PATOGENISITAS Aeromonas salmonicida PADA PATIN SIAM (Pangasius hypophthalmus)

  

ABSTRAK

PATOGENISITAS Aeromonas salmonicida PADA PATIN SIAM

(Pangasius hypophthalmus)

  

Oleh

Elmunah Wahidah

Aeromonas salmonicida merupakan bakteri pathogen pada ikan yang memiliki

  kisaran inang yang luas. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengamati dan mengetahui patogenisitas A. salmonicida pada ikan patin siam. Isolate bakteri A.

  

salmonicida dikoleksi dari Stasiun Karantina Ikan Panjang. Ada tiga parameter

  yang diamati untuk mengetahui patogenisitas A. salmonicida pada penelitian ini yaitu, LD , uji hemaglutinasi dan uji Postulat Koch. LD diambil dari data

  50

  50

  sekunder pada penelitian sebelumnya oleh Supriyadi (2010). Uji hemaglutinasi dilakukan dengan mengacu pada metode standar uji hemaglutinasi VIRAPUR (2011) dengan sedikit modifikasi. Uji Postulat Koch dilakukan dengan menginfeksikan isolat A. salmonicida dari ikan yang diinfeksi sebelumnya pada 10 ekor ikan patin dan diamati gejala sakit dan kematian selama 2 minggu. Hasil penelitian menunjukkan LD

  A. salmonicida pada ikan patin siam adalah

  50

  7

  10 cfu/mL. Uji hemaglutinasi menunjukkan adanya reaksi aglutinasi eritrosit ikan

  1

  patin pada pengenceran 2 . Uji Postulat Koch menunjukkan adanya kematian pada ikan patin sebanyak 2 ekor tanpa diawali dengan gejala klinis. Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa bakteri A. salmonicida memiliki patogenisitas yang relatif rendah pada ikan patin siam.

  Kata kunci : A. salmonicida, Hemaglutinasi, LD 50, Patin siam, Postulat Koch

  

ABSTRACT

Pathogenicity of Aeromonas salmonicida in Patin Siam

(Pangasius hypophthalmus)

  

By

ELMUNAH WAHIDAH

Aeromonas salmonicida is pathogenic bacteria in fish that has wide range host.

  The objective of this research was to know pathogenicity of A. salmonicida on striped catfish. A. salmonicida isolate was collected from Panjang fish quarantine station. There were three parameters observed to detect pathogenicity of A.

  salmonicida in this research : LD 50 , hemagglutination test and Koch Postulate test.

  LD

  50 was taken from the secondary data in a previous research by Supriyadi

  (2010). Hemagglutination test was referred to standard method of VIRAPUR hemagglutination test (2011) with minor modification. Koch Postulate test was done by infecting A. salmonicida from a previously infected fish into ten striped catfish. The symptom of disease and mortality was observed daily in two weeks after infection.

  7 The results showed that LD

50 A. salmonicida on striped catfish was 10 cfu/mL.

  The hemagglutination test showed that there was agglutination reaction of

• 1

  erythrocyte on striped catfish in 2 dilution. Koch Postulate test indicated that there were 2 fish died without any initiated clinical symptom. These resulted that

  A. salmonicida isolate of this research has low pathogenicity on striped catfish..

  Key words : A. salmonicida, LD

  50 , hemagglutination, Koch Postulat, striped catfish.

  PATOGENISITAS Aeromonas salmonicida PADA IKAN PATIN SIAM ( Pangasius hypophthalmus)

  Oleh ELMUNAH WAHIDAH Skripsi Sebagai Salah Salah Satu Syarat untuk Mencapai Gelar SARJANA PERIKANAN Pada Program Studi Budidaya Perairan Fakultas Pertanian Universitas Lampung FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS LAMPUNG BANDAR LAMPUNG 2012

  PATOGENISITAS Aeromonas salmonicida PADA IKAN PATIN SIAM Pangasius hypophthalmus)

  ( (Skripsi) Oleh Elmunah Wahidah 0514111042 PROGRAM STUDI BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERTANIAN UNIVERSITAS LAMPUNG 2012

  DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 1.

  Ikan patin ...........................................................................................

  8 2. Bakteri A. salmonicida ....................................................................... 10 3.

  Eritrosit aglutinan dan eritrosit tidak aglutinan ................................. 17 4. Tahapan penelitian ............................................................................. 24 5. Hasil uji hemaglutinasi ........................................................................ 31 6. Isolasi bakteri ke medium GSP ............................................................ 31 7. Gejala klinis pada uji Postulat Koch .................................................. 34

  

DAFTAR ISI

DAFTAR TABEL ......................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xiv

  9 C. Patogenisitas Mikroba ........................................................................

  20 3. pH ...................................................................................................

  19 2. DO (Dissolved oxygen) ..................................................................

  19 1. Suhu ................................................................................................

  18 D. Kualitas Air ........................................................................................

  16 3. Uji Postulat Koch ...........................................................................

  16 2. Uji Hemaglutinasi ..........................................................................

  50 ..........................................................................................

  1. Uji LD

  16

  9 B. Bakteri A. salmonicida .......................................................................

  I. PENDAHULUAN ....................................................................................

  8 3. Makan dan kebiasaan makan ikan patin ........................................

  7 2. Habitat dan distribusi ikan patin .....................................................

  7 1. Klasifikasi dan identifikasi ikan patin ...........................................

