AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU MONYET (Anacardium occidentale L.) Aktivitas Antibakteri dan Bioautografi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet (Anacardium occidentale L.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichi
1
TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus
DAN
Escherichia coli
MULTIRESISTEN
SKRIPSI
Oleh:
NUR SUCI KARTININGSIH
K 100 080 042
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
(2)
1
AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI
EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU MONYET (
Anacardium
occidentale
L.)
TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus
DAN
Escherichia coli
MULTIRESISTEN
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mancapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NUR SUCI KARTININGSIH
K 100 080 042
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
(3)
2 iii
(4)
MOTTO
“
Allah tidak akan membebani seseorang melainkan sesuai dengan kesanggupannya
”(Q. S. Al Baqarah :286)
“
Sesungguhnya bersama kesulitan itu ada kemudahan
”
(Q. S. Al-Insyirah: 5-6)
``
Dunia ini adalah perhiasan. Dan sebaik-baik perhiasan dunia adalah
Wanita sholihah
``(H.R. An Nasa`i)
“
Jika kita menghitung nikmat Allah niscaya kita tidak akan sanggup
menghitungnya
”(Q. S Ibrahim: 37)
(5)
v
PERSEMBAHAN
Alhamdulillahirobil’alamin...
Puji syukur kepada-Mu ya Allah atas semua
karunia dan anugerah yang selalu Kau limpahkan kepadaku.
Dengan ridho-Mu dan segala rasa cinta, sayang dan doa, kupersembahkan
karya sederhana ini untuk:
Ibu dan Bapakku tercinta
Sebagai rasa hormat dan baktiku serta terima kasih atas doa, kasih
sayang, perhatian, pengorbanan, nasehat dan semangat yang tiada
pernah putus kepada anak-anakmu
(Alm.) Ayahku
Sebagai rasa sayang dan terima kasihku yang tak akan pernah aku
lupa sampai kapanpun
Ipras dan Roby
Adik-adikku yang selalu mendukungku dan menemani hari-hariku,
semoga menjadi anak yang sholeh. Semoga karya ini juga dapat
memotivasi kalian
Sahabat-sahabatku
Terima kasih atas semangat, dukungan, suka dan duka selama ini
(6)
vi
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan saya tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 14 Januari 2012 Peneliti
(7)
vii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur tak hentinya penulis panjatkan kepada Allah atas segala rahmat, hidayah, anugerah, dan kekuatan luar biasa yang telah diberikan kepada penulis. Sholawat dan salam semoga senantiasa terlimpah kepada Rosululloh Muhammad SAW, keluarga, sahabat, dan para generasi yang meneruskan perjuangan beliau hingga hari kiamat.
Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
Aktivitas Antibakteri dan Bioautografi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet (Anacardium occidentale L.) terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli Multiresisten sebagai salah satu syarat mencapai Derajat
Sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada:
1. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Ika Trisharyanti D.K, M.Farm., Apt., selaku dosen Pembimbing I yang telah meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan nasihat, pengarahan, dan petunjuk serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.
3. Bapak Peni Indrayudha, M.Biotech. Apt., selaku dosen Pembimbing II yang dengan penuh kesabaran memberikan bimbingan, nasehat, pengarahan, dan petunjuk, serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.
4. Ibu Ratna Yuliani, M. Biotech.St dan Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt. selaku penguji yang telah mengantarkan penulis meraih gelar sarjana farmasi. 5. Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt. dan Bapak Azis Saifudin, S.F., Apt. selaku dosen pembimbing akademik yang telah memberikan nasehat dan pengarahan kepada penulis.
(8)
viii
6. Bapak dan Ibu dosen Fakultas Farmasi UMS yang telah memberikan banyak ilmu yang semoga dapat bermanfaat bagi penulis dan menjadi amal jariyah yang akan dibalas oleh-Nya.
7. Mbak Noor, Pak Zainal, Pak Awang, dan Pak Ghofar selaku laboran yang senantiasa bersabar menemani penulis menyelesaikan penelitian di laboratorium.
8. Mbah Kakung dan Mbah Putri yang telah memberikan nasehat, motivasi, dan semangat pada penulis.
9. Mas Soma Bagus Pradana yang telah memberikan semangat dan motivasi dalam penyelesaian skripsi ini.
10. Sahabat tersayang Febtiana Nuridati yang telah menemani, membantu, dan memberikan semangat pada penulis dalam penyelesaian skripsi ini.
