POTENSI ANGKAK KO-KULTUR Saccharomyces cerevisiae TINGGI LOVASTATIN SEBAGAI AGEN TERAPI TIKUS HIPERKOLESTEROLEMIA The Potential of High Lovastatin Co-Culture Angkak S. cerevisiae as Therapy Agent for Wistar with Hypercholesterolemia

  

POTENSI ANGKAK KO-KULTUR Saccharomyces cerevisiae TINGGI LOVASTATIN

SEBAGAI AGEN TERAPI TIKUS HIPERKOLESTEROLEMIA

The Potential of High Lovastatin Co-Culture Angkak S. cerevisiae as Therapy

Agent for Wistar with Hypercholesterolemia

  1 1*

  Elok Zubaidah , Rebecca Oktanesia 1) Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, FTP Universitas Brawijaya Malang

  Jl. Veteran, Malang 65145

• Penulis Korespondensi, email:

  

ABSTRAK

  Angkak memiliki potensi menurunkan hiperkolesterolemia karena mengandung lovastatin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah pemberian angkak ko-kultur S.

  

cerevisiae berpengaruh terhadap penurunan kadar hiperkolesterolemia tikus wistar, dengan

  metode True Experimental Design: Pre and Post Test Control Group Desaign yang terdiri dari 4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol. Analisis data dilakukan menggunakan

  

Analysis of Varian (ANOVA) dan dilanjut menggunakan uji lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT)

dengan selang kepercayaan 5%. Hasil penelitian menunjukkan angkak ko-kultur S.

cerevisiae mampu menurunkan total kolesterol menjadi 79.15 mg/dl, kadar LDL menjadi 13.5

  mg/dl, dan trigliserida darah menjadi 42 mg/dl, serta menaikkan kadar HDL darah menjadi 57.75 mg/dl. Kata kunci: Angkak, Ko-kultur S. cerevisiae, Kolesterol, Lovastatin

  

ABSTRACT

Angkak has the potential to reduce hypercholesterolemic because it contains

lovastatin. This research aims to determine whether the administration of co-culture Angkak

  

S. cerevisiae effect on decreased levels of hypercholesterolemic wistar using True

Experimental Design: Pre and Post Test Control Group Design method that consists of 4

treatment groups. The data analysis is done using the Analysis of variant (ANOVA) method

and continued by using Least Significant Difference (LSD) test with the confidence interval

(CI) of 5%. The result of the research showed that Angkak with Saccharomyces cerevisiae

co-culture capable of lowering total cholesterol level to 79.15 mg/dl, the LDL level to 13.5

mg/dl, and blood triglyceride to 42 mg/dl, and increase the blood HDL level to 57.75 mg/dl. Keywords: Angkak, Cholesterol, Lovastatin, S. cerevisiae Co-culture

  

PENDAHULUAN

  Hiperkolesterol yaitu suatu kondisi yang ditandai dengan peningkatan kadar Low

  

Density Lipoprotein (LDL) disertai peningkatan kadar trigliserida dan kadar High Density

Lipoprotein (HDL) yang terlalu rendah [1]. LDL disebut juga sebagai kolesterol jahat karena

  kolesterol dalam LDL mudah melekat pada pembuluh darah yang menyebabkan penumpukan lemak dan lambat-laun akan mengeras (membentuk plak) sehingga terjadi penyumbatan. Kelebihan kolesterol dalam darah dapat mengakibatkan penyakit jantung dan stroke. Upaya untuk mencegah peningkatan kadar kolesterol mulai banyak mendapat perhatian salah satunya pengobatan alami menggunakan angkak.

  Angkak atau red fermented rice merupakan hasil fermentasi beras dengan menggunakan kapang Monascus purpureus. Salah satu metabolit sekunder yang dihasilkan selama proses fermentasi angkak adalah monakolin K yang dikenal dengan lovastatin [2]. Lovastatin merupakan senyawa aktif penurun kolesterol dimana senyawa lovastatin akan menghambat pembentukan mevalonat pada sintesis kolesterol. Pengobatan dengan angkak lebih aman dibandingkan dengan obat golongan statin serta harga yang lebih ekonomis.

