UJI AKTIVITAS SITOPROTEKTIF EKSTRAK APEL LOKAL DAN APEL IMPOR (Malus domestica Borkh) TERHADAP INDUKSI H2O2 PADA SEL FIBROBLAS NIH3T3 - repository perpustakaan

  

UJI AKTIVITAS SITOPROTEKTIF EKSTRAK APEL LOKAL DAN

APEL IMPOR ( Malus domestica Borkh) TERHADAP INDUKSI H

  2 O

  2 PADA SEL FIBROBLAS NIH3T3

SKRIPSI

  Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi Diajukan Oleh :

  

DARSINI

1308010008

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

  

2017

  PERSEMBAHAN Dengan nama Allah Yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang. Skripsi ini akan dipersembahkan untuk:

  1. Bapak dan Mamah tercinta yang selama ini telah memberikan kasih sayang yang

begitu besar dan senantiasa memberikan dukungan dari segala aspek serta doa yang

selalu dipanjatkan untuk mengiringi perjalanan hidup anak-anaknya. Termikasih atas

semuanya, tak cukup untuk membalah cinta dan kasih sayang yang telah kalian

berikan selama ini.

  2. Kakakku tersayang Darsiti yang selalu mendukung dan memberikan doa kepada adiknya. Terimakasih telah mendukung dan memberi semangat.

  3. Adikku tersayang Akhmad syaefullah yang selalu memberikan semangat dan doa kepada kakaknya.

  4. Keluarga besar Alm.Bapak Warsip dan keluarga besar Alm.Bapak Tohari yang selalu memberikan dukungan, nasihat dan doa kepada saya selama ini.

  5. Dosen pembimbingku (Ibu Nunuk dan Pak Anjar) yang selama ini dengan sabar membimbingku, terima kasih banyak.

  6. Dosen, seluruh laboran dan Staf Karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  7. Sahabatku yang selalu setia disampingku dan memberikan dukungan serta doanya

Sulaeman, untuk sahabat seperjuangan SMKF Rita Permatasari, Van Fatkhan,

Prayogo Pangestu dan Desy Amalia G sekaligus menjadi partner penelitain yang

saling mendukung dan berjuang bersama. Kakak-kakak yang telah membawa kami ke

UMP Ari Fariz Mustofa dan Diaz. Sahabat saya Mitha R, Rumiyana Hartiningsih,

Noni Lestiwowati, Fitria naelinnajah, telah memberikan dukungan dan semangat.

Teman seperjuangan dalam penelitian (TIM KULTUR) Mba Dyfa Anggita, Endah

Nur I, Euis Aisyah, Fitria Yosi M, Nurfina Mafazah, Atika Dewi W, Siti Mulyanah,

Senja Nur S, Binaripan, Ridwan Setiaji terimakasih sudah saling membantu. Farmasi

  angkatan 2013 terimakasih sudah menemani dan berjuang bersama, khususnya untuk anak-anak farmasi kelas B kalian telah menjadi teman, sahabat, serta keluarga. serta semua sahabatku yang tak dapat disebutkan satu per satu disini.

  8. Almamaterku Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  MOTTO

  All imposible is possible for those who believe Don’t lose the faith, keep praying, keep trying

  “jika kamu tidak dapat menahan lelahnya beajar maka kamu harus sanggup menahan perihnya kebodohan” (Imam Syafi’i)

KATA PENGANTAR

  Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian skripssi dengan judul

  “AKTIVITAS SITOPROTEKTIF EKSTRAK APEL LOKAL DAN APEL IMPOR (Malus domestica, Borkh) TERHADAP INDUKSI H

  2 O

  2 PADA

  SEL FIBROBLAST NIH3T3”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh gelar sarjana S1 di Fakultas Farmasi Universitas Muhammdiyah Purwokerto.

  Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada:

  1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi.

  3. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt. Selaku dosen pembimbing I yang telah memberikan arahan, masukan, dan bimbingan dalam penyusunan skripsi ini.

  4. Anjar Mahardian Kusuma, M.Sc., Apt. Selaku dosen pembimbing II dan pembimbing akademik yang telah memberikan arahan, bimbingan, dan masukan dalam penyusunan skripsi ini dan dalam akademik.

