Isolasi Senyawa Flavonoida dari Daun Tumbuhan Kesumba Keling (Bixa orellana L.)

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI
DAUN TUMBUHAN KESUMBA
KELING (Bixa orellana L.)

SKRIPSI

DEBYNATI SIHOMBING
110802024

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016

Universitas Sumatera Utara

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI
DAUN TUMBUHAN KESUMBA
KELING (Bixa orellana L.)


SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar sarjana sains

DEBYNATI SIHOMBING
110802024

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016

Universitas Sumatera Utara

PERSETUJUAN

Judul
Kategori
Nama Mahasiswa
Nomor Induk Mahasiswa

Program Studi
Departemen
Fakultas

: Isolasi Senyawa Flavonoida Dari Daun Tumbuhan
Kesumba Keling (Bixa orellana L.)
: Skripsi
: Debynati Sihombing
: 110802024
: Sarjana (S1) Kimia
: Kimia
: Matematika Dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sumatera Utara

Disetujui di
Medan, Januari 2016
Komisi Pembimbing

:


Pembimbing 2

Pembimbing 1

Lamek Marpaung, M.Phil, Ph.D
NIP: 1952 0828 1982 031001

Dr. Sovia Lenny, M.Si
NIP: 1975 1018 2000 032001

Diketahui/ Disetujui oleh
Departemen Kimia FMIPA USU
Ketua,

Dr. Rumondang Bulan Nst, MS
NIP: 1954 0830 1985 032001

Universitas Sumatera Utara

PERNYATAAN


ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI DAUN TUMBUHAN KESUMBA
KELING (Bixa orellana L.)

SKRIPSI

Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa
kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.

Medan, Januari 2016

DEBYNATI SIHOMBING
110802024

Universitas Sumatera Utara

PENGHARGAAN

Puji syukur penulis panjatkan kehadiran Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan
karunia yang begitu luar biasa karena melalui penyertaanNya skripsi ini dapat

diselesaikan dalam waktu yang telah ditetapkanNya.
Ucapan terima kasih secara khusus penulis sampaikan dengan segala
kerendahan hati kepada kedua orang tua penulis, Bapak tercinta T. Sihombing, ibu
terkasih alm. N. Simanjuntak, atas doa, dukungan dan kasihnya kepada penulis
sejak mula terlahir ke dunia sampai pada seorang Sarjana dan sampai selamalamanya, serta kakak dan abang tersayang Vicko Dodi Imendola Sihombing,
Maharoyana Sihombing, Wike Sepriyani Sihombing, Ade Saputra Sihombing,
dan Juni Eviyanti Sihombing atas bantuan, dukungan dan doa kepada penulis.
Penulis juga menyadari bahwa skripsi ini tidak akan selesai tanpa adanya bantuan
dari berbagai pihak, maka penulis mengucapkan terima kasih yang luar biasa
kepada:
1. Ibu Dr. Sovia Lenny, M.Si dan Bapak Lamek Marpaung, M.Phil, Ph.D
selaku dosen pembimbing yang telah banyak membimbing, mengajari dan
memotivasi penulis selama melakukan penelitian dan penulisan skripsi.
2. Ibu Dr. Rumondang Bulan Nst, M.S selaku Ketua Departemen Kimia
FMIPA USU dan Bapak Drs. Albert Pasaribu, M.Sc selaku Sekretaris
Departemen, serta kepada Ibu Juliati Tarigan selaku dosen PA penulis dan
kepada semua staf pengajar di Kimia FMIPA USU.
3. Kepala Laboratorium Bapak Lamek Marpaung, M.Phil, Ph.D atas bantuan,
kepercayaan dan kerja sama selama saya menjadi asisten dan kepada
seluruh asisten Laboratorium Kimia Bahan Alam Hayati (Bang Berkat,

