PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Dan Infusa Daun Kupu-Kupu (Bauhinia Variegata) Terhadap Bakteri Streptococcus Pyogenes.
1
PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK
ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU
(Bauhinia variegata) TERHADAP BAKTERI
Streptococcus pyogenes
SKRIPSI
Oleh:
ISTIQAMATUSH SHOLIHAH
K 100110184
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
1
2
PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK
ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU
(Bauhinia variegata) TERHADAP BAKTERI
Streptococcus pyogenes
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
ISTIQAMATUSH SHOLIHAH
K100110184
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
2
3
3
4
4iii
5
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr wb
Alhamdulillahirobbil’alamin puji syukur kepada Allah SWT yang telah
memberikan rahmat, hidayah dan karunia-Nya sehingga penulis dapat
menyelesaikan
skripsi
dengan
judul
PENGUJIAN
AKTIVITAS
ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU
(Bauhinia variegata) TERHADAP BAKTERI Streptococcus pyogenes sebagai
syarat menempuh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) progam studi Farmasi di
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penulis mengucapkan
rasa terimakasihnya kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D.,Apt., Selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Ika Trisharyanti D.K, M.Farm., Apt., selaku dosen pembimbing.
3. Ibu Mariska S.H., S.Farm.,Apt selaku dosen pembimbing akademik.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St., selaku penguji 1
5. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku penguji 2
6. Keluarga tercinta Ibu Nuraeni, Bapak Ichsanuddin, Kakak Sitoresmi,
Kakak Hakim, Adik Aisyah yang selalu mendoakan dan memberikan
dukungan.
7. Pak Awang selaku laboran lantai 3
Penulis menyadari naskah skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Semoga
naskah ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu dan teknologi serta dunia
kesehatan maupun dunia farmasi.
Surakarta, 17 Juni 2015
Penulis
5
iv
6
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN................................................................................. ii
DEKLARASI ........................................................................................................ iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ..........................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii
DAFTAR TABEL .................................................................................................. ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................x
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................... xi
INTISARI...... ....................................................................................................... xii
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah........................................................................1
B. Perumusan Masalah...............................................................................2
C. Tujuan Penelitian...................................................................................3
D. Tinjauan Pustaka ...................................................................................3
1. Tanaman Kupu-Kupu (Bauhinia variegata) .....................................3
a. Khasiat ..........................................................................................3
b. Kandungan Kimia .........................................................................4
2. Streptococcus pyogenes ....................................................................4
a. Klasifikasi .....................................................................................4
b. Morfologi dan Identifikasi ............................................................5
c. Penyakit yang Ditimbulkan ..........................................................5
3. Antibakteri.........................................................................................5
4. Bioautografi.......................................................................................6
E. Landasan Teori ......................................................................................7
F. Hipotesis ................................................................................................8
BAB II MATODE PENELITIAN ..........................................................................9
A. Kategori Penelitian ................................................................................9
B. Variabel Penelitian ................................................................................9
v6
7
1. Variabel Bebas..................................................................................9
2. Variabel Tergantung .........................................................................9
3. Variabel Terkendali ..........................................................................9
C. Alat dan Bahan ......................................................................................9
1. Alat ...................................................................................................9
2. Bahan ................................................................................................9
D. Tempat Penelitian................................................................................10
E. Jalannya Penelitian ..............................................................................10
1. Determinasi Tanaman .....................................................................10
2. Pengambilan Bahan ........................................................................10
3. Ekstraksi Daun Kupu-Kupu ...........................................................10
4. Uji Mikrobiologi .............................................................................10
a. Sterilisasi Alat ..........................................................................10
b. Pembuatan Media Agar ...........................................................11
c. Pembuatan Persediaan Bakteri .................................................11
c. Pembuatan Suspensi Bakteri ....................................................11
d. Pewarnaan Bakteri ...................................................................11
e. Uji Biokimiawi (uji hemolisis) ................................................12
f. Pengujian Aktivitas Antibakteri ...............................................12
5. Uji KLT dan Uji Tabung .............................................................12
