Antioksidan dan Tabir Surya Nauclea subd
1
1
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN TABIR SURYA
FRAKSI ETIL ASETAT KULIT BATANG BANGKAL
(Nauclea subdita) SECARA IN VITRO
Artikel Ilmiah
untuk memenuhi persyaratan
dalam menyelesaikan program sarjana Strata-1 Farmasi
Oleh:
Zakiah
NIM J1E111017
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS LAMBUNG MANGKURAT
BANJARBARU
AGUSTUS 2015
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN TABIR SURYA
FRAKSI ETIL ASETAT KULIT BATANG BANGKAL (Nauclea subdita)
SECARA IN VITRO
Zakiah1, Dina Rahmawanty2, Fadlilaturrahmah3
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat
Jl. A. Yani Km 36 Banjarbaru, Kalimantan Selatan
e-mail: [email protected]
Abstract
Bangkal (Nauclea subdita) has been used as traditional cosmetics by people in South
Kalimantan. Ethanolic extract from stem bark of bangkal has been reported as an
antioxidant and sunscreen. The aim of this study was to evaluated antioxidant activity
and potential sunscreen from ethyl acetate fraction of stem bark of bangkal.
Determination of antioxidant activity had been evaluated using DPPH (2,2-diphenyl1-picrylhidrazyl) method with UV-Vis spectrophotometer at wavelength 522 nm and
compared with ascorbic acid as positive control. Determination of potential
sunscreen was done by defining values of SPF (Sun Protection Factor) using a
method developed by Mansur using UV-Vis spectrophotometer at wavelength range
290-320 nm. The result showed that ethyl acetate fraction of stem bark of bangkal
had antioxidant activity with IC50 value of 236,9137 ppm that was included in the
moderate level. Ethyl acetate fraction of stem bark of bangkal as potential sunscreen
at consentration 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm, and 350
ppm had SPF value 4 and 5 (moderate protection); 10 and 11 (maximal protection);
18, 21 dan 24 (ultra protection). These results indicate that ethyl acetate fraction of
stem bark of bangkal has potential as a natural antioxidant and sunscreen.
Keywords: Nauclea subdita, sunscreen, antioxidant, ethyl acetate
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
Abstrak
Bangkal (Nauclea subdita) secara empiris digunakan sebagai kosmetika tradisional
oleh masyarakat Kalimantan Selatan. Ekstrak etanol kulit batang bangkal telah diuji
aktivitasnya sebagai antioksidan dan tabir surya. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antioksidan dan tabir surya dari fraksi etil asetat kulit batang
bangkal. Penentuan aktivitas antioksidan diuji menggunakan metode DPPH (2,2difenil-1-pikrilhidrazil) dengan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang
522 nm dan dibandingkan dengan asam askorbat sebagai kontrol positif. Penentuan
potensi tabir surya dilakukan dengan menentukan nilai SPF (Sun Protection Factor)
menggunakan metode yang dikembangkan oleh Mansur dengan Spektrofotometer
UV-Vis pada panjang gelombang 290-320 nm. Hasil penelitian menunjukkan fraksi
etil asetat kulit batang bangkal memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50
sebesar 236,9137 ppm yang termasuk dalam tingkat kemampuan aktivitas antioksidan
sedang. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal berpotensi sebagai tabir surya dengan
konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan 350 ppm
dengan nilai SPF berturut-turut sebesar 4 dan 5 (proteksi sedang); 10 dan 11 (proteksi
maksimal); 18, 21 dan 24 (proteksi ultra). Dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat
kulit batang bangkal berpotensi sebagai antioksidan dan tabir surya alami.
Kata kunci : Nauclea subdita, tabir surya, antioksidan, etil asetat
PENDAHULUAN
Penggunaan tabir surya merupakan salah satu upaya yang dapat dilakukan
untuk melindungi kulit dari efek merugikan yang disebabkan oleh radiasi UV.
Kemampuan suatu tabir surya dapat melindungi kulit dengan menunda eritema
dinyatakan dengan Sun Protection Factor (SPF) (Hassan et al., 2013). Nilai SPF
menunjukkan berapa kali perlindungan kulit dilipatgandakan sehingga aman di bawah
sinar matahari tanpa mengalami eritema (Rai & Srinivas, 2007). Paparan radiasi UV
yang berlebihan dapat menyebabkan kerusakan kulit akibat adanya radikal bebas
yang terbentuk sehingga diperlukan suatu antioksidan untuk menghambat radikal
bebas tersebut. Salah satu golongan senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan dari
sumber alami yaitu flavonoid. Senyawa ini dapat menghambat radikal bebas dengan
mendonasikan satu elektronnya (Ardhie, 2011).
Masyarakat daerah Kalimantan Selatan memanfaatkan kulit batang bangkal
secara tradisional sebagai bedak dingin. Bedak dingin ini berkhasiat untuk
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
melindungi kulit wajah dari radiasi ultraviolet yang merupakan salah satu komponen
utama yang dipancarkan oleh sinar matahari (Hassan et al., 2013). Selain itu, dapat
berkhasiat untuk menghaluskan permukaan kulit, memberi kesan putih (atau
kekuningan), menghilangkan flek-flek hitam, mencegah jerawat dan membersihkan
sel-sel mati pada kulit wajah (Soendjoto & Riefani, 2013).
Penelitian Maulina (2014) menyatakan bahwa ekstrak etanol kulit batang
bangkal yang diuji secara in vitro menggunakan metode DPPH (2,2-difenil-1pikrilhidrazil) memiliki nilai IC50 sebesar 84,850 ppm yang termasuk aktivitas
antioksidan aktif. Penentuan nilai SPF ekstrak etanol menggunakan metode yang
dikembangkan oleh Mansur (1986) pada konsentrasi 250 ppm, 500 ppm, dan 1000
ppm menghasilkan nilai SPF berturut-turut sebesar 10 (proteksi maksimal), 15
(proteksi maksimal) dan 29 (proteksi ultra). Dari hasil tersebut, diduga kuat senyawa
berperan sebagai antioksidan dan tabir surya kulit batang bangkal adalah flavonoid.