  Penambahan ko-kultur Saccharomyces cerevisiae menghasilkan alkohol selama fermentasi sehingga dapat menginduksi pembentukan lovastatin lebih banyak. Penelitian Kartawijaya dan Zubaidah [3], membuktikan bahwa penambahan ko-kultur Saccharomyces

  

cerevisiae mampu meningkatkan kadar lovastatin lebih tinggi dibandingkan angkak tanpa ko-

  kultur. Belum diketahui apakah dengan pemberian angkak ko-kultur Saccharomyces

  

cerevisiae mampu menurunkan kadar kolesterol. Penelitian kali ini dilakukan dengan uji in

vivo untuk mengetahui pengaruh pemberian angkak ko-kultur terhadap penurunan kadar

  total kolesterol tikus wistar.

  

BAHAN DAN METODE

Mikroorganisme

  Kultur Monascus purpureus dan Saccharomyces cerevisiae diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Pangan, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya.

  Bahan

  Bahan yang digunakan adalah comfeed PAR-S 50%, tepung terigu 25%, kuning telur 5%, asam kolat 0.15%, minyak kelapa 1%, minyak kambing 10%, minyak babi 9.30%, air, beras IR36, bekatul, tepung beras, NH4NO3, KH2PO4, MgSO4.7H2O, 0.25 M KOH, 0.1 M HCl, akuades, pepton glucose yeast extract agar (PGYA), metanol 96%, asetonitril, buffer Na-sitrat pH 3 and buffer Na-fosfat pH 7.

  Alat

  Alat yang digunakan adalah glassware, gelas arloji, neraca analitik (Mettler Toledo), pH meter (WTW), autoklaf (Tommy High Preasure Steam Sterilizer), LAF, mikropipet (AVI- TECH), incubator (WTB Binder), oven kering, spektrofotometer (Jenway 6305), color reader (Konica Minolta CR-10), rotary shaker (Lab Companion SI-600R), kandang, bak plastik, sonde, jarum suntik 5ml, tabung ependopt.

  Desain Penelitian

  Pada rancangan penelitian ini terdapat pemberian 4 perlakuan dengan 1 kontrol : Kontrol negatif (P0) : pemberian diet normal Kontrol positif (P1) : pemberian diet tinggi lemak Perlakuan 1 (P2) : pemberian diet tinggi lemak + angkak Perlakuan 2 (P3) : pemberian diet tinggi lemak + angkak ko-kultur Perlakuan 3 (P4) : pemberian diet tinggi lemak + angkak pasaran

  Tahapan Penelitian Tahapan penelitian meliputi pembuatan starter angkak, pembuatan inokulum S. cerevisiae, pembuatan angkak dan peningkatan kadar kolesterol.

1. Pembuatan Starter Angkak

  Pembuatan starter cair dilakukan dengan melarutkan tepung beras 4% (b/v), NH4NO3 0.15% (b/v), KH2PO4 0.25% (b/v), MgSO4.7H2O 0.1% (b/v) dalam 100 mL akuades kemudian pH larutan medium diatur hingga mencapai pH 6.0 dengan 0.25 M KOH atau 0.1 M HCl. Media kemudian disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit kemudian didinginkan hingga suhu ± 35°C. Kedalam media kemudian diinokulasikan 2 ose spora M. purpureus berusia 1 minggu dan diinkubasi selama 7 hari.

  2. Pembuatan Inokulum S. cerevisiae

  Biakan agar miring PGYA S. cerevisiae berumur 48 jam ditambah dengan 2.5 mL akuades steril kemudian digores sampai biakan terlepas sehingga diperoleh suspensi biakan

  

S. cerevisiae. Untuk memperoleh inokulum dengan konsentrasi yang lebih rendah dilakukan

pengenceran menggunakan akuades steril.

  3. Pembuatan Angkak

  Pembuatan angkak dilakukan dengan merendam beras selama 8 jam dalam akuades dengan perbandingan 1:1 (b/v) dan ditambah bekatul dengan proporsi 5% (b/b) dari berat total. Dilakukan penambahan larutan nutrien dengan komposisi 4% tepung beras (b/v), 0.15% NH4NO3 (b/v), 0.25% KH2PO4 (b/v), 0.10% MgSO4.7H2O (b/v) dan 0.10% MSG (b/v) dalam 12.50 ml akuades dan diatur pH 6.0 dengan 0.25 M KOH atau 0.1 M HCl. Medium fermentasi yang telah ditambah larutan nutrien disterilisasi dengan autoklaf 121°C selama 15 menit. Setelah selesai sterilisasi, ditunggu suhu medium sampai ± 35°C kemudian diinokulasi 4 mL starter angkak. Pada hari ke-8 fermentasi ditambah dengan 2.50 ml inokulum S. cerevisiae. Inkubasi dilanjutkan sampai hari ke-14 kemudian dikeringkan dalam oven suhu 70°C selama 24 jam dan dihancurkan dengan blender sehingga diperoleh serbuk angkak.