F. Teknik Analisis ...................................................................................13
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................................14
A. Determinasi Tanaman .........................................................................14
B. Ekstraksi ..............................................................................................14
C. Identifikasi Bakteri ..............................................................................15
1. Pewarnaan Bakteri ..........................................................................15
2. Uji Biokimiawi ...............................................................................15
D. Uji Aktivitas Antibakteri .....................................................................16
E. Analisis Kromatografi Lapis Tipis dan Uji Tabung ............................18
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................................22
A. Kesimpulan .........................................................................................22
7
vi
8
B. Saran ....................................................................................................22
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................23
LAMPIRAN.... .......................................................................................................26
8
vii
9
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Daun dan bunga kupu-kupu ...................................................................3
Gambar 2. Sruktur kimia kandungan daun kupu-kupu ............................................4
Gambar 3. Hasil pengecatan bakteri Streptococcus pyogenes ...............................15
Gambar 4. Hasil uji biokimiawi bakteri Streptococcus pyogenes..........................16
Gambar 5. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan infusa daun
kupu-kupu terhadap Streptococcus pyogenes .....................................17
Gambar 6. Hasil uji KLT ekstrak etanol daun kupu-kupu menggunakan fase
gerak heksan:etil asetat (6:4) dan fase diam silika gel GF254 ..............19
Gambar 7. Hasil uji tabung ekstrak etanol daun kupu-kupu ..................................20
Gambar 8. Hasil uji tabung infusa daun kupu-kupu ..............................................20
9
viii
10
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan infusa daun kupukupu terhadap Streptococcus pyogenes ..................................................17
Tabel 2. Hasil analisis KLT ekstrak etanol daun kupu-kupu menggunakan
fase gerak heksan:etil asetat (6:4) dan fase diam silika gel GF254 ...........19
10
ix
11
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan hasil determinasi ....................................................27
Lampiran 2. Komposisi cat Gram ..........................................................................29
Lampiran 3. Komposisi media ...............................................................................30
Lampiran 4. Pembuatan reagen semprot ................................................................31
Lampiran 5. Perhitungan seri konsentrasi ..............................................................32
11
x
12
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
DMSO : Dimethylsulphoxide
hRf
: Hundred Retardation Factor
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
LB
: Liebermann-Burchard
MH
: Muller Hinton
mg/mL : Milligram per Mililiter
12
xi
13
INTISARI
Tanaman kupu-kupu (Bauhinia variegata) merupakan tanaman yang
mempunyai berbagai khasiat dan banyak ditanam di Indonesia. Daun kupu-kupu
digunakan oleh masyarakat Sumba Barat Nusa Tenggara Timur sebagai obat
bisul. Tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak
etanol dan infusa daun kupu-kupu terhadap Streptococcus pyogenes dan
mengetahui golongan senyawa yang mempunyai aktivitas antibakteri.
Daun kupu-kupu diekstraksi dengan cara maserasi dan infundasi dengan
pelarut etanol 96% dan akuades. Metode uji aktivitas antibakteri digunakan
metode disc difusson Kirby Bauer. Analisis golongan senyawa yang terdapat
dalam daun kupu-kupu dilakukan dengan cara Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
dan uji tabung.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol dan infusa daun
kupu-kupu tidak mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Streptococcus
pyogenes. Hasil KLT dan uji tabung menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun
kupu-kupu mengandung tanin, saponin dan terpenoid. Sedangkan infusa daun
kupu-kupu terdapat saponin.
Kata kunci: Bauhinia variegata, antibakteri, Streptococcus pyogenes, maserasi,
infundasi.
xii
13
PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK
ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU
(Bauhinia variegata) TERHADAP BAKTERI
Streptococcus pyogenes
SKRIPSI
Oleh:
ISTIQAMATUSH SHOLIHAH
K 100110184
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
1
2
PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK
ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU
(Bauhinia variegata) TERHADAP BAKTERI
Streptococcus pyogenes
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
ISTIQAMATUSH SHOLIHAH
K100110184
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
2
3
3
4
4iii
5
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr wb
Alhamdulillahirobbil’alamin puji syukur kepada Allah SWT yang telah
memberikan rahmat, hidayah dan karunia-Nya sehingga penulis dapat
menyelesaikan
skripsi
dengan
judul
PENGUJIAN
AKTIVITAS
ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAN INFUSA DAUN KUPU-KUPU
(Bauhinia variegata) TERHADAP BAKTERI Streptococcus pyogenes sebagai
syarat menempuh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) progam studi Farmasi di
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penulis mengucapkan
rasa terimakasihnya kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D.,Apt., Selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Ika Trisharyanti D.K, M.Farm., Apt., selaku dosen pembimbing.
3. Ibu Mariska S.H., S.Farm.,Apt selaku dosen pembimbing akademik.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St., selaku penguji 1
5. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku penguji 2
6. Keluarga tercinta Ibu Nuraeni, Bapak Ichsanuddin, Kakak Sitoresmi,
Kakak Hakim, Adik Aisyah yang selalu mendoakan dan memberikan
dukungan.
7. Pak Awang selaku laboran lantai 3
Penulis menyadari naskah skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Semoga
naskah ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu dan teknologi serta dunia
kesehatan maupun dunia farmasi.
