UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP Uji Antikanker Ekstrak Metanol Jamur Yang Diisolasi Dari Tanah Di Cilacap Terhadap Sel Kanker MCF-7 Secara In Vitro.
UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR
YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP
TERHADAP SEL KANKER MCF-7
SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Oleh:
NINA SRI WULAN
K100130069
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR
YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP
TERHADAP SEL KANKER MCF-7
SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NINA SRI WULAN
K100130069
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
ii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Alhamdulillahirobbil’alamin, segala puji syukur penulis panjatkan
kehadirat Alloh SWT Rabb semesta alam berkat limpahan rahmat dan hidayahNya penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Uji Antikanker Ekstrak
Metanol Jamur yang Diisolasi dari Tanah di Cilacap Terhadap Sel Kanker
MCF-7 secara In Vitro ”. Hanya kepada-Nya kita memuji, memohon, berlindung,
menyembah dan berserah diri. Shalawat dan salam senantiasa tercurahkan kepada
Nabi
Muhammad
SAW,
keluarganya,
sahabat-sahabatnya
dan
segenap
pengikutnya hingga akhir zaman kelak. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah
satu syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) di Fakultas
Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Pelaksanaan dan penulisan skripsi ini tidak lepas dari bantuan, bimbingan,
dan pengarahan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dengan kerendahan hati dan
rasa hormat penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Bapak Azis Saifudin, M.Sc., Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan dosen pembimbing sekaligus
penguji skripsi.
2.
Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku penguji skripsi.
3.
Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku penguji skripsi.
4.
Safira sarah Rosita dan Ratna lestari sebagai tim peneliti sitotoksik yang
sudah membantu dan memberi dukungan selama penelitian.
5.
Ayah, ibu, dan keluarga besar penulis yang selalu memberikan dukungan baik
mental, spiritual dan finansial untuk kelancaran studi penulis.
Semoga Alloh SWT memberikan balasan yang berlipat ganda kepada
semuanya. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa skripsi ini jauh dari sempurna,
sehingga kritik dan saran yang membangun sangat diharapkan. Namun besar
harapan penulis semoga hasil penelitian yang sederhana ini dapat bermanfaat
v
untuk kemajuan ilmu pengetahuan pada umumnya dan ilmu farmasi pada
khususnya.
Wassalamu’alaikum warahmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, 8 Desember 2016
Penulis
vi
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .............................................................................................. II
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... III
DEKLARASI ........................................................................................................ IV
KATA PENGANTAR ............................................................................................ V
DAFTAR ISI........................................................................................................ VII
DAFTAR TABEL................................................................................................. IX
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. X
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................ XII
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... XIII
ABSTRAK ..........................................................................................................XIV
ABSTRACT........................................................................................................... XV
BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah..................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .............................................................................. 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka ................................................................................ 3
1. Tanah............................................................................................ 3
a. Tanah dan mikroba tanah ....................................................... 3
b. Skrining tanah ........................................................................ 4
2. Kanker .......................................................................................... 4
a. Tinjauan umum kanker .......................................................... 4
b. Penyebab kanker .................................................................... 5
c. Perkembangan sel kanker....................................................... 5
3. Kanker payudara .......................................................................... 5
4. Sel MCF-7 .................................................................................... 6
5. Uji Sitotoksik ............................................................................... 7
E. Keterangan Empiris ........................................................................... 7
BAB II. METODE PENELITIAN ......................................................................... 9
vii
A. Kategori Penelitian ............................................................................. 9
