Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi n-Heksana dan serta Etilasetat Daun Ingul (Toona sinensis (Juss.) M.Roem) Terhadap Esherichia coli, Salmonella typhi dan Bacillus subtilis
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL,
FRAKSIn-HEKSANA DAN ETILASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP Escherichia coli,
Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MARIA MESTIKA DEWI SIPAYUNG
NIM 121501140
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
i
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL,
FRAKSIn-HEKSANA DAN ETILASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP Escherichia coli,
Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MARIA MESTIKA DEWI SIPAYUNG
NIM 121501140
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL,
FRAKSIn-HEKSANA DAN ETILASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP Escherichia coli,
Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
OLEH:
MARIA MESTIKA DEWI SIPAYUNG
NIM 121501140
Dipertahankan di HadapanPanitiaPengujiSkripsi
FakultasFarmasiUniversitas Sumatera Utara
PadaTanggal :18 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt
NIP 195709091985112001
Pembimbing II,
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt.
NIP 197812052010121004
Medan,
Agustus 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Pejabat Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan
rahmat, kasih, dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian
dan penulisan skripsi ini.
Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan
judul “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi n-Heksana dan serta
Etilasetat Daun Ingul (Toona sinensis (Juss.) M.Roem) Terhadap Esherichia coli,
Salmonella typhi dan Bacillus subtilis”.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku
Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, yang telah memberikan
fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Bapak Dr. Panal
Sitorus, M.Si., Apt., dan Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., yang telah membimbing dan
memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya
skripsi ini. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Bapak Drs. Suryadi Achmad,
M,Sc., Apt. dan Bapak Popi Patilaya, S.Si., M. Sc., Apt. selaku dosen penguji
yang telah memberikan kritik, saran, dan arahan kepada penulis dalam
menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Medan yang telah mendidik selama perkuliahan dan
Ibu Dra. Masria Lasma Tambunan, M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang
selalu memberikan bimbingan, perhatian dan motivasi kepada penulis selama
masa perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
iv
Universitas Sumatera Utara
terhingga kepada Ayahanda Alpensius Sipayung dan Ibunda Rugun Simanjuntak
yang telah memberikan cinta dan kasih sayang yang tidak ternilai dengan apapun,
pengorbanan baik materi maupun motivasi beserta doa yang tulus yang tidak
pernah berhenti. Abangku tercinta Andhica Sipayung, S.T serta seluruh keluarga
yang selalu mendoakan dan memberikan semangat hingga selesainya penulisan
skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan,
Penulis
Agustus 2016
Maria Mestika D Sipayung
NIM 121501140
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama
: Maria Mestika Dewi Sipayung
Nomor Induk Mahasiswa
: 121501140
Program Studi
: Reguler Farmasi
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi nHeksana dan Etilasetat Daun Ingul (Toona sinensis
(Juss. ) M.Roem) terhadap Escherichia coli,
Salmonella typhi dan Bacillus subtilis
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini
ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima
sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Agustus 2016
Yang membuat pernyataan,
Maria Mestika D. Sipayung
NIM 121501140
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL, FRAKSI
n-HEKSANA DAN ETIL ASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP
Escherichia coli, Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
ABSTRAK
Tanaman ingul (Toona sinensis (Juss.) M. Roem) merupakan salah satu
tanaman obat yang digunakan masyarakat sebagai obat diare, disentri, pengawet
minuman dan insektisida. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui
karakteristik simplisia, golongan senyawa dan aktivitas antibakteri ekstrak etanol,
fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun ingul terhadap Escherichia coli,
Salmonella typhidan Bacillus subtilis.
Serbuk simplisia dikarakterisasi dan diskrining fitokimia, dimaserasi
menggunakan pelarut etanol 80% dan ekstrak etanol difraksinasi menggunakan
pelarut n-heksana dan etilasetat. Selanjutnya ekstrak etanol, fraksi n-heksana dan
etilasetat diskrining dan dilakukan uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Escherichia coli, Salmonella typhidan Bacillus subtilismenggunakan metode
difusi agar dengan cakram kertas.
Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 7,86%, kadar sari larut air
24,52%, kadar sari larut etanol 24,62%, kadar abu total 4,65% dan kadar abu tidak
larut dalam asam 0,59%. Skrining fitokimia simplisia dan ekstrak etanol
menunjukkan adanya golongan senyawa flavonoid, saponin, tanin, glikosida dan
steroida/triterpenoida.
Fraksi
n-heksana
menunjukkan
adanya
steroida/triterpenoida dan pada fraksi etilasetat menunjukkan adanya flavonoid,
glikosida, saponin dan tanin. Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa
ekstrak etanol memberikan aktivitas antibakteri yang efektif pada konsentrasi 20
mg/ml pada bakteri Escherichia colimemberikan diameter hambat 14,80 mm,
pada konsentrasi 25 mg/ml pada bakteri Salmonella typhidengan diameter hambat
14,07 dan pada konsentrasi 50 mg/ml pada bakteri Bacillus subtilisdengan
diameter hambat 15,53 mm. Fraksi etilasetat memiliki efektivitas terbesar sebagai
antibakteri yaitu konsentrasi 5 mg/ml terhadap Bacillus subtilisdan Escherichia
coli dengan diameter hambat 14,37 mm dan 14,03 mm dan konsentrasi 20 mg/ml
pada Salmonella typhidengan diameter hambat 15,60 mm. Fraksi n-heksana
menunjukkan aktivitas antibakteri yang terlemah yaitu konsentrasi 300 mg/ml
efektif terhadap Bacillus subtilis dan Salmonella typhidengan diameter hambat
14,77 mm dan 14,40 mm dan pada konsentrasi 400 mg/ml terhadap bakteri
Escherichia coli dengan diameter hambat 14,50 mm.
Kata kunci: Toona sinensis (Juss.) M. Roem, antibakteri, daun Ingul
Universitas Sumatera Utara
ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT,
n-HEXANA AND ETHYLACETATE FRACTION OF
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) AGAINST
Escherichia coli, Salmonella typhi And Bacillus subtilis
ABSTRACT
Toona sinensis (Juss.) M. Roem is one of the medicinal plants which is
commonly applied to diarrhoeal, dysentery, drinks preservative and insecticide.
The purpose of this study is to find out the powder fineness characterization,
phytochemical screening and antibacterial activities of ethanol extract, n-hexana
fraction and ethylacetate fraction against Escherichia coli, Salmonella typhi and
Bacillus subtilis.
Powder of dried folium of ingul was characterized, phytochemical
screened and extracted by maceration using ethanol 80% and continued by
fractioning the etanol extract using n-hexane and ethylacetate. Ethanol extract, nhexane fraction and ethylacetate were screened and tested with antibacterial
activity test againstEscherichia coli, Salmonella typhi and Bacillus subtilis using
agar diffusion with papper disk.
The result of dried folium of ingul showed 7.86% of water content,
24.52% of water soluble extract, 24.62% of ethanol soluble extract, 4.65%of ash
total and 0.59% of acid insoluble ash. The pytochemical screening of powder
fineness and ethanol extract showed the presence of flavonoids, saponins, tannins,
glycocides and steroids/triterpenoids. The n-hexane fraction showed the presence
of steroids/triterpenoids and ethylacetate fraction showed the presence of
flavonoid, glycocides, saponins and tannin. The result of antibacterial activity test
showed that ethanol extract was effective at 20 mg/ml ofconcentration against
Escherichia coli with 14.80 mm of inhibit zone diameter, 25 mg/ml of
concentration against Salmonella typhi with 14.07 mm of inhibit zone diameter
and at 50 mg/ml of concentration against Bacillus subtilis with 15.53 mm of
inhibit zone diameter. The most effective antibacterial agent was ethylacetate
fraction that inhibited the growth of Bacillus subtilis at 5 mg/ml of concentration,
at 10 mg/ml of concentration against Escherichia coli and at 20 mg/ml of
concentrationagainst Salmonella typhi with inhibit zone diameter respectively at
14.37 mm, 14.03 mm and 15.60 mm. The n-hexane fraction showed the poorest
effectivity of antibacterial activity at 300 mg/mlof concentrationagainst Bacillus
subtilis and Salmonella typhi, and at 400 mg/ml of concentration against
Escherichia coliwith inhibit zonediameter respectively at 14.77 mm, 14.40 mm
and 14.50 mm.
