Pengembangan Metode Pemisahan Antosianidin Dari Ekstrak Ubi Jalar Ungu (Iopmea batatas L.) Dengan Metode HPTLC-Spektrofotodensitometri C-18.
P
PENGEM
MBANG
GAN METODE PEMISA
P
AHAN
ANTO
OSIANID
DIN DAR
RI EKST
TRAK UMBI
U
UBI JALA
AR
UN
NGU (Ipoomoea batatas L.) DENG
GAN ME
ETODE
RI C-18
HPTLC-SP
PEKTRO
OFOTOD
DENSIT
TOMETR
8
Skripssi
CLA
AUDIA PRIIMADEWI
1208505038
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKULTA
AS MATEM
MATIKA DA
AN ILMU PENGETAH
P
HUAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
i
LembarPengesahan
PENGEMBANGAN METODE PEMISAHAN
ANTOSIANIDIN DARI EKSTRAK UMBI UBI JALAR
UNGU (Ipomoea batatas L.) DENGAN METODE
HPTLC-SPEKTROFOTODENSITOMETRI C-18
Skripsi
Skripsiinidiajukansebagaisyaratuntukmemperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUdayan
a
Oleh
CLAUDIA PRIMADEWI
NIM. 1208505038
Menyetujui:
Pembimbing II
Pembimbing I
Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 198302132006042002
NIP. 196804201994021001
Mengesahkan:
KetuaJurusanFarmasi
FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlam
Dr. rer. nat. I Made AgusGelgelWirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 196804201994021001
ii
KATA PENGANTAR
PujisyukurpenulispanjatkankehadapanTuhan
Yang
MahaEsa,
karenaatasberkatdanrahmat-Nyapenulisdapatmenyelesaikanskripsi yang berjudul
“Pengembangan Metode Pemisahan Antosianidin dari Ekstrak Umbi Ubi Jalar
Ungu (Ipomoea batatas L.) dengan Metode HPTLC-spektrofotodensitometri C18” tepatpadawaktunya.
Penyusunanskripsiinitidakterlepasdaridukungan,
saran,
danbimbingandariberbagaipihak.Makadariitu,
padakesempataninipenulisinginpengucapkanterimakasihkepada:
1. Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt. selakudosenpembimbing I yang
denganpenuhperhatiantelahmemberikanmotivasi, semangat, bimbingan, dan
saran
dengansabarselamapenulismengikutipendidikan
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana, khususnyadalampenyusunanskripsiini.
2. Dr.
rer.
nat.
I
Made
Agus
Gelgel
selakudosenpembimbing
Wirasuta,
II
M.Si.,
Apt.
dan
selakuKetuaJurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUn
iversitasUdayana
semangat,
yang
denganpenuhperhatiantelahmemberikanmotivasi,
bimbingan,
dengansabarselamapenulismengikutipendidikan
iii
dan
saran
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana, khususnyadalampenyusunanskripsiini.
3. Drs.
Ida
Bagus
Made
Suaskara,
M.Si.,selakuDekanFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitas
Udayana.
4. Seluruhdosendanstafpegawai
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana
yang
telahmemberikanbantuankepadapenulisselamapenyusunanskripsiini.
5. Keluarga, yaitu orang tua yang sangatsayasayangidanhormati, Ibu Ripih
Effenty dan Bapak Deddy Daryanto, dan adik-adik yang saya kasihi, Icha,
Bella
dan
Dinda,
terimakasihatasdukungandoadansemangat
yang
telahdiberikanbaik moral maupun material dalampenyusunanskripsiini.
6. Teman-temantersayang, Eny, Ratih, Sonia, Anabel, Diah, Wiwik, Nia, Desak
dan
Risma
yang
selalumemberikansemangatdanmembantusaatdalamkesulitan.
7. Teman-temanseperjuanganriset analisis 2012, Vanadium Spectra yang terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat dan dukungan,
khususnya grup Antosianin “PSP” yaitu Gung Rias, Sonia, Ayu, Krisnawan,
Dewa dan Made yang selalu ada hampir setiap saat dan menjadi kawan
bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
iv
8. Teman-teman Beswan Djarum 30 Bali, Meci, Febri, Mia, Sasmita, Nana,
Arik, Indra dan Wintara, yang selalu menyemangati satu sama lain dan
menjadi sumber memotivasi diri penulis.
9. Sahabat yang jauh di Jakarta & Jogja, Auli, Fia, Inaya, dan Diana yang
walaupun jarang sekali bertemu tapi tetap menjadi sumber motivasi
kesayangan penulis.
10. Temen-temen super gercep KKN Nusa, Lola, Dyah, Cindy, Alit, Leonk, Kak
Dandy dan Edy yang selalu jadi menghibur dan memberikan semangat satu
sama lain dalam pengerjaan skripsi ini.
11. Keluarga besar Analisis Farmasi Udayana, para dosen serta laboran yang
selalu memberikan motivasi dan semangat saat penulis menghadapi kesulitan.