  7 A. Ikan Patin (Pangasius hypophthalmus) ..............................................

  6 II. TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................................

  5 D. Manfaat Penelitian ..............................................................................

  4 C. Kerangka Pemikiran ...........................................................................

  1 B. Tujuan Penelitian ................................................................................

  1 A. Latar Belakang ...................................................................................

  20

  III. METODE PENELITIAN ......................................................................

  21 A. Waktu dan Tempat .............................................................................

  21 B. Alat dan Bahan ...................................................................................

  21 C.Metode Penelitian ...............................................................................

  22 D.Prosedur Penelitian ..............................................................................

  23 1. Tahap Persiapan ..............................................................................

  25 a. Sterilisasi Alat dan Bahan ............................................................

  25 b. Persiapan Wadah dan Ikan Uji ...................................................

  25 c. Pembuatan Media Bakteri ..........................................................

  26 d. Penumbuhan dan Pengenceran Bakteri .......................................

  26 e. Kohabitasi ....................................................................................

  26 2. Tahap Pelaksanaan ..........................................................................

  27 a. Uji Hemaglutinasi ........................................................................

  27 b. Uji Postulat Koch ........................................................................

  27 3. Tahap Pengamatan ..........................................................................

  27 a. Respon makan ikan ......................................................................

  28 b. Mortalitas ....................................................................................

  28 c. Pengukuran Kualitas Air .............................................................

  28 d. Gejala Klinis ................................................................................

  29 IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................................

  30 A.

   Hasil Penelitian .................................................................................. 30

  1. LD 50 ................................................................................................

  30 2. Uji Hemaglutinasi ..........................................................................

  30 3. Uji Postulat Koch ...........................................................................

  31 a. Respon nafsu makan ikan patin ..................................................

  32 b. Kualitas Air ................................................................................

  33 c. Mortalitas ....................................................................................

  33 d. Gejala klinis ikan patin ...............................................................

  33 B. Pembahasan ......................................................................................

  34 V. SIMPULAN ..............................................................................................

  40 DAFTAR PUSTAKA

  LAMPIRAN

  41

  DAFTAR PUSTAKA

  Anonim. 2007. Petunjuk Praktikum Penyakit Ikan Bakterial. Pelatihan Lanjutan Bakteriologi Tingkat Ahli Karantina Ikan. Lab Hama dan Penyakit Ikan.

  UGM. Hal 22 – 23. ______. 2008. (http//id.wikipedia.org/wiki/Bakteri). Di akses tanggal 11 September 2011. Jam 20.25 wib.

  ______. 2010a. Petunjuk Praktikum Manajemen Kesehatan Ikan. Universitas Lampung Jurusan Budidaya Perairan. Hal 2. ______. 2010b. spot.com/2010/06/Postulat

• – Koch.html) di akses tanggal 1 November 2011 jam 20.18 wib.

  ______. 2011a. VIRAPUR (Virus Purification Experts). www. Virapur.com. San Diego. Diakses tanggal 10 Oktober 2011. ______. 2011b. serangan_bakteri_Aeromonas_pada_patin_dan_manusia/GCAT: glyoerophospolipid cholesterol acyltransferase). Di akses tanggal 29 Oktober 2011 pukul 19.03 WIB. ______. 2012a Diakses tanggal 5 Januari 2012 pukul

  02.28 wib. ______ . 2012. .files.wordpress.com. 2011/01/ anatomi_bakteri.jpg.) diakses tanggal 25 Desember 2011 Pukul 22.30 wib. Afrianto, E & Liviawaty, E. 1999. Pengendalian Hama dan Penyakit Ikan.

  Kanasius. Hal 56 – 62. Alexander, D. 1996. Newcastle disease. In Manual of Standard for Diagnostic

  Test and Vaccines, OIE World Organisation for Animal Health. Edisi ke 3

  : 161 – 169.

  42 Ayuningtyas, A.K. 2008. Efektivitas Campuran Meniran Phylanthus niruri dan

  Bawang Putih (Allium sativum) untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada ikan Lele Dumbo (Clarias sp). Skripsi

  Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Instintut Pertanian Bogor. Bogor. Bootsma, R., dan J. Blommert. 1978. Zur Aetiologie der Erythroder- matitis beim

  Karpfen Cyprinu8 cal’pio L. In Neuere uber Fischifektionen. Gustav

  Fischer Verlag Stuttgart and New York. Pp 20 – 27. Boyd, C.E. 1982. Water Quality Management for Pond Fish Culture. Auburn

  th

  University. 4 Printing, International Centre for Aquaculture Experiment Station. Auburn. Buller, N.B. 2004. Bacteria from Fish and Other Aquatic Animals, A Practical Identification Manual. CABI Publishing, UK. 358p. Carson, J. Dan J. Handlinger. 1988. Virulence of the aetiological agent of goldfish ulcer disease in Atlantic salmon, Salmo salar L. Journal of Fish Disease.

  11 : 471 – 479. Cipriano dan G. Bullock. 2001. Furunculosis And Other Diseases Caused By

  Aeromonas salmonicida. Fish Diseases Leaflet 66. West Virginia. 33 :

  2

• –8 Dachlan, M. 2001. Kamus Istilah Medis. Penerbit Arkola. Jakarta. Hal 449. Darmanto. 2003. Respon Kebal Ikan Mas Koki (Carassius auratus) Melalui

  Vaksinasi dan Imunostimulasi Terhadap Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila. Tesis. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Instintut

  Pertanian Bogor. Bogor. Darti S.L dan Iwan, D. 2006. Penyakit Ikan Hias. Penebar Swadaya. Jakarta Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. 1998. Kamus Besar Bahasa Indonesia.