  5. Seluruh dosen, laboran dan staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  6. Kedua orang tua tercinta yang selama ini telah memberikan usaha berupa doa dan dukungan dari segala aspek.

  7. Kakak dan adik tersayang yang selalu mendukung dan memberikan doa.

  8. Sahabat-sahabat yang tak dapat disebutkan satu per satu disini, terimakasih atas bantuan, doa, dan dukungan kalian selama ini.

  9. Semua pihak yang telah membantu.

  Penulis menyadari dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kata sempurna, untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi kebaikan penelitian di masa mendatang.

  Semoga Allah SWT senantiasa membalas amal kebaikan yang telah Bapak/Ibu/Saudara berikan, dan harapan penulis semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi penulis sendiri dan bagi semua pihak yang membutuhkan.

  Purwokerto, Juni 2017 Penulis,

  Darsini Uji Aktivitas Sitoprotektif Ekstrak Apel Lokal Dan Apel Impor (Malus domestica, Borkh.) Terhadap Induksi H

  2 O

  2 Pada Sel Fibroblas NIH3T3

  1

  

2

  3 Darsini , Nunuk Aries Nurulita , Anjar Mahardian Kusuma .

  ABSTRAK

  Radikal bebas adalah atom, gugus atom atau molekul yang memiliki satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan sehingga menyebabkan radikal bebas bersifat tidak stabil dan sangat reaktif. Radikal bebas dalam tubuh dapat menyebabkan penyakit degeneratif seperti kanker, kerusakan hati dan penuaan. Antioksidan berfungsi untuk menetralisis radikal bebas dan mencegah terjadinya kerusakan yang timbul akibat radikal bebas. Penelitian ini dilakukan uji aktivitas sitoprotektif pada pemberian ekstrak apel lokal dan apel import dari paparan H O

  2

  2

  terhadap sel fibroblast NIH3T3. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan bahwa dengan pemberian Ekstrak Apel Lokal (EAL) dan Ekstrak Apel Impor (EAI) dapat mempengaruhi % viabilitas sel fibroblast NIH3T3, menentukan bahwa dengan pemberian EAL dan EAI dapat melindungi sel fibroblast NIH3T3 dari paparan H O pada uji induksi H O dan recovery induksi H O . Uji viabilitas sel

  2

  2

  2

  2

  2

  2

  menggunakan metode 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolium bromide (MTT). Konsentrasi larutan EAL dan EAI yaitu sebesar 50, 125, 250, 500, dan

  2 O 2 melihat pengaruh induksi H

  2 O

  2

  1000 μg/mL. Uji induksi dan recovery H terhadap pemberian EAL, EAI, dan vitamin C. Hasil uji viabilitas sel EAL dan EAI memberikan nilai IC 528 µg/mL dan 463 µg/mL. Perbandingan nilai IC

  50

  50 EAL dan EAI menunjukan perbedaan signifikan (sig=0,006). Hasil induksi EAL

  dan EAI konsentrasi 50 ,125 , 250 ,500 dan 1000 µg/mL dengan kontrol negatif H

  2 O 2 terdapat perbedaan yang signifikan (sig = 0,05). Hasil Recovery induksi

  EAL dan EAI konsentrasi 50 ,125 , 250 ,500 dan 1000 µg/mL dengan kontrol negatif H O terdapat perbedaan yang signifikan (sig = 0,000). EAL dan EAI

  2

  2

  memiliki kemampuan sitoprotektif dalam mempertahankan sel dari induksi H O

  2 2.

  Kata Kunci : Radikal bebas, antioksidan, apel lokal dan apel impor, H

  2 O 2, sel

  fibroblast NIH3T3

  Cytoprotective Activity Test of Local Apples and Imported Apple Apples (Malus

  domestica , Borkh.) Against H O Induction On Fibroblast Cells NIH3T3

  2

  2

  1

  

2

  3 Darsini , Nunuk Aries Nurulita , Anjar Mahardian Kusuma .

  ABSTRACT Free radicals are atoms, atomic groups or molecules that have one or more unpaired electrons that cause free radicals are unstable and highly reactive. Free radicals in the body can cause degenerative diseases such as cancer, liver damage and aging. Antioxidants serve to neutralize free radicals and prevent the occurrence of damage caused by free radicals. This study tested cytoprotective activity on local apple extract and imported apples from H