Surakarta, 17 Juni 2015
Penulis
5
iv
6
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN................................................................................. ii
DEKLARASI ........................................................................................................ iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ..........................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii
DAFTAR TABEL .................................................................................................. ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................x
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................... xi
INTISARI...... ....................................................................................................... xii
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah........................................................................1
B. Perumusan Masalah...............................................................................2
C. Tujuan Penelitian...................................................................................3
D. Tinjauan Pustaka ...................................................................................3
1. Tanaman Kupu-Kupu (Bauhinia variegata) .....................................3
a. Khasiat ..........................................................................................3
b. Kandungan Kimia .........................................................................4
2. Streptococcus pyogenes ....................................................................4
a. Klasifikasi .....................................................................................4
b. Morfologi dan Identifikasi ............................................................5
c. Penyakit yang Ditimbulkan ..........................................................5
3. Antibakteri.........................................................................................5
4. Bioautografi.......................................................................................6
E. Landasan Teori ......................................................................................7
F. Hipotesis ................................................................................................8
BAB II MATODE PENELITIAN ..........................................................................9
A. Kategori Penelitian ................................................................................9
B. Variabel Penelitian ................................................................................9
v6
7
1. Variabel Bebas..................................................................................9
2. Variabel Tergantung .........................................................................9
3. Variabel Terkendali ..........................................................................9
C. Alat dan Bahan ......................................................................................9
1. Alat ...................................................................................................9
2. Bahan ................................................................................................9
D. Tempat Penelitian................................................................................10
E. Jalannya Penelitian ..............................................................................10
1. Determinasi Tanaman .....................................................................10
2. Pengambilan Bahan ........................................................................10
3. Ekstraksi Daun Kupu-Kupu ...........................................................10
4. Uji Mikrobiologi .............................................................................10
a. Sterilisasi Alat ..........................................................................10
b. Pembuatan Media Agar ...........................................................11
c. Pembuatan Persediaan Bakteri .................................................11
c. Pembuatan Suspensi Bakteri ....................................................11
d. Pewarnaan Bakteri ...................................................................11
e. Uji Biokimiawi (uji hemolisis) ................................................12
f. Pengujian Aktivitas Antibakteri ...............................................12
5. Uji KLT dan Uji Tabung .............................................................12
F. Teknik Analisis ...................................................................................13
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................................14
A. Determinasi Tanaman .........................................................................14
B. Ekstraksi ..............................................................................................14
C. Identifikasi Bakteri ..............................................................................15
1. Pewarnaan Bakteri ..........................................................................15
2. Uji Biokimiawi ...............................................................................15
D. Uji Aktivitas Antibakteri .....................................................................16
E. Analisis Kromatografi Lapis Tipis dan Uji Tabung ............................18
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................................22
A. Kesimpulan .........................................................................................22
7
vi
8
B. Saran ....................................................................................................22
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................23
LAMPIRAN.... .......................................................................................................26
8
vii
9
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Daun dan bunga kupu-kupu ...................................................................3
Gambar 2. Sruktur kimia kandungan daun kupu-kupu ............................................4
Gambar 3. Hasil pengecatan bakteri Streptococcus pyogenes ...............................15
Gambar 4. Hasil uji biokimiawi bakteri Streptococcus pyogenes..........................16
Gambar 5. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan infusa daun
kupu-kupu terhadap Streptococcus pyogenes .....................................17
Gambar 6. Hasil uji KLT ekstrak etanol daun kupu-kupu menggunakan fase
gerak heksan:etil asetat (6:4) dan fase diam silika gel GF254 ..............19
Gambar 7. Hasil uji tabung ekstrak etanol daun kupu-kupu ..................................20
Gambar 8. Hasil uji tabung infusa daun kupu-kupu ..............................................20
9
viii
10
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol dan infusa daun kupukupu terhadap Streptococcus pyogenes ..................................................17
Tabel 2. Hasil analisis KLT ekstrak etanol daun kupu-kupu menggunakan
fase gerak heksan:etil asetat (6:4) dan fase diam silika gel GF254 ...........19
10
ix
11
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan hasil determinasi ....................................................27
Lampiran 2. Komposisi cat Gram ..........................................................................29
Lampiran 3. Komposisi media ...............................................................................30
Lampiran 4. Pembuatan reagen semprot ................................................................31
Lampiran 5. Perhitungan seri konsentrasi ..............................................................32
11
x
12
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
DMSO : Dimethylsulphoxide
hRf
: Hundred Retardation Factor
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
LB
: Liebermann-Burchard
MH
: Muller Hinton
mg/mL : Milligram per Mililiter
12
xi
13
INTISARI
Tanaman kupu-kupu (Bauhinia variegata) merupakan tanaman yang
mempunyai berbagai khasiat dan banyak ditanam di Indonesia. Daun kupu-kupu
digunakan oleh masyarakat Sumba Barat Nusa Tenggara Timur sebagai obat
bisul. Tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak
etanol dan infusa daun kupu-kupu terhadap Streptococcus pyogenes dan
mengetahui golongan senyawa yang mempunyai aktivitas antibakteri.
Daun kupu-kupu diekstraksi dengan cara maserasi dan infundasi dengan
pelarut etanol 96% dan akuades. Metode uji aktivitas antibakteri digunakan
metode disc difusson Kirby Bauer. Analisis golongan senyawa yang terdapat
dalam daun kupu-kupu dilakukan dengan cara Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
dan uji tabung.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol dan infusa daun
kupu-kupu tidak mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Streptococcus
pyogenes. Hasil KLT dan uji tabung menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun
kupu-kupu mengandung tanin, saponin dan terpenoid. Sedangkan infusa daun
kupu-kupu terdapat saponin.
Kata kunci: Bauhinia variegata, antibakteri, Streptococcus pyogenes, maserasi,
infundasi.
xii
13