Metode ini digunakan dalam usaha mengisolasi senyawa toksik dari ekstrak. Pertama kali metode ini dipergunakan untuk menent ukan keberadaan
residu insektisida seperti DDT, parathion, dieldrin dan menentukan potensi senyawa anestetik. Metode ini kemudian berkembang sebagai salah satu metode
dalam mengisolasi senyawa aktif yang terdapat dalam suatu ekstrak tanaman. Keuntungan dari metode BSLT adalah peka, cepat, sederhana dan dapat diulang
tanpa terjadi penyimpangan Wahyuono dkk, 1995.
5. Artemia salina, Leach
a. Klasifikasi Artemia salina Leach adalah udang tingkat rendah yang hidup sebagai
zooplankton. Artemia pada tahun 1778 diber i nama cancer salinus,yang kemudian diubah menjadi Artemia salina pada tahun 1819 oleh Leach
Klasifikasi Artemia pada dunia hewan adalah sebagai berikut : Divisi
: Animal Phylum
: Arthropoda Kelas
: Crustaceae Subkelas : Branchiopoda
Ordo : Anostraca
Familia : Arthemidae
Genus : Artemia
Species : Artemia salina Leach
Mudjiman, 1995
b. Morfologi Artemia salina, Leach Artemia salina
, Leach diperdagangkan dalam bentuk telur istirahat yang dinamakan kista. Kista ini bentuk bulatan-bulatan kecil berwarna kelabu
kecoklatan dengan diameter berkisar 200-300 µm Mudjiman,1995. Kista berkualitas baik, apabila diinkubasi dalam air berkadar garam 5-70
permil akan menetas sekitar 18-24 jam. Artemia yang baru menetas disebut nauplius, berwarna orange, berbentuk bulat lonjong dengan panjang sekitar 400
mikron, lebar 170 mikron dan berat 0,002 mg. Nauplius berangsur -angsur mengalami perkembangan dan perubahan morfologis dengan 15 kali pergantian
kulit hingga menjadi dewasa. Pada setiap pergantian kulit dis ebut instar Mujiman, 1995.
Ada beberapa tahap penetasan Artemia yaitu tahap hidrasi, tahap pecah cangkang, dan tahap payung atau tahap pengeluaran. Tahap hidrasi terjadi
penyerapan air sehingga kista yang diawetkan dalam bentuk kering tersebut akan menjadi bulat dan aktif bermetabolisme. Tahap selanjutnya adalah tahap pecah
cangkang dan disusul dengan tahap payung yang terjadi beberapa saat sebelum nauplius keluar dari cangkang Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995. Tahap
penetasan Artemia seperti pada gamb ar 1.
Gambar 1. Tahap penetasan telur Artemia
Artemia dewasa biasanya berukuran panjang 1-2 cm yang ditandai adanya
tangkai mata yang jelas terlihat pada kedua sisi bagian kepala, antena sebagai alat sensori, saluran pencernaan yang terlihat jelas, dan 11 pasang thorakopoda. Pada
Artemia jantan, antena berubah menjadi alat penjepit, sepasang penis terdapat
dibagian belakang tubuh, sedangkan pada Artemia betina antena mengalami penyusutan. Sepasang indung telur atau ovarium terdapat di kedua sisi saluran
pencernaan, dibelakang thorakopoda Mujiman,1995. Gambar 2 merupakan gambar morfologi nauplius Artemia salina Leach.
Gambar 2. Morfologi nauplius Artemia salina
Mujiman, 1995 c. Lingkungan hidup
Artemia salina hidup planktonik di perairan berkadar garam tinggi antara
15-30 permil, suhu yang dikehendaki berkisar antara 25°C-30°C, oksigen terlarut sekitar 3 mgL dan pH antara 7,3-8,4. Artemia salina, Leach tidak dapat
mempertahankan diri dari pemangsa musuh- musuhnya karena tidak mempunyai alat atau cara untuk membela diri, salah satu cara untuk menghindarkan diri dari
pemangsa hewan lain dengan berpindah kekondisi alam berupa lingkungan hidup berkadar garam tinggi. Pada umumnya pemangsa tidak dapat hidup lagi pada
kondisi itu Mudjiman,1995. Makanan Artemia salina terdiri atas ganggang renik, bakteri dan cendawan.