  2 O 2 exposure to NIH3T3 fibroblast cells. This study aims to determine that by administering EAL (Local Apples Extract) and EAI (Imported Apple Extract) can affect % viability of NIH3T3 fibroblast cells, determining that by administering EAL and EAI can protect fibroblast cells NIH3T3 from H2O2 exposure on H

  2 O 2 induction test and induction H2O2 recovery. Cell viability test using 3- (4,5-dimethyltiazole-2-yl) - 2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) method. Concentrations of EAL solution and EAI were 5 0, 125, 250, 500, and 1000 μg/mL. The induction and recovery test of H

  2 O 2 observes the effect of H

2 O 2 induction on EAL, EAI, and Vitamin C.

  The results of EAL cell viability test EAL and EAI give IC 50 528 μg/mL and 463 μg/mL. The comparison of IC

50 EAL and EAI values shows significant differences

  (sig = 0,006). The result of induction of EAL and EAI concentration 50, 125, 250,

  2 O 2 there was significant difference 500 and 1000 μg/mL with negative control H (sig = 0,05). The results of EAL Induction Recovery and EAI concentrations of 50,

  2 O 2 were significant 125, 250, 500 and 1000 μg/mL with negative control of H differences (sig = 0,000). EAL and EAI have a cytoprotective ability in maintaining cells from H

2 O 2 induction.

  Keywords: Free radicals, antioxidants, local apples and imported apples, H2O2, fibroblast cells NIH3T3

RIWAYAT HIDUP

  Nama : Darsini TTL : Cirebon, 25 November 1994 Jenis Kelamin : Perempuan Agama : Islam Pendidikan : Fakultas Farmasi UMP (2013-2017)

  SMK Farmasi Muhammadiyah 2 Kedawung (2010-2013) SMPN 7 Kota Cirebon (2007-2010) SDN 1 Pamengkang (2002-2007)

  Kegiatan Ilmiah Mahasiswa :

  a. PKM-P (Program Kreativitas Mahasiswa

• – Penelitian) = Cegah Penuaan Dini dengan EKSALA, Ekstrak Apel Malang Melalui Penghambatan Enzim Beta- galaktosidase Tahnun 2017 (Anggota)

  Keanggotaan Organisasi : Anggota Bidang Keilmuan Ikatan Mahasiswa Muhammadiyah (IMM) Komisariat Farmasi periode 2013 - 2014.

  Pengalaman :

  a. Asisten Praktikum Ilmu Resep Dasar di Laboratorium Teknologi Farmasi (2014)

  b. Asisten Praktikum Biokimia di Laboratorium Kimia Organik (2014)

  c. Asisten Praktikum Farmasi Fisikia di Biologi Farmasi (2014)

  d. Asisten Praktikum FTS Solid di Laboratorium Teknologi Farmasi (2015)

  e. Asisten Praktikum Ilmu Resep Dasar di Laboratorium Teknologi Farmasi (2016)

  f. Asisten Praktikum Biokimia di Laboratorium Kimia Organik (2017)

  g. Asisten Praktikum FTS Solid di Laboratorium Teknologi Farmasi (2017)

  h. Asisten Praktikum FTS Semi-Solid Liquid di Laboratorium Teknologi Farmasi (2017) i. Asisten Praktikum Biofarmasetika di Laboratorium Farmakologi-Toksikologi

  Farmasi (2017)

  DAFTAR ISI Halaman

  5 1. Radikal Bebas ..................................................................

  9 C.Kerangka Konsep .................................................................

  9 5.Apel ..................................................................................

  2 O 2 .................................................................................

  4. H

  8

  6 3. Sel Fibroblas ....................................................................

  5 2. Antioksidan .....................................................................

  4 B. Landasan Teori ....................................................................

  HALAMAN JUDUL ............................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................. ii HALAMAN PERNYATAAN .............................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN ........................................................... iv MOTTO ................................................................................................ v KATA PENGANTAR .......................................................................... vi ABSTRAK ........................................................................................... viii

  4 A. Penelitian Terdahulu ...........................................................

  3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................