B. Variabel Penelitian ............................................................................. 9
C. Alat dan Bahan ................................................................................... 9
1. Alat-alat........................................................................................ 9
2. Bahan-bahan .............................................................................. 10
D. Tempat Penelitian ............................................................................ 10
E. Jalannya Penelitian ........................................................................... 10
1. Pengambilan sampel tanah ......................................................... 12
2. Sterilisasi alat ............................................................................. 12
3. Pembuatan media pertumbuhan jamur ....................................... 12
4. Skrining tanah dan isolasi jamur ................................................ 13
5. Identifikasi isolat jamur ............................................................. 14
6. Ekstraksi ..................................................................................... 14
7. Uji sitotoksik .............................................................................. 14
a. Pemanenan sel ...................................................................... 14
b. Preparasi sampel .................................................................. 15
c. Uji sitotoksik dengan MTT assay ........................................ 15
F. Analisis Data .................................................................................... 16
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 19
A. Pengambilan Sampel Tanah ............................................................. 19
B. Skrining Tanah ................................................................................. 20
C. Ekstraksi ........................................................................................... 23
D. Uji Sitotoksik ................................................................................... 24
BAB IV. KESIMPULAN ....................................................................................... 33
A. Kesimpulan ...................................................................................... 33
B. Saran ................................................................................................ 33
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 34
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Letak geografis ekosistem tanah ............................................................. 12
Tabel 2. Komposisi media agar Czapex dox......................................................... 13
Tabel 3. Rendemen ekstrak metanol isolat jamur tanah beserta media
pertumbuhannya ..................................................................................... 24
Tabel 4. Persentase sel MCF-7 yang hidup setelah diberi ekstrak metanol
jamur beserta media pertumbuhannya ................................................... 32
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Bagan langkah kerja penelitian ........................................................... 11
Gambar 2. Bagan uji sitotoksik ............................................................................. 17
Gambar 3. Jamur yang diisolasi dari tanah hutan pada hari ke-14 inkubasi ......... 20
Gambar 4. Jamur yang diisolasi dari tanah pegunungan pada hari ke-14
inkubasi ............................................................................................... 21
Gambar 5. Jamur yang diisolasi dari tanah peternakan ayam pada hari ke-14
inkubasi ............................................................................................... 21
Gambar 6. Jamur yang diisolasi dari tanah tepi sungai pada hari ke-14
inkubasi ............................................................................................... 22
Gambar 7. Jamur yang diisolasi dari tanah sawah pada hari ke-14 inkubasi ....... 22
Gambar 8. Morfologi sel kanker MCF-7 yang hidup (A) dan sel kanker
MCF-7 yang mati (B).......................................................................... 24
Gambar 9. Kristal formazan yang terbentuk pada kontrol sel (A) dan sel
yang diberi ekstrak (B)........................................................................ 25
Gambar 10. Pengaruh ekstrak metanol media Czapex dox terhadap
persentase sel MCF-7 yang hidup ....................................................... 26
Gambar 11. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
hutan beserta media pertumbuhannya dengan esktrak metanol
media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang hidup ......... 27
Gambar 12. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
pegunungan beserta media pertumbuhannya dengan esktrak
metanol media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7
yang hidup ........................................................................................... 28
Gambar 13. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
peternakan ayam beserta media pertumbuhannya dengan ekstrak
metanol media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 29
x
Gambar 14. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah tepi
sungai beserta media pertumbuhannya dengan ekstrak metanol
media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang hidup ......... 30
Gambar 15. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
sawah beserta media pertumbuhannya dengan ekstrak metanol