Uji aktivitas antioksidan dan tabir surya kulit batang bangkal masih terbatas
pada ekstrak. Oleh karena itu, perlu dilakukan pengujian lebih lanjut mengenai
aktivitas antioksidan dan tabir surya kulit batang bangkal dari hasil fraksinasi
khususnya fraksi etil asetat. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan nilai IC50 dan
nilai SPF secara in vitro dari fraksi etil asetat kulit batang bangkal dari tanaman
bangkal yang tumbuh di daerah Kalimantan Selatan.
METODOLOGI PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Februari-April 2015 bertempat di
Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Farmasi dan Laboratorium Kimia Farmasi
FMIPA Unlam Banjarbaru.
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah timbangan analitik (Ohauss PA214),
timbangan analitik (Gold Series), blender (Panasonic), oven (Memmert), bejana
maserasi, alat-alat gelas (Iwaki Pyrex), mikropipet (Labmate), tip pipet, propipet
(Vitalab), ayakan mesh 25 (Retsch AS 200), spatel, mesin ultrasonik tipe bath
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
(Bandelin Sonorex Digitec), corong pisah (Duran), statif, waterbath (SMIC), rotary
vacuum evaporator (RV 06-ML IKA WERKE model VR-2B), vial, cawan porselin,
rak tabung reaksi, penjepit, magnetic stirrer, hot plate (Stuart CB 302) dan
spektrofotometer UV-Vis (Spectronic Genesys 10uv).
Bahan-bahan yang digunakan adalah kulit batang bangkal, akuades, pelarut
etanol 70% teknis, etanol p.a, AlCl3 p.a (Merck), kuersetin (Merck), pereaksi DPPH
(2,2-difenil-1-pikrilhidrazil), n-heksan (Brataco), kloroform, etil asetat p.a (Merck),
n-butanol (Merck), asam klorida (HCl) pekat, asam asetat glasial (Merck), NaOH,
asam askorbat p.a, HCl 1%, reagen Dragendroff, reagen Meyer, FeCl3 3%, gelatin
linier (Brataco), benzena, amonia, asam sulfat pekat, asam asetat anhidrat, NaCl, Pb
Asetat, aluminium foil dan kertas saring.
Determinasi Tumbuhan Bangkal
Determinasi dilakukan di Laboratorium Dasar FMIPA UNLAM Banjarbaru.
Pengumpulan dan Pengolahan Sampel
Kulit batang bangkal diperoleh dari desa Sinar Bulan Kecamatan Satui
Kabupaten Tanah Bumbu Provinsi Kalimantan Selatan. Kulit batang bangkal
dikumpulkan dengan cara dikelupas kulit batang utama denan ketebalan 2-6 mm,
disortasi basah, dicuci bersih, dipotong-potong dengan panjang 10 cm dan lebar 2-3
cm, dikeringkan dengan oven pada suhu 50 oC selama 12 jam, disortasi kering,
diserut, dihaluskan dengan blender, lalu diayak dengan ayakan mesh 25.
Ekstraksi dan Fraksinasi
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi ultrasonikasi. Sebanyak 1 kg
serbuk simplisia diekstraksi dengan etanol 70% (1:5). Sampel diaduk dengan
magnetic stirrer pada kecepatan 50 rpm selama 15 menit. Sonikasi dilakukan selama
30 menit pada suhu 50 oC. Kemudian dilakukan perendaman pada suhu kamar selama
1x24 jam. Hasil maserasi disaring dengan corong Buchner. Remaserasi dilakukan
3x24 jam. Filtrat dipekatkan dengan rotary vacuum evaporator pada suhu 55oC
sampai menjadi kental (Handa et al., 2008). Kemudian diuapkan dalam cawan
porselin di atas waterbath hingga bobot tetap.
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
Lima gram ekstrak etanol difraksinasi dengan corong pisah menggunakan
pelarut yang memiliki kepolaran berbeda yaitu n-heksana dan etil asetat. Ekstrak
kental disuspensikan menggunakan akuades terlebih dahulu dengan perbandingan
1:20, kemudian dilakukan fraksinasi dengan pelarut n-heksana (1:20) dan etil asetat
(1:20). Dilakukan tiga kali replikasi. Lapisan yang larut etil asetat dipisahkan,
dikumpulkan, dan diuapkan di atas waterbath hingga bobot tetap, kemudian dihitung
rendemennya terhadap ekstrak etanol.
Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Batang Bangkal
Skrining fitokimia ekstrak etanol dan fraksi etil asetat berupa uji kandungan
tanin, saponin, steroid, flavonoid, alkaloid dan antrakuinon.
Penentuan Kadar Total Flavonid dari Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat
Kulit Batang Bangkal
Sebanyak 25 mg fraksi etil asetat dilarutkan ke dalam etanol 70% p.a dalam
labu ukur 5 mL dan ditambahkan etanol 70% p.a hingga tanda batas. Sebanyak 1 mL
sampel direaksikan dengan 1 mL AlCl3 2%. Lalu ditambahkan ke dalam larutan 8 mL
asam asetat 5% dan didiamkan selama 14 menit. Absorbansi larutan uji diukur pada
panjang gelombang maksimal menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Dilakukan
tiga kali replikasi. Pengukuran juga dilakukan terhadap blanko berupa serupa dengan
perlakuan namun tanpa sampel. Absorbansi dicatat dan dilakukan perhitungan kadar
dengan memasukan hasil absorbansi ke dalam persamaan kurva baku y = bx + a.
Digunakan kuersetin sebagai standar (Depkes RI, 2000).
Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pembuatan Larutan Uji
Fraksi etil asetat kulit batang bangkal sebanyak 25 mg dilarutkan dalam etanol
70% p.a 5 mL sehingga diperoleh konsentrasi 5000 ppm. Larutan induk diencerkan
menjadi berbagai konsentrasi 50, 100, 150, 200, 250 dan 300 ppm.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH dan Operating Time
Sebanyak 1 mL larutan DPPH 0,4 mM dan ditambahkan dengan 4 mL etanol
70% p.a. setelah dibiarkan selama 30 menit ditempat gelap. Larutan ini sebagai
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
blanko. Serapan larutan diukur dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 450-550 nm (Molyneux, 2004). Penentuan operating time dilakukan
dengan cara 1 mL larutan DPPH 0,4 mM ditambah dengan salah satu larutan
pembanding 6 ppm sebanyak 4 mL. Larutan tersebut diukur absorbansinya pada
panjang gelombang maksimum dengan interval pada waktu 5 menit sampai diperoleh
absorbansi yang stabil (Maulina, 2014).