Dalam pemeliharaan makanan yang diberikan adalah katul padi, tepung terigu, tepung kedelai, dan ragi Mudjiman,1995.
d. Perkembangbiakan dan siklus hidup Perkembangbiakannya yaitu jenis biseksual dan jenis partenogenenetik
Keduanya dapat terjadi ovovivipar atau ovipar. Pada ovovivipar keluar dari
induknya sudah berupa anak yang dinamakan nauplius, sedangkan pada ovipar anak keluar dari induknya berupa telur, bercangkang tebal yang dinamakan siste.
Perkembangbiakan jenis biseksual harus melalui proses perkawinan antara induk jantan dengan induk betina. Pada jenis parthenogenesis tidak ada perkawinan
karena memang tidak pernah ada jantannya. Jadi, betina akan beranak dengan sendirinya tanpa perkawinan Mudjiman,1995. Siklus hidup Artemia salina
seperti pada gambar 3.
Gambar 3. Siklus Hidup Artemia salina Leach
Mudjiman,1995 e. Penetasan telur Artemia salina Leach
Telur yang siap menetas berwarna coklat keabu-abuan. Untuk media penetasan dapat digunakan air laut biasa kadar garam ± 30 permil. Tapi untuk
mencapai hasil penetasan yang lebih baik, kita perlu menggunakan air berkadar garam 5 permil. Ini dapat dibuat dengan mengencerkan air laut dengan air tawar.
Sebelum ditetaskan telur-telur tersebut perlu dicuci terlebih dahulu, yakni dengan direndam di dalam air tawar selama 1 jam, baru kemudian dimasukan
dalam wadah penetasan. Suhu air yang baik selama proses penetasan adalah antara 25-30 C. Sedangkan kadar oksigennya harus lebih dari 2 mgL. Untuk
merangsang proses penetasannya media penetasan tersebut perlu disinari dengan lampu yang dipasang di samping wadah. Dalam waktu 24-36 jam setelah
pemasukan telur, biasanya telur-telur itu sudah menetas menjadi anak Artemia yang dinamakan nauplius Mudjiman,1995.
f. Penggunaan Artemia salina Leach dalam penelitian Suatu metode uji hayati yang tepat dan murah untuk skrining dalam
menentukan toksisitas suatu ekstrak tanaman aktif dengan menggunakan hewan uji Artemia salina Leach. Artemia sebe lumnya telah digunakan dalam bermacam-
macam uji hayati seperti uji pestisida, polutan, mikotoksin, anestetik, komponen seperti morfin, kekarsinogenikan dan toksikan dalam air laut. Uji dengan
organisme ini sesuai untuk aktifitas farmakologi dalam ekstrak tanaman yang bersifat toksik. Penelitian menggunakan Artemia salina memiliki beberapa
keuntungan antara lain cepat, mudah, murah dan sederhana. Penelitian dengan larva Artemia salina Leach telah digunakan oleh Pusat
Kanker Purdue, Universitas Purdue di Lafayette untuk senyawa aktif tanaman secara umum dan tidak spesifik untuk zat anti kanker. Namun demikian hubungan
yang signifikan dari sampel yang bersifat toksik terhadap larva Artemia salina Leach ternyata juga mempunyai aktifitas sitotoksik. Berdasarkan hal tersebut
maka larva Artemia salina Leach dapat digunakan untuk uji toksisitas Meyer et al., cit Wahyuni,S.,2002.
6. Kromatografi Lapis Tipis KLT
