3.2.1. Tahap persiapan
Tahap pertama yakni tahap persiapan kandang yang diawali dengan pembersihan kandang dengan cara di semprot dengan air dan air sabun, kemudian
dilakukan sanitasi dengan cara penyemprotan area kandang secara menyeluruh menggunakan cairan desinfektan kemudian dilanjutkan dengan pembuatan petak
unit percobaan, pemasangan instalasi air minum dan sekat pakan. Pembuatan ransum perlakuan menggunakan daun mengkudu, daun mengkudu yang
digunakan adalah daun yang dalam keadaan segar, sedangkan daun yang sudah lama jatuh dan sudah berubah warna menjadi coklat atau coklat kehitaman dan
kering tidak dipakai. Selanjutnya daun yang sudah disiapkan dikeringkan dalam oven 60°C selama 15 menit hingga daun menjadi kering dan warna daun berubah
menjadi hijau tua, kemudian dibentuk tepung dengan cara di tumbukdi blender. Semua bahan pakan ditimbang sesuai dengan formulasi, kemudian ditambahkan
tepung daun mengkudu sesuai dengan taraf perlakuan dengan proses pencampuran. Pencampuran dilakukan dengan cara mencampurkan semua bahan
pakan sesuai dengan formulasinya hingga tercampur rata.
3.2.2. Parameter
Parameter yang diamati adalah kadar kolesterol, High Density Lipoprotein HDL dan Low Density Lipoprotein LDL dalam serum darah ayam petelur.
Serum darah diperoleh dengan mengambil sampel darah ayam petelur melalui vena brachialis berada di sayap sebanyak 3 ml setiap ekor. Selanjutnya
dimasukan ke dalam tabung penampung darah dan dikemas dalam termos es
untuk kemudian dilakukan pengujian serum darah di Balai Laboraturium Kesehatan Semarang untuk mengetahui kadar Kolesterol, HDL, LDL dalam
darah.
3.2.3. Rancangan penelitian
Penelitian menggunakan rancangan acak lengkap RAL dengan 4 perlakuan dan 5 ulangan. Perlakuan yang digunakan adalah :
T0 : pakan kontrol tanpa penggunaan tepung daun mengkudu T1 : pakan menggunakan 2,5 tepung daun mengkudu
T2 : pakan menggunakan 5 tepung daun mengkudu T3 : pakan menggunakan 7,5 tepung daun mengkudu
3.2.4. Tahap perlakuan