Keyword: Toona sinensis (Juss.) M. Roem, antibacterial, Ingul leaves
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .......................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL ..................................................................................
ii
LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ...........................................
vi
ABSTRAK .................................................................................................
vii
ABSTRACT ...............................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ......................................................................................
xiv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..............................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ..........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ..................................................................
4
1.3 Hipotesis ...................................................................................
4
1.4 Tujuan Penelitian ......................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................
6
2.1 Uraian Tanaman ......................................................................
6
2.1.1 Morfologi tanaman .........................................................
6
2.1.2 Habitat tanaman ..............................................................
6
2.1.3 Sistematika tanaman .......................................................
7
2.1.4 Sinonim tanaman ............................................................
7
Universitas Sumatera Utara
2.1.5 Nama asing .....................................................................
8
2.1.6 Nama daerah ..................................................................
8
2.1.7 Manfaat tanaman ingul ...................................................
8
2.1.8 Kandungan kimia ............................................................
8
2.2 Uraian Kandungan Kimia ........................................................
8
2.3 Ekstraksi ..................................................................................
11
2.4 Fraksinasi ................................................................................
12
2.5 Bakteri .....................................................................................
13
2.5.1 Uraian umum ..................................................................
13
2.5.2 Salmonella typhi ..............................................................
15
2.5.3 Eschericia coli .................................................................
17
2.5.4 Bacillus subtilis ...............................................................
19
2.5.5 Morfologi bakteri ............................................................
19
2.5.5.1 Ukuran bakteri .....................................................
19
2.5.5.2 Bentuk bakteri .....................................................
20
2.5.6 Fase pertumbuhan mikroorganisme ................................
21
2.5.7 Pengukuran pertumbuhan mikroorganisme ....................
22
2.5.8 Metode pengujian aktivitas antibakteri ..........................
24
2.6 Diare ........................................................................................
26
BAB III METODE PENELITIAN .............................................................
29
3.1 Alat-alat ..................................................................................
29
3.2 Bahan-bahan ..........................................................................
29
3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi dan Media ................................
30
3.3.1 Pembuatan larutan pereaksi ...........................................
30
3.3.1.1 Pereaksi Mayer ..................................................
30
Universitas Sumatera Utara
3.3.1.2 Pereaksi natrium hidroksida ..............................
30
3.3.1.3 Pereaksi besi (III) klorida 1% ............................
30
3.3.1.4 Perekasi asam klorida 2 N .................................
30
3.3.1.5 Pereaksi Dragendorff .........................................
30
3.3.1.6 Pereaksi Bouchardat ..........................................
31
3.3.1.7 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ........................
31
3.3.1.8 Pereaksi Liebermann-Burchard .........................
31
3.3.1.9 Pereaksi Molisch ................................................
31
3.3.1.10 Pereaksi kloralhidrat ........................................
31
3.3.2 Pembuatan media ...........................................................
31
3.3.2.1 Media nutrient agar ............................................
31
3.3.2.2 Media nutrient broth ..........................................
32
3.3.2.3 Pembuatan agar miring ......................................
32
3.4 Sterilisai alat dan bahan ............................................................
32
3.5 Pengempulan dan pengolahan bahan tanaman .........................
33
3.5.1 Pengumpulan bahan tanaman ..........................................
33
3.5.2 Identifikasi tanaman ........................................................
33
3.5.3 Pembuatan simplisia ........................................................
33
3.6 Karakterisasi Simplisia .............................................................
33
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ...............................................
33
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ...............................................