12. Semua teman-temanDioscuri Hygeia 2012 yang dengansemangatuntukbisa
lulus bersamamembuatpenulislebihterdorongmenyelesaikanskripsiini.
13. Semuapihak
yang
terlibatdantelahmembantupenulisdalampenyusunanskripsiini
yang
tidakdapatpenulissebutkansatu per satu.
Penulismenyadaribahwapenyusunanskripsiinimasihjauhdarisempurna.Untukitupe
nulismengharapkankritikdan
saran
darisemuapihak
yang
bersifatmembangunsehingga di masa yang akandatangdapatmenjadilebihbaik.
Penulisberharapsemogaskripsiinidapatbermanfaatbagisemuapihak
yang
membacanya.
Bukit Jimbaran, 11 Mei 2016
v
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii
KATA PENGANTAR ........................................................................................ iii
DAFTAR ISI ....................................................................................................... vi
DAFTAR TABEL ............................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xi
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH .......................................................... xii
ABSTRAK .......................................................................................................... xv
ABSTRACT ........................................................................................................ xvi
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 LatarBelakang ................................................................................ 1
1.2 RumusanMasalah ........................................................................... 3
1.3 TujuanPenelitian ............................................................................ 3
1.4 ManfaatPenelitian .......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Klasifikasi Ubi Jalar Ungu ............................................................. 5
2.2 AntosianinUbijalarUngu ................................................................ 6
2.2.1 SifatFisika Kimia AntosianindanAntosianidin ..................... 6
2.2.2 Identifikasi Antosianin dan Antosianidin Ubi jalar Ungu .... 8
2.3 Pemisahan Glikosida Antosianin dengan Metode Kromatografi ... 11
vii
2.3.1 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) Fase Balik ........ 11
2.3.2 Kromatografi Lapis Tipis KT (HPTLC) Fase Balik ............. 13
2.3.3 Kromatografi Kertas ............................................................. 14
2.4 Validasi dan Parameter Metode Pemisahan Kromatografi ............ 14
2.4.1
Capacityfactor.................................................................... 15
2.4.2
Plate number ...................................................................... 15
2.4.3
Resolusi .............................................................................. 16
2.4.4
Tailing factor ..................................................................... 17
2.4.5
Faktor Selektivitas ............................................................. 18
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian ..................................................................... 19
3.2 LokasidanWaktuPenelitian ............................................................ 19
3.3 Bahan Penelitian ............................................................................ 19
3.4 Alat Penelitian ................................................................................ 20
3.5 ProsedurPenelitian ......................................................................... 20
3.5.1 Determinasi Tanaman Ubi Jalar Ungu .................................. 22
3.5.2 Penyiapan Bahan Baku ......................................................... 22
3.5.3 Ekstraksi Ubi Jalar Ungu ...................................................... 22
3.5.4 Preparasi Sampel ................................................................... 23
3.5.5 Pengembangan Metode Pemisahan dengan HPTLCSpektrofotodensitometri C-18 ............................................... 21
3.5.6 Identifikasi Hasil Pemisahan................................................. 21
3.5.7 Analisis Data ......................................................................... 22
viii
3.6 SkemaUmumPenelitian ................................................................. 24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Determinasi Tanaman .................................................................... 25
4.2 Ekstraksi Umbi Ubi Jalar Ungu ..................................................... 26
4.3 Pemilihan FaseGerakMetodePemisahanSampeldengan HPTLCspektrofotodensitometri C-18 ........................................................ 27
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 38
5.2 Saran ............................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 39
LAMPIRAN ........................................................................................................ 43
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. SenyawaantosianidinhasilpemisahanolehTeraharaet al (2004) ........... 8
Tabel 2. Penafsiranspektrumpereaksigeser AlCl3 .............................................. 9
Tabel 3. Penafsiranwarnabercakdarisegistruktur flavonoid ............................... 10
Tabel 4. Senyawaantosianinhasilpemisahanmenggunakan HPLC C-18 ........... 12
Tabel 5. Hasilpemisahanantosianidindenganfasegerak BAW ........................... 14
Tabel 6. Hasil reaksi warna noda dengan reagen pereaksi................................. 30
Tabel 7. Nilai parameter kromatografi hasil pemisahan .................................... 37
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Umbi Ubi Jalar Ungu ..................................................................... 5
Gambar 2.
Struktur kimia antosianin ............................................................... 7
Gambar 3.
Strukturkimiaantosianidin .............................................................. 7
Gambar 4.
Spektrum antosianin ubi jalar ungu ............................................... 9
Gambar 5.
Hasilpemisahan yang diamatipadacahayavisibelsetelahpenyemprotan
diazotized sulfonamide .................................................................. 13
Gambar 6.
Perhitungan Nilai Tailing Factor ................................................... 18
Gambar 7.
Skema Umum Penelitian................................................................ 24
Gambar 8.
Hasil pemisahan fase gerak I, II dan III ......................................... 28
Gambar 9.
