Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol serta Fraksi n-Heksana Etilasetat dan Air Herba Kurmak Mbelin (Enydra fluctuans Lour.)
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL SERTA FRAKSI n-HEKSANA ETILASETAT DAN AIR HERBA KURMAK MBELIN (Enydra fluctuans Lour.) SKRIPSI OLEH: YANI PUTRI SIMBOLON NIM 101501121
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL SERTA FRAKSI n-HEKSANA ETILASETAT DAN AIR HERBA KURMAK MBELIN (Enydra fluctuans Lour.) SKRIPSI Diajukan sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara OLEH: YANI PUTRI SIMBOLON NIM 101501121 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014
PENGESAHAN SKRIPSI
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL SERTA FRAKSI n-HEKSANA
ETILASETAT DAN AIR HERBA KURMAK MBELIN
(Enydra fluctuans Lour.)
OLEH:
YANI PUTRI SIMBOLON NIM 101501121
Dipertahankan dihadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 16 Agustus 2014 Pembimbing I, Panitia Penguji, Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002 NIP 195103261978022001 Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
Pembimbing II, NIP 195112231980032002 Dr. M. Pandapotan Nasution, M.P.S., Apt. Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.
NIP 194908111976031001 NIP 195709091985112001 Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002 Medan, 9 Oktober 2014 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002 Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat kasih dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol serta Fraksi n-Heksana Etilasetat dan Air Herba Kurmak Mbelin (Enydra fluctuans Lour.)”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas selama masa pendidikan. I
dan Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, M.P.S., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan dan nasehat selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Bapak Dr. Edy Suwarso, S.U., Apt., selaku penasehat akademik yang telah memberikan bimbingan kepada penulis selama masa perkuliahan. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah mendidik selama masa perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penelitian dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penelitian. Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt., Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis juga ingin mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga kepada Ayahanda Tombor Simbolon, S.H., M.M., dan Ibunda Mindo Napitupulu, S.Pd., atas doa dan pengorbanannya dengan tulus dan ikhlas bagi kesuksesan penulis, juga untuk abang dan adik tersayang Dharma Yoga Putra Simbolon, Sharon Tara Simbolon, Grace Auditia Simbolon serta teman-teman penulis Meity Mardiana Nainggolan, Nona Juwita Christiana Marbun, Grace Kyara Rotua Nababan, Arta Maria Hutagaol, Friska Rani Sarah Purba, Melisa Anriani Sitanggang, Ria Mintan Sihotang, Satia Cristenson Devina Sirait, Maya Natalina Hutapea, Yemima Kasih Oriza Silalahi, Novia Christin Nainggolan dan Presty Sipayung yang selalu setia memberi doa, bantuan dan semangat.
Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih banyak kekurangan, oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan dan ilmu kefarmasian khususnya.
Medan, Oktober 2014 Penulis Yani Putri Simbolon NIM 101501121
SKRINING FITOKIMIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL SERTA FRAKSI n-HEKSANA
ETILASETAT DAN AIR HERBA KURMAK MBELIN
(Enydra fluctuans Lour.)
ABSTRAK
Kurmak mbelin (Enydra fluctuans Lour.) adalah tumbuhan yang telah dikenal sejak dahulu kala, berasal dari wilayah Indo-China, yang tumbuh di daerah tropis di Asia dan Afrika. Kurmak mbelin, terutama bagian pucuk muda, digunakan sebagai sayur di Asia Tenggara (Indo-China dan Thailand), baik mentah maupun direbus. Di Kabupaten Karo kurmak mbelin dikonsumsi sebagai sayuran. Tumbuhan ini memiliki rasa yang agak pahit. Bagian herba memiliki aktivitas antimikroba dan antioksidan. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, golongan kandungan senyawa kimia dan aktivitas antioksidan ekstrak herba kurmak mbelin.
Serbuk simplisia herba kurmak mbelin diekstraksi secara perkolasi dengan pelarut etanol 96%. Ekstrak dipekatkan dengan alat rotary evaporator dan dikeringkan dengan freeze dryer sehingga diperoleh ekstrak kental, kemudian difraksinasi dengan pelarut n-heksana dan etilasetat, diuji aktivitas antioksidannya terhadap DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) sebagai radikal bebas dengan mengukur absorbansi DPPH pada panjang gelombang 516 nm pada menit ke-60 setelah penambahan pelarut metanol. Kemampuan antioksidan diukur sebagai penurunan absorbansi larutan DPPH setelah penambahan ekstrak.
Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 5,2%, kadar sari yang larut dalam air 20,63%, kadar sari yang larut dalam etanol 17,24%, kadar abu total 14,28% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,54%. Hasil skrining fitokimia herba kurmak mbelin mengandung senyawa kimia golongan flavonoida, glikosida, saponin, steroida/triterpenoida dan tanin. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode DPPH menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi n- heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air dari herba kurmak mbelin memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat dengan nilai inhibitory concentration (IC
50 )
yang diperoleh dari ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air sebesar 25,93, 19,51, 17,14 dan 35,18 ppm.
Kata kunci: uji aktivitas antioksidan, Enydra fluctuans Lour., DPPH
PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ANTIOXIDANT ACTIVITY OF ETHANOL EXTRACT AND n-HEXANE ETHYLACETATE AND AQUEOUS FRACTIONS OF KURMAK MBELIN HERB (Enydra fluctuans Lour.) ABSTRACT
Kurmak Mbelin (Enydra fluctuans Lour.) is a plant of the old world, originated from the Indo-China region, which grows in tropical regions of Asia and Africa. Kurmak mbelin, especially young shoots, are consumed as vegetable or spice in Southeast Asia (Indo-China and Thailand), either raw or boiled. In Karo kurmak mbelin is consumed as a vegetable. This plant tastes rather bitter. The herb also has antimicrobial and antioxidant activities. The purpose of this study was to determine the characteristics of simplex, to determine the chemical compounds contained and to measure the antioxidant activity of extracts of the kurmak mbelin herb.
The ethanolic extract was prepared by percolation with 96% ethanol. Percolate was concentrated in vacuo and by freeze dryer. The simplex of kurmak mbelin herb was also fractionated with n-hexane and ethylacetate. Then, the antioxidant activity of extracts were tested using DPPH as free radical. Absorbance of DPPH was measured at 516 nm, at 60th minute after the addition of methanol solvent. Antioxidant activity was measured as a decrease in absorbance of DPPH solution after the addition of extract.
The result of simplex characterization gave the water content value 5.2%, the water soluble extract 20.63%, the ethanol soluble extract 17.24%, the total ash 14.28% and the acid insoluble ash 0.54%. The result of phytochemical screening showed that kurmak mbelin herb contains flavonoid, glycoside, saponin, steroid/triterpenoid and tannin. The results of antioxidant activity testing showed that ethanolic extract, n-hexane fraction, ethylacetate fraction and aqueous fraction of kurmak mbelin exhibited strong antioxidant activity with inhibitory
concentration (IC 50 ) of ethanolic extract, n-hexane fraction, ethylacetate fraction and aqueous fraction 25.93, 19.51, 17.14 and 35.18 ppm consecutively.
Key words: antioxidant activity, Enydra fluctuans Lour., DPPH
DAFTAR ISI
Halaman JUDUL ..................................................................................................... i HALAMAN JUDUL ............................................................................... ii LEMBAR PENGESAHAN ..................................................................... iii KATA PENGANTAR ............................................................................. iv ABSTRAK ............................................................................................... vi ABSTRACT ............................................................................................. vii DAFTAR ISI ........................................................................................... viii DAFTAR TABEL .................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR ............................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xv BAB I PENDAHULUAN ....................................................................
1 1.1 Latar Belakang ....................................................................
1 1.2 Perumusan Masalah ............................................................
3 1.3 Hipotesis ..............................................................................
3 1.4 Tujuan .................................................................................
4 1.5 Manfaat ...............................................................................
4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...........................................................
5 2.1 Uraian Tumbuhan ...............................................................
5 2.1.1 Daerah tumbuh ...........................................................
5 2.1.2 Nama daerah ..............................................................
5 2.1.3 Nama asing .................................................................
6
2.1.4 Sistematika tumbuhan ................................................
6 2.1.5 Morfologi tumbuhan ..................................................
7 2.1.6 Kandungan kimia .......................................................
7 2.1.7 Kegunaan ...................................................................
7 2.2 Simplisia dan Ekstrak .........................................................
8 2.2.1 Simplisia ....................................................................
8 2.2.2 Ekstrak .......................................................................
8 2.3 Radikal Bebas .....................................................................
11 2.4 Antioksidan .........................................................................
12 2.4.1 Antioksidan alami ......................................................
13 2.4.2 Betakaroten ................................................................
13 2.4.3 Polifenol .....................................................................
14 2.5 Spektrofotometri UV–Visibel .............................................
16 2.6 Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ....
16 2.6.1 Pelarut ........................................................................
19 2.6.2 Pengukuran absorbansi–panjang gelombang .............
19 2.6.3 Waktu reaksi ..............................................................
19 BAB III METODE PENELITIAN ..........................................................
20 3.1 Alat-Alat ..............................................................................
20 3.2 Bahan-Bahan .......................................................................
20 3.3 Penyiapan Tumbuhan ..........................................................
21 3.3.1 Pengambilan tumbuhan .............................................
21 3.3.2 Identifikasi tumbuhan ................................................