  Balai Pustaka. Jakarta Djarijah, A.S. 2001. Pembenihan Patin. Kanisius. Yogyakarta.

  Effendi, M.I. 1997. Biologi Perikanan. Yayasan Pustaka Nusatama. Bogor Emmerich, R., dan E. Weibel. 1890. Uber eine durch Bakterien verursachte

  Infektionskrankheitder Forellen. Allg. Fisch. Ztg. 15: 85 – 92.

  Gufran, M. 2004. Penanggulangan Hama dan Penyakit Ikan. Rineka Cipta.

  Jakarta. 63 hal. Ghufron, K.K. 2005. Budidaya Ikan Patin. Yayasan Pustaka Nusatama.

  43 Ghufran, K,K. 2010. Budidaya Ikan Patin di Kolam Terpal. LILY Publisher.

  Yogyakarta. Hal 7 – 11. Gyles, C. L. and J.F. Prescott. 2004. Themes in Bacterial Pathogenic Mechanisms.

  In Gyles, C.L., J. F. Prescott, J. G. Songer, and C. O. Thoen (Eds). 2004.

  Pathogenesis of Bacterial Infections in Animals Third Edition. Blackwell Publishing, Iowa, USA.

  Guntur Tarigan, H. 2009. Prinsip

• – Prinsip Dasar Metode Riset Pengajaran dan Pembelajaran Bahasa. Angkasa. Bandung. Hal 155.

  Hammel, K.L. 1995. An overview of furunculosis in Atlantic Canada. Bulletin of the Aquaculture Association of Canada. 95 : 8

• – 11. Hariyadi, S., I.N.N Suryadiputra dan B. Widigdo. 1992. Limnologi. Metode

  Analisa Kualitas Air. Laboratorium Limnologi. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. IPB. Bogor. 109 halaman.

  Holt, J.G., N.R Krieg., P.H.A Sneath., J.P Staley. 1994.

  Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. The Williams and Wilkins Company,

  Baltimore. Humphrey, J.D. dan L. D. Ashburner. 1993. Spread of the bacterial fish pathogen

  A. salmonicida after importation of infected goldfish, Carrasius auratus,

  into Australia. Australian Veterinary Journal. 70 : 453 – 454. Jawetz, E, Melnick, J.L dan Adelberg, E.A. 1995. Medical Microbiology. San Fransisco. Edisi 20. hal 141.

  Kurniastuti. 2001. Rangkuman Bahan Kuliah Pengendalian Hama Penyakit.

  Program D3 Sumberdaya Perikanan. Universitas Lampung. Hal 5. Lee, K., S. Kim, Y. Oh, and Y. Lee. 2000. Characterization of Aeromonas

  hydrophila Isolated from Rainbow Trouts in Korea. The Journal of

  Microbiology Vol. 38. (1) : 1-7 McCarthy, D. H. dan R. J. Robert. 1980. Furunculosis of fish

• – the present state of our knowledge. In M. R. Droop and H. W. Jannasch, eds. Advances in Aquatic Microbiology. Academic Press, London. Vol 2 : 293 – 341.

  Michael T,Madigan, John M.Martinko and Jack Parker. 2003. Biology of

  Microorganisms. Edisi sepuluh. Technical University of Denmark, Lyngby, Denmark. Hal. 740.

  Notoadmojo, S. 2005. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta. Hal. 138 Pusat Karantina Ikan, DKP. 2007. Metode Standar Pemeriksaan HPIK

  44 Putra, A. P. 2009. Efektivitas Ekstrak Daun Sirih (Piper betle L) terhadap

  Infeksi Bakter Aeromonas salmonicida pada Ikan Patin (Pangasius pangasius). Skripsi Fakultas Pertanian Program Studi Budidaya

  Perairan, Universiras Lampung. Lampung. ReedL. J. & Muench H. 1938. A simple method of estimating

  fifty percent end points. American Journal of Hygiene 27, 493

• –497. Supriyadi, A. 2010. Efektifitas Ekstrak Daun Ketapang (Terminalia cattapa L)

  Untuk Pengobatan Infeksi Bakteri Aeromonas salmonicida Pada Ikan Patin (Pangasioniodon hypophthalmus). Skripsi Fakultas Pertnian

  Program Studi Budidaya Perairan. Universitas Lampung. Supriyadi, H. Dan P. Taufik, 1981. Identifikasi dan cara penanggulangannya

  penyakit bakterial pada ikan lele (Clarias batracus). Bull. Perik. I (3):

  447-454 Stickney, RR. 1993. Principle of Warmwater Aquaculture. A Wiley-Interscience Publication, John Wiley and Sons, New York.

  Sunarma, A. 2007. Budidaya Ikan Patin (Pangasius pangasius). Diakses dari http: ada tanggal 6 Febuari 2009. Supriyadi, H. 2003. Penyakit pada Ikan Hias Serta Cara Penanggulangannya.

  Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar Sukamandi. Jawa Barat. Suriawiria, U. 1986. Buku Materi Pokok Mikrobiologi Modul 1

• – 5. Karunika Jakarta. Hal 1 – 8.

  Susanto, H dan Khairul A. 2007. Budidaya Ikan Patin. Penebar Swadaya. Jakarta. Tim Penyusun Pusat Bahasa. 1998. Kamus Besar Bahasa Indonesia. Jakarta : Balai Pustaka.