Spektrum antosianin umbi ubi jalar ungu dan spektrum noda hasil
pemisahan fase gerak I, II dan III .................................................. 29
Gambar 10. Pergeseran spektrum antosianin pada pita I ................................... 32
Gambar 11. Kompleks antara antosianindan Al3+ di posisi C3’ dan C4’ .......... 35
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Hasil determinasi tanaman ............................................................ 43
Lampiran 2. Dokmentasi penelitian ................................................................... 45
Lampiran 3. Perhitungan nilai resolusi (Rs) ...................................................... 46
Lampiran 4. Perhitungan nilai tailing factor (Tf) .............................................. 47
Lampiran 5. Perhitungan nilai plate count/plate number (PN) .......................... 49
Lampiran 6. Perhitungan nilai capacity factor dan faktor selektivitas .............. 51
xii
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH
Absorbansi
: Rasiologaritmikdariradiasi
dipaparkankesuatubahanterhadapradiasi
yang
yang
ditransmisikanmenembusbahan
Aglikon
: Komponen non gula dari suatu glikosida
Analit
: Zat kimia yang diukur atau diuji
Antidiabetik
: Agen yang mengontrol tingkat glukosa dalam darah
Antiinflamasi
: Agen penghilang radang
Antikarsinogenik
: Agen yang bersifat melawan agen pemicu kanker
Antimutagenik
: Agen yang bersifat mencegah mutasi
Antioksidan
: Agen seperti kelompok vitamin, mineral, enzim,
danrempah-rempah
yang
membantumelindungitubuhdariradikalbebas
Antitumor
: Agen pencegah pembentukan tumor
Bathokromik
: Pergeseran puncak absorbsi ke panjang gelombang
yang lebih besar
C-18
: Jenis fase diam kromatografi yang bersifat non polar
karena memiliki komponen atom karbon yang panjang
Cost effective
: Keefektifan biaya suatu analisis
Determinasi
: Penentuan, penetapan
Ekstrak
: Hasildari proses menyarisimplisia
Ekstraksi
: Proses menyari simplisia
xiii
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan
suatu
pelarut
yang
disebut
eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Glikosida
: Senyawa yang terdiri atas dua bagian senyawa, yaitu
gula dan non gula
Gugus
: Kelompok unsur kimia
Hepatoprotektif
: Bersifat melindungi organ hati
Herbal
: Terbuat atau berasal dari tumbuh-tumbuhan
Hidroksilasi
: Proses penambahan –OH sebagai suatu subtituen
senyawa kimia
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
In vitro
: Percobaan
yang
dilakukan
dalam
lingkungan
terkontrol, misal dalam tabung reaksi atau cawan petri
In vivo
: Percobaan yang dilakukan menggunakan keseluruhan
hidup organisme, menggunakan hewan coba
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Maserasi
: Cara ekstraksi sederhana dengan merendam sampel
simplisia dalam suatu pelarut, tanpa pemanasan,
selama 24 jam
xiv
Maserat
: Hasil penyarian maserasi
Metoksilasi
: Proses penambahan gugus metoksi (-CH3OH) sebagai
subtituen suatu senyawa kimia
Neuroprotektif
: Bersifat melindungi saraf
Polar
: Sifat suatu senyawa akibat adanya ikatan elektron, dan
memiliki muatan negatif di sebagian besar sisi
senyawa tersebut
Profiling
: Proses penentuan profil suatu bahan kimia atau bahan
alam dengan melihat bentuk kromatogram
Resolusi
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
elektromagnetik
prinsip
dengan
analit
interaksi
yang
radiasi
merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu hal, yang didokumentasikan
xv
P
PENGEM
MBANG
GAN METODE PEMISA
P
AHAN
ANTO
OSIANID
DIN DAR
RI EKST
TRAK UMBI
U
UBI JALA
AR
UN
NGU (Ipoomoea batatas L.) DENG
GAN ME
ETODE
RI C-18
HPTLC-SP
PEKTRO
OFOTOD
DENSIT
TOMETR
8
Skripssi
CLA
AUDIA PRIIMADEWI
1208505038
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKULTA
AS MATEM
MATIKA DA
AN ILMU PENGETAH
P
HUAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
i
LembarPengesahan
PENGEMBANGAN METODE PEMISAHAN
ANTOSIANIDIN DARI EKSTRAK UMBI UBI JALAR
UNGU (Ipomoea batatas L.) DENGAN METODE
HPTLC-SPEKTROFOTODENSITOMETRI C-18
Skripsi
Skripsiinidiajukansebagaisyaratuntukmemperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUdayan
a
Oleh
CLAUDIA PRIMADEWI
NIM. 1208505038
Menyetujui:
Pembimbing II
Pembimbing I
Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 198302132006042002
NIP. 196804201994021001
Mengesahkan:
KetuaJurusanFarmasi
FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlam
Dr. rer. nat. I Made AgusGelgelWirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 196804201994021001
ii
KATA PENGANTAR
PujisyukurpenulispanjatkankehadapanTuhan
Yang
MahaEsa,
karenaatasberkatdanrahmat-Nyapenulisdapatmenyelesaikanskripsi yang berjudul
“Pengembangan Metode Pemisahan Antosianidin dari Ekstrak Umbi Ubi Jalar
Ungu (Ipomoea batatas L.) dengan Metode HPTLC-spektrofotodensitometri C18” tepatpadawaktunya.