33
2.6.3 Penetapan kadar air ..........................................................
34
3.6.4 Penetapan kadar sari larut dalam air ................................
34
3.6.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol ..........................
35
3.6.6 Penetapan kadar abu total ................................................
35
Universitas Sumatera Utara
3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam .....................
35
3.7 Skrining Fitokimia ....................................................................
36
3.7.1 Pemeriksaan flavonoida ...................................................
36
3.7.2 Pemeriksaan alkaloida .....................................................
36
3.7.3 Pemeriksaan saponin ......................................................
37
3.7.4 Pemeriksaan tanin ............................................................
37
3.7.5 Pemeriksaan glikosida .....................................................
37
3.7.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ..................................
38
3.8 Pembuatan Ekstrak ...................................................................
38
3.9 Pembuatan Frakasi n-Heksana dan Fraksi Etilasetat ................
39
3.10 Pembuatan Larutan Uji dengan Berbagai Konsentrasi ...........
39
3.11 Pembiakan Bakteri .................................................................
39
3.11.1 Pembuatan stok kultur bakteri ......................................
39
3.11.2 Peremajaan bakteri .......................................................
40
3.11.3 Pembuatan larutan standar McFarland No.0,5 .............
40
3.11.4 Penyiapan inokulum bakteri .........................................
40
3.12 Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................
40
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
42
4.1 Hasil Identifikasi Tanaman ....................................................
42
4.2 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi ............................................
42
4.3 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi ...............................................
43
4.4 Hasil Skrining Fitokimia ........................................................
44
4.5 Hasil Uji aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol (EEDI), Fraksi
Fraksi n-Heksana (FHDI) dan Fraksi Etilasetat (FEAI) daun
ingul ......................................................................................
45
4.5.1 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol ................
45
Universitas Sumatera Utara
4.5.2 Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana ............
46
4.5.3 Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat ..............
47
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .....................................................
50
5.1 Kesimpulan ............................................................................
50
5.2 Saran ......................................................................................
50
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
51
LAMPIRAN ...............................................................................................
54
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1
Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun ingul .......
42
4.2
Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak daun ingul .
44
4.3
Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri rata-rata ekstrak etanol .......................................................
46
Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri rata-rata fraksi n-heksana ...................................................
47
Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri rata-rata fraksi etilasetat .....................................................
48
4.4
4.5
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Koloni Salmonella typhi...............................................................
16
2.2
Koloni Eschericia coli..................................................................
18
2.3
Grafik pertumbuhan bakteri ........................................................
22
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Hasil identifikasi tanaman ........................................................
55
2
Tanaman, daun segar, simplisia dan serbuk simplisia ingul
(Toona sinensis) ........................................................................
56
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun ingul
(perbesaran 10x40) ...................................................................
59
4
Bagan pembuatan simplisia ......................................................
60
5
Bagan pembuatan ekstrak etanol daun ingul ............................
61
6
Bagan pembuatan fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun
ingul ..........................................................................................
62
7
Bagan pengujian aktivitas antibakteri ......................................
63
8
Perhitungan karakterisasi simplisia daun ingul ........................
64
9
Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, fraksi n
heksana dan fraksi etilasetat terhadap escherichia coli ............
67
Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, frakasi nheksana dan fraksi etilasetat terhadap salmonella typhi ...........
70
Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, frakasi nheksana dan fraksi etilasetat terhadap bacillus subtilis ............
73
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun ingul
terhadap escherichia coli, sallmonella typhi, dan
bacillussubtilis ...........................................................................
76
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana daun ingul
terhadap escherichia coli, sallmonella typhi, dan
bacillussubtilis ...........................................................................
79
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun ingul
terhadap escherichia coli, sallmonella typhi, dan
bacillussubtilis ...........................................................................