  Trust, T.J. A. G. Khouri, R.A. Austen, dan L. D. Ashburner. 1980. First isolation

  in Australia of atypical A. Salmonicida. FEMS Microbiologi Letter. 9 : 39 – 42.

  Walpole, R. E.1995. Pengantar Statistik Edisi 3. Gramedia Pustaka Utama.

  Jakarta.

  45

I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

  Ikan patin merupakan salah satu jenis ikan air tawar asli Indonesia yang tersebar di sebagian wilayah Sumatera dan Kalimantan (Djarijah, 2001). Ikan patin termasuk komoditi yang memiliki prospek cerah untuk dibudidayakan. Hal tersebut dikarenakan ikan patin mempunyai kelebihan yaitu rasa dagingnya yang lezat dan gurih, ukuran per individunya besar, pertumbuhannya yang pesat, dan mudah dibudidayakan (Susanto dan Khairul, 2007). Di Indonesia terdapat 13 jenis ikan patin, namun baru 2 spesies yang telah berhasil dibudidayakan yakni ikan patin siam dan patin jambal. Selain di Indonesia, ikan patin juga banyak ditemukan di kawasan Asia lainnya seperti di Vietnam, Thailand, dan Cina (Ghufran, 2010).

  Perkembangan budidaya ikan patin di Indonesia makin lama makin berkembang dengan pesat, karena kelebihan-kelebihan yang dimiliki oleh ikan patin. Adapun kelebihan

• – kelebihan yang dimiliki oleh ikan patin diantaranya rasa dagingnya gurih, ukuran per individu besar, ukuran dagingnya tebal. Karena kelebihan
• – kelebihan itu pengembangan budidaya patin terus dilakukan, diantaranya dengan metode budidaya intensif. Sehingga penerapan intensifikasi dengan padat penebaran yang tinggi tidak dapat dihindari lagi (Sunarma, 2007).

  2 Akan tetapi padat penebaran yang tinggi, jika tidak didukung dengan kualitas air yang baik, seperti kandungan pH dan oksigen terlarut rendah, pakan yang diberikan kurang tepat baik mutu maupun jumlahnya, serta penanganan ikan yang kurang sempurna. Hal tersebut mengakibatkan ikan mengalami stres sehingga ikan mudah terserang penyakit (Sarig 1971 dalam Supriyadi, 2003). Salah satu kendala yang dihadapi dalam budidaya ikan adalah masalah penyakit. Penyakit ikan merupakan masalah serius yang harus dihadapi oleh para pembudidaya ikan, karena sangat berpotensi menimbulkan kerugian yang tidak sedikit. Kerugian tersebut dapat berupa kematian ikan dan penurunan kualitas ikan sehingga secara ekonomis akan berakibat pada penurunan harga. Penyakit bakterial misalnya seringkali menimbulkan kerugian yang besar bagi para pembudidaya ikan karena penyakit tersebut dapat mengakibatkan kematian sekitar

  50 – 100 % (Supriyadi et al., 1981). Penyakit yang menyerang ikan disebabkan interaksi antara patogen, lingkungan dan inang sehingga timbul penyakit dalam usaha budidaya (Anonim, 2010a). Penyakit pada budidaya ikan air tawar dapat digolongkan menjadi dua macam yaitu penyakit infeksi dan non-infeksi (Kurniastuti et a.l., 2001). Salah satu penyakit infeksi pada ikan adalah Furunculosis dan Erytrodermatitis yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas salmonicida.

  Serangan bakteri A. salmonicida yang terjadi pada tahun 1980 di Jawa Barat dan sekitarnya telah menimbulkan kematian sebanyak 125 ribu ekor ikan mas, sehingga dalam waktu relatif singkat 82,2 ton ikan mati secara massal, baik

  3 (Afrianto dan Liviawaty, 1999). Pada tahun 1989, di Skotlandia terjadi wabah

  

furunkulosis yang disebabkan A. salmonicida sebanyak 15 kali pada ikan-ikan air

tawar dan 127 kali pada ikan-ikan air laut (Anonimus, 2000).

  Bakteri A. salmonicida merupakan bakteri patogen obligat pada ikan yang dapat diisolasi dari ikan yang sakit atau ikan sehat yang carrier. Bakteri ini mampu hidup beberapa minggu diluar inang tergantung salinitas, pH, temperatur dan detritus level air (Anonim, 2008). Secara umum bakteri A salmonicida adalah bakteri penyebab utama penyakit furunkulosis pada ikan. Awalnya bakteri ini hanya dideteksi menyerang ikan-ikan salmon. Namun, beberapa dekade berikutnya bakteri ini juga ditemukan pada ikan-ikan selain salmon seperti karper dan koi (Cyprins carpio Linneaus), sidat (Anguilla anguilla), lamprey, dan ikan koki (Carrasius auratus). Ikan-ikan tersebut selain menjadi inang utama dalam infeksi A. salmonicida juga beberapa inang hanya menjadi vector (perantara) (Buller, 2004). Bakteri A. salmonicida umumnya menyerang ikan air tawar dan menjadi masalah yang serius pada ikan air laut, khususnya pada budidaya ikan salmon Atlantik. Apabila ikan sudah menunjukkan gejala klinis yang parah misalnya tukak akibat serangan bakteri A. salmonicida, maka ikan harus segera dimusnahkan karena sifat penyakitnya yang mudah menular. Sedangkan pada ikan yang terinfeksi namun belum parah misalnya hemoragi dapat diatasi dengan cara pengobatan. Penularan bakteri Aeromonas dapat berlangsung melalui air, kontak badan, kontak dengan peralatan yang telah tercemar atau karena

  4 pemindahan ikan yang telah terserang Aeromonas dari satu tempat ke tempat lain (Afrianto dan Liviawaty, 1999).