Penyusunanskripsiinitidakterlepasdaridukungan,
saran,
danbimbingandariberbagaipihak.Makadariitu,
padakesempataninipenulisinginpengucapkanterimakasihkepada:
1. Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt. selakudosenpembimbing I yang
denganpenuhperhatiantelahmemberikanmotivasi, semangat, bimbingan, dan
saran
dengansabarselamapenulismengikutipendidikan
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana, khususnyadalampenyusunanskripsiini.
2. Dr.
rer.
nat.
I
Made
Agus
Gelgel
selakudosenpembimbing
Wirasuta,
II
M.Si.,
Apt.
dan
selakuKetuaJurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUn
iversitasUdayana
semangat,
yang
denganpenuhperhatiantelahmemberikanmotivasi,
bimbingan,
dengansabarselamapenulismengikutipendidikan
iii
dan
saran
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana, khususnyadalampenyusunanskripsiini.
3. Drs.
Ida
Bagus
Made
Suaskara,
M.Si.,selakuDekanFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitas
Udayana.
4. Seluruhdosendanstafpegawai
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana
yang
telahmemberikanbantuankepadapenulisselamapenyusunanskripsiini.
5. Keluarga, yaitu orang tua yang sangatsayasayangidanhormati, Ibu Ripih
Effenty dan Bapak Deddy Daryanto, dan adik-adik yang saya kasihi, Icha,
Bella
dan
Dinda,
terimakasihatasdukungandoadansemangat
yang
telahdiberikanbaik moral maupun material dalampenyusunanskripsiini.
6. Teman-temantersayang, Eny, Ratih, Sonia, Anabel, Diah, Wiwik, Nia, Desak
dan
Risma
yang
selalumemberikansemangatdanmembantusaatdalamkesulitan.
7. Teman-temanseperjuanganriset analisis 2012, Vanadium Spectra yang terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat dan dukungan,
khususnya grup Antosianin “PSP” yaitu Gung Rias, Sonia, Ayu, Krisnawan,
Dewa dan Made yang selalu ada hampir setiap saat dan menjadi kawan
bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
iv
8. Teman-teman Beswan Djarum 30 Bali, Meci, Febri, Mia, Sasmita, Nana,
Arik, Indra dan Wintara, yang selalu menyemangati satu sama lain dan
menjadi sumber memotivasi diri penulis.
9. Sahabat yang jauh di Jakarta & Jogja, Auli, Fia, Inaya, dan Diana yang
walaupun jarang sekali bertemu tapi tetap menjadi sumber motivasi
kesayangan penulis.
10. Temen-temen super gercep KKN Nusa, Lola, Dyah, Cindy, Alit, Leonk, Kak
Dandy dan Edy yang selalu jadi menghibur dan memberikan semangat satu
sama lain dalam pengerjaan skripsi ini.
11. Keluarga besar Analisis Farmasi Udayana, para dosen serta laboran yang
selalu memberikan motivasi dan semangat saat penulis menghadapi kesulitan.
12. Semua teman-temanDioscuri Hygeia 2012 yang dengansemangatuntukbisa
lulus bersamamembuatpenulislebihterdorongmenyelesaikanskripsiini.
13. Semuapihak
yang
terlibatdantelahmembantupenulisdalampenyusunanskripsiini
yang
tidakdapatpenulissebutkansatu per satu.
Penulismenyadaribahwapenyusunanskripsiinimasihjauhdarisempurna.Untukitupe
nulismengharapkankritikdan
saran
darisemuapihak
yang
bersifatmembangunsehingga di masa yang akandatangdapatmenjadilebihbaik.
Penulisberharapsemogaskripsiinidapatbermanfaatbagisemuapihak
yang
membacanya.
