UJI DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK JAHE (Zingiber officinale Roxb.) TERHADAP PERTUMBUHAN Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN-VITRO
1 UJI DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK JAHE
(Zingiber officinale Roxb.) TERHADAP PERTUMBUHAN
Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN-VITRO
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1
Oleh :
LAELA TRI ALFIANA
1001070021
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2014 ii
iii iv PERSEMBAHAN Skripsi ini saya persembahkan untuk.1. Bapak (Samsudin) dan ibu (Satinah) tercinta yang selalu memberikan doa setiap waktu, motivasi, dukungan, dorongan, seluruh pengorbanan dan cinta kasihnya.
2. Arif Budiyanto, Hasan Mustofa, Muhshanudin, dan Yanuar Putra Pamungkas orang-orang tersayang yang selalu memberi semangat dan motivasi. v
MOTTO
Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan, sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka jika kamu telah selesai dari suatu urusan kerjakanlah dengan sungguh-sungguh urusan yang lain dan hanya kepada Tuhan-mulah hendaknya kamu berharap (QS. Al-Insyirah, 5-8).
Man Jadda WaJada, Man Shabara Zhafira. Siapa yang bersungguh-sungguh akan mendapatkan hasil, siapa yang bersabar akan beruntung.
Apabila kita berbuat kebaikan dengan orang lain, maka kita telah berbuat baik terhadap diri sendiri. vi
UJI DAYA ANTIBAKTERI EKSTRAK JAHE (Zingiber
officinale Roxb.) TERHADAP PERTUMBUHAN Aeromonas
hydrophila GPl-04 SECARA IN-VITRO
ABSTRAK
Dalam kegiatan budidaya ikan, penyakit MAS (Motile Aeromonas
Septicemia ) yang disebabkan oleh Aeromonas hydrophila menjadi salah satu wabah yang menakutkan karena mampu menyebabkan kematian yang tinggi.
Pengobatan yang sering dilakukan terhadap ikan yang terserang MAS adalah dengan pemberian antibiotik. Namun, penggunaan antibiotik dapat memberikan banyak dampak negatif. Oleh karena itu, perlu adanya alternatif pengobatan berupa bahan alami yang tidak menimbulkan dampak negatif. Salah satu bahan alami yang memiliki kemampuan antibakteri adalah tanaman jahe. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan daya antibakteri ekstrak jahe dalam menghambat pertumbuhan A. hydrophila GPl-04 dan mengetahui efektivitas ekstrak jahe jika dibandingkan dengan antibiotik kloramfenikol secara in-vitro. Penelitian dilaksanakan selama 3 bulan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan dan Laboratorium Biologi-Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Metode penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan mengaplikasian 4 kali ulangan, yaitu konsentrasi ekstrak jahe 20%, 40%, 60%, 80%, 100%, dan kontrol positif (kloramfenikol). Parameter yang diamati adalah zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak jahe dan antibiotik kloramfenikol. Analisis data dilakukan dengan uji Analysis of Variance (ANOVA) pada tingkat kepercayaan 95%, dilanjutkan dengan uji lanjut Duncan
Multiple Range Test (DMRT) pada tingkat kepercayaan 95%. Hasil penelitian
menunjukkan bahwa ekstrak jahe memiliki kemampuan dalam menghambat pertumbuhan bakteri A.hydrophila GPl-04, tetapi masih jauh dikatakan efektif jika dibandingkan dengan antibiotik kloramfenikol. Ekstrak jahe dengan perlakuan 20% hingga 100% memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri, tetapi sifat penghambatannya masih tergolong resisten bagi pertumbuhan bakteri
GPl-04. Hasil Perbandingan kesetaraan antara ekstrak jahe dan
A.hydrophila antibiotik kloramfenikol adalah 40.080 : 1 (satuan ppm).