11. Kakak tingkat, Mbak Thisa yang telah membantu, memberikan semangat, dan pengarahan dalam penyelesaian skripsi.
12. Teman-teman seperjuangan Ratih dan Fifi yang saling memberikan semangat, bantuan, keributan, dan canda tawa selama menyelesaikan skripsi.
13. Sahabat tercinta Widya, Wenny, dan Mella yang telah mewarnai hidup penulis dengan rasa persahabatan yang sebenarnya.
14. Teman-teman kelas A dan B 2008 terima kasih untuk tiga tahun yang paling berharga di Fakultas Farmasi UMS.
Penulis menyadari bahwa naskah skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Semoga penelitian ini bermanfaat bagi pengembangan ilmu dan teknologi khususnya dalam bidang farmasi dan dunia kesehatan pada umumnya.
Surakarta, 14 Januari 2012
(9)
ix
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ... i
HALAMAN PENGESAHAN ... iii
MOTTO ... iv
PERSEMBAHAN ... v
DEKLARASI ... vi
KATA PENGANTAR ... vii
DAFTAR ISI ... ix
DAFTAR TABEL ... xi
DAFTAR GAMBAR ... xii
DAFTAR LAMPIRAN ... xiii
DAFTAR SINGKATAN ... xiv
INTISARI ... xv
BAB I. PENDAHULUAN ... 1
A. Latar Belakang Masalah ... 1
B. Rumusan Masalah ... 2
C. Tujuan Penelitian ... 3
D. Tinjauan Pustaka ... 3
1. Tanaman jambu monyet ... 3
2. Staphylococcus aureus ... 4
3. Escherichia coli ... 5
4. Bioautografi... 5
E. Keterangan Empiris ... 6
BAB II. METODOLOGI PENELITIAN ... 7
A. Ketegori Penelitian dan Variabel Penelitian ... 7
B. Bahan dan Alat ... 7
C. Jalannya Penelitian ... 8
1. Determinasi tanaman ... 8
(10)
x
3. Optimasi penyarian ... 8
4. Ekstraksi daun jambu monyet ... 8
5. Sterilisasi alat bahan ... 9
6. Pembuatan media ... 9
7. Identifikasi bakteri ... 9
8. Uji sensitivitas bakteri terhadap antibiotik ... 10
9. Pembuatan suspensi bakteri ... 10
10.Pembuatan stok ekstrak ... 10
11.Pembuatan seri konsentrasi ... 10
12.Penyiapan kontrol... 11
13.Uji aktivitas antibakteri dengan metode dilusi padat ... 12
14.Uji kromatografi lapis tipis ... 12
15.Bioautografi... 13
D. Analisis Data ... 13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 14
A. Determinasi Tanaman ... 14
B. Optimasi Penyarian ... 14
C. Ekstraksi Daun Jambu Monyet ... 14
D. Identifikasi Bakteri ... 15
E. Uji Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik ... 18
F. Uji Aktivitas Antibakteri ... 19
G. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ... 22
H. Uji Bioautografi ... 24
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 27
A. Kesimpulan ... 27
B. Saran ... 27
DAFTAR PUSTAKA ... 28
(11)
xi
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1. Hasil Optimasi Ekstrak Etanol 70% dan 96% Daun Jambu
Monyet ... 14 Tabel 2. Hasil Uji Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik ... 19 Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri S. aureus Multiresisten ... 20 Tabel 4. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri E.coli Multiresisten ... 21 Tabel 5. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
Menggunakan Fase Gerak Butanol:Asam Asetat
Glasial:Air (4:1:5) ... 23 Tabel 5. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
(12)
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu
Monyet pada S. aureus Multiresisten ... 11 Gambar 2. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu
Monyet pada E. coli Multiresisten ... 12 Gambar 3. Hasil Pengecatan Gram Bakteri E. coli dan S. aureus
Multiresisten ... 15 Gambar 4. Hasil Uji Identifikasi S. aureus Menggunakan Media MSA ... 16 Gambar 5. Hasil Uji Identifikasi Bakteri E. coli Menggunakan Media
MacConkey ... 16 Gambar 6. Hasil Identifikasi Bakteri E. coli Menggunakan Uji Deret
Biokimia, Media KIA, LIA, dan MIO ... 17 Gambar 7. Hasil Uji Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik ... 19 Gambar 8. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri S. aureus Multiresisten ... 20 Gambar 9. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri E. coli Multiresisten ... 21 Gambar 10. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
Menggunakan Fase Gerak Butanol:Asam Asetat
Glasial:Air (4:1:5) ... 23 Gambar 11. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
Menggunakan Fase Gerak Heksan:Etil Asetat (3:2) ... 24 Gambar 12. Hasil Uji Bioautografi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
(13)