Penentuan Aktivitas Antioksidan
Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan cara 1 mL larutan DPPH
0,4 mM ditambah dengan masing-masing 4 mL larutan uji. Campuran didiamkan
selama waktu operating time, diukur absorbansinya pada panjang gelombang
maksimum. Asam askorbat p.a digunakan sebagai kontrol positif dengan konsentrasi
1, 2, 3, 4, 5 dan 6 ppm. Dilakukan juga pengukuran absorbansi blanko. Hasil
penetapan antioksidan dibandingkan dengan asam askorbat p.a sebagai kontrol positif
(Maulina, 2014).
Penentuan Nilai SPF
Sebanyak 25 mg fraksi etil asetat dilarutkan dalam 5 mL etanol 70% p.a,
diperoleh larutan baku induk 5000 ppm. Kemudian dilakukan pengenceran berbagai
konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm dan 300 ppm. Larutan
seri kadar dibaca serapannya pada panjang gelombang antara 290-320 nm setiap
interval 5 nm, blanko yang digunakan adalah etanol 70% p.a. Nilai SPF dihitung
dengan persamaan yang dikembangkan oleh Mansur et al. (1986).
Pengumpulan dan Pengolahan Data
Analisis nilai IC50 menggunakan persamaan garis regresi linier yang diperoleh
dari grafik hubungan antara konsentrasi dengan persen inhibisi. Besarnya persen
inhibsi dihitung dengan rumus:
Persen inhibisi =
Absorbansi Kontrol-Absorbansi Sampel
Absorbansi Kontrol
x 100%
Menurut Jun et al. (2003) tingkat kemampuan aktivitas antioksidan dengan
metode DPPH adalah sebagai berikut: nilai IC50 500 ppm termasuk aktivitas tidak aktif.
Nilai SPF dihitung dengan menggunakan persamaan matematis Mansur et al.
(1986), persamaan dapat dilihat sebagai berikut:
320
EE ( λ) x I ( λ) x absorbansi ( λ)
SPF = CF x
290
Keterangan: EE = Spektrum efek eritema
Abs = Serapan tabir surya
I = Intensitas spektrum sinar
CF = Faktor koreksi
Tingkat kemampuan tabir surya dikelompokkan berdasarkan SPF menurut
ketentuan FDA adalah sebagai berikut: SPF 2-4 termasuk proteksi minimal, SPF 4-6
termasuk proteksi sedang, SPF 6-8 termasuk proteksi ultra, 8-15 termasuk proteksi
maksimal dan >15 termasuk proteksi ultra (Wilkinson et al., 1982).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Determinasi Tumbuhan Bangkal
Hasil determinasi menyatakan sampel bangkal yang dideterminasi adalah jenis
Nauclea subdita.
Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi
Berat total ekstrak etanol yang diperoleh sebesar 101,46 gram dari 1000 gram
serbuk simplisia dengan rendemen sebesar 10,146% (%b/b). Berat dari fraksi etil
asetat kering yang diperoleh sebesar 0,29 gram dari 5 gram ekstrak dengan rendemen
sebesar 5,8% (%b/b).
Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat Kulit Batang
Bangkal
Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol mengandung alkaloid, flavonoid, tanin,
saponin, triterpen dan fitosterol, sedangkan fraksi etil asetat mengandung flavonoid,
fitosterol dan triterpen.
Hasil Kadar Total Flavonoid Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat
Kadar total flavonoid fraksi etil asetat diperoleh sebesar 2,9709% atau 29,709
mg ekuivalen kuersetin/g fraksi. Kadar total flavonoid ekstrak etanol diperoleh
sebesar 0,6361% atau 6,361 mg ekuivalen kuersetin/g ekstrak. Walaupun demikian,
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
jika kadar total flavonoid fraksi ditinjau dari per gram ekstrak, kadar total flavonoid
dari fraksi etil asetat hanya sebesar 1,7231 mg ekuivalen kuersetin/g ekstrak. Hasil
konversi kadar total flavonoid fraksi etil asetat dalam mg ekuivalen kuersetin/g
ekstrak diperoleh dengan mengalikan rendemen fraksi (Perwiratami et al., 2014).
Hasil Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Persen Inhibisi (%)
Absorbansi
y = 0.159x + 12.24
R = 0.9993
70
0.092
0.091
0.09
0.089
0.088
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
60
50
40
30
20
10
0
0
50
100
200
250
300
350
Konsentrasi (ppm)
Waktu (menit)
Gambar 1. Operating Time
150
Gambar 2. Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat
Hasil Panjang Gelombang Maksimum DPPH dan Operating Time
Panjang gelombang maksimum DPPH yang yang diperoleh sebesar 522 nm.
Berdasarkan Gambar 1, serapan larutan mulai stabil terjadi pada menit ke-15 dan
berhenti stabil pada menit ke-55. Hal ini memberikan informasi bahwa operating time
yang digunakan pada menit ke-15 hingga menit ke-50. Oleh karena itu, operating
time larutan uji dilakukan setelah 15 menit direaksikan dengan DPPH.
Hasil Penentuan Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat
Penentuan aktivitas antioksidan sampel terukur ketika senyawa yang
terkandung dalam larutan uji mendonasikan satu atom hidrogen atau elektronnya
pada radikal bebas DPPH sehingga DPPH menjadi senyawa yang bukan radikal.
Berdasarkan Gambar 2, hasil menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi maka
semakin tinggi persen inhibisi. Hal ini menunjukkan bahwa terdapat hubungan antara
konsentrasi larutan uji dengan peningkatan persen inhibisi.
Persen inhibisi hanya menunjukkan respon masing-masing konsentrasi larutan
uji sehingga tidak mencerminkan aktivitas antioksidan yang paling baik diantara
seluruh sampel yang diujikan. Oleh karena itu, digunakan analisis nilai IC50 sebagai
parameter utama aktivitas antioksidan (Molyneux, 2004). Hasil penelitian
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
menunjukkan fraksi etil asetat kulit batang bangkal memiliki aktivitas antioksidan
dengan nilai IC50 sebesar 236,9137 ppm. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal
mampu menghambat aktivitas radikal bebas sebesar 50% dengan konsentrasi
236,9137 ppm. Menurut Jun et al. (2003), dapat diketahui bahwa fraksi etil asetat
kulit batang bangkal memiliki tingkat kemampuan aktivitas antioksidan sedang.