media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang hidup ......... 31
Gambar 16. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah peternakan ayam
beserta media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7
yang hidup ........................................................................................... 43
Gambar 17. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah hutan beserta
media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 44
Gambar 18. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah tepi sungai beserta
media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 45
Gambar 19. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah sawah beserta
media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 46
Gambar 20. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah pegunungan
beserta media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7
yang hidup ........................................................................................... 47
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Rendemen ekstrak isolat jamur tanah ............................................... 38
Lampiran 2. Perhitungan larutan sampel dan perhitungan sel MCF-7 ................. 39
Lampiran 3. Peta 96-well microplates .................................................................. 41
Lampiran 4. Data asli uji sitotoksik sel MCF-7 .................................................... 42
Lampiran 5. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah
peternakan ayam .............................................................................. 43
Lampiran 6. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah hutan ..... 44
Lampiran 7. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah
tepi sungai ........................................................................................ 45
Lampiran 8. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah sawah.... 46
Lampiran 9. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah
pegunungan ...................................................................................... 47
Lampiran 10. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol media Czapex dox ......... 48
xii
DAFTAR SINGKATAN
MCF-7
: Michigan Cancer Foundation-7
BRCA
: Breast Cancer
DMEM
: Dulbecco’s Modified Eagle Medium
SDS
: Sodium Dodecyil Sulphate
MTT
: 3-(4,5 dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida
PBS
: Phosphate Buffer Saline
FBS
: Fetal Bovine Serum
DMSO
: Dimetil Sulfoksida
ELISA
: Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay
IC50
: Inhibitory Concentration 50
LAF
: Laminar Air Flow
CCRC
: Cancer Chemoprevention Research Center
xiii
ABSTRAK
Tanah merupakan dasar ekosistem semua makhluk hidup seperti mikroba
salah satunya yaitu jamur. Kultur mikroba tanah telah menjadi sumber yang
sangat produktif untuk dijadikan obat alami seperti doksorubisin, bleomisin, dan
mitomisin, sehingga penelitian menggunakan mikroba tanah menarik untuk
dilakukan. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui efek antikanker isolat jamur
dari tanah hutan, sawah, pegunungan, tepi sungai, dan peternakan ayam terhadap
sel kanker MCF-7.
Isolat jamur didapatkan dari skrining tanah yang dilakukan dengan cara
pengenceran suspensi tanah dari lima ekosistem berbeda menggunakan larutan
salin steril sampai konsentrasi 10-3 kemudian ditanam pada media Czapex dox
yang sudah ditambah antibiotik streptomisin dan tetrasiklin serta ekstrak yeast.
Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi yang dilakukan dengan cara
merendam isolat jamur tanah beserta media pertumbuhan jamur. Ekstrak metanol
isolat jamur dengan konsentrasi 500; 250; 125; 62,5; dan 31,25 µ g/mL diuji efek
sitotoksik pada sel kanker MCF-7 menggunakan metode MTT assay.
Hasil uji sitotoksik menunjukan bahwa ekstrak metanol isolat jamur tanah
dari lima ekosistem mampu meningkatkan jumlah sel hidup seiring meningkatnya
konsentrasi. Sehingga dapat disimpulkan bahwa ekstrak metanol isolate jamur
tidak mempunyai efek antikanker terhadap sel kanker MCF-7.
Kata kunci: Jamur tanah, sitotoksik, sel MCF-7
xiv
ABSTRACT
Soil is the basic ecosystem of all living organisms like microbes, one of
them is fungus. Cultured soil microbes have been an incredibly productive source
of natural drugs, such as doxorubicin, bleomycin, and mitomycin, so research
which uses soil microbes is interesting to be done. The purpose of this study was
to find out the anticancer effects of fungal isolates from forest land, fields,
mountains, river banks, and poultry against MCF-7 cells.
Fungal isolates were collected from soil screening which was done by soil
suspension diluting from five different ecosystems using sterile saline solution
until the concentration was 10-3, then planted on Czapex dox which was added
with streptomycin, tetracycline, and yeast extract. Fungus were extracted using
maceration method by soaking soil fungal isolates and fungal growth media. Each
of the methanol extract of fungi isolates had concentration of 500; 250; 125; 62,5;
and 31,25 µ g/mL were tested by cytotoxic effect to MCF-7 cells using the MTT
assay method.
The result of cytotoxic test showed that the methanol extract of soil fungi
isolates from five ecosystems could increase the number of living cell along with
increase of the concentration. Therefore it can be conclude that methanol extract
of fungal isolates have no anticancer effect to MCF-7 cells.
