43
Lampiran 1. Komposisi dan Prosedur Pembuatan Medium 1.
Medium Starch Casein Nitrat SCN
Bahan gL
Soluble starch 10
Kasein 1
KNO
3
1 K
2
HPO
4
0,5 MgSO
4
,7H
2
O 0,5
NaCl 0,5
FeSO
4
,7H
2
O 0,01
Agar 20
Akuades 1000 mL
pH akhir 6,8-7,0
2. Medium cair Yeast Extract Malt Extract YEMENurkanto et al., 2008
Bahan gL
Yeast extract Malt extract
Glukosa 4
10 4
KNO
3
1 K
2
HPO
4
0,5 MgSO
4
,7H
2
O 0,5
NaCl 0,5
FeSO
4
,7H
2
O 0,01
Akuades 1000 mL
pH akhir 7,3
3. Medium cair OatmealNurkanto et al., 2008
Bahan gL
Oatmeal komersial 20
Yeast extract 1
KNO
3
1 K
2
HPO
4
0,5 MgSO
4
,7H
2
O 0,5
NaCl 0,5
FeSO
4
,7H
2
O 0,01
Akuades 1000 mL
pH akhir 7,2
4. Medium Starch Agar SABridson, 1998
Bahan gL
Meat extract 3
Peptic digest of animal tissue
5 Soluble starch
2 Agar
15 Akuades
1000 mL
pH akhir 7,2 ± 0,1
bio.unsoed.ac.id
44
5. Medium Urea Broth UBBridson, 1998
Bahan gL
Yeast extract 0,1
Dipotassium hydrogen phosphate 9,5
Potassium dihydrogen phosphate 9,1
Urea 20,0
Phenol red 0,01
Akuades 1000 mL
pH akhir 6,8 ± 0,2
6. Medium Sulfide Indole Motility SIMBridson, 1998
Bahan gL
Tryptone 20
Peptone 6,1
Ferrous ammonium sulphate 0,2
Sodium thiosulphate 0,2
Agar 3,5
Akuades 1000 mL
pH akhir 7,3 ± 0,2
7. Medium Tryptone Soya Agar TSABridson, 1998
Bahan gL
Tryptone 15,0
Soya peptone 5,0
Sodium chloride 5,0
Agar 20,0
Akuades 1000 mL
pH akhir 7,3 ± 0,2
8. Medium Basal
Bahan Dalam 1 L
K2HPO4 1,0 g
MgSO4 0,5 g
FeSO4 50 mg
Na Molibdat 0,005 g
Akuades 1000 mL
pH akhir 7,3 ± 0,2
Prosedur Pembuatan Medium
Semua bahan dilarutkan dalam akuades sampai volume 1000 mL. Larutan dididihkan dan terus diaduk hingga homogen. Kemudian pH medium diukur, apabila
terlalu asam ditambahkan NaOH dan apabila terlalu basa ditambahkan HCl. Medium dimasukkan dalam labu Erlenmeyer dan disterilisasi dengan autoklaf pada suhu
121
o
C dengan tekanan 2 atm selama 15 menit.
bio.unsoed.ac.id
45
Lampiran 2. Spesifikasi Peralatan dan Bahan 1.
Alat
No Nama Alat
MerekTipe Kegunaan
Tempat
1 Cawan petri
IWAKI Pyrex®, Japan
Menumbuhkan biakan Lab. Mikrobiologi
2 Tabung reaksi
IWAKI Pyrex®, Japan
Uji-uji biokimiawi Lab. Mikrobiologi
3 Mikropipet
Socorex, Swiss Mengambil larutan dengan
volume 1000 µl
Lab. Mikrobiologi 4
Tip Biologix,
Amerika Memindahkan larutan
Lab. Mikrobiologi 5
Labu Erlenmeyer IWAKI Pyrex®,
Japan Tempat pembuatan media
Lab. Mikrobiologi 6
Gelas ukur IWAKI Pyrex®,
Japan Mengukur volume cairan
Lab. Mikrobiologi 7
Beaker glass IWAKI Pyrex®,
Japan Tempat preparasi media
Lab. Mikrobiologi 8
Optilab Miconos
Mengamati struktur hifa isolat dan untuk foto
Lab. Mikrobiologi 9
Pipet tetes Stera, Indonesia
Mengambil larutan yang volumenya tidak diketahui
Lab. Mikrobiologi 10
pH meter Thermo electron
coorpoeation Russel RL060P
Mengukur derajat keasaman larutan atau media
Lab. Mikrobiologi 11
Timbangan analitik Tipe EO 2140
Ohaus Co,, USA
Mengukur massa bahan Lab. Mikrobiologi
12 Refrigerated
centrifuge Hitachi-himac
CR7 Sentrifugasi
Lab. Riset 13
Mikroskop cahaya Olympus C110
Mengamati mikromorfologi isolat
Lab. Mikrobiologi 14
Mikroskop stereo Olympus SZ30
Mengamati morfologi koloni isolat
Lab. Mikrobiologi 15
Autoklaf Model HL36AE
Hirayama Manufacturing
Corporation, Japan
Sterilisasi bahan dan alat Lab. Mikrobiologi
16 Oven
Memmert Mengeringkan kertas saring
dan miselium Lab. Mikrobiologi
17 Hotplate dan stirrer
bar Ika® C-MAG
HS 10 Menghomogenkan media
atau larutan Lab. Mikrobiologi
18 Desikator
- Menstabilkan suhu
Lab. Mikrobiologi 19
Inkubator Memmert
Memeram biakan pada suhu terkontrol
Lab. Mikrobiologi 20
Rotary evaporator Stuart RE300
Menguapkan pelarut Lab. Riset
21 Spektrofotometer
Shimidzu UV 1800
Menentukan maksimum
pigmen Lab. Biokimia
22 Pembakar spirtus
- Menciptakan suasana aseptis
Lab. Mikrobiologi 23
Bor gabus -
Membuat cetakan isolat berukuran seragam
Lab. Mikologi 24
Rak tabung reaksi -
Meletakan tabung reaksi Lab. Mikrobiologi
25 Jarum inokulum
- Inokulasi biakan
Lab. Mikrobiologi 26
Sprayer alkohol Nagata
Untuk kerja aseptis Lab. Mikrobiologi
27 Object glass
Sail brand Untuk pengamatan
Lab. Mikrobiologi
bio.unsoed.ac.id
46
mikromorfologi pada mikroskop cahaya
28 Cover glass
Sail brand Pasangan object glass
Lab. Mikrobiologi 29
Corong -
Untuk memudahkan memasukkan larutan
Lab. Mikrobiologi 30
Kulkas National®
model B22AF Menyimpan media
Lab. Mikrobiologi 31
Microwave Menumaster
Memanaskan media Lab. Mikrobiologi
32 Kompor Listrik
Rinai Proses Sokletasi
Lab. Biokimia 33
Soxhlet extractor Pyrex
Ekstraksi pigmen Lab. Biokimia
2. Bahan