Kontrol positif yang digunakan adalah asam askorbat. Jika nilai IC50 sampel
sama atau mendekati nilai IC50 kontrol positif maka dapat dikatakan bahwa sampel
berpotensi sebagai salah satu alternatif antioksidan yang sangat aktif. Hasil
menunjukkan asam askorbat memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 sebesar
3,9543 ppm. Asam askorbat dapat menghambat aktivitas radikal bebas sebesar 50%
dengan konsentrasi 3,9543 ppm. Menurut Jun et al. (2003), dapat diketahui bahwa
asam askorbat memiliki tingkat kemampuan aktivitas antioksidan sangat aktif. Dari
data tersebut, aktivitas antioksidan fraksi etil asetat kulit batang bangkal memiliki
aktivitas lebih lemah dibandingkan asam askorbat.
Hasil Penentuan Nilai SPF
30
Nilai SPF
25
20
18
15
10
5
4
5
50
100
10
11
150
200
21
24
0
250
300
350
Konsentrasi (ppm)
Berdasarkan grafik, dapat dikelompokkan tingkat kemampuan tabir surya
berdasarkan nilai SPF menurut ketentuan FDA (Wilkinson et al., 1982). Fraksi etil asetat
kulit batang bangkal dengan konsentrasi 50 ppm dan 100 ppm diperoleh nilai SPF
berturut-turut 4 dan 5 yang berada dalam rentang 4-6, termasuk memiliki tingkat
kemampuan proteksi sedang. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal dengan
konsentrasi 150 ppm dan 200 ppm diperoleh nilai SPF berturut-turut 10 dan 11 yang
berada dalam rentang 8-15, termasuk memiliki tingkat kemampuan proteksi
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
maksimal. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal dengan konsentrasi 250 ppm, 300
ppm, dan 350 ppm diperoleh nilai SPF berturut-turut 18, 21, dan 24 berada dalam
kategori lebih dari 15, termasuk memiliki tingkat kemampuan proteksi ultra. Hasil
tersebut menunjukkan bahwa fraksi etil asetat kulit batang bangkal berpotensi sebagai
tabir surya yang dinyatakan dengan nilai SPF.
KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diperoleh dari penelitian ini adalah:
1. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal memiliki kemampuan aktivitas antioksidan
dengan nilai IC50 sebesar 236,9137 ppm yang termasuk dalam tingkat kemampuan
aktivitas antioksidan sedang.
2. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal menunjukkan potensi sebagai tabir surya
dengan konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan
350 ppm dengan nilai SPF berturut-turut sebesar 4 dan 5 (proteksi sedang); 10 dan
11 (proteksi maksimal); 18, 21 dan 24 (proteksi ultra).
UCAPAN TERIMAKASIH
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih atas segala bantuan
dan dukungan kepada kedua orang tua, Ibu Dina Rahmawanty, M.Farm., Apt. selaku
dosen pembimbing utama, Ibu Fadlilaturrahmah, M.Sc., Apt. selaku dosen
pembimbing pendamping. Bapak M. Ikhwan Rizki, M.Sc., Apt. dan Ibu Mia Fitriana,
M.Si., Apt., selaku tim penguji dan semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu
persatu yang ikut membantu jalannya penyusunan skripsi ini.
DAFTAR PUSTAKA
Ardhie, A. M. 2011. Radikal Bebas dan Peran Antioksidan dalam Mencegah
Penuaan. Medicinus. 24: 4-9.
Daud, M. F., E. R. Sadiyah & E. Rismawati. 2011. Pengaruh Perbedaan Metode
Ekstraksi terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji
(Psidium guajava L.) Berdaging Buah Putih. Prosiding Seminar Nasional
Penelitian dan PKM Sains, Teknologi dan Kesehatan. 2: 55-62.
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Handa, S. S., S. P. S. Khanuja, G. Longo, & D. D. Rakesh. 2008. Extraction
Technologies for Medicinal and Aromatic Plants. International Centre for
Science and High Technology, Trieste.
Hassan, I., K. Dorjay, A. Sami, & P. Anwar. 2013. Suncreens and Antioxidant as
Photo-Protective Measures: An Update. Our Dermatol Online. 4: 369-374.
Jun, M. H. Y., J. Yu, X. Fong, C. Wan, S., & C. T. Yang. 2003. Comparison of
Antioxidant Activities of Isoflavones from Kudzu Root (Pueraria labata
Ohwl.). Journal of Food Sciences. 68 : 2117-2122.
Mansur, J. S., M. N. R. Breder, M. C. A.Mansur, & R. D. Azulay. 1986.
Determination of Sun Protection Factor by Ultraviolet Spectrophotometry.
Anais Brasileiros de Dermatologia. 61 : 121-124.
Marinova, G. & V. Batchvarov. 2011. Evaluation of the Methods for Determination
of the Free Radical Scavenging Activity by DPPH. Bulgarian Journal of
Agricultural Science. 17: 11-24.
Maulina, R. 2014. Penentuan Nilai Sun Protection Factor (SPF) dan Aktivitas
Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Batang Bangkal (Nauclea subdita) secara in
vitro. Skripsi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pnegetahuan Alam, Universitas
Lambung Mangkurat, Banjarbaru.
Molyneux, P. 2004. The Use of Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)
for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin Journal of Science and
Technology. 26: 211-219.
Perwiratami, C., M. Suzery & B. Cahyono. 2014. Korelasi Fenolat Total dan
Flavonoid Total dengan Antioksidan dari Beberapa Sediaan Ekstrak Buah
Tanjung (Mimusops elengi). Progress in Chemistry.7: 34-39.
Rai, R. & C. R. Srinivas. 2007. Photoprotection. Indian Journal Dermatology,
Venereology, and Leprology. 73: 73-79.
Soendjoto, M. A. & M. K. Riefani. 2013. Bangkal (Nauclea sp.) Tumbuhan Lahan
Basah Bedak Dingin. Warta Konservasi Lahan Basah. 21: 13 dan 18.
Wilkinson, J. B., R. J. Moore & G. Godwin. 1982. Harry's Cosmeticology (7th
edition). Chemical Publishing Company, New York.