  4. Pembuatan Pakan

  Bahan-bahan dicampurkan dengan komposisi, antara lain : comfeed PAR-S 67%, Tepung terigu 33%, dan air secukupnya untuk diet normal sedangkan untuk komposisi diet tinggi lemak, antara lain : comfeed PAR-S 50%, tepung terigu 25%, kuning telur 5%, asam kolat 0.15%, minyak kelapa 1%, minyak kambing 10%, minyak babi 9.30% dan air secukupnya.

  Prosedur Analisis

  Analisis yang dilakukan meliputi analisis intensitas pigmen merah, kadar lovastatin, derajat kemerahan (a*) dan kecerahan (L*). Perlakuan kemudian dilanjutkan dengan pemberian pada tikus untuk uji penurunan kadar kolesterol.

  Analisis Intensitas Pigmen Merah

  Serbuk angkak ditimbang 0.05 gram dan ditambahkan dengan metanol 96% sebanyak 10 mL. Larutan kemudian diinkubasi dalam shaker dengan kecepatan 120 rpm selama 24 jam. Kemudian disaring dengan kertas saring dan filtrat diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 500 nm.

  Analisis Kadar Lovastatin Angkak

  5 gram serbuk angkak dilarutkan dalam 25 mL etil asetat dan diinkubasi pada shaker 180 rpm pada suhu 70°C selama 1.5 jam. Campuran kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 8 menit kemudian filtrat diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 237 nm.

  Cara Pemberian Angkak

  Serbuk angkak ditimbang sebesar 0.40 g dan dilakukan pengenceran dengan ditambahkan aquades sebesar 2.50 ml, kemudian direbus hingga diperoleh 2 ml aquadest. Angkak diberikan menggunakan metode sonde. Pengenceran angkak dilakukan setiap hari agar tidak terjadi reaksi hidrolisis zat dalam angkak.

  Analisis Profil Lipid

  Pengambilan sampel darah dilakukan dengan membius binatang coba, kemudian dibedah dan diambil darahnya dari jantung menggunakan spet dan jarum. Pengambilan dilakukan di Laboratorium Farmakologi. Pengambilan data dilakukan dengan mengukur kadar total kolesterol, HDL (Hight Density Lipoprotein), LDL (Low Density Lipoprotein), dan trigliserida serum darah tikus. Untuk pengukuran kandungan lipid darah diperiksa di Laboratorium Klinik Universitas Brawijaya Malang.

  Analisis Data

  Data yang diperoleh dari hasil penelitian dianalisis statistik menggunakan Analysis of

  

Varian (ANOVA) dan apabila dari hasil menunjukkan perbedaan maka diuji lanjut dengan

menggunakan uji lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT) dengan selang kepercayaan 5%.

HASIL DAN PEMBAHASAN

1. Analisis Intensitas Pigmen Merah

  Hasil penelitian intensitas pigmen merah serbuk angkak memiliki nilai antara 1.54- 5.16. Hasil intensitas pigmen merah dapat dilihat pada Gambar 1.

  Gambar 1. Intensitas Pigmen Merah Serbuk Angkak, Angkak bekatul dan

  

S.cerevisiae, dan Angkak Pasaran

  Hasil intensitas pigmen merah tertinggi ditunjukkan oleh serbuk angkak bekatul dan

  

S. cerevisiae yaitu sebesar 5.12, sedangkan hasil intensitas pigmen terendah ditunjukan oleh

  serbuk angkak pasaran yaitu sebesar 1.54. Penambahan ko-kultur S. cerevisiae selama masa fermentasi mampu meningkatkan biomassa sel dan pigmen merah yang paling besar, selain itu hal yang dapat menyebabkan peningkatan pigmen merah yaitu adanya enzim glukoamilase. S. cerevisiae menghasilkan enzim glukoamilase yang akan membantu memecah pati menjadi glukosa dan etanol. Glukosa yang terbentuk mengalami dekarboksilasi oksidatif membentuk asetil Ko-A dan malonil Ko-A. Asetil Ko-A dan malonil Ko-A yang terbentuk itulah yang akan dimanfaatkan untuk pembentukan pigmen [4].