  Namun, sejauh ini belum ada kajian patogenisitas pada ikan patin (Pangasius hypophthalmus). Hal ini sangat penting mengingat saat ini sedang digalakkan budidaya ikan patin untuk memenuhi pasar lokal dan internasional.

  Menurut Dachlan (2001), patogenitas adalah kemampuan untuk menimbulkan penyakit. Sedangkan menurut Jawetz dkk (1995), patogenisitas adalah kemampuan suatu penyebab infeksi untuk menimbulkan penyakit. Pengetahuan mengenai patogenisitas A. salmonicida terhadap ikan patin akan menjadi dasar dalam penanganan dan pencegahan terhadap munculnya wabah penyakit baru yang disebabkan A. salmonicida. Oleh karena itu, penting dilakukan penelitian mengenai patogenisitas A. salmonicida pada ikan patin untuk mengantisipasi munculnya wabah penyakit yang disebabkan bakteri A.

  salmonicida.

B. Tujuan Penelitian Penelitian bertujuan untuk mengamati dan mengetahui patogenisitas A.

  

salmonicida pada ikan patin yang diindikasikan dengan kemampuan

  mengaglutinasi sel darah merah (eritrosit), pembuktian Postulat Koch serta gejala klinis.

  5

C. Kerangka Pemikiran

  Ikan patin merupakan komoditas ikan air tawar unggulan di Indonesia dan telah mangalami perkembangan budidaya yang cukup pesat. Penerapan intensifikasi budidaya dengan padat tebar yang tinggi tidak dapat dihindarkan untuk memenuhi permintaan pasar yang terus meningkat. Namun, intensifikasi budidaya dapat menimbulkan berbagai dampak negatif antara lain penyakit. Penyakit ikan merupakan salah satu masalah serius yang harus dihadapi oleh para pembudidaya ikan, karena sangat berpotensi menimbulkan kerugian yang tidak sedikit. Kerugian tersebut dapat berupa kematian ikan dan penurunan kualitas ikan sehingga secara ekonomis akan berakibat pada penurunan harga. Penyakit bakterial misalnya seringkali menimbulkan kerugian yang besar bagi para pembudidaya ikan karena penyakit tersebut dapat mengakibatkan kematian sekitar 50-100% (Supriyadi dan Taufik, 1981). Salah satu bakteri yang sering menyerang ikan air tawar dan bersifat patogen adalah A. salmonicida. Serangan penyakit yang disebabkan oleh bakteri ini sangat cepat hingga dalam waktu 2-3 hari sejak ikan mengalami gejala-gejala sakit, seperti nafsu makan menurun, berenang ke arah pinggir, ikan lemah atau megap- megap di atas permukaan air hingga dapat menimbulkan kematian. Sejauh ini belum ada kajian mengenai patogenisitas bakteri A. salmonicida terhadap ikan patin siam (P. hypophthalmus). Oleh karena itu, perlu dilakukan kajian mengenai patogenisitas bakteri A. salmonicida terhadap ikan patin. Penelitian mengenai patogenisitas A. salmonicida pada ikan patin dapat

  6 disebabkan oleh bakteri A. salmonicida, sehingga penanggulangannya dapat dilakukan sejak dini.

D. Manfaat Penelitian

  Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi awal tentang ada tidaknya sifat patogen bakteri A. salmonicida pada ikan patin, sehingga bisa di upayakan penanggulangannya sejak dini.

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Biologi Ikan Patin Siam (Pangasius hypophthalmus)

1. Klasifikasi dan Identifikasi

  Klasifikasi ikan patin menurut Ghufran (2010) sebagai berikut : Filum : Chordata

  Kelas : Pisces Ordo : Siluriformes Famili : Pangasidae Genus : Pangasius Spesies : Pangasius hypophthalmus

  Patin mempunyai bentuk tubuh memanjang, agak pipih, tidak bersisik, kepala kecil, mata kecil, serta mulut diujung kepala dan lebar. Panjang tubuh ikan patin dapat mencapai ukuran 120 cm. Warna tubuh ikan patin pada bagian punggung keabu-abuan atau kebiru-biruan dan bagian perut putih keperak perakan (Susanto dan Khairul, 2007). Sirip punggung patin mempunyai 1 jari-jari keras yang berubah menjadi patil yang besar dan bergerigi dibelakangnya, sedangkan jari-jari lunak 6-7 buah. Pada permukaan punggung terdapat sirip lemak yang ukurannya sangat kecil. Sirip

  6 jari-jari lunak. Sedangkan sirip dada terdapat 1 jari-jari keras yang berubah menjadi patil dan 12-13 jari-jari lunak. Sirip ekor bercagak dan bentuknya simetris (Ghufron, 2005).