82
3
10
11
12
13
14
Universitas Sumatera Utara
FRAKSIn-HEKSANA DAN ETILASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP Escherichia coli,
Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MARIA MESTIKA DEWI SIPAYUNG
NIM 121501140
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
i
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL,
FRAKSIn-HEKSANA DAN ETILASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP Escherichia coli,
Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
MARIA MESTIKA DEWI SIPAYUNG
NIM 121501140
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL,
FRAKSIn-HEKSANA DAN ETILASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP Escherichia coli,
Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
OLEH:
MARIA MESTIKA DEWI SIPAYUNG
NIM 121501140
Dipertahankan di HadapanPanitiaPengujiSkripsi
FakultasFarmasiUniversitas Sumatera Utara
PadaTanggal :18 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt
NIP 195709091985112001
Pembimbing II,
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt.
NIP 197812052010121004
Medan,
Agustus 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Pejabat Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan
rahmat, kasih, dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian
dan penulisan skripsi ini.
Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dengan
judul “Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi n-Heksana dan serta
Etilasetat Daun Ingul (Toona sinensis (Juss.) M.Roem) Terhadap Esherichia coli,
Salmonella typhi dan Bacillus subtilis”.
Pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan
terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku
Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, yang telah memberikan
fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Bapak Dr. Panal
Sitorus, M.Si., Apt., dan Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., yang telah membimbing dan
memberikan petunjuk serta saran-saran selama penelitian hingga selesainya
skripsi ini. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Bapak Drs. Suryadi Achmad,
M,Sc., Apt. dan Bapak Popi Patilaya, S.Si., M. Sc., Apt. selaku dosen penguji
yang telah memberikan kritik, saran, dan arahan kepada penulis dalam
menyelesaikan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara Medan yang telah mendidik selama perkuliahan dan
Ibu Dra. Masria Lasma Tambunan, M.Si., Apt., selaku penasehat akademik yang
selalu memberikan bimbingan, perhatian dan motivasi kepada penulis selama
masa perkuliahan.
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
iv
Universitas Sumatera Utara
terhingga kepada Ayahanda Alpensius Sipayung dan Ibunda Rugun Simanjuntak
yang telah memberikan cinta dan kasih sayang yang tidak ternilai dengan apapun,
pengorbanan baik materi maupun motivasi beserta doa yang tulus yang tidak
pernah berhenti. Abangku tercinta Andhica Sipayung, S.T serta seluruh keluarga
yang selalu mendoakan dan memberikan semangat hingga selesainya penulisan
skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis
menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis
berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan,
Penulis
Agustus 2016
Maria Mestika D Sipayung
NIM 121501140
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama
: Maria Mestika Dewi Sipayung
Nomor Induk Mahasiswa
: 121501140
Program Studi
: Reguler Farmasi
Judul Skripsi
: Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol, Fraksi nHeksana dan Etilasetat Daun Ingul (Toona sinensis
(Juss. ) M.Roem) terhadap Escherichia coli,
Salmonella typhi dan Bacillus subtilis
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi ini
ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima
sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Agustus 2016
Yang membuat pernyataan,
Maria Mestika D. Sipayung
NIM 121501140
Universitas Sumatera Utara
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL, FRAKSI
n-HEKSANA DAN ETIL ASETAT DAUN INGUL
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) TERHADAP
Escherichia coli, Salmonella typhiDan Bacillus subtilis
ABSTRAK
Tanaman ingul (Toona sinensis (Juss.) M. Roem) merupakan salah satu
tanaman obat yang digunakan masyarakat sebagai obat diare, disentri, pengawet
minuman dan insektisida. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui
karakteristik simplisia, golongan senyawa dan aktivitas antibakteri ekstrak etanol,
fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun ingul terhadap Escherichia coli,
Salmonella typhidan Bacillus subtilis.
Serbuk simplisia dikarakterisasi dan diskrining fitokimia, dimaserasi
menggunakan pelarut etanol 80% dan ekstrak etanol difraksinasi menggunakan
pelarut n-heksana dan etilasetat. Selanjutnya ekstrak etanol, fraksi n-heksana dan
etilasetat diskrining dan dilakukan uji aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Escherichia coli, Salmonella typhidan Bacillus subtilismenggunakan metode
difusi agar dengan cakram kertas.
Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 7,86%, kadar sari larut air
24,52%, kadar sari larut etanol 24,62%, kadar abu total 4,65% dan kadar abu tidak
larut dalam asam 0,59%. Skrining fitokimia simplisia dan ekstrak etanol
menunjukkan adanya golongan senyawa flavonoid, saponin, tanin, glikosida dan
steroida/triterpenoida.
Fraksi
n-heksana
menunjukkan
adanya
steroida/triterpenoida dan pada fraksi etilasetat menunjukkan adanya flavonoid,
glikosida, saponin dan tanin. Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa
ekstrak etanol memberikan aktivitas antibakteri yang efektif pada konsentrasi 20
mg/ml pada bakteri Escherichia colimemberikan diameter hambat 14,80 mm,
pada konsentrasi 25 mg/ml pada bakteri Salmonella typhidengan diameter hambat
14,07 dan pada konsentrasi 50 mg/ml pada bakteri Bacillus subtilisdengan
diameter hambat 15,53 mm. Fraksi etilasetat memiliki efektivitas terbesar sebagai
antibakteri yaitu konsentrasi 5 mg/ml terhadap Bacillus subtilisdan Escherichia
coli dengan diameter hambat 14,37 mm dan 14,03 mm dan konsentrasi 20 mg/ml
pada Salmonella typhidengan diameter hambat 15,60 mm. Fraksi n-heksana
menunjukkan aktivitas antibakteri yang terlemah yaitu konsentrasi 300 mg/ml
efektif terhadap Bacillus subtilis dan Salmonella typhidengan diameter hambat
14,77 mm dan 14,40 mm dan pada konsentrasi 400 mg/ml terhadap bakteri
Escherichia coli dengan diameter hambat 14,50 mm.
Kata kunci: Toona sinensis (Juss.) M. Roem, antibakteri, daun Ingul
Universitas Sumatera Utara
ANTIBACTERIAL ACTIVITY TEST OF ETHANOL EXTRACT,
n-HEXANA AND ETHYLACETATE FRACTION OF
(Toona sinensis (Juss. ) M.Roem) AGAINST
Escherichia coli, Salmonella typhi And Bacillus subtilis
ABSTRACT
Toona sinensis (Juss.) M. Roem is one of the medicinal plants which is
commonly applied to diarrhoeal, dysentery, drinks preservative and insecticide.
The purpose of this study is to find out the powder fineness characterization,
phytochemical screening and antibacterial activities of ethanol extract, n-hexana
fraction and ethylacetate fraction against Escherichia coli, Salmonella typhi and
Bacillus subtilis.
Powder of dried folium of ingul was characterized, phytochemical
screened and extracted by maceration using ethanol 80% and continued by
fractioning the etanol extract using n-hexane and ethylacetate. Ethanol extract, nhexane fraction and ethylacetate were screened and tested with antibacterial
activity test againstEscherichia coli, Salmonella typhi and Bacillus subtilis using
agar diffusion with papper disk.
The result of dried folium of ingul showed 7.86% of water content,
24.52% of water soluble extract, 24.62% of ethanol soluble extract, 4.65%of ash
total and 0.59% of acid insoluble ash. The pytochemical screening of powder
fineness and ethanol extract showed the presence of flavonoids, saponins, tannins,
glycocides and steroids/triterpenoids. The n-hexane fraction showed the presence
of steroids/triterpenoids and ethylacetate fraction showed the presence of
flavonoid, glycocides, saponins and tannin. The result of antibacterial activity test
showed that ethanol extract was effective at 20 mg/ml ofconcentration against
Escherichia coli with 14.80 mm of inhibit zone diameter, 25 mg/ml of
concentration against Salmonella typhi with 14.07 mm of inhibit zone diameter
and at 50 mg/ml of concentration against Bacillus subtilis with 15.53 mm of
inhibit zone diameter. The most effective antibacterial agent was ethylacetate
fraction that inhibited the growth of Bacillus subtilis at 5 mg/ml of concentration,
at 10 mg/ml of concentration against Escherichia coli and at 20 mg/ml of
concentrationagainst Salmonella typhi with inhibit zone diameter respectively at
14.37 mm, 14.03 mm and 15.60 mm. The n-hexane fraction showed the poorest
effectivity of antibacterial activity at 300 mg/mlof concentrationagainst Bacillus
subtilis and Salmonella typhi, and at 400 mg/ml of concentration against
Escherichia coliwith inhibit zonediameter respectively at 14.77 mm, 14.40 mm
and 14.50 mm.