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi ... 32
Lampiran 2. Surat Keterangan Bakteri S. aureus Multiresisten ... 34
Lampiran 3. Surat Keterangan Bakteri E. coli Multiresisten... 35
Lampiran 4. Foto Tanaman Jambu Monyet ... 36
Lampiran 5. Gambar Optimasi Penyari Ekstrak Etanol 70% dan 96% Daun Jambu Monyet Metode Sumuran terhadap Bakteri S. aureus dan E. coli Multiresisten... 37
Lampiran 6. Perhitungan Rendemen ... 38
Lampiran 7. Perhitungan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet terhadap S. aureus Multiresisten ... 39
Lampiran 8. Perhitungan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet terhadap E.coli Multiresisten ... 40
(14)
xiv
DAFTAR SINGKATAN
BHI : Brain Heart Infusion
CFU : Colony Forming Unit
CMC-Na : Carboxy Methyl Celulose Natrium
E. coli : Escherichia coli
hRf : hundred Retardation factor
KBM : Kadar Bunuh Minimum
KHM : Kadar Hambat Minimum
KIA : Kligler Iron Agar
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
LAF : Laminar Air Flow
LIA : Lysine Iron Agar
MBC : Minimum Bactericidal Concentration
MH : Mueller Hinton
MIC : Minimum Inhibitory Concentration
MIO : Motility Indol Ornithine
(15)
xv
INTISARI
Daun jambu monyet telah terbukti memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun jambu monyet terhadap
Staphylococcus aureus (Gram positif) dan Escherichia coli (Gram negatif)
multiresisten serta untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang berkhasiat sebagai antibakteri pada ekstrak etanol daun jambu monyet.
Daun jambu monyet yang diperoleh dari daerah Boyolali diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan penyari etanol 96%. Ekstrak yang diperoleh kemudian diuji aktivitas antibakterinya menggunakan metode dilusi padat untuk memperoleh Kadar Hambat Minimum (KHM). Seri konsentrasi yang digunakan untuk Staphylococcus aureus adalah 0,1%; 0,15%; 0,2%; 0,25%; dan 0,3%, sedangkan untuk Escherichia coli adalah 0,025%; 0,05%, 0,1%; 0,2%; 0,3%; dan 0,4%. Analisis kandungan golongan senyawa ekstrak etanol daun jambu monyet dilakukan dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT) menggunakan fase gerak butanol:asam asetat glasial:air (4:1:5) dan heksan:etil asetat (3:2), fase diam silika gel GF254nm, serta metode bioautografi untuk mengetahui senyawa aktif yang
membentuk zona jernih.
Hasil uji aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli multiresisten dengan nilai KHM berturut turut sebesar 0,2% dan
0,3%, serta hasil KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun jambu monyet mengandung golongan senyawa fenol dan minyak atsiri. Hasil uji bioautografi menunjukkan senyawa yang berkhasiat sebagai antibakteri adalah fenol dan minyak atsiri yang ditunjukkan pada hRf 7, 22, dan 73.
Kata kunci: Anacardium occidentale L., Staphylococcus aureus multiresisten,
(1)
x
3. Optimasi penyarian ... 8
4. Ekstraksi daun jambu monyet ... 8
5. Sterilisasi alat bahan ... 9
6. Pembuatan media ... 9
7. Identifikasi bakteri ... 9
8. Uji sensitivitas bakteri terhadap antibiotik ... 10
9. Pembuatan suspensi bakteri ... 10
10.Pembuatan stok ekstrak ... 10
11.Pembuatan seri konsentrasi ... 10
12.Penyiapan kontrol... 11
13.Uji aktivitas antibakteri dengan metode dilusi padat ... 12
14.Uji kromatografi lapis tipis ... 12
15.Bioautografi... 13
D. Analisis Data ... 13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 14
A. Determinasi Tanaman ... 14
B. Optimasi Penyarian ... 14
C. Ekstraksi Daun Jambu Monyet ... 14
D. Identifikasi Bakteri ... 15
E. Uji Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik ... 18
F. Uji Aktivitas Antibakteri ... 19
G. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ... 22
H. Uji Bioautografi ... 24
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ... 27
A. Kesimpulan ... 27
B. Saran ... 27
DAFTAR PUSTAKA ... 28
(2)
xi
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel 1. Hasil Optimasi Ekstrak Etanol 70% dan 96% Daun Jambu
Monyet ... 14 Tabel 2. Hasil Uji Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik ... 19 Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri S. aureus Multiresisten ... 20 Tabel 4. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri E.coli Multiresisten ... 21 Tabel 5. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