   7

   3

   2

  6

   1

   4

   5 Gambar 1 . Ikan Patin

  Keterangan :

  1. Mulut, 2. Mata, 3. Sirip Pektoral, 4. Sirip Ventral,

  5. Sirip Anal, 6. Sirip Caudal, 7. Sirip Dorsal

2. Habitat dan Distribusi

  Patin merupakan ikan air tawar yang hidup di sungai dan muara-muara sungai serta danau yang mampu bertahan pada lingkungan perairan yang jelek, misalnya kekurangan oksigen. Patin dikenal sebagai hewan nokturnal, yaitu hewan yang aktif pada malam hari dan sebagai hewan dasar yang suka bersembunyi di liang-liang tepi sungai (Ghufron, 2005). Penyebaran patin meliputi berbagai negara diantaranya adalah Thailand, Malaysia, Myanmar, Laos, India, dan Indonesia. Di Indonesia, patin terdapat di sungai dan danau-danau di pulau Sumatera, Kalimantan, dan Jawa (Djarijah, 2001).

3. Makan dan Kebiasaan Makan

  Patin merupakan jenis ikan omnivora dan cenderung bersifat karnivora. Di alam, patin memakan ikan-ikan kecil, cacing, detritus, serangga, biji-bijian, potongan daun tumbuh-tumbuhan, rumput-rumputan, udang-udang kecil dan moluska. Dalam pemeliharaannya ikan patin dapat diberi pakan buatan (artificial

  foods), yaitu berupa pelet (Ghufron, 2005).

B. Aeromonas salmonicida

  Menurut Gufran (2004), bakteri adalah mikroorganisme dengan struktur intraseluler yang sederhana dan mempunyai daerah penyebaran relative luas sehingga hampir dapat dijumpai dimana saja. Bakteri tersebar di tanah, air dan sebagai simbiosis dari organisme lain. Ciri

• – ciri bakteri adalah sifatnya yang dapat tumbuh dan bertambah banyak dalam kelompok, berbentuk rantai atau benang, memiliki koloni yang berwarna dan berkilau atau tidak, halus atau kasar, metabolisme aerob atau anaerob dan membutuhkan media tertentu untuk mengkultur disertai dengan menghasilkan asam atau gas, sifat
• – sifat ini berguna untuk mengidentifikasi bakteri (Kurniastuti, 2001).

  Gambar 2. Bakteri Aeromonas salmonicida (sumberrisno blog.files.wordpress.com.2011/01/anatomi_bakteri.jpg.) Berikut adalah klasifikasi Aeromonas salmonicida menurut Holt et. al. (1994) : Superkingdom : Bakteria Filum : Proteobakteria Kelas : Gammaproteobakteria Ordo : Aeromonadales Famili : Aeromonadaceae Genus : Aeromonas Spesies : Aeromonas salmonicida

  Bakteri Aeromonas merupakan jenis bakteri yang sering menginfeksi ikan air tawar. Namun dari beberapa spesies Aeromonas, A. salmonicida yang paling pathogen dan penyebarannya paling luas sehingga cukup meresahkan pembudidaya ikan. A. salmonicida banyak terdapat di daerah budidaya salmonid Australia (Trust et al., 1980; Humphrey dan Ashburner 1993), Kanada (Hammel, 1995) dan di Atlantik (Carson et a.l., 1988).

   A. salmonicida adalah bakteri yang berbentuk batang pendek dengan ukuran

  1,3

• – 2,0 x 0,8 – 1,3 mm, bersifat gram negatif, non – motil, tidak membentuk spora maupun kapsul dan bersifat aerob (Anonim, 2011b). A. salmonicida tidak dapat bertahan lama tanpa inang dan dapat tumbuh optimal pada suhu 22

  C,

• –28 sedangkan pada suhu 30 C pertumbuhannya terhambat. Daerah penyebaran bakteri ini cukup luas hampir di seluruh dunia, meliputi lingkungan air tawar maupun air laut terutama di daerah yang banyak memelihara ikan salmon dan dikenal sebagai penyebab furunkulosis (Pusat Karantina Ikan DKP Jakarta, 2007).

Bakteri A. salmonicida memiliki banyak subspesies yang memiliki perbedaan sifat dan patogenisitas. Holt et al., (1994), menyatakan paling tidak ada 4 subspesies A. salmonicida yang telah diketahui, yaitu subspesies

salmonicida, achromogenes, masoucida dan smithia. Secara taksonomi, A.

  

salmonicida dibagi menjadi dua jenis yaitu typical dan atypical. A. salmonicida

  subspesies salmonicida merupakan strain typical penyebab furunkulosis dan

  

septisemia yang parah sampai menyebabkan kematian pada ikan. Strain ini

memiliki karakteristik yang homogen sifat morfologi dan biokimianya.

  Sedangkan subspesies yang lain merupakan strain atypical yang biasanya dikarakteristikkan dengan adanya pemborokan pada kulit dan ciri eksternal dengan atau tanpa disertai septisemia. Strain ini memiliki banyak varial sifat fisiologi, biokimia dan serologi serta ketahanan tubuh terhadap antibiotik.

  Patogenisitas serangan bakteri A. salmonicida yang menyebabkan

  furunkulosis dapat terbagi menjadi beberapa bentuk :

  1. Bentuk sub - akut atau kronis Biasa menyerang ikan dewasa dengan tanda berkurangnya aktivitas renang, kongesti pada sirip dan pandarahan pada insang. Secara internal dapat ditemui hemoragi pada hati, pembengkakan limpa dan nekrosis pada ginjal. Tingkat kematian akibat bentuk sub - akut ini rendah.