Bang Doni, kak Siska, kak Agnes, kak Anita, Andre, Rickson, Rut,
Handes, bontor, cintaku, defrista, jessy, debby, dan haponsaria)
4. Sahabat-sahabat terbaik (Ena Bellia O. Munthe dan Yulia Aidira
Anggreini Ambarita) serta abang kakak stambuk 2008 dan seluruh temanteman seperjuangan stambuk 2011 yang sudah menjadi keluarga penulis
beserta adik-adik stambuk 2012, 2013, 2014 terima kasih buat dukungan,
doa dan bantuannya.
5. Kepada teman-teman kos Pondok Larisma yang terkasih.
6. Serta Kepada seluruh keluarga besar penulis yang selalu memotivasi,
membantu serta mendoakan penulis.
7. Dan kepada semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu, terima
kasih.
Kiranya Tuhan selalu memberikan perlindungan dan kasih sayang kepada kita.
Tuhan memberkati kita semua.

Penulis

Universitas Sumatera Utara

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI DAUN TUMBUHAN
KESUMBA KELING (Bixa orellana L.)


ABSTRAK

Isolasi senyawa flavonoida yang terdapat pada daun tumbuhan Kesumba Keling
(Bixa orellana L.). Ekstraksi dilakukan secara maserasi dengan pelarut metanol.
Ekstrak pekat metanol ditambahkan dengan etil asetat kemudian disaring. Ekstrak
pekat etil asetat dilarutkan dengan metanol dan dipartisi dengan n-heksana.
Ekstrak pekat metanol dihidrolisis dengan HCl 6% dan selanjutnya dipartisi
dengan kloroform. Ekstrak pekat kloroform dipisahkan dengan kromatografi
kolom dengan eluen n-heksana : etil asetat (90:10; 80:20; 70:30; 60:40; 50:50
(v/v)). Senyawa yang diperoleh dimurnikan dengan kromatografi lapis tipis
preparatif, menghasilkan kristal berwarna kuning sebanyak 29,7 mg dengan harga
Rf=0,51. Selanjutnya senyawa yang diperoleh dianalisis dengan Spektrofotometer
UV-Visible, Inframerah (FT-IR) dan Spektrometer Resonansi Magnetik Inti
Proton (1H-NMR). Dari data spektroskopi menunjukkan bahwa senyawa yang
diperoleh adalah golongan isoflavon.

Kata kunci : Kesumba Keling, Bixa orellana .L, Flavonoida, Isoflavon

Universitas Sumatera Utara


ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUNDS FROM LEAVES OF
KESUMBA KELING (Bixa orellana L.)

ABSTRACT

Isolation of flavonoid compounds from leaves of Kesumba Keling (Bixa orellana
L.). Extraction has been done with maceration by methanol solvent. The
concentrated extract of methanol added with ethyl acetate. The concentrated
extract of ethyl acetate then dissolved with methanol and partition extracted with
n-hexane. The concentrated extract of methanol acidified by HCl 6%, then
partition extracted with chloroform. The concentrated extract of chloroform
separated with column chromatography with eluent n-hexane: ethyl acetate 90:10;
80:20; 70:30; 60:40; 50:50 (v/v). The compounds was purified with TLC
preparative yielding yellow cristal with weight 29,7 mg with Rf=0,51. The
compound was further identified by spectroscopy Ultraviolet Visible (UV-Vis),
Fourier Transform Infra Red Spectroscopy (FT-IR) and Proton Nuclear Magnetic
Resonancy Spectroscopy (1H-NMR). Spectroscopic data show that the compound
was isoflavone.
Keywords


: Kesumba Keling, Bixa orellana .L, Flavonoida, Isoflavone

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR ISI

Halaman
Persetujuan
Pernyataan
Penghargaan
Abstrak
Abstract
Daftar Isi
Daftar Tabel
Daftar Gambar
Daftar Lampiran

iii
iv

v
vi
vii
viii
x
xi
xii

Bab 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
1.2 Permasalahan
1.3 Tujuan Penelitian
1.4 Manfaat Penelitian
1.5 Lokasi Penelitian
1.6 Metodologi Penelitian