1
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN TABIR SURYA
FRAKSI ETIL ASETAT KULIT BATANG BANGKAL
(Nauclea subdita) SECARA IN VITRO
Artikel Ilmiah
untuk memenuhi persyaratan
dalam menyelesaikan program sarjana Strata-1 Farmasi
Oleh:
Zakiah
NIM J1E111017
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS LAMBUNG MANGKURAT
BANJARBARU
AGUSTUS 2015
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN TABIR SURYA
FRAKSI ETIL ASETAT KULIT BATANG BANGKAL (Nauclea subdita)
SECARA IN VITRO
Zakiah1, Dina Rahmawanty2, Fadlilaturrahmah3
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat
Jl. A. Yani Km 36 Banjarbaru, Kalimantan Selatan
e-mail: [email protected]
Abstract
Bangkal (Nauclea subdita) has been used as traditional cosmetics by people in South
Kalimantan. Ethanolic extract from stem bark of bangkal has been reported as an
antioxidant and sunscreen. The aim of this study was to evaluated antioxidant activity
and potential sunscreen from ethyl acetate fraction of stem bark of bangkal.
Determination of antioxidant activity had been evaluated using DPPH (2,2-diphenyl1-picrylhidrazyl) method with UV-Vis spectrophotometer at wavelength 522 nm and
compared with ascorbic acid as positive control. Determination of potential
sunscreen was done by defining values of SPF (Sun Protection Factor) using a
method developed by Mansur using UV-Vis spectrophotometer at wavelength range
290-320 nm. The result showed that ethyl acetate fraction of stem bark of bangkal
had antioxidant activity with IC50 value of 236,9137 ppm that was included in the
moderate level. Ethyl acetate fraction of stem bark of bangkal as potential sunscreen
at consentration 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm, and 350
ppm had SPF value 4 and 5 (moderate protection); 10 and 11 (maximal protection);
18, 21 dan 24 (ultra protection). These results indicate that ethyl acetate fraction of
stem bark of bangkal has potential as a natural antioxidant and sunscreen.
Keywords: Nauclea subdita, sunscreen, antioxidant, ethyl acetate
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
Abstrak
Bangkal (Nauclea subdita) secara empiris digunakan sebagai kosmetika tradisional
oleh masyarakat Kalimantan Selatan. Ekstrak etanol kulit batang bangkal telah diuji
aktivitasnya sebagai antioksidan dan tabir surya. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antioksidan dan tabir surya dari fraksi etil asetat kulit batang
bangkal. Penentuan aktivitas antioksidan diuji menggunakan metode DPPH (2,2difenil-1-pikrilhidrazil) dengan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang
522 nm dan dibandingkan dengan asam askorbat sebagai kontrol positif. Penentuan
potensi tabir surya dilakukan dengan menentukan nilai SPF (Sun Protection Factor)
menggunakan metode yang dikembangkan oleh Mansur dengan Spektrofotometer
UV-Vis pada panjang gelombang 290-320 nm. Hasil penelitian menunjukkan fraksi
etil asetat kulit batang bangkal memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50
sebesar 236,9137 ppm yang termasuk dalam tingkat kemampuan aktivitas antioksidan
sedang. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal berpotensi sebagai tabir surya dengan
konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan 350 ppm
dengan nilai SPF berturut-turut sebesar 4 dan 5 (proteksi sedang); 10 dan 11 (proteksi
maksimal); 18, 21 dan 24 (proteksi ultra). Dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat
kulit batang bangkal berpotensi sebagai antioksidan dan tabir surya alami.
Kata kunci : Nauclea subdita, tabir surya, antioksidan, etil asetat
PENDAHULUAN
Penggunaan tabir surya merupakan salah satu upaya yang dapat dilakukan
untuk melindungi kulit dari efek merugikan yang disebabkan oleh radiasi UV.
Kemampuan suatu tabir surya dapat melindungi kulit dengan menunda eritema
dinyatakan dengan Sun Protection Factor (SPF) (Hassan et al., 2013). Nilai SPF
menunjukkan berapa kali perlindungan kulit dilipatgandakan sehingga aman di bawah
sinar matahari tanpa mengalami eritema (Rai & Srinivas, 2007). Paparan radiasi UV
yang berlebihan dapat menyebabkan kerusakan kulit akibat adanya radikal bebas
yang terbentuk sehingga diperlukan suatu antioksidan untuk menghambat radikal
bebas tersebut. Salah satu golongan senyawa yang memiliki aktivitas antioksidan dari
sumber alami yaitu flavonoid. Senyawa ini dapat menghambat radikal bebas dengan
mendonasikan satu elektronnya (Ardhie, 2011).
Masyarakat daerah Kalimantan Selatan memanfaatkan kulit batang bangkal
secara tradisional sebagai bedak dingin. Bedak dingin ini berkhasiat untuk
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
melindungi kulit wajah dari radiasi ultraviolet yang merupakan salah satu komponen
utama yang dipancarkan oleh sinar matahari (Hassan et al., 2013). Selain itu, dapat
berkhasiat untuk menghaluskan permukaan kulit, memberi kesan putih (atau
kekuningan), menghilangkan flek-flek hitam, mencegah jerawat dan membersihkan
sel-sel mati pada kulit wajah (Soendjoto & Riefani, 2013).
Penelitian Maulina (2014) menyatakan bahwa ekstrak etanol kulit batang
bangkal yang diuji secara in vitro menggunakan metode DPPH (2,2-difenil-1pikrilhidrazil) memiliki nilai IC50 sebesar 84,850 ppm yang termasuk aktivitas
antioksidan aktif. Penentuan nilai SPF ekstrak etanol menggunakan metode yang
dikembangkan oleh Mansur (1986) pada konsentrasi 250 ppm, 500 ppm, dan 1000
ppm menghasilkan nilai SPF berturut-turut sebesar 10 (proteksi maksimal), 15
(proteksi maksimal) dan 29 (proteksi ultra). Dari hasil tersebut, diduga kuat senyawa
berperan sebagai antioksidan dan tabir surya kulit batang bangkal adalah flavonoid.