2. Analisis Kadar Lovastatin

  Hasil lovastatin larutan serbuk angkak antara 9.54 hingga 15.01 mg/100 ml. Hasil rerata kadar lovastatin dapat dilihat pada Gambar 2. Hasil kadar lovastatin tertinggi ada pada perlakuan angkak bekatul dan S. cerevisiae sebesar 15.01 mg/100 ml. Peningkatan kadar lovastatin pada perlakuan tersebut dikarenakan adanya penambahan bekatul dan S. cerevisiae pada fermentasi angkak. Kartawijaya dan Zubaidah [3], juga menyatakan bahwa penambahan ko-kultur S. cerevisiae

  5

  pada hari ke-8 fermentasi dengan konsentrasi 10 cfu/ml merupakan waktu yang optimum dalam menghasilkan pigmen merah dan kadar lovastatin. S. cerevisiae akan menghasilkan enzim glukoamilase dan etanol. Glukoamilase mampu memecahkan pati menjadi glukosa dan etanol yang dapat dikonversi menjadi glukosa dapat digunakan sebagai bahan awal pembentukan pigmen merah oleh Monascus purpureus. Etanol yang berlebih dapat menghambat pertumbuhan dan metabolisme sel Monascus purpureus.

  Gambar 2. Kadar Lovastatin Serbuk Angkak, Angkak bekatul dan S. cerevisiae, dan Angkak Pasaran

  3. Derajat Kecerahan (L*)

  Derajat kecerahan (L*) memiliki nilai yang berkisar antara 37.27-41.53. Grafik derajat kecerahan (L*) dapat dilihat pada Gambar 3.

  Gambar 3. Derajat Kecerahan (L*) Serbuk Angkak, Angkak bekatul dan S. cerevisiae, dan Angkak Pasaran

  Derajat kecerahan (L*) terendah terdapat pada serbuk angkak dengan penambahan bekatul dan S. cerevisiae sebesar 37.27. Nilai derajat kecerahan (L*) pada setiap perlakuan dipengaruhi oleh intensitas pigmen yang dihasilkan, dimana semakin tinggi intensitas pigmen yang dihasilkan maka derajat kecerahan (L*) akan semakin rendah. Semakin tinggi intensitas pigmen maka warna akan menjadi lebih pekat sehingga derajat kecerahan menjadi semakin menurun, sebaliknya jika intensitas menurun maka derajat kecerahan akan meningkat [5].

  4. Derajat Kemerahan (a*)

  Nilai derajat kecerahan (a*) pada semua perlakuan angkak berkisar antara 12.00- 17.00. Grafik derajat kecerahan (a*) dapat dilihat pada Gambar 4. Nilai derajat kemerahan (a*) angkak bekatul dan S. cerevisiae sebesar 17.00. Nilai derajat kemerahan (a*) dipengaruhi oleh intensitas pigmen merah yang dihasilkan. Semakin tinggi intensitas pigmen yang dihasilkan maka derajat kemerahan akan semakin tinggi. Derajat kemerahan (a*) juga dipengaruhi oleh pergantian atom oksigen oleh gugus

• –NH menyebabkan terjadinya perubahan warna dan terbentuklah warna merah [6].

Gambar 4. Derajat Kemerahan (a*) Serbuk Angkak, Angkak bekatul dan S. cerevisiae, dan Angkak Pasaran

  5. Kolesterol Total

  Kolesterol merupakan senyawa utama penyebab kondisi hiperkolesterol. Perubahan rerata kadar total kolesterol setiap minggu terdapat pada Gambar 5.

  Gambar 5. Kadar Total Kolesterol Tikus Sebelum dan Sesudah Perlakuan Pemberian Angkak

  Hasil analisis kelompok perlakuan angkak bekatul dan S. cerevisiae mengalami penurunan tertinggi sebesar 117.41 mg/dl. Penambahan ko-kultur S.cerevisiae mampu meningkatkan kadar pigmen dan lovastatin hasil metabolit sekunder Monascus purpureus sehingga memiliki kemampuan dalam menurunkan kadar kolesterol. Lovastatin merupakan inhibitor yang berkompetitif terhadap enzim HMG-KoA (3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA) reduktase [7]. HMG-KoA reduktase merupakan enzim utama yang mendukung sintesis kolesterol dalam hati dengan cara berikatan dengan HMG-KoA membentuk mevalonat. Ketika lovastatin tersedia dalam jumlah yang besar maka HMG-KoA akan berikatan dengan lovastatin sehingga tidak akan berikatan dengan HMG-KoA reduktase dan tidak membentuk mavalonat serta mampu mereduksi sintesis kolesterol.