1
1
2
3

3
3
4

Bab 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tumbuhan Kesumba keling
2.2 Senyawa Organik Bahan Alam
2.3 Metabolit Sekunder
2.4 Senyawa Flavonoida
2.4.1 Biosintesis Flavonoida
2.4.2 Klasifikasi Senyawa Flavonoida
2.5 Skrining Fitokimia
2.6 Teknik Pemisahan
2.6.1 Ekstraksi
2.6.2 Partisi
2.6.3 Hidrolisis
2.6.4 Kromatografi
2.6.4.1 Kromatografi Lapis Tipis
2.6.4.2 Kromatografi Kolom
2.6.4.3 Kromatografi Lapis Tipis Preparatif
2.7 Teknik Spektroskopi
2.7.1 Spektroskopi Ultraviolet (UV-Vis)
2.7.2 Spektroskopi Inframerah (FT-IR)
2.7.3 Spektroskopi Resonansi Magnetik Inti Proton (1HNMR)

5
5
6
10
11
13
14
19
20
21
22
23
23
26
26
27
28
28
30
32

Universitas Sumatera Utara

Bab 3 METODE PENELITIAN
3.1 Alat-alat
3.2 Bahan-bahan
3.3 Prosedur Penelitian
3.3.1 Penyiapan Sampel
3.3.2 Uji Pendahuluan Terhadap Ekstrak Daun Tumbuhan
Kesumba keling
3.3.3 Ekstraksi Daun Tumbuhan Kesumba keling
3.3.4 Analisis Kromatografi Lapis Tipis
3.3.5 Isolasi Senyawa Flavonoida dengan Kromatografi
Kolom
3.3.6 Pemurnian
3.3.7 Uji Kemurnian Hasil Isolasi dengan Kromatografi
Lapis Tipis (KLT)
3.3.8 Identifikasi Senyawa Hasil Isolasi
3.3.8.1 Identifikasi dengan Spektrofotometer UVVisible
3.3.8.2 Identifikasi dengan Spektrofotometer
Inframerah (FT-IR)
3.3.8.3 Identifikasi dengan Spektrometer Resonansi
Magnetik Inti Proton (1H-NMR)
3.4 Bagan Skrining Fitokimia
3.5 Bagan Penelitian
Bab 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
4.2 Pembahasan

33
33
34
34
34
35

Bab 5 KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
5.2 Saran

51
51
51

DAFTAR PUSTAKA

52

LAMPIRAN

55

35
36
36
37
38
38
38
38
39

44
44
47

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR TABEL

Nomor
Tabel
2.1
2.2
2.3
2.4
2.5

Judul

Halaman

Daftar Adsorben pada Kromatografi
Rentangan Serapan Spektrum UV-Visible golongan
Flavonoida
Spektrum UV-Vis pada golongan Isoflavon
Interpretasi Spektrum FT-IR senyawa hasil isolasi
Pergeseran kimia 1H-NMR senyawa hasil isolasi

25
29
30
46
47

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR GAMBAR

Nomor
Gambar
2.1
2.2
2.3
4.1
4.2
4.3
4.4

Judul

Halaman

Biosintesis Senyawa Flavonoida
Diagram Teknik Pemisahan Metabolit Sekunder
Spektroskopi UV-Vis pada spektrum isoflavon
Spektrum UV-Visible Senyawa Hasil Isolasi
Spektrum Inframerah (FT-IR) Senyawa Hasil Isolasi
Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi
Struktur Senyawa Hasil Isolasi Isoflavon

13
20
30
44
45
46
50

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor
Lampiran
1.
2.
3.

4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11 .

Judul

Halaman

Gambar daun tumbuhan Kesumba keling (Bixa
orellana L.)
Hasil Determinasi daun tumbuhan Kesumba Keling
(Bixa orellana L.)
Kromatogram Lapisan Tipis Ekstrak Pekat
Kloroform daun tumbuhan Kesumba keling (Bixa
orellana L.) sebelum Kromatografi Kolom
Kromatogram Lapisan Tipis sebelum preparatif
Kromatogram Lapisan Tipis senyawa hasil isolasi
Spektrum Ultraviolet-Visible beberapa senyawa
Flavonoida
Spektrum 1H-NMR senyawa hasil isolasi Spektrum
1
H-NMR
Spektrum 1H-NMR senyawa hasil isolasi pada δ =
6