Kata kunci : Aeromonas hydrophila Gpl-04, antibiotik, ekstrak jahe, in-vitro, kloramfenikol, Motile Aeromonas Septicemia, zona hambat.
vii UCAPAN TERIMAKASIH Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, berkat rahmat dan karunia-
Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan Judul “Uji Daya
Antibakteri Ekstrak Jahe (Zingiber Officinale Roxb.) Terhadap
Pertumbuhan Aeromonas hydrophila Gpl-04 Secara In-Vitro”. Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih yang setulus- tulusnya kepada Dini Siswani Mulia, S.Pi., M.Si dan Drs. Arief Husin, M.Si, yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulisan ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih yang tak terhingga kepada :
1. Drs. Ahmad, M.Pd selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Semua dosen Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
4. Staf Laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi dan Staf Laboratorium Biologi-Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang banyak sekali membantu dalam penelitian penulis. viii
5. Teman seperjuangan sekaligus partner kerja, Rofika Rita Utami yang banyak membantu dalam menyiapkan berbagai hal dan selalu memberi semangat.
6. Sahabat-sahabat seperjuangan Lily, Febri, Kiki, Mba Dian, Lala, Nengsih, Nurul, Fadli, Dika, Imeh, dan Ramadhani yang telah memberikan bantuan dalam berbagai hal serta dorongan semangat.
7. Teman-teman Seperjuangan Program Studi Pendidikan Biologi 2010.
8. Teman-teman kost Puri sekar hutami khususnya Hesti, Indah, Ira, dan K Ros yang selalu membantu dan memberikan semangat.
9. Semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu yang telah membantu dalam penelitian dan penyelesaian penulisan skripsi ini.
Semoga Allah SWT senantiasa melimpahkan rahmat dan karunia-Nya serta membalas semua kebaikan yang telah diberikan kepada penulis selama ini dan semoga skripsi ini bermanfaat bagi para pembaca.
Purwokerto, 9 Agustus 2014 Penulis ix
DAFTAR ISI
Halaman viii UCAPAN TERIMAKASIH…………………………………………... x DAFTAR ISI………………………………………………………...... xiv DAFTAR TABEL…………………………………………………...... xv DAFTAR GAMBAR…………………………………………………. xvi DAFTAR LAMPIRAN………………………………………………..
BAB I. PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang 1 ………………………………………………..
1.2 Perumusan Ma 4 salah…………………………………………..
1.3
4 Tujuan Penelitian……………………………………………..
1.4
5 Manfaat Penelitian……………………………………………
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tanaman Jahe (Zingiber officinale
6 Roxb.)…………………..
2.1.1 Klasifikasi Tanaman Jahe (Zingiber officinale Roxb.)..
6
2.1.2 Deskripsi Tanaman Jahe (Zingiber officinale Roxb.)
6 …
2.1.3 Varietas Jahe (Zingiber officinale Roxb.)
7 ……………..
2.1.4 Budidaya Tanaman Jahe (Zingiber officinale Roxb.)
8 …
2.2
9 Metabolit Sekunder…………………………………………..
2.3
13 Kandungan Jahe……………………………………………...
2.4 Bakteri Aeromonas hydrophila
15 …….........................................
2.4.1. Klasifikasi
15 Aeromonas hydrophila……………………...
2.4.2 Karakteristik Aeromonas hydrophila..............................
15 x
2.4.3 Patogenitas Aeromonas hydrophila
17 …..…………………
2.5
17 Antibiotik Pembanding………………………………………
2.6
20 Uji Aktivitas Antibakteri…………………………………….
2.7
21 Metode Ekstraksi……………………………………………
2.8
24 Kromatografi Lapis Tipis…………………………………….
BAB III. METODE PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian
26 ………………………………..
3.2 Alat dan Bahan Penelitian
26 ……………………………………
3.2.1 Alat 26 ……………………………………………………..
3.2.1.1 Alat Pembuatan Ekstrak
26 ……………………….
3.2.1.2 Alat Analisis Fitokimia Simplisia dan Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
26 ……………....
3.2.1.3 Alat Uji Daya Antibakteri
26 ……………………..
3.2.2
27 Bahan …………………………………………………
3.2.2.1 Bakteri Aeromonas hydrophila
27 ………………..
3.2.2.2
27 Ekstrak Jahe…………………………………...
3.2.2.3 Media Pertumbu
27 han Bakteri…………………..
3.3
27 Rancangan Penelitian………………………………………...
3.4
28 Prosedur Kerja……………………………………………….
3.4.1
28 Pembuatan Ekstrak Jahe……………………………….
3.4.2 Uji Fitokimia Simplisia Jahe
29 …………………………..