Uji aktivitas antioksidan dan tabir surya kulit batang bangkal masih terbatas
pada ekstrak. Oleh karena itu, perlu dilakukan pengujian lebih lanjut mengenai
aktivitas antioksidan dan tabir surya kulit batang bangkal dari hasil fraksinasi
khususnya fraksi etil asetat. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan nilai IC50 dan
nilai SPF secara in vitro dari fraksi etil asetat kulit batang bangkal dari tanaman
bangkal yang tumbuh di daerah Kalimantan Selatan.
METODOLOGI PENELITIAN
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan mulai bulan Februari-April 2015 bertempat di
Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Farmasi dan Laboratorium Kimia Farmasi
FMIPA Unlam Banjarbaru.
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah timbangan analitik (Ohauss PA214),
timbangan analitik (Gold Series), blender (Panasonic), oven (Memmert), bejana
maserasi, alat-alat gelas (Iwaki Pyrex), mikropipet (Labmate), tip pipet, propipet
(Vitalab), ayakan mesh 25 (Retsch AS 200), spatel, mesin ultrasonik tipe bath
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
(Bandelin Sonorex Digitec), corong pisah (Duran), statif, waterbath (SMIC), rotary
vacuum evaporator (RV 06-ML IKA WERKE model VR-2B), vial, cawan porselin,
rak tabung reaksi, penjepit, magnetic stirrer, hot plate (Stuart CB 302) dan
spektrofotometer UV-Vis (Spectronic Genesys 10uv).
Bahan-bahan yang digunakan adalah kulit batang bangkal, akuades, pelarut
etanol 70% teknis, etanol p.a, AlCl3 p.a (Merck), kuersetin (Merck), pereaksi DPPH
(2,2-difenil-1-pikrilhidrazil), n-heksan (Brataco), kloroform, etil asetat p.a (Merck),
n-butanol (Merck), asam klorida (HCl) pekat, asam asetat glasial (Merck), NaOH,
asam askorbat p.a, HCl 1%, reagen Dragendroff, reagen Meyer, FeCl3 3%, gelatin
linier (Brataco), benzena, amonia, asam sulfat pekat, asam asetat anhidrat, NaCl, Pb
Asetat, aluminium foil dan kertas saring.
Determinasi Tumbuhan Bangkal
Determinasi dilakukan di Laboratorium Dasar FMIPA UNLAM Banjarbaru.
Pengumpulan dan Pengolahan Sampel
Kulit batang bangkal diperoleh dari desa Sinar Bulan Kecamatan Satui
Kabupaten Tanah Bumbu Provinsi Kalimantan Selatan. Kulit batang bangkal
dikumpulkan dengan cara dikelupas kulit batang utama denan ketebalan 2-6 mm,
disortasi basah, dicuci bersih, dipotong-potong dengan panjang 10 cm dan lebar 2-3
cm, dikeringkan dengan oven pada suhu 50 oC selama 12 jam, disortasi kering,
diserut, dihaluskan dengan blender, lalu diayak dengan ayakan mesh 25.
Ekstraksi dan Fraksinasi
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi ultrasonikasi. Sebanyak 1 kg
serbuk simplisia diekstraksi dengan etanol 70% (1:5). Sampel diaduk dengan
magnetic stirrer pada kecepatan 50 rpm selama 15 menit. Sonikasi dilakukan selama
30 menit pada suhu 50 oC. Kemudian dilakukan perendaman pada suhu kamar selama
1x24 jam. Hasil maserasi disaring dengan corong Buchner. Remaserasi dilakukan
3x24 jam. Filtrat dipekatkan dengan rotary vacuum evaporator pada suhu 55oC
sampai menjadi kental (Handa et al., 2008). Kemudian diuapkan dalam cawan
porselin di atas waterbath hingga bobot tetap.
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
Lima gram ekstrak etanol difraksinasi dengan corong pisah menggunakan
pelarut yang memiliki kepolaran berbeda yaitu n-heksana dan etil asetat. Ekstrak
kental disuspensikan menggunakan akuades terlebih dahulu dengan perbandingan
1:20, kemudian dilakukan fraksinasi dengan pelarut n-heksana (1:20) dan etil asetat
(1:20). Dilakukan tiga kali replikasi. Lapisan yang larut etil asetat dipisahkan,
dikumpulkan, dan diuapkan di atas waterbath hingga bobot tetap, kemudian dihitung
rendemennya terhadap ekstrak etanol.
Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Kulit Batang Bangkal
Skrining fitokimia ekstrak etanol dan fraksi etil asetat berupa uji kandungan
tanin, saponin, steroid, flavonoid, alkaloid dan antrakuinon.
Penentuan Kadar Total Flavonid dari Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat
Kulit Batang Bangkal
Sebanyak 25 mg fraksi etil asetat dilarutkan ke dalam etanol 70% p.a dalam
labu ukur 5 mL dan ditambahkan etanol 70% p.a hingga tanda batas. Sebanyak 1 mL
sampel direaksikan dengan 1 mL AlCl3 2%. Lalu ditambahkan ke dalam larutan 8 mL
asam asetat 5% dan didiamkan selama 14 menit. Absorbansi larutan uji diukur pada
panjang gelombang maksimal menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Dilakukan
tiga kali replikasi. Pengukuran juga dilakukan terhadap blanko berupa serupa dengan
perlakuan namun tanpa sampel. Absorbansi dicatat dan dilakukan perhitungan kadar
dengan memasukan hasil absorbansi ke dalam persamaan kurva baku y = bx + a.
Digunakan kuersetin sebagai standar (Depkes RI, 2000).
Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pembuatan Larutan Uji
Fraksi etil asetat kulit batang bangkal sebanyak 25 mg dilarutkan dalam etanol
70% p.a 5 mL sehingga diperoleh konsentrasi 5000 ppm. Larutan induk diencerkan
menjadi berbagai konsentrasi 50, 100, 150, 200, 250 dan 300 ppm.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH dan Operating Time
Sebanyak 1 mL larutan DPPH 0,4 mM dan ditambahkan dengan 4 mL etanol
70% p.a. setelah dibiarkan selama 30 menit ditempat gelap. Larutan ini sebagai
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
blanko. Serapan larutan diukur dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 450-550 nm (Molyneux, 2004). Penentuan operating time dilakukan
dengan cara 1 mL larutan DPPH 0,4 mM ditambah dengan salah satu larutan
pembanding 6 ppm sebanyak 4 mL. Larutan tersebut diukur absorbansinya pada
panjang gelombang maksimum dengan interval pada waktu 5 menit sampai diperoleh
absorbansi yang stabil (Maulina, 2014).