  2. Bentuk akut Biasa terjadi pada ikan muda dan dewasa, ditandai dengan terjadinya septisemia, warna tubuh ikan yang lebih gelap, gerakan yang kurang aktif dan darah, haemoragi pada dinding abdominal, visceral dan jantung serta limpa yang membengkak (McCarthy dan Robert, 1980). Bentuk akut biasanya muncul secara tiba

• –tiba. Gejala eksternal sedikit bahkan tidak ada. Terjadi dalam waktu singkat dan menyebabkan kematian pada ikan setelah 2
• – 3 hari (Afrianto dan Liviawaty, 1999).

  3. Bentuk per akut Terjadi pada fingerling, ditandai dengan warna tubuh yang menggelap. Ikan mati dengan cepat tanpa gejala eksternal. Bentuk per akut ini dapat menimbulkan kerugian yang besar pada hatchery. Selain furunculosis, A. salmonicida dapat menimbulkan penyakit lain misalnya erythrodermatitis pada ikan carp. Bootsma dan Blommert (1978) menyatakan bahwa dari hasil isolasi agen pembawa penyakit carp Erythrodermatitis yang telah dilakukan, diketahui merupakan jenis strain atypical yaitu achromogenic yang merupakan salah satu varian A.

  salmonicida (Supriyadi, 2010).

  Penularan A. salmonicida dapat terjadi melalui kontak fisik antar ikan dalam kolom air, ikan sakit (carier), telur yang terkontaminasi atau melalui bulu burung air (Cipriano dan Bullock, 2001). Menurut Afrianto dan Liviawaty (1999), ikan yang terserang bakteri

  Aeromonas salmonicida menunjukkan gejala klinis sebagai berikut : 1.

  Luka yang khas yaitu nekrosis dalam otot, berupa pembengkakan di bawah kulit (furuncle)

2. Pembengkakan biasanya menjadi luka terbuka berisi nanah, darah dan

  3. Pada serangan akut tanda-tanda yang menyeluruh mungkin tidak tampak 4.

  Mungkin juga terdapat pendarahan dari luka jaringan pada pangkal sirip dada dan sirip perut

  5. Mata menonjol (exophthalmus) 6.

  Warna tubuh menjadi lebih gelap Secara patologi ikan yang terserang bakteri A. salmonicida memiliki ciri seperti : Usus bagian belakang lengket dan bersatu, pembengkakan limpa dan ginjal yang berkembang menjadi nekrosis, dan septicemia sangat jelas. Patogenesis infeksi bakteri mencakup inisiasi dari proses infeksi dan mekanisme yang menyebabkan pemunculan tanda

• – tanda dan simtom penyakit. Ciri khas bakteri pathogen antara lain kemampuan transmisi, perlekatan pada sel inang, invasi sel dan jaringan inang, toksigenisitas, dan kemampuan untuk menghindari sistem imun inang. Banyak infeksi yang disebabkan oleh bakteri yang secara umum merupakan pathogen bersifat tidak tampak. Penyakit terjadi jika bakteri atau reaksi imunologik terhadap keberadaannya menyebabkan cukup kerusakan terhadap seseorang. Bakteri beradaptasi pada lingkungan, termasuk hewan dan manusia, tempat bakteri hidup dan bertempat tinggal. Dengan melakukan itu, bakteri memastikan pertahanan hidupnya dan meningkatkan kemampuan penularan. Untuk menimbulkan penyakit, pathogen harus menembus pertahanan. Sekali masuk ke dalam tubuh, bakteri harus menempel atau melekat pada sel inang, biasanya sel epitel atau sel permukaan jaringan.

Pelekatan ini merupakan salah satu langkah dalam proses infeksi, akan diikuti dengan munculnya mikrokoloni dan langkah

• – langkah berikutnya dalam patogenesis infeksi. Bakteri juga mempunyai molekul permukaan khusus yang berinteraksi dengan sel inang. Banyak bakteri mempunyai pili, organ mirip rambut yang menjulur dari permukaan sel bakteri dan membantu memperantarai pelekatan bakteri pada permukaan sel inang. Setelah bakteri menetap pada tempat infeksi pertama, bakteri berkembang biak dan menyebar langsung melalui jaringan atau lewat system getah bening menuju aliran darah. Infeksi ini (bakteremia) dapat bersifat sementara atau menetap. Bakteremia memungkinkan bakteri untuk menyebar luas dalam tubuh dan mencapai jaringan yang cocok bagi perkembangbiakannya. Setelah berada di dalam sel inang, bakteri dapat bersembunyi dalam suatu vakuola yang terdiri atas selaput sel inang dan bakteri disebarkan dalam sitoplasma. Invasi adalah istilah yang sering dipakai untuk menjelaskan masuknya bakteri ke dalam sel inang, meliputi peran aktif bagi organisme dan peran pasif bagi sel inang. Pada kebanyakan infeksi, bakteri menghasilkan faktor virulen yang mempengaruhi sel inang, yang menyebabkan sel inang menelan (memakan) bakteri. Sel inang sangat berperan aktif dalam proses ini. Sifat biokimia A. salmonicida adalah anaerob fakultatif, oksidase (+), katalase (+) dan sedikit menghasilkan asam pada gula tertentu. Morfologi koloni bakteri A. salmonicida pada medium standar (TSA dan BHIA) adalah : warna putih, bentuk bulat (circulair), permukaan cembung (convex). Pada media

  

Furunculosis Agar (FA) membentuk pigmen, terutama untuk subspecies

salmonicida (Anonim, 2007).