29
3.4.2.1 Uji Terpenoid…………………………………
29 3.4.2.2 Uji Flavonoid………………………………….
3.4.2.3 Uji Tanin……………………………………… xi
30
3.4.2.4 Uji Saponin……………………………………
3.4.2.5
30 Uji Alkaloid…………………………………...
3.4.3 Penapisan Fitokimia Ekstrak Jahe dengan Bantuan
30 KLT …………………………………………………...
3.4.4 Sterilisasi Peralatan dan Media Tumbuh
30 ……………...
3.4.5 Pembuatan Media Tumbuh Bakteri
32 …………………...
3.4.5 32 .1 Pembuatan Media GSP………………………...
32 3.4.5.2 Pembuatan Media TSA………………………..
32 3.4.5.3 Pembuatan Media TSB………………………...
3.4.6 Purifikasi Isolat Bakteri Aeromonas hydrophila
32 ……...
3.4.7 Penentuan Jumlah Sel Bakteri Uji (Aeromonas
33
hydrophila ) Menggunakan Metode Total Plate Count
(TPC) ………………………………………………….
3.4.8 Uji Sensitivitas Antibiotik Pembanding
33 (Kloramfenikol) Terhadap Bakteri Aeromonas
hydrophila ……………………………………………..
3.4.9 Uji Daya Antibakteri Ekstrak Jahe
34 …………………..
35 3.4.10 Menghitung Diameter Zona Hambat………………...
3.4.11 Penentuan Kesetaraan Daya Antibakteri Ekstrak Jahe
35 dengan Antibiotik Pembanding...................................
3.5 Analisis Data 36 ………………………………………………...
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
36
4.1 Pembuatan Ekstrak Jahe ……………………………………..
4.2 Uji Fitokimia Simplisia Jahe
37 ………………………………...
4.3 Uji Fitokimia Ekstrak Jahe dengan Bantuan Teknik KLT
37 …..
4.4 Purifikasi Biakan Bakteri
39 …………………………………… xii
4.5 Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri Aeromonas hydrophila
40 GPl- 04………………………………………………………..
4.6 Uji Sensit 41 ivitas Antibiotik Kloramfenikol…………………..
4.7 Uji Daya Antibakteri Ekstrak Jahe
42 ………………………….
4.8 Kesetaraan Ekstrak Jahe Dengan Antibiotik
45 Pembanding …………………………………………………
BAB V. SIMPULAN DAN SARAN
49
5.1 Simpulan……………………………………………………
53 5.2 Saran………………………………………………………..
53 DAFTAR PUSTAKA ……………………………………………….
54 LAMPIRAN………………………………………………………....
58 xiii
DAFTAR TABEL Nomor Judul Tabel Halaman
4.1
38 Hasil Uji Fitokimia Simplisia Jahe …………….
4.2 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Jahe dengan Teknik
39 KLT …………………………………………… 4.3 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A.
hydrophila GPl-
40 04……………………………… 4.4 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol..
43
4.5 Diameter Zona Hambat Ekstrak Jahe Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-
46 04…………………………………………..
`
xiv
DAFTAR GAMBAR Nomor Judul Gambar Halaman
3.1 Bagan Pembuatan Ekstrak Rimpang Jahe
29 Emprit……………………………………………
4.1
37 Ekstrak Kental Jahe……………………………...
4.2 Hasil Uji Fitokimia Simplisia Jahe A.Terpenoid, B.Flavonoid, C. Tanin, D. Alkaoid, E.Saponin...
39
4.3 Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Jahe dengan Bantuan KLT A. Flavonoid , B. Shogaol , C.
Tanin 40 …………………………………………….
4.4 Hasil Purifikasi Isolat Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-
41 04 …….……………………….
4.5 Hasil Uji Sensitivitas Kloramfenikol Sebagai
45 Antibiotik Pembanding………………………….
4.6 Hasil Uji Daya Anti Bakteri Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-
46 04.…………..........................................................
4.7 Kurva Hubungan Antara Konsentrasi
Kloramfenikol dengan Diameter Zona
50 Hambat…………………………………………. xv