  3 D. Manfaat Penelitian ...............................................................

  2 C. Tujuan Penelitian .................................................................

  1 B. Rumusan Masalah ...............................................................

  1 A. Latar Belakang ....................................................................

  RIWAYAT HIDUP .............................................................................. x DAFTAR ISI ........................................................................................ xii DAFTAR TABEL ................................................................................ xiv DAFTAR GAMBAR ............................................................................ xv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................ xvi DAFTAR SINGKATAN ...................................................................... xvii BAB I PENDAHULUAN ....................................................................

  ABSTRACT ........................................................................................... ix

  13

  G. Hipotesis ..............................................................................

  13 BAB III METODE PENELITIAN .......................................................

  12 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ........................................

  14 B. Variabel Penelitian ............................................................

  14 C. Waktu dan Tempat Penelitian ...........................................

  14 D. Alat dan Bahan Penelitian .................................................

  15 1. Alat ................................................................................

  15 2. Bahan ............................................................................

  15 E. Cara Penelitian ..................................................................

  15 1. Asal bahan ....................................................................

  15 2. Determinasi Tanaman ...................................................

  15 3. Ekstraksi Apel...............................................................

  16 4. Skrining Golongan Metabolit Sekunder .......................

  16 5. Panen Sel Line Fibroblast NIH3T3 ..............................

  18 6. Uji Viabilitas Sel dengan Metode MTT .......................

  18 7. Induksi Stres dengan H O ...........................................

  20

  2

  

2

  8. Recovery dengan H

  2 O 2 .................................................

  21 F. Analisis Data......................................................................

  22 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................

  23 A. Hasil dan Pembahasan ......................................................

  23 1. Determinasi Buah Apel ...............................................

  23 2. Penyiapan Sampel .......................................................

  23 3. Ekstraksi Buah Apel ....................................................

  24 4. Skrining Golongan Metabolit Sekunder .....................

  25 5. Uji Viabilitas Sel dengan Metode MTT .....................

  28 6. Uji Efek Induksi H O dan Recovery .........................

  31

  2

  2 B. Keterbatasan Penelitian ................................................

  40 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................

  41 A. Kesimpulan .......................................................................

  41 B. Saran ..................................................................................

  41 DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................

  42 LAMPIRAN .........................................................................................

  46

  DAFTAR TABEL

   Halaman Tabel 1. Klasifikasi Ekstrak Apel ...................................................................... 24 Tabel 2. Hasil Randemen Ekstrak Apel Lokal dan Apel Import ....................... 25 Tabel 3. Hasil Uji Identifikasi Skrining Metabolit Sekunde Ekstrak Apel

  Lokal dan Apel Import ......................................................................... 26 Tabel 4. Analisis Probit ...................................................................................... 30

  DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Apel (Malus domestica, Brokh) .....................................................

  9 Gambar 2. Kerangka Konsep .......................................................................... 13 Gambar 3. Hail Proses Ekatraksi Apel Lokal dan Apel Import, (A) Buah

  Apel Segar, (B) Serbuk Simplisia, dan (C) Ekstrak Kental Apel Lokal dan Apel Import (Malus domestica, Brokh) ....................... 25

  Gambar 4. Efek perlakuan EAL dan EAI. Terdapat perubahan morfologi sel yang diberi perlakuan dibandingkan dengan kontrol sel dibawah pengamatan mikroskop interverted dengan perbesaran 10x. ....................................................................................................... 29

  Gambar 5. Grafik Konsentrasi EAL Dan EAI vs %viabilitas sel. .................. 29 Gambar 6. Efek Perlakuan EAL dan EAI Setelah Paparan H

  2 O 2 . Ekstrak

  Dapat Melindungi Morfologi Sel Yang Diberi Paparan H

  2 O 2 .

  Dilakukan Dibawah Pengamatan Mikroskop Inverted Perbesaran 20x. .............................................................

  33 ……. Gambar 7 Efek Induksi Pada EAL Dan EAI Dengan Diberikan Paparan

  H2O2 Terhadap Sel Fibroblas NIH3T3. Sel Diberi Pengobatan Dengan 50, 125,250, dan 1000 µg/mL Ekstrak Apel dan Asam Askorbat 352 µM Selama 1 Jam Sebelum Stres Oksidatif H

  2 O

  2

  100 µM Dengan Paparan yang Berulang Selama 3 Hari. Hasil Uji Statistik Menunjukan Perbedaan yang Signifikan (sig = 0.02) . ............................................................................................. 33