C. Patogenisitas Mikroba

  1. Lethal Dosis (LD )

  50

  50 Uji LD 50 adalah salah satu cara untuk mengetahui patogenitas bakteri

  dimana suatu uji dosis bakteri yang mampu menyebabkan kematian pada inang sebanyak 50 % (Michael dkk, 2003). Metode ini dapat dilakukan melalui infeksi, rendaman maupun suntikan. Metode suntik lebih mudah dilakukan, sementara metode rendaman lebih alami karena memanfaatkan kemampuan bakteri dalam menerobos pertahanan tubuh ikan paling luar, namun metode rendaman ini memerlukan waktu lebih lama (Anonim, 2007).

  Media yang digunakan untuk uji LD 50 adalah TSB (Tripticase Soy Broth). Masa inkubasi dilakukan pada suhu 37 C yang merupakan suhu optimum bagi pertumbuhan bakteri (Afrianto & Liviawaty, 1999).

2. Uji Hemaglutinasi

  Uji hemaglutinasi adalah untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam mengaglutinasi sel darah merah ikan yang telah disuntikkan bakteri A.

  

salmonicida (Anonim, 2011a). Menurut Alexander (1996), hemaglutinasi (HA)

  merupakan salah satu uji yang prinsipnya berdasarkan kemampuan bakteri untuk mengaglutinasi sel darah merah.

  Uji hemaglutinasi dilakukan untuk mengetahui kemampuan bakteri A.

  Apakah bakteri A. salmonicida bersifat patogen atau tidak terhadap ikan patin siam (P. hypophthalmus). Uji ini dilakukan dengan melihat ada tidaknya reaksi aglutinasi sel darah merah ikan patin siam (P. hypophthalmus). Reaksi aglutinasi tersebut merupakan salah satu indikator terjadinya perlekatan adhesi antara patogen dengan inang. Adhesi merupakan tahapan pertama mikroba dalam melakukan infeksi terhadap inangnya. Media yang digunakan Phospat Buffer Saline (PBS), aquades dan suspensi sel darah merah ikan patin. Bakteri yang digunakan bakteri A. salmonicida yang akan diinfeksikan ke ikan patin. Setelah semua dihomogenkan, diamati pada suhu ruang. Jika terjadi hemaglutinasi sel darah merah menunjukkan ada pathogen bakteri A. salmonicida pada ikan patin. Menurut standard OIE (Office

  

International des Epizooties), RBC (Red Blood Cell) yang aglutinan bentuknya

  seperti butiran pasir yang halus, sedangkan yang tidak aglutin RBC bentuknya buram seperti disajikan pada gambar 3. a b

  

Gambar 3. (a) RBC (Red Blood Cell) aglutinan, dan

(b) RBC (Red Blood Cell) tidak aglutinan

3. Postulat Koch

  Robert Koch (1843 - 1910) seorang dokter Jerman, yang banyak jasanya di dalam bidang mikrobiologi, kedokteran dan kemanusiaan. Atas penemuan dan penelitiannya, kaitan dan peranan mikroba sebagai jasad penyebab penyakit dapat terjawab dan diterangkan secara jelas. Sehingga salah satu batasan (postulat) yang telah disusunnya saat itu, masih tetap berlaku sampai sekarang ini, yang umum dikenal dengan nama Postulat Koch, yang terdiri dari 4 atau 5 masalah.

  Berkat penelitian Koch ini maka ihwal dan penyebab penyakit TBC, tifus, difteri, kolera dan gonorhu serta antraks, dapat terungkap dan dipisahkan secara murni.

  Yang paling penting adalah Postulat Koch yang menjadi dasar bagi seorang ahli untuk mencari, menemukan dan mengetahui jasad penyebab suatu penyakit di dalam suatu wabah yang sedang berkecamuk (Suriawiria, 1986). Tahap

• – tahap kerja Postulat Koch sebagai berikut 1)

  Bahwa mikroba yang disangka penyebab harus selalu didapatkan pada semua penderita dan tidak didapatkan pada bukan penderita (misal yang sehat). 2)

  Bahwa mikroba penyebab harus dapat dibiakkan secara murni di dalam media tanpa kehadiran bagian / jaringan jasad yang tadinya dikenai.

  3) Bahwa biakan jasad yang sudah dibiakkan, bila diinokulasikan

  (disuntikkan) kepada hewan percobaan, akan menimbulkan gejala penyakit yang sama seperti pada (1).

  4) Bahwa biakan jasad yang sudah di inokulasikan, dapat diisolasi / dipisahkan kembali kemudian dibiakkan akan mempunyai bentuk yang Setelah ikan patin diinfeksi bakteri A. salmonicida kemudian dilanjutkan uji Postulat Koch, yaitu dengan mengisolasi bakteri dari ginjal ikan patin yang diinfeksi bakteri A. salmonicida ke dalam medium GSP. Sebagaimana petunjuk pabrik, medium GSP merupakan medium spesifik untuk bakteri Aeromonas dan

  

Pseudomonas. Untuk bakteri Aeromonas warna kuning, Pseudomonas warna

merah (Anonim, 2012a).

  Bakteri yang tumbuh di medium GSP selanjutnya dikultur di medium TSB dan diinkubasi selama 24 jam, kemudian bakteri tersebut disuntikkan ke 10 ekor ikan patin (Lampiran 10).

D. Kualitas Air

  Kualitas air merupakan salah satu faktor pendukung keberhasilan kegiatan budidaya ikan patin. Hal tersebut dikarenakan kualitas air yang kurang baik dapat menyebabkan ikan mudah terserang penyakit. Kualitas air yang diukur meliputi