Keywords: Soil fungus, cytotoxic, MCF-7 cells
xv
YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP
TERHADAP SEL KANKER MCF-7
SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Oleh:
NINA SRI WULAN
K100130069
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
UJI ANTIKANKER EKSTRAK METANOL JAMUR
YANG DIISOLASI DARI TANAH DI CILACAP
TERHADAP SEL KANKER MCF-7
SECARA IN VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NINA SRI WULAN
K100130069
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
ii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Alhamdulillahirobbil’alamin, segala puji syukur penulis panjatkan
kehadirat Alloh SWT Rabb semesta alam berkat limpahan rahmat dan hidayahNya penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Uji Antikanker Ekstrak
Metanol Jamur yang Diisolasi dari Tanah di Cilacap Terhadap Sel Kanker
MCF-7 secara In Vitro ”. Hanya kepada-Nya kita memuji, memohon, berlindung,
menyembah dan berserah diri. Shalawat dan salam senantiasa tercurahkan kepada
Nabi
Muhammad
SAW,
keluarganya,
sahabat-sahabatnya
dan
segenap
pengikutnya hingga akhir zaman kelak. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah
satu syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) di Fakultas
Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Pelaksanaan dan penulisan skripsi ini tidak lepas dari bantuan, bimbingan,
dan pengarahan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dengan kerendahan hati dan
rasa hormat penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Bapak Azis Saifudin, M.Sc., Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan dosen pembimbing sekaligus
penguji skripsi.
2.
Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku penguji skripsi.
3.
Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku penguji skripsi.
4.
Safira sarah Rosita dan Ratna lestari sebagai tim peneliti sitotoksik yang
sudah membantu dan memberi dukungan selama penelitian.
5.
Ayah, ibu, dan keluarga besar penulis yang selalu memberikan dukungan baik
mental, spiritual dan finansial untuk kelancaran studi penulis.
Semoga Alloh SWT memberikan balasan yang berlipat ganda kepada
semuanya. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa skripsi ini jauh dari sempurna,
sehingga kritik dan saran yang membangun sangat diharapkan. Namun besar
harapan penulis semoga hasil penelitian yang sederhana ini dapat bermanfaat
v
untuk kemajuan ilmu pengetahuan pada umumnya dan ilmu farmasi pada
khususnya.
Wassalamu’alaikum warahmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, 8 Desember 2016
Penulis
vi
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .............................................................................................. II
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... III
DEKLARASI ........................................................................................................ IV
KATA PENGANTAR ............................................................................................ V
DAFTAR ISI........................................................................................................ VII
DAFTAR TABEL................................................................................................. IX
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. X
DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................ XII
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... XIII
ABSTRAK ..........................................................................................................XIV
ABSTRACT........................................................................................................... XV
BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah..................................................................... 1
B. Rumusan Masalah .............................................................................. 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka ................................................................................ 3
1. Tanah............................................................................................ 3
a. Tanah dan mikroba tanah ....................................................... 3
b. Skrining tanah ........................................................................ 4
2. Kanker .......................................................................................... 4
a. Tinjauan umum kanker .......................................................... 4
b. Penyebab kanker .................................................................... 5
c. Perkembangan sel kanker....................................................... 5
3. Kanker payudara .......................................................................... 5
4. Sel MCF-7 .................................................................................... 6
5. Uji Sitotoksik ............................................................................... 7
E. Keterangan Empiris ........................................................................... 7
BAB II. METODE PENELITIAN ......................................................................... 9
vii
A. Kategori Penelitian ............................................................................. 9
B. Variabel Penelitian ............................................................................. 9
C. Alat dan Bahan ................................................................................... 9