  6. LDL (Low Density Lipoprotein)

  LDL (Low Density Lipoprotein) atau yang biasa dikenal dengan lemak jahat adalah lipoprotein yang merupakan gabungan molekul lemak dan protein yang disintesa dihati, sehingga sangat berpengaruh pada penyakit jantung koroner. Grafik rerata kadar LDL dapat dilihat pada Gambar 6.

  Gambar 6. Kadar LDL (Low Density Lipoprotein) Tikus Sebelum dan Sesudah Perlakuan Pemberian Angkak Perlakuan

  Penurunan kadar total LDL kelompok perlakuan dengan penambahan angkak tertinggi terdapat pada kelompok perlakuan angkak bekatul dan S. cerevisiae yaitu 122.00 mg/dl. adanya penambahan ko-kultur S. cerevisiae pada angkak dapat membantu pertumbuhan Monascus purpureus dalam menghasilkan metabolit sekunder salah satunya adalah senyawa lovastatin yang dapat menurunkan LDL dalam tubuh. Lovastatin bekerja dengan naiknya katabolisme dan menghambat sintesis LDL sehingga LDL menurun, kolesterol total juga akan menurun dan meningkatkan HDL. Karena afinitasnya yang kuat terhadap enzim, semua efektif berpacu menghambat HMG-KoA reduktase dalam sintesis kolesterol. Dengan menghambat sintesis kolesterol maka lovastatin akan menghabiskan simpanan kolesterol [8]. Hasil akhir adalah penurunan kolesterol karena sintesis berkurang dan LDL menurun.

7. HDL (High Density Lipoprotein)

  HDL (High Density Lipoprotein) atau yang biasa dikenal dengan lemak baik adalah lipoprotein yang memiliki berat jenis yang tinggi. Secara umum, semakin tinggi kadar HDL dalam darah maka semakin besar kemampuan dalam mengangkut kolesterol jahat dan mencegah terjadinya penimbunan kolesterol yang membentuk plak [2]. Kadar HDL dapat dilihat pada Gambar 7.

  Gambar 7. Kadar HDL (High Density Lipoprotein) Tikus Sebelum dan Sesudah Perlakuan Pemberian Angkak Perlakuan

  Peningkatan nilai kadar HDL (High Density Lipoprotein) terbesar ada pada kelompok perlakuan angkak bekatul dan S. cerevisiae yang memiliki nilai HDL (High Density

  

Lipoprotein) tertinggi yaitu sebesar 57.25 mg/dl. Semakin rendah kadar LDL, maka kadar

  HDL akan semakin tinggi. HMG KoA reduktase yang merupakan enzim utama yang mendukung sintesis kolesterol dalam hati dengan cara berikatan dengan HMG KoA membentuk mevalonat. Ketika lovastatin tersedia dalam jumlah yang lebih besar maka HMG KoA reduktase akan berikatan dengan lovastatin sehingga tidak akan berikatan dengan HMG KoA reduktase dan tidak membentuk mevalonat serta mampu menghambat sintesis kolesterol [7].

  8. Kadar Trigliserida

  Perubahan rerata kadar trigliserida setelah pemberian perlakuan angkak bekatul dan S. cerevisiae pada penelitian ini dapat dilihat pada Gambar 8.

  Gambar 8. Kadar Trigliserida Tikus Sebelum dan Sesudah Perlakuan Pemberian Angkak Perlakuan Penurunan kadar trigliserida tertinggi ditunjukkan oleh angkak bekatul dan S.

  

cerevisiae sebesar 70.85 mg/dl. Hal ini dikarenakan angkak dengan penambahan bekatul

  dan S. cerevisiae mengandung kadar lovastatin yang lebih tinggi dibandingkan dengan kadar lovastatin pada angkak dan angkak pasaran. Penumpukan darah tidak hanya berdasarkan kadar LDL saja, tetapi juga kadar HDL, kadar kolesterol total dan trigliserida. Meningkatnya kadar trigliserida dalam darah juga dapat meningkatkan kadar kolesterol [9]. Semakin tinggi kadar lovastatin pada angkak maka semakin tinggi kemampuan menurunkan kadar kolesterol dalam tubuh.

  9. Pengaruh Pakan Terhadap Berat Badan Tikus Hiperkolesterolemia

  Rerata perubahan berat badan tikus selama masa percobaan dapat dilihat pada Gambar 9.