Penentuan Aktivitas Antioksidan
Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan cara 1 mL larutan DPPH
0,4 mM ditambah dengan masing-masing 4 mL larutan uji. Campuran didiamkan
selama waktu operating time, diukur absorbansinya pada panjang gelombang
maksimum. Asam askorbat p.a digunakan sebagai kontrol positif dengan konsentrasi
1, 2, 3, 4, 5 dan 6 ppm. Dilakukan juga pengukuran absorbansi blanko. Hasil
penetapan antioksidan dibandingkan dengan asam askorbat p.a sebagai kontrol positif
(Maulina, 2014).
Penentuan Nilai SPF
Sebanyak 25 mg fraksi etil asetat dilarutkan dalam 5 mL etanol 70% p.a,
diperoleh larutan baku induk 5000 ppm. Kemudian dilakukan pengenceran berbagai
konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm dan 300 ppm. Larutan
seri kadar dibaca serapannya pada panjang gelombang antara 290-320 nm setiap
interval 5 nm, blanko yang digunakan adalah etanol 70% p.a. Nilai SPF dihitung
dengan persamaan yang dikembangkan oleh Mansur et al. (1986).
Pengumpulan dan Pengolahan Data
Analisis nilai IC50 menggunakan persamaan garis regresi linier yang diperoleh
dari grafik hubungan antara konsentrasi dengan persen inhibisi. Besarnya persen
inhibsi dihitung dengan rumus:
Persen inhibisi =
Absorbansi Kontrol-Absorbansi Sampel
Absorbansi Kontrol
x 100%
Menurut Jun et al. (2003) tingkat kemampuan aktivitas antioksidan dengan
metode DPPH adalah sebagai berikut: nilai IC50 500 ppm termasuk aktivitas tidak aktif.
Nilai SPF dihitung dengan menggunakan persamaan matematis Mansur et al.
(1986), persamaan dapat dilihat sebagai berikut:
320
EE ( λ) x I ( λ) x absorbansi ( λ)
SPF = CF x
290
Keterangan: EE = Spektrum efek eritema
Abs = Serapan tabir surya
I = Intensitas spektrum sinar
CF = Faktor koreksi
Tingkat kemampuan tabir surya dikelompokkan berdasarkan SPF menurut
ketentuan FDA adalah sebagai berikut: SPF 2-4 termasuk proteksi minimal, SPF 4-6
termasuk proteksi sedang, SPF 6-8 termasuk proteksi ultra, 8-15 termasuk proteksi
maksimal dan >15 termasuk proteksi ultra (Wilkinson et al., 1982).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Determinasi Tumbuhan Bangkal
Hasil determinasi menyatakan sampel bangkal yang dideterminasi adalah jenis
Nauclea subdita.
Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi
Berat total ekstrak etanol yang diperoleh sebesar 101,46 gram dari 1000 gram
serbuk simplisia dengan rendemen sebesar 10,146% (%b/b). Berat dari fraksi etil
asetat kering yang diperoleh sebesar 0,29 gram dari 5 gram ekstrak dengan rendemen
sebesar 5,8% (%b/b).
Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat Kulit Batang
Bangkal
Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol mengandung alkaloid, flavonoid, tanin,
saponin, triterpen dan fitosterol, sedangkan fraksi etil asetat mengandung flavonoid,
fitosterol dan triterpen.
Hasil Kadar Total Flavonoid Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat
Kadar total flavonoid fraksi etil asetat diperoleh sebesar 2,9709% atau 29,709
mg ekuivalen kuersetin/g fraksi. Kadar total flavonoid ekstrak etanol diperoleh
sebesar 0,6361% atau 6,361 mg ekuivalen kuersetin/g ekstrak. Walaupun demikian,
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
jika kadar total flavonoid fraksi ditinjau dari per gram ekstrak, kadar total flavonoid
dari fraksi etil asetat hanya sebesar 1,7231 mg ekuivalen kuersetin/g ekstrak. Hasil
konversi kadar total flavonoid fraksi etil asetat dalam mg ekuivalen kuersetin/g
ekstrak diperoleh dengan mengalikan rendemen fraksi (Perwiratami et al., 2014).
Hasil Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Persen Inhibisi (%)
Absorbansi
y = 0.159x + 12.24
R = 0.9993
70
0.092
0.091
0.09
0.089
0.088
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
60
50
40
30
20
10
0
0
50
100
200
250
300
350
Konsentrasi (ppm)
Waktu (menit)
Gambar 1. Operating Time
150
Gambar 2. Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat
Hasil Panjang Gelombang Maksimum DPPH dan Operating Time
Panjang gelombang maksimum DPPH yang yang diperoleh sebesar 522 nm.
Berdasarkan Gambar 1, serapan larutan mulai stabil terjadi pada menit ke-15 dan
berhenti stabil pada menit ke-55. Hal ini memberikan informasi bahwa operating time
yang digunakan pada menit ke-15 hingga menit ke-50. Oleh karena itu, operating
time larutan uji dilakukan setelah 15 menit direaksikan dengan DPPH.
Hasil Penentuan Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat
Penentuan aktivitas antioksidan sampel terukur ketika senyawa yang
terkandung dalam larutan uji mendonasikan satu atom hidrogen atau elektronnya
pada radikal bebas DPPH sehingga DPPH menjadi senyawa yang bukan radikal.
Berdasarkan Gambar 2, hasil menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi maka
semakin tinggi persen inhibisi. Hal ini menunjukkan bahwa terdapat hubungan antara
konsentrasi larutan uji dengan peningkatan persen inhibisi.
Persen inhibisi hanya menunjukkan respon masing-masing konsentrasi larutan
uji sehingga tidak mencerminkan aktivitas antioksidan yang paling baik diantara
seluruh sampel yang diujikan. Oleh karena itu, digunakan analisis nilai IC50 sebagai
parameter utama aktivitas antioksidan (Molyneux, 2004). Hasil penelitian
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
menunjukkan fraksi etil asetat kulit batang bangkal memiliki aktivitas antioksidan
dengan nilai IC50 sebesar 236,9137 ppm. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal
mampu menghambat aktivitas radikal bebas sebesar 50% dengan konsentrasi
236,9137 ppm. Menurut Jun et al. (2003), dapat diketahui bahwa fraksi etil asetat
kulit batang bangkal memiliki tingkat kemampuan aktivitas antioksidan sedang.