1. Alat-alat........................................................................................ 9
2. Bahan-bahan .............................................................................. 10
D. Tempat Penelitian ............................................................................ 10
E. Jalannya Penelitian ........................................................................... 10
1. Pengambilan sampel tanah ......................................................... 12
2. Sterilisasi alat ............................................................................. 12
3. Pembuatan media pertumbuhan jamur ....................................... 12
4. Skrining tanah dan isolasi jamur ................................................ 13
5. Identifikasi isolat jamur ............................................................. 14
6. Ekstraksi ..................................................................................... 14
7. Uji sitotoksik .............................................................................. 14
a. Pemanenan sel ...................................................................... 14
b. Preparasi sampel .................................................................. 15
c. Uji sitotoksik dengan MTT assay ........................................ 15
F. Analisis Data .................................................................................... 16
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 19
A. Pengambilan Sampel Tanah ............................................................. 19
B. Skrining Tanah ................................................................................. 20
C. Ekstraksi ........................................................................................... 23
D. Uji Sitotoksik ................................................................................... 24
BAB IV. KESIMPULAN ....................................................................................... 33
A. Kesimpulan ...................................................................................... 33
B. Saran ................................................................................................ 33
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 34
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Letak geografis ekosistem tanah ............................................................. 12
Tabel 2. Komposisi media agar Czapex dox......................................................... 13
Tabel 3. Rendemen ekstrak metanol isolat jamur tanah beserta media
pertumbuhannya ..................................................................................... 24
Tabel 4. Persentase sel MCF-7 yang hidup setelah diberi ekstrak metanol
jamur beserta media pertumbuhannya ................................................... 32
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Bagan langkah kerja penelitian ........................................................... 11
Gambar 2. Bagan uji sitotoksik ............................................................................. 17
Gambar 3. Jamur yang diisolasi dari tanah hutan pada hari ke-14 inkubasi ......... 20
Gambar 4. Jamur yang diisolasi dari tanah pegunungan pada hari ke-14
inkubasi ............................................................................................... 21
Gambar 5. Jamur yang diisolasi dari tanah peternakan ayam pada hari ke-14
inkubasi ............................................................................................... 21
Gambar 6. Jamur yang diisolasi dari tanah tepi sungai pada hari ke-14
inkubasi ............................................................................................... 22
Gambar 7. Jamur yang diisolasi dari tanah sawah pada hari ke-14 inkubasi ....... 22
Gambar 8. Morfologi sel kanker MCF-7 yang hidup (A) dan sel kanker
MCF-7 yang mati (B).......................................................................... 24
Gambar 9. Kristal formazan yang terbentuk pada kontrol sel (A) dan sel
yang diberi ekstrak (B)........................................................................ 25
Gambar 10. Pengaruh ekstrak metanol media Czapex dox terhadap
persentase sel MCF-7 yang hidup ....................................................... 26
Gambar 11. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
hutan beserta media pertumbuhannya dengan esktrak metanol
media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang hidup ......... 27
Gambar 12. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
pegunungan beserta media pertumbuhannya dengan esktrak
metanol media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7
yang hidup ........................................................................................... 28
Gambar 13. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
peternakan ayam beserta media pertumbuhannya dengan ekstrak
metanol media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 29
x
Gambar 14. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah tepi
sungai beserta media pertumbuhannya dengan ekstrak metanol
media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang hidup ......... 30
Gambar 15. Perbandingan pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah
sawah beserta media pertumbuhannya dengan ekstrak metanol
media Czapex dox terhadap persentase sel MCF-7 yang hidup ......... 31
Gambar 16. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah peternakan ayam