  Gambar 9. Berat Badan Tikus Selama Masa Percobaan Berat badan tikus paling rendah adalah tikus dengan perlakuan pemberian angkak bekatul dan S. cerevisiae yaitu sebesar 153 gram. Perbedaan berat badan tikus disebabkan karena jumlah makanan yang dikonsumsi berbeda. Semakin tinggi konsumsi pakan perhari maka akan semakin tinggi berat badan tikus. Faktor lain yang mampu mempengaruhi penurunan berat badan yaitu pemberian komposisi pakan perlakuan. Berikut merupakan rerata jumlah konsumsi pakan dapat dilihat pada Gambar 10.

  Gambar 10. Konsumsi Pakan Tikus Selama Masa Percobaan Besar konsumsi pakan untuk angkak dengan penambahan bekatul dan ko-kultur menurun 7 gram yang semula 27 gram menjadi 20 gram. Penurunan rerata konsumsi pakan dengan penambahan angkak perlakuan karena adanya perbedaan rasa pakan yang sedikit pahit akibat penambahan angkak perlakuan. Semakin tinggi tingkat rasa pahit pakan, semakin rendah jumlah konsumsi pakan tikus percobaan.

  

SIMPULAN

  Angkak terbukti memiliki kemampuan menurunkan total kolesterol, kadar LDL dan trigliserida darah, serta menaikkan kadar HDL darah. Kelompok angkak dengan penambahan bekatul dan Saccharomyces cerevisiae merupakan kelompok dengan kemampuan perbaikan profil lipid paling baik. Kelompok angkak bekatul dan Saccharomyces

  

cerevisiae secara nyata mampu menurunkan total kolesterol menjadi 79.15 mg/dl, kadar

  LDL menjadi 13.50 mg/dl, dan trigliserida darah menjadi 42 mg/dl, serta menaikkan kadar HDL darah menjadi 57.75 mg/dl. Kandungan lovastatin pada angkak secara optimal memperbaiki nilai profil lipid. Kelompok angkak dengan penambahan bekatul dan

  Saccharomyces cerevisiae menghasilkan lovastatin paling tinggi diantara jenis angkak lain.

  

DAFTAR PUSTAKA

1) Soeharto, I. 2004. Serangan Jantung dan Stroke. Gramedia Pustaka Umum. Jakarta.

  78,144-153, 157-165, 279, 287-290 2) Kasim, E., Y. Kurniawati and N. Nurhidayat. 2006. Pemanfaatan Isolat Lokal Monascus

  purpureus untuk Menurunkan Kolesterol Darah pada Tikus Putih Galur Sprangue Dawley. Biodiversitas. 7(2): 123-126

  3) Kartawijaya, Medicia dan Elok Zubaidah. 2014. Efek Ko-Kultur Monascus Purpureus dan

  Saccharomyces Cerevisiae Selama Proses Fermentasi Terhadap Intensitas Pigmen Dan

  Kadar Lovastatin Angkak. Jurnal Pangan dan Agroindustri, 2 (1) : 7-17. Vol.2 No.1 p.7-

17. Universitas Brawijaya. Malang

  4) Juzlova, P, Martinkova, L, Lozinsku, J and Machaek, F. 1994. Ethanol as Substrate for Pigment Production by the Fungus Monascus purpureus. Enzyme Microb. Technol. 16: 996-1001.

  5) Mardhatila, M. 2006. Pembuatan Pewarna Bubuk Alami dari Ekstrak Angkak (Kajian Lama Ekstraksi dan Konsentrasi Dekstrin). Skripsi. Universitas Brawijaya. Malang. 6) Vargaz, F. D. and Lopez, O.P. 2003. Natural Colorants for Food and Nutraceutial Uses.

  CRC Press. USA 7) Aryantha INP, Widayanti, S dan Yuanita. 2004. Eksplorasi Fungi Penghasil senyawa Anti

  Kolesterol. Institut Pertanian Bogor. Bogor 8) Talbert, Robert L. 2005. Pharmacotherapy : A Pathophysiologic Approach, sixth edition. Mcgraw-Hill. Medical Publishing Division. USA 9) Oetoro, S. 2009. Atherosklerosis dan Efek Buruknya. Tanggal akses: 16/01/2015

  10) Dewi, Alicia Puspita dan Elok Zubaidah. 2014. Produksi Pigmen Angkak Tinggi Lovastatin Pada Media Beras Ir36 (Kajian Proporsi Penambahan Bekatul). Jurnal Pangan dan Agroindustri Vol.2 No.1 p.28-38.