Bukit Jimbaran, 11 Mei 2016
v
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii
KATA PENGANTAR ........................................................................................ iii
DAFTAR ISI ....................................................................................................... vi
DAFTAR TABEL ............................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xi
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH .......................................................... xii
ABSTRAK .......................................................................................................... xv
ABSTRACT ........................................................................................................ xvi
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 LatarBelakang ................................................................................ 1
1.2 RumusanMasalah ........................................................................... 3
1.3 TujuanPenelitian ............................................................................ 3
1.4 ManfaatPenelitian .......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Klasifikasi Ubi Jalar Ungu ............................................................. 5
2.2 AntosianinUbijalarUngu ................................................................ 6
2.2.1 SifatFisika Kimia AntosianindanAntosianidin ..................... 6
2.2.2 Identifikasi Antosianin dan Antosianidin Ubi jalar Ungu .... 8
2.3 Pemisahan Glikosida Antosianin dengan Metode Kromatografi ... 11
vii
2.3.1 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) Fase Balik ........ 11
2.3.2 Kromatografi Lapis Tipis KT (HPTLC) Fase Balik ............. 13
2.3.3 Kromatografi Kertas ............................................................. 14
2.4 Validasi dan Parameter Metode Pemisahan Kromatografi ............ 14
2.4.1
Capacityfactor.................................................................... 15
2.4.2
Plate number ...................................................................... 15
2.4.3
Resolusi .............................................................................. 16
2.4.4
Tailing factor ..................................................................... 17
2.4.5
Faktor Selektivitas ............................................................. 18
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian ..................................................................... 19
3.2 LokasidanWaktuPenelitian ............................................................ 19
3.3 Bahan Penelitian ............................................................................ 19
3.4 Alat Penelitian ................................................................................ 20
3.5 ProsedurPenelitian ......................................................................... 20
3.5.1 Determinasi Tanaman Ubi Jalar Ungu .................................. 22
3.5.2 Penyiapan Bahan Baku ......................................................... 22
3.5.3 Ekstraksi Ubi Jalar Ungu ...................................................... 22
3.5.4 Preparasi Sampel ................................................................... 23
3.5.5 Pengembangan Metode Pemisahan dengan HPTLCSpektrofotodensitometri C-18 ............................................... 21
3.5.6 Identifikasi Hasil Pemisahan................................................. 21
3.5.7 Analisis Data ......................................................................... 22
viii
3.6 SkemaUmumPenelitian ................................................................. 24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Determinasi Tanaman .................................................................... 25
4.2 Ekstraksi Umbi Ubi Jalar Ungu ..................................................... 26
4.3 Pemilihan FaseGerakMetodePemisahanSampeldengan HPTLCspektrofotodensitometri C-18 ........................................................ 27
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 38
5.2 Saran ............................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 39
LAMPIRAN ........................................................................................................ 43
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. SenyawaantosianidinhasilpemisahanolehTeraharaet al (2004) ........... 8
Tabel 2. Penafsiranspektrumpereaksigeser AlCl3 .............................................. 9
Tabel 3. Penafsiranwarnabercakdarisegistruktur flavonoid ............................... 10
Tabel 4. Senyawaantosianinhasilpemisahanmenggunakan HPLC C-18 ........... 12
Tabel 5. Hasilpemisahanantosianidindenganfasegerak BAW ........................... 14
Tabel 6. Hasil reaksi warna noda dengan reagen pereaksi................................. 30
Tabel 7. Nilai parameter kromatografi hasil pemisahan .................................... 37
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Umbi Ubi Jalar Ungu ..................................................................... 5
Gambar 2.
Struktur kimia antosianin ............................................................... 7
Gambar 3.
Strukturkimiaantosianidin .............................................................. 7
Gambar 4.
Spektrum antosianin ubi jalar ungu ............................................... 9
Gambar 5.
Hasilpemisahan yang diamatipadacahayavisibelsetelahpenyemprotan
diazotized sulfonamide .................................................................. 13
Gambar 6.
Perhitungan Nilai Tailing Factor ................................................... 18
Gambar 7.
Skema Umum Penelitian................................................................ 24
Gambar 8.
Hasil pemisahan fase gerak I, II dan III ......................................... 28
Gambar 9.
Spektrum antosianin umbi ubi jalar ungu dan spektrum noda hasil
pemisahan fase gerak I, II dan III .................................................. 29