beserta media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7
yang hidup ........................................................................................... 43
Gambar 17. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah hutan beserta
media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 44
Gambar 18. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah tepi sungai beserta
media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 45
Gambar 19. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah sawah beserta
media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7 yang
hidup ................................................................................................... 46
Gambar 20. Pengaruh ekstrak metanol isolat jamur tanah pegunungan
beserta media pertumbuhannya terhadap persentase sel MCF-7
yang hidup ........................................................................................... 47
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Rendemen ekstrak isolat jamur tanah ............................................... 38
Lampiran 2. Perhitungan larutan sampel dan perhitungan sel MCF-7 ................. 39
Lampiran 3. Peta 96-well microplates .................................................................. 41
Lampiran 4. Data asli uji sitotoksik sel MCF-7 .................................................... 42
Lampiran 5. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah
peternakan ayam .............................................................................. 43
Lampiran 6. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah hutan ..... 44
Lampiran 7. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah
tepi sungai ........................................................................................ 45
Lampiran 8. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah sawah.... 46
Lampiran 9. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol jamur dari tanah
pegunungan ...................................................................................... 47
Lampiran 10. Data hasil uji sitotoksik ekstrak metanol media Czapex dox ......... 48
xii
DAFTAR SINGKATAN
MCF-7
: Michigan Cancer Foundation-7
BRCA
: Breast Cancer
DMEM
: Dulbecco’s Modified Eagle Medium
SDS
: Sodium Dodecyil Sulphate
MTT
: 3-(4,5 dimetil tiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida
PBS
: Phosphate Buffer Saline
FBS
: Fetal Bovine Serum
DMSO
: Dimetil Sulfoksida
ELISA
: Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay
IC50
: Inhibitory Concentration 50
LAF
: Laminar Air Flow
CCRC
: Cancer Chemoprevention Research Center
xiii
ABSTRAK
Tanah merupakan dasar ekosistem semua makhluk hidup seperti mikroba
salah satunya yaitu jamur. Kultur mikroba tanah telah menjadi sumber yang
sangat produktif untuk dijadikan obat alami seperti doksorubisin, bleomisin, dan
mitomisin, sehingga penelitian menggunakan mikroba tanah menarik untuk
dilakukan. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui efek antikanker isolat jamur
dari tanah hutan, sawah, pegunungan, tepi sungai, dan peternakan ayam terhadap
sel kanker MCF-7.
Isolat jamur didapatkan dari skrining tanah yang dilakukan dengan cara
pengenceran suspensi tanah dari lima ekosistem berbeda menggunakan larutan
salin steril sampai konsentrasi 10-3 kemudian ditanam pada media Czapex dox
yang sudah ditambah antibiotik streptomisin dan tetrasiklin serta ekstrak yeast.
Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi yang dilakukan dengan cara
merendam isolat jamur tanah beserta media pertumbuhan jamur. Ekstrak metanol
isolat jamur dengan konsentrasi 500; 250; 125; 62,5; dan 31,25 µ g/mL diuji efek
sitotoksik pada sel kanker MCF-7 menggunakan metode MTT assay.
Hasil uji sitotoksik menunjukan bahwa ekstrak metanol isolat jamur tanah
dari lima ekosistem mampu meningkatkan jumlah sel hidup seiring meningkatnya
konsentrasi. Sehingga dapat disimpulkan bahwa ekstrak metanol isolate jamur
tidak mempunyai efek antikanker terhadap sel kanker MCF-7.
Kata kunci: Jamur tanah, sitotoksik, sel MCF-7
xiv
ABSTRACT
Soil is the basic ecosystem of all living organisms like microbes, one of
them is fungus. Cultured soil microbes have been an incredibly productive source
of natural drugs, such as doxorubicin, bleomycin, and mitomycin, so research
which uses soil microbes is interesting to be done. The purpose of this study was
to find out the anticancer effects of fungal isolates from forest land, fields,
mountains, river banks, and poultry against MCF-7 cells.
Fungal isolates were collected from soil screening which was done by soil
suspension diluting from five different ecosystems using sterile saline solution
until the concentration was 10-3, then planted on Czapex dox which was added
with streptomycin, tetracycline, and yeast extract. Fungus were extracted using
maceration method by soaking soil fungal isolates and fungal growth media. Each
of the methanol extract of fungi isolates had concentration of 500; 250; 125; 62,5;
and 31,25 µ g/mL were tested by cytotoxic effect to MCF-7 cells using the MTT
assay method.
The result of cytotoxic test showed that the methanol extract of soil fungi
isolates from five ecosystems could increase the number of living cell along with
increase of the concentration. Therefore it can be conclude that methanol extract
of fungal isolates have no anticancer effect to MCF-7 cells.
Keywords: Soil fungus, cytotoxic, MCF-7 cells
xv