Keyword: Toona sinensis (Juss.) M. Roem, antibacterial, Ingul leaves
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .......................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL ..................................................................................
ii
LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ...........................................
vi
ABSTRAK .................................................................................................
vii
ABSTRACT ...............................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ......................................................................................
xiv
DAFTAR GAMBAR .................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..............................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ..........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ..................................................................
4
1.3 Hipotesis ...................................................................................
4
1.4 Tujuan Penelitian ......................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ....................................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................
6
2.1 Uraian Tanaman ......................................................................
6
2.1.1 Morfologi tanaman .........................................................
6
2.1.2 Habitat tanaman ..............................................................
6
2.1.3 Sistematika tanaman .......................................................
7
2.1.4 Sinonim tanaman ............................................................
7
Universitas Sumatera Utara
2.1.5 Nama asing .....................................................................
8
2.1.6 Nama daerah ..................................................................
8
2.1.7 Manfaat tanaman ingul ...................................................
8
2.1.8 Kandungan kimia ............................................................
8
2.2 Uraian Kandungan Kimia ........................................................
8
2.3 Ekstraksi ..................................................................................
11
2.4 Fraksinasi ................................................................................
12
2.5 Bakteri .....................................................................................
13
2.5.1 Uraian umum ..................................................................
13
2.5.2 Salmonella typhi ..............................................................
15
2.5.3 Eschericia coli .................................................................
17
2.5.4 Bacillus subtilis ...............................................................
19
2.5.5 Morfologi bakteri ............................................................
19
2.5.5.1 Ukuran bakteri .....................................................
19
2.5.5.2 Bentuk bakteri .....................................................
20
2.5.6 Fase pertumbuhan mikroorganisme ................................
21
2.5.7 Pengukuran pertumbuhan mikroorganisme ....................
22
2.5.8 Metode pengujian aktivitas antibakteri ..........................
24
2.6 Diare ........................................................................................
26
BAB III METODE PENELITIAN .............................................................
29
3.1 Alat-alat ..................................................................................
29
3.2 Bahan-bahan ..........................................................................
29
3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi dan Media ................................
30
3.3.1 Pembuatan larutan pereaksi ...........................................
30
3.3.1.1 Pereaksi Mayer ..................................................
30
Universitas Sumatera Utara
3.3.1.2 Pereaksi natrium hidroksida ..............................
30
3.3.1.3 Pereaksi besi (III) klorida 1% ............................
30
3.3.1.4 Perekasi asam klorida 2 N .................................
30
3.3.1.5 Pereaksi Dragendorff .........................................
30
3.3.1.6 Pereaksi Bouchardat ..........................................
31
3.3.1.7 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ........................
31
3.3.1.8 Pereaksi Liebermann-Burchard .........................
31
3.3.1.9 Pereaksi Molisch ................................................
31
3.3.1.10 Pereaksi kloralhidrat ........................................
31
3.3.2 Pembuatan media ...........................................................
31
3.3.2.1 Media nutrient agar ............................................
31
3.3.2.2 Media nutrient broth ..........................................
32
3.3.2.3 Pembuatan agar miring ......................................
32
3.4 Sterilisai alat dan bahan ............................................................
32
3.5 Pengempulan dan pengolahan bahan tanaman .........................
33
3.5.1 Pengumpulan bahan tanaman ..........................................
33
3.5.2 Identifikasi tanaman ........................................................
33
3.5.3 Pembuatan simplisia ........................................................
33
3.6 Karakterisasi Simplisia .............................................................
33
3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ...............................................