Gambar 10. Pergeseran spektrum antosianin pada pita I ................................... 32
Gambar 11. Kompleks antara antosianindan Al3+ di posisi C3’ dan C4’ .......... 35
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Hasil determinasi tanaman ............................................................ 43
Lampiran 2. Dokmentasi penelitian ................................................................... 45
Lampiran 3. Perhitungan nilai resolusi (Rs) ...................................................... 46
Lampiran 4. Perhitungan nilai tailing factor (Tf) .............................................. 47
Lampiran 5. Perhitungan nilai plate count/plate number (PN) .......................... 49
Lampiran 6. Perhitungan nilai capacity factor dan faktor selektivitas .............. 51
xii
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH
Absorbansi
: Rasiologaritmikdariradiasi
dipaparkankesuatubahanterhadapradiasi
yang
yang
ditransmisikanmenembusbahan
Aglikon
: Komponen non gula dari suatu glikosida
Analit
: Zat kimia yang diukur atau diuji
Antidiabetik
: Agen yang mengontrol tingkat glukosa dalam darah
Antiinflamasi
: Agen penghilang radang
Antikarsinogenik
: Agen yang bersifat melawan agen pemicu kanker
Antimutagenik
: Agen yang bersifat mencegah mutasi
Antioksidan
: Agen seperti kelompok vitamin, mineral, enzim,
danrempah-rempah
yang
membantumelindungitubuhdariradikalbebas
Antitumor
: Agen pencegah pembentukan tumor
Bathokromik
: Pergeseran puncak absorbsi ke panjang gelombang
yang lebih besar
C-18
: Jenis fase diam kromatografi yang bersifat non polar
karena memiliki komponen atom karbon yang panjang
Cost effective
: Keefektifan biaya suatu analisis
Determinasi
: Penentuan, penetapan
Ekstrak
: Hasildari proses menyarisimplisia
Ekstraksi
: Proses menyari simplisia
xiii
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan
suatu
pelarut
yang
disebut
eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Glikosida
: Senyawa yang terdiri atas dua bagian senyawa, yaitu
gula dan non gula
Gugus
: Kelompok unsur kimia
Hepatoprotektif
: Bersifat melindungi organ hati
Herbal
: Terbuat atau berasal dari tumbuh-tumbuhan
Hidroksilasi
: Proses penambahan –OH sebagai suatu subtituen
senyawa kimia
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
In vitro
: Percobaan
yang
dilakukan
dalam
lingkungan
terkontrol, misal dalam tabung reaksi atau cawan petri
In vivo
: Percobaan yang dilakukan menggunakan keseluruhan
hidup organisme, menggunakan hewan coba
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Maserasi
: Cara ekstraksi sederhana dengan merendam sampel
simplisia dalam suatu pelarut, tanpa pemanasan,
selama 24 jam
xiv
Maserat
: Hasil penyarian maserasi
Metoksilasi
: Proses penambahan gugus metoksi (-CH3OH) sebagai
subtituen suatu senyawa kimia
Neuroprotektif
: Bersifat melindungi saraf
Polar
: Sifat suatu senyawa akibat adanya ikatan elektron, dan
memiliki muatan negatif di sebagian besar sisi
senyawa tersebut
Profiling
: Proses penentuan profil suatu bahan kimia atau bahan
alam dengan melihat bentuk kromatogram
Resolusi
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
elektromagnetik
prinsip
dengan
analit
interaksi
yang
radiasi
merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu hal, yang didokumentasikan
xv
P
PENGEM
MBANG
GAN METODE PEMISA
P
AHAN
ANTO
OSIANID
DIN DAR
RI EKST
TRAK UMBI
U
UBI JALA
AR
UN
NGU (Ipoomoea batatas L.) DENG
GAN ME
ETODE
RI C-18
HPTLC-SP
PEKTRO
OFOTOD
DENSIT
TOMETR
8
Skripssi
CLA
AUDIA PRIIMADEWI
1208505038
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKULTA
AS MATEM
MATIKA DA
AN ILMU PENGETAH
P
HUAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
i
LembarPengesahan
PENGEMBANGAN METODE PEMISAHAN
ANTOSIANIDIN DARI EKSTRAK UMBI UBI JALAR
UNGU (Ipomoea batatas L.) DENGAN METODE
HPTLC-SPEKTROFOTODENSITOMETRI C-18
Skripsi
Skripsiinidiajukansebagaisyaratuntukmemperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUdayan
a
Oleh
CLAUDIA PRIMADEWI
NIM. 1208505038
Menyetujui:
Pembimbing II
Pembimbing I
Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 198302132006042002
NIP. 196804201994021001
Mengesahkan:
KetuaJurusanFarmasi
FakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlam
Dr. rer. nat. I Made AgusGelgelWirasuta, M.Si., Apt.
NIP. 196804201994021001
ii
KATA PENGANTAR
PujisyukurpenulispanjatkankehadapanTuhan
Yang
MahaEsa,
karenaatasberkatdanrahmat-Nyapenulisdapatmenyelesaikanskripsi yang berjudul
“Pengembangan Metode Pemisahan Antosianidin dari Ekstrak Umbi Ubi Jalar
Ungu (Ipomoea batatas L.) dengan Metode HPTLC-spektrofotodensitometri C18” tepatpadawaktunya.
Penyusunanskripsiinitidakterlepasdaridukungan,
saran,
danbimbingandariberbagaipihak.Makadariitu,
padakesempataninipenulisinginpengucapkanterimakasihkepada:
1. Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt. selakudosenpembimbing I yang
denganpenuhperhatiantelahmemberikanmotivasi, semangat, bimbingan, dan
saran
dengansabarselamapenulismengikutipendidikan
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana, khususnyadalampenyusunanskripsiini.
2. Dr.
rer.
nat.
I
Made
Agus
Gelgel
selakudosenpembimbing
Wirasuta,
II
M.Si.,
Apt.
dan
selakuKetuaJurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUn
iversitasUdayana
semangat,
yang
denganpenuhperhatiantelahmemberikanmotivasi,
bimbingan,
dengansabarselamapenulismengikutipendidikan
iii
dan
saran
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana, khususnyadalampenyusunanskripsiini.
3. Drs.
Ida
Bagus
Made
Suaskara,
M.Si.,selakuDekanFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitas
Udayana.
4. Seluruhdosendanstafpegawai
di
JurusanFarmasiFakultasMatematikadanIlmuPengetahuanAlamUniversitasUd
ayana
yang
telahmemberikanbantuankepadapenulisselamapenyusunanskripsiini.
5. Keluarga, yaitu orang tua yang sangatsayasayangidanhormati, Ibu Ripih
Effenty dan Bapak Deddy Daryanto, dan adik-adik yang saya kasihi, Icha,
Bella
dan
Dinda,
terimakasihatasdukungandoadansemangat
yang
telahdiberikanbaik moral maupun material dalampenyusunanskripsiini.