21 3.3.3 Pengolahan tumbuhan ................................................
21
3.4 Pembuatan larutan pereaksi ................................................
21 3.4.1 Larutan pereaksi Bouchardat .....................................
21 3.4.2 Larutan pereaksi Mayer .............................................
22 3.4.3 Larutan pereaksi Dragendorff ....................................
22 3.4.4 Larutan pereaksi Molish .............................................
22 3.4.5 Larutan pereaksi asam klorida 2 N ............................
22 3.4.6 Larutan pereaksi asam sulfat 2 N ...............................
22 3.4.7 Larutan pereaksi asam nitrat 0,5 N ............................
22 3.4.8 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ...................
23 3.4.9 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% .......................
23 3.4.10 Larutan pereaksi kloralhidrat 70% b/b .....................
23 3.4.11 Larutan pereaksi DPPH 0,5 mM ..............................
23 3.5 Pemeriksaan Mikroskopik Herba Kurmak Mbelin .............
23 3.6 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ..................................
23 3.6.1 Pemeriksaan makroskopik .........................................
24 3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ..........................................
24 3.6.3 Penetapan kadar air ....................................................
24 3.6.4 Penetapan kadar sari larut dalam air ..........................
25 3.6.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol ....................
25 3.6.6 Penetapan kadar abu total ..........................................
25 3.6.7 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam .............
26 3.7 Skrining Fitokimia ..............................................................
26 3.7.1 Pemeriksaan alkaloida ................................................
26 3.7.2 Pemeriksaan glikosida ...............................................
27
3.7.3 Pemeriksaan saponin ..................................................
27 3.7.4 Pemeriksaan flavonoida .............................................
27 3.7.5 Pemeriksaan antrakinon .............................................
28 3.7.6 Pemeriksaan tanin ......................................................
28 3.7.7 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ............................
28 3.8 Pembuatan Ekstrak ..............................................................
29 3.8.1 Pembuatan ekstrak etanol ..........................................
29 3.8.2 Pembuatan fraksi ekstrak ...........................................
29
3.9 Pengujian Kemampuan Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel ....................................................
30
3.9.1 Prinsip metode penangkapan radikal bebas DPPH .........................................................................
30 3.9.2 Pengukuran larutan DPPH .........................................
30 3.9.3 Pembuatan larutan induk ...........................................
30 3.9.4 Pengukuran aktivitas antioksidan sampel uji .............
30 3.9.5 Penentuan persen peredaman .....................................
31
3.9.6 Penentuan nilai IC 50 ...................................................
31 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................
32 4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ...............................................
32 4.2 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik Herba Kurmak Mbelin ....
32 4.3 Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia .........................
32 4.3.1 Hasil pemeriksaan makroskopik ................................
32 4.3.2 Hasil pemeriksaan mikroskopik ................................
33 4.3.3 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia ......
33 4.4 Hasil Skrining Fitokimia .....................................................
34
4.4.1 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia ..................
34 4.4.2 Hasil skrining fitokimia ekstrak .................................
35
4.5 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum ..........................................................................
36 4.6 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan ..................................
37
4.7 Hasil Analisis Peredaman Radikal Bebas DPPH oleh Sampel Uji ..........................................................................
38
4.8 Hasil Analisis Nilai IC
50 (Inhibitory Concentration) Sampel Uji ..........................................................................
39 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................
42 5.1 Kesimpulan .........................................................................
42 5.2 Saran ....................................................................................
42 DAFTAR PUSTAKA ..............................................................................
43 LAMPIRAN .............................................................................................
46
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia herba kurmak mbelin ............................................................................
33
4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia herba kurmak mbelin .......................................................................................
34 4.3 Hasil skrining fitokimia ekstrak herba kurmak mbelin ..............
35
4.4 Hasil analisis peredaman radikal bebas oleh ekstrak herba kurmak mbelin ............................................................................
39
4.5 Hasil persamaan regresi linier dari ekstrak herba kurmak mbelin .......................................................................................
40
4.6 Nilai IC 50 dari ekstrak herba kurmak mbelin .............................
40
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Rumus bangun betakaroten ...................................................... 14
2.2 Struktur dasar polifenol ............................................................ 14
2.3 Rumus bangun DPPH ............................................................... 17
2.4 Resonansi DPPH ...................................................................... 18
2.5 Reaksi antara DPPH dengan atom H netral yang berasal dari antioksidan ................................................................................ 18
4.1 Kurva serapan maksimum larutan DPPH 40 ppm dalam metanol secara spektrofotometri visibel ................................... 36
4.2 Hasil analisis aktivitas antioksidan sampel ekstrak etanol, fraksi n-heksana, etil asetat dan air dari herba kurmak mbelin pada menit ke-60 . ..................................................................... 37