33
3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ...............................................
33
2.6.3 Penetapan kadar air ..........................................................
34
3.6.4 Penetapan kadar sari larut dalam air ................................
34
3.6.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol ..........................
35
3.6.6 Penetapan kadar abu total ................................................
35
Universitas Sumatera Utara
3.6.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam .....................
35
3.7 Skrining Fitokimia ....................................................................
36
3.7.1 Pemeriksaan flavonoida ...................................................
36
3.7.2 Pemeriksaan alkaloida .....................................................
36
3.7.3 Pemeriksaan saponin ......................................................
37
3.7.4 Pemeriksaan tanin ............................................................
37
3.7.5 Pemeriksaan glikosida .....................................................
37
3.7.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ..................................
38
3.8 Pembuatan Ekstrak ...................................................................
38
3.9 Pembuatan Frakasi n-Heksana dan Fraksi Etilasetat ................
39
3.10 Pembuatan Larutan Uji dengan Berbagai Konsentrasi ...........
39
3.11 Pembiakan Bakteri .................................................................
39
3.11.1 Pembuatan stok kultur bakteri ......................................
39
3.11.2 Peremajaan bakteri .......................................................
40
3.11.3 Pembuatan larutan standar McFarland No.0,5 .............
40
3.11.4 Penyiapan inokulum bakteri .........................................
40
3.12 Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................
40
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................
42
4.1 Hasil Identifikasi Tanaman ....................................................
42
4.2 Hasil Pemeriksaan Karakterisasi ............................................
42
4.3 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi ...............................................
43
4.4 Hasil Skrining Fitokimia ........................................................
44
4.5 Hasil Uji aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol (EEDI), Fraksi
Fraksi n-Heksana (FHDI) dan Fraksi Etilasetat (FEAI) daun
ingul ......................................................................................
45
4.5.1 Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol ................
45
Universitas Sumatera Utara
4.5.2 Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana ............
46
4.5.3 Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat ..............
47
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .....................................................
50
5.1 Kesimpulan ............................................................................
50
5.2 Saran ......................................................................................
50
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
51
LAMPIRAN ...............................................................................................
54
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1
Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun ingul .......
42
4.2
Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak daun ingul .
44
4.3
Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri rata-rata ekstrak etanol .......................................................
46
Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri rata-rata fraksi n-heksana ...................................................
47
Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan
bakteri rata-rata fraksi etilasetat .....................................................
48
4.4
4.5
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Koloni Salmonella typhi...............................................................
16
2.2
Koloni Eschericia coli..................................................................
18
2.3
Grafik pertumbuhan bakteri ........................................................
22
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Hasil identifikasi tanaman ........................................................
55
2
Tanaman, daun segar, simplisia dan serbuk simplisia ingul
(Toona sinensis) ........................................................................
56
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun ingul
(perbesaran 10x40) ...................................................................
59
4
Bagan pembuatan simplisia ......................................................
60
5
Bagan pembuatan ekstrak etanol daun ingul ............................
61
6
Bagan pembuatan fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun
ingul ..........................................................................................
62
7
Bagan pengujian aktivitas antibakteri ......................................
63
8
Perhitungan karakterisasi simplisia daun ingul ........................
64
9
Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, fraksi n
heksana dan fraksi etilasetat terhadap escherichia coli ............
67
Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, frakasi nheksana dan fraksi etilasetat terhadap salmonella typhi ...........
70
Data hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol, frakasi nheksana dan fraksi etilasetat terhadap bacillus subtilis ............
73
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun ingul
terhadap escherichia coli, sallmonella typhi, dan
bacillussubtilis ...........................................................................
76
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana daun ingul
terhadap escherichia coli, sallmonella typhi, dan
bacillussubtilis ...........................................................................
79
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun ingul
terhadap escherichia coli, sallmonella typhi, dan
bacillussubtilis ...........................................................................
82
3
10
11
12
13
14
Universitas Sumatera Utara