6. Teman-temantersayang, Eny, Ratih, Sonia, Anabel, Diah, Wiwik, Nia, Desak
dan
Risma
yang
selalumemberikansemangatdanmembantusaatdalamkesulitan.
7. Teman-temanseperjuanganriset analisis 2012, Vanadium Spectra yang terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat dan dukungan,
khususnya grup Antosianin “PSP” yaitu Gung Rias, Sonia, Ayu, Krisnawan,
Dewa dan Made yang selalu ada hampir setiap saat dan menjadi kawan
bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
iv
8. Teman-teman Beswan Djarum 30 Bali, Meci, Febri, Mia, Sasmita, Nana,
Arik, Indra dan Wintara, yang selalu menyemangati satu sama lain dan
menjadi sumber memotivasi diri penulis.
9. Sahabat yang jauh di Jakarta & Jogja, Auli, Fia, Inaya, dan Diana yang
walaupun jarang sekali bertemu tapi tetap menjadi sumber motivasi
kesayangan penulis.
10. Temen-temen super gercep KKN Nusa, Lola, Dyah, Cindy, Alit, Leonk, Kak
Dandy dan Edy yang selalu jadi menghibur dan memberikan semangat satu
sama lain dalam pengerjaan skripsi ini.
11. Keluarga besar Analisis Farmasi Udayana, para dosen serta laboran yang
selalu memberikan motivasi dan semangat saat penulis menghadapi kesulitan.
12. Semua teman-temanDioscuri Hygeia 2012 yang dengansemangatuntukbisa
lulus bersamamembuatpenulislebihterdorongmenyelesaikanskripsiini.
13. Semuapihak
yang
terlibatdantelahmembantupenulisdalampenyusunanskripsiini
yang
tidakdapatpenulissebutkansatu per satu.
Penulismenyadaribahwapenyusunanskripsiinimasihjauhdarisempurna.Untukitupe
nulismengharapkankritikdan
saran
darisemuapihak
yang
bersifatmembangunsehingga di masa yang akandatangdapatmenjadilebihbaik.
Penulisberharapsemogaskripsiinidapatbermanfaatbagisemuapihak
yang
membacanya.
Bukit Jimbaran, 11 Mei 2016
v
Penulis
vi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii
KATA PENGANTAR ........................................................................................ iii
DAFTAR ISI ....................................................................................................... vi
DAFTAR TABEL ............................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xi
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH .......................................................... xii
ABSTRAK .......................................................................................................... xv
ABSTRACT ........................................................................................................ xvi
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 LatarBelakang ................................................................................ 1
1.2 RumusanMasalah ........................................................................... 3
1.3 TujuanPenelitian ............................................................................ 3
1.4 ManfaatPenelitian .......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Klasifikasi Ubi Jalar Ungu ............................................................. 5
2.2 AntosianinUbijalarUngu ................................................................ 6
2.2.1 SifatFisika Kimia AntosianindanAntosianidin ..................... 6
2.2.2 Identifikasi Antosianin dan Antosianidin Ubi jalar Ungu .... 8
2.3 Pemisahan Glikosida Antosianin dengan Metode Kromatografi ... 11
vii
2.3.1 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) Fase Balik ........ 11
2.3.2 Kromatografi Lapis Tipis KT (HPTLC) Fase Balik ............. 13
2.3.3 Kromatografi Kertas ............................................................. 14
2.4 Validasi dan Parameter Metode Pemisahan Kromatografi ............ 14
2.4.1
Capacityfactor.................................................................... 15
2.4.2
Plate number ...................................................................... 15
2.4.3
Resolusi .............................................................................. 16
2.4.4
Tailing factor ..................................................................... 17
2.4.5
Faktor Selektivitas ............................................................. 18
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian ..................................................................... 19
3.2 LokasidanWaktuPenelitian ............................................................ 19
3.3 Bahan Penelitian ............................................................................ 19
3.4 Alat Penelitian ................................................................................ 20
3.5 ProsedurPenelitian ......................................................................... 20
3.5.1 Determinasi Tanaman Ubi Jalar Ungu .................................. 22
3.5.2 Penyiapan Bahan Baku ......................................................... 22
3.5.3 Ekstraksi Ubi Jalar Ungu ...................................................... 22
3.5.4 Preparasi Sampel ................................................................... 23
3.5.5 Pengembangan Metode Pemisahan dengan HPTLCSpektrofotodensitometri C-18 ............................................... 21
3.5.6 Identifikasi Hasil Pemisahan................................................. 21
3.5.7 Analisis Data ......................................................................... 22
viii
3.6 SkemaUmumPenelitian ................................................................. 24
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Determinasi Tanaman .................................................................... 25
4.2 Ekstraksi Umbi Ubi Jalar Ungu ..................................................... 26
4.3 Pemilihan FaseGerakMetodePemisahanSampeldengan HPTLCspektrofotodensitometri C-18 ........................................................ 27
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 38
5.2 Saran ............................................................................................... 38
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 39
LAMPIRAN ........................................................................................................ 43
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. SenyawaantosianidinhasilpemisahanolehTeraharaet al (2004) ........... 8
Tabel 2. Penafsiranspektrumpereaksigeser AlCl3 .............................................. 9
Tabel 3. Penafsiranwarnabercakdarisegistruktur flavonoid ............................... 10
Tabel 4. Senyawaantosianinhasilpemisahanmenggunakan HPLC C-18 ........... 12
Tabel 5. Hasilpemisahanantosianidindenganfasegerak BAW ........................... 14
Tabel 6. Hasil reaksi warna noda dengan reagen pereaksi................................. 30
Tabel 7. Nilai parameter kromatografi hasil pemisahan .................................... 37
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Umbi Ubi Jalar Ungu ..................................................................... 5
Gambar 2.
Struktur kimia antosianin ............................................................... 7
Gambar 3.
Strukturkimiaantosianidin .............................................................. 7
Gambar 4.
Spektrum antosianin ubi jalar ungu ............................................... 9
Gambar 5.
Hasilpemisahan yang diamatipadacahayavisibelsetelahpenyemprotan
diazotized sulfonamide .................................................................. 13
Gambar 6.
Perhitungan Nilai Tailing Factor ................................................... 18
Gambar 7.
Skema Umum Penelitian................................................................ 24
Gambar 8.
Hasil pemisahan fase gerak I, II dan III ......................................... 28
Gambar 9.
Spektrum antosianin umbi ubi jalar ungu dan spektrum noda hasil
pemisahan fase gerak I, II dan III .................................................. 29
Gambar 10. Pergeseran spektrum antosianin pada pita I ................................... 32
Gambar 11. Kompleks antara antosianindan Al3+ di posisi C3’ dan C4’ .......... 35
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Hasil determinasi tanaman ............................................................ 43
Lampiran 2. Dokmentasi penelitian ................................................................... 45
Lampiran 3. Perhitungan nilai resolusi (Rs) ...................................................... 46
Lampiran 4. Perhitungan nilai tailing factor (Tf) .............................................. 47
Lampiran 5. Perhitungan nilai plate count/plate number (PN) .......................... 49
Lampiran 6. Perhitungan nilai capacity factor dan faktor selektivitas .............. 51
xii
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH
Absorbansi
: Rasiologaritmikdariradiasi
dipaparkankesuatubahanterhadapradiasi
yang
yang
ditransmisikanmenembusbahan
Aglikon
: Komponen non gula dari suatu glikosida
Analit
: Zat kimia yang diukur atau diuji
Antidiabetik
: Agen yang mengontrol tingkat glukosa dalam darah
Antiinflamasi
: Agen penghilang radang
Antikarsinogenik
: Agen yang bersifat melawan agen pemicu kanker
Antimutagenik
: Agen yang bersifat mencegah mutasi
Antioksidan
: Agen seperti kelompok vitamin, mineral, enzim,
danrempah-rempah
yang
membantumelindungitubuhdariradikalbebas
Antitumor
: Agen pencegah pembentukan tumor
Bathokromik
: Pergeseran puncak absorbsi ke panjang gelombang
yang lebih besar
C-18
: Jenis fase diam kromatografi yang bersifat non polar
karena memiliki komponen atom karbon yang panjang
Cost effective
: Keefektifan biaya suatu analisis
Determinasi
: Penentuan, penetapan
Ekstrak
: Hasildari proses menyarisimplisia
Ekstraksi
: Proses menyari simplisia
xiii
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan
suatu
pelarut
yang
disebut
eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Glikosida
: Senyawa yang terdiri atas dua bagian senyawa, yaitu
gula dan non gula
Gugus
: Kelompok unsur kimia
Hepatoprotektif
: Bersifat melindungi organ hati
Herbal
: Terbuat atau berasal dari tumbuh-tumbuhan
Hidroksilasi
: Proses penambahan –OH sebagai suatu subtituen
senyawa kimia
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
In vitro
: Percobaan
yang
dilakukan
dalam
lingkungan
terkontrol, misal dalam tabung reaksi atau cawan petri
In vivo
: Percobaan yang dilakukan menggunakan keseluruhan
hidup organisme, menggunakan hewan coba
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Maserasi
: Cara ekstraksi sederhana dengan merendam sampel
simplisia dalam suatu pelarut, tanpa pemanasan,
selama 24 jam
xiv
Maserat
: Hasil penyarian maserasi
Metoksilasi
: Proses penambahan gugus metoksi (-CH3OH) sebagai
subtituen suatu senyawa kimia
Neuroprotektif
: Bersifat melindungi saraf
Polar
: Sifat suatu senyawa akibat adanya ikatan elektron, dan
memiliki muatan negatif di sebagian besar sisi
senyawa tersebut
Profiling
: Proses penentuan profil suatu bahan kimia atau bahan
alam dengan melihat bentuk kromatogram
Resolusi
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
elektromagnetik
prinsip
dengan
analit
interaksi
yang
radiasi
merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu hal, yang didokumentasikan
xv