Kontrol positif yang digunakan adalah asam askorbat. Jika nilai IC50 sampel
sama atau mendekati nilai IC50 kontrol positif maka dapat dikatakan bahwa sampel
berpotensi sebagai salah satu alternatif antioksidan yang sangat aktif. Hasil
menunjukkan asam askorbat memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 sebesar
3,9543 ppm. Asam askorbat dapat menghambat aktivitas radikal bebas sebesar 50%
dengan konsentrasi 3,9543 ppm. Menurut Jun et al. (2003), dapat diketahui bahwa
asam askorbat memiliki tingkat kemampuan aktivitas antioksidan sangat aktif. Dari
data tersebut, aktivitas antioksidan fraksi etil asetat kulit batang bangkal memiliki
aktivitas lebih lemah dibandingkan asam askorbat.
Hasil Penentuan Nilai SPF
30
Nilai SPF
25
20
18
15
10
5
4
5
50
100
10
11
150
200
21
24
0
250
300
350
Konsentrasi (ppm)
Berdasarkan grafik, dapat dikelompokkan tingkat kemampuan tabir surya
berdasarkan nilai SPF menurut ketentuan FDA (Wilkinson et al., 1982). Fraksi etil asetat
kulit batang bangkal dengan konsentrasi 50 ppm dan 100 ppm diperoleh nilai SPF
berturut-turut 4 dan 5 yang berada dalam rentang 4-6, termasuk memiliki tingkat
kemampuan proteksi sedang. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal dengan
konsentrasi 150 ppm dan 200 ppm diperoleh nilai SPF berturut-turut 10 dan 11 yang
berada dalam rentang 8-15, termasuk memiliki tingkat kemampuan proteksi
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
maksimal. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal dengan konsentrasi 250 ppm, 300
ppm, dan 350 ppm diperoleh nilai SPF berturut-turut 18, 21, dan 24 berada dalam
kategori lebih dari 15, termasuk memiliki tingkat kemampuan proteksi ultra. Hasil
tersebut menunjukkan bahwa fraksi etil asetat kulit batang bangkal berpotensi sebagai
tabir surya yang dinyatakan dengan nilai SPF.
KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diperoleh dari penelitian ini adalah:
1. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal memiliki kemampuan aktivitas antioksidan
dengan nilai IC50 sebesar 236,9137 ppm yang termasuk dalam tingkat kemampuan
aktivitas antioksidan sedang.
2. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal menunjukkan potensi sebagai tabir surya
dengan konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan
350 ppm dengan nilai SPF berturut-turut sebesar 4 dan 5 (proteksi sedang); 10 dan
11 (proteksi maksimal); 18, 21 dan 24 (proteksi ultra).
UCAPAN TERIMAKASIH
Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih atas segala bantuan
dan dukungan kepada kedua orang tua, Ibu Dina Rahmawanty, M.Farm., Apt. selaku
dosen pembimbing utama, Ibu Fadlilaturrahmah, M.Sc., Apt. selaku dosen
pembimbing pendamping. Bapak M. Ikhwan Rizki, M.Sc., Apt. dan Ibu Mia Fitriana,
M.Si., Apt., selaku tim penguji dan semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu
persatu yang ikut membantu jalannya penyusunan skripsi ini.
DAFTAR PUSTAKA
Ardhie, A. M. 2011. Radikal Bebas dan Peran Antioksidan dalam Mencegah
Penuaan. Medicinus. 24: 4-9.
Daud, M. F., E. R. Sadiyah & E. Rismawati. 2011. Pengaruh Perbedaan Metode
Ekstraksi terhadap Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji
(Psidium guajava L.) Berdaging Buah Putih. Prosiding Seminar Nasional
Penelitian dan PKM Sains, Teknologi dan Kesehatan. 2: 55-62.
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA 2015
Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak. Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Handa, S. S., S. P. S. Khanuja, G. Longo, & D. D. Rakesh. 2008. Extraction
Technologies for Medicinal and Aromatic Plants. International Centre for
Science and High Technology, Trieste.
Hassan, I., K. Dorjay, A. Sami, & P. Anwar. 2013. Suncreens and Antioxidant as
Photo-Protective Measures: An Update. Our Dermatol Online. 4: 369-374.
Jun, M. H. Y., J. Yu, X. Fong, C. Wan, S., & C. T. Yang. 2003. Comparison of
Antioxidant Activities of Isoflavones from Kudzu Root (Pueraria labata
Ohwl.). Journal of Food Sciences. 68 : 2117-2122.
Mansur, J. S., M. N. R. Breder, M. C. A.Mansur, & R. D. Azulay. 1986.
Determination of Sun Protection Factor by Ultraviolet Spectrophotometry.
Anais Brasileiros de Dermatologia. 61 : 121-124.
Marinova, G. & V. Batchvarov. 2011. Evaluation of the Methods for Determination
of the Free Radical Scavenging Activity by DPPH. Bulgarian Journal of
Agricultural Science. 17: 11-24.
Maulina, R. 2014. Penentuan Nilai Sun Protection Factor (SPF) dan Aktivitas
Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Batang Bangkal (Nauclea subdita) secara in
vitro. Skripsi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pnegetahuan Alam, Universitas
Lambung Mangkurat, Banjarbaru.
Molyneux, P. 2004. The Use of Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)
for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin Journal of Science and
Technology. 26: 211-219.
Perwiratami, C., M. Suzery & B. Cahyono. 2014. Korelasi Fenolat Total dan
Flavonoid Total dengan Antioksidan dari Beberapa Sediaan Ekstrak Buah
Tanjung (Mimusops elengi). Progress in Chemistry.7: 34-39.
Rai, R. & C. R. Srinivas. 2007. Photoprotection. Indian Journal Dermatology,
Venereology, and Leprology. 73: 73-79.
Soendjoto, M. A. & M. K. Riefani. 2013. Bangkal (Nauclea sp.) Tumbuhan Lahan
Basah Bedak Dingin. Warta Konservasi Lahan Basah. 21: 13 dan 18.
Wilkinson, J. B., R. J. Moore & G. Godwin. 1982. Harry's Cosmeticology (7th
edition). Chemical Publishing Company, New York.