Menggunakan Fase Gerak Butanol:Asam Asetat
Glasial:Air (4:1:5) ... 23 Tabel 5. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
(3)
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu
Monyet pada S. aureus Multiresisten ... 11 Gambar 2. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu
Monyet pada E. coli Multiresisten ... 12 Gambar 3. Hasil Pengecatan Gram Bakteri E. coli dan S. aureus
Multiresisten ... 15 Gambar 4. Hasil Uji Identifikasi S. aureus Menggunakan Media MSA ... 16 Gambar 5. Hasil Uji Identifikasi Bakteri E. coli Menggunakan Media
MacConkey ... 16 Gambar 6. Hasil Identifikasi Bakteri E. coli Menggunakan Uji Deret
Biokimia, Media KIA, LIA, dan MIO ... 17 Gambar 7. Hasil Uji Sensitivitas Bakteri terhadap Antibiotik ... 19 Gambar 8. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri S. aureus Multiresisten ... 20 Gambar 9. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun
Jambu Monyet terhadap Bakteri E. coli Multiresisten ... 21 Gambar 10. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
Menggunakan Fase Gerak Butanol:Asam Asetat
Glasial:Air (4:1:5) ... 23 Gambar 11. Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
Menggunakan Fase Gerak Heksan:Etil Asetat (3:2) ... 24 Gambar 12. Hasil Uji Bioautografi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet
(4)
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi ... 32
Lampiran 2. Surat Keterangan Bakteri S. aureus Multiresisten ... 34
Lampiran 3. Surat Keterangan Bakteri E. coli Multiresisten... 35
Lampiran 4. Foto Tanaman Jambu Monyet ... 36
Lampiran 5. Gambar Optimasi Penyari Ekstrak Etanol 70% dan 96% Daun Jambu Monyet Metode Sumuran terhadap Bakteri S. aureus dan E. coli Multiresisten... 37
Lampiran 6. Perhitungan Rendemen ... 38
Lampiran 7. Perhitungan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet terhadap S. aureus Multiresisten ... 39
Lampiran 8. Perhitungan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Jambu Monyet terhadap E.coli Multiresisten ... 40
(5)
xiv
DAFTAR SINGKATAN
BHI : Brain Heart Infusion
CFU : Colony Forming Unit
CMC-Na : Carboxy Methyl Celulose Natrium E. coli : Escherichia coli
hRf : hundred Retardation factor
KBM : Kadar Bunuh Minimum
KHM : Kadar Hambat Minimum
KIA : Kligler Iron Agar
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
LAF : Laminar Air Flow
LIA : Lysine Iron Agar
MBC : Minimum Bactericidal Concentration
MH : Mueller Hinton
MIC : Minimum Inhibitory Concentration
MIO : Motility Indol Ornithine
(6)
xv
INTISARI
Daun jambu monyet telah terbukti memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun jambu monyet terhadap Staphylococcus aureus (Gram positif) dan Escherichia coli (Gram negatif) multiresisten serta untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang berkhasiat sebagai antibakteri pada ekstrak etanol daun jambu monyet.
Daun jambu monyet yang diperoleh dari daerah Boyolali diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan penyari etanol 96%. Ekstrak yang diperoleh kemudian diuji aktivitas antibakterinya menggunakan metode dilusi padat untuk memperoleh Kadar Hambat Minimum (KHM). Seri konsentrasi yang digunakan untuk Staphylococcus aureus adalah 0,1%; 0,15%; 0,2%; 0,25%; dan 0,3%, sedangkan untuk Escherichia coli adalah 0,025%; 0,05%, 0,1%; 0,2%; 0,3%; dan 0,4%. Analisis kandungan golongan senyawa ekstrak etanol daun jambu monyet dilakukan dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT) menggunakan fase gerak butanol:asam asetat glasial:air (4:1:5) dan heksan:etil asetat (3:2), fase diam silika gel GF254nm, serta metode bioautografi untuk mengetahui senyawa aktif yang
membentuk zona jernih.
Hasil uji aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dan Escherichia coli multiresisten dengan nilai KHM berturut turut sebesar 0,2% dan 0,3%, serta hasil KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun jambu monyet mengandung golongan senyawa fenol dan minyak atsiri. Hasil uji bioautografi menunjukkan senyawa yang berkhasiat sebagai antibakteri adalah fenol dan minyak atsiri yang ditunjukkan pada hRf 7, 22, dan 73.
Kata kunci: Anacardium occidentale L., Staphylococcus aureus multiresisten, Escherichia coli multiresisten, antibakteri, bioautografi