar Air Flow

MCF-7

: Michigan Cancer Foundation

MK

: Media Kultur

MTT

: 3-(4,5-Dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazoliumbromide

PBS

: Phospate Buffered Saline

SDS

: Sodium Dodecyl Sulfate

UV

: Ultraviolet

xii

ABSTRAK

Kanker payudara merupakan penyebab kematian akibat kanker terbesar
kedua di dunia, maka dari itu peneliti tertarik mengembangkan bahan alam sebagai
agen sitotoksik, salah satunya mikroba yang dihasilkan dari tanah. Tujuan
penelitian ini yaitu untuk mengeksplorasi tanah di Wonogiri pada ekosistem yang
berbeda yaitu tanah daerah waduk, hutan, sawah, peternakan sapi, dan tanah kapur
terhadap efek sitotoksik sel MCF-7.
Sampel diambil dengan metode purposive sampling, kemudian
ditumbuhkan pada media Czapek dox selama 14 hari dan dengan metode cawan
pengenceran, pengenceran mencapai konsentrasi 10-3 jamur yang tumbuh kemudian
diekstraksi dengan metanol dan dipekatkan dengan rotary evaporator. Ekstrak
kental metanol jamur dari tanah diuji dengan sel MCF-7 menggunakan metode
MTT pada seri konsentrasi 500 µg/mL; 250 µg/mL; 125 µg/mL; 62,5 µg/mL, dan
31,25 µg/mL. Uji kualitatif menggunakan fase diam plat silika GF 254 dan fase
gerak kloroform : metanol (95 : 5).
Dari hasil penelitian dihitung nilai IC50, namun ekstrak methanol jamur
tanah waduk hanya dapat menghambat 83,95% sel hidup pada konsentrasi 500
µg/mL, sedangkan ekstrak jamur yang diisolasi dari tanah daerah hutan, sawah,
peternakan sapi, dan tanah kapur tidak memiliki efek sitotoksik. Hasil uji kualitatif
ekstrak methanol jamur tanah waduk diduga mengandung komponen poliketida dan
fenil propanoid.
Kata Kunci: Tanah, jamur, MTT, sitotoksik, sel MCF-7.

xiii

ABSTRACT

Breast cancer is the leading cause of cancer deaths the second largest in
the world, and therefore the researchers are interested in developing natural
products as a cytotoxic agent, one of them is microbes be produced from soil. The
purpose of this study is to explore the soil in Wonogiri on different ecosystems
which are land reservoirs area, forests, fields, cattle and limestone soils of the
cytotoxic effects of MCF-7 cells.
Samples were taken with the purposive sampling method, then cultured in
Czapek dox media for 14 days and methods plate dilution, dilution 10-3 mold
growing concentration is then extracted with methanol and then concentrated by
rotary evaporator, condensed methanol extract soil of fungi tested with MCF-7
cells using MTT methode on a series of concentration 500 µg/mL; 250 µg/mL; 125
µg/mL; 62,5 µg/mL, dan 31,25 µg/mL. Qualitative test using silika GF 254 plate
stationary phase and a mobile phase of chloroform: methanol (95: 5).
From the results of this study calculated IC50 values, but the methanol
extract of soil fungi reservoirs can only inhibit 83.95% of living cells at a
concentration of 500 mg / mL, whereas extracts of fungi isolated from soil forest
areas, fields, cattle ranches, and limestone soil has no effect cytotoxic. Qualitative
test of the extract of soil fungi is thought to contain the component polyketides and
phenyl propanoid.
Keywords: Soil, fungi, MTT, MCF-7 cells.

xiv

Dokumen yang terkait

UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR YANG DIISOLASI DARI TANAH DAERAH WONOGIRI TERHADAP SEL KANKER Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Daerah Wonogiri Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 Secara In Vitro.

0 2 15

PENDAHULUAN Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Daerah Wonogiri Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 Secara In Vitro.

0 4 8

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL JAMUR DARI ISOLAT TANAH DI DAERAH ISTIMEWA YOGYAKARTA Uji Sitotoksisitas Ekstak Metanol Jamur Dari Isolat Tanah Di Daerah Istimewa Yogyakarta Terhadap Sel Kanker Payudara MCF7.

0 2 14

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK METANOL JAMUR DARI ISOLAT TANAH DI DAERAH ISTIMEWA YOGYAKARTA Uji Sitotoksisitas Ekstak Metanol Jamur Dari Isolat Tanah Di Daerah Istimewa Yogyakarta Terhadap Sel Kanker Payudara MCF7.

0 2 16

PENDAHULUAN Uji Sitotoksisitas Ekstak Metanol Jamur Dari Isolat Tanah Di Daerah Istimewa Yogyakarta Terhadap Sel Kanker Payudara MCF7.

0 3 7

DAFTAR PUSTAKA Uji Sitotoksisitas Ekstak Metanol Jamur Dari Isolat Tanah Di Daerah Istimewa Yogyakarta Terhadap Sel Kanker Payudara MCF7.

0 3 4

UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP TERHADAP SEL KANKER MCF-7 Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Di Cilacap Terhadap Sel Kanker MCF-7 Secara In Vitro.

0 3 15

UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Di Cilacap Terhadap Sel Kanker MCF-7 Secara In Vitro.

0 2 15

PENDAHULUAN Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Di Cilacap Terhadap Sel Kanker MCF-7 Secara In Vitro.

0 4 8

DAFTAR PUSTAKA Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Di Cilacap Terhadap Sel Kanker MCF-7 Secara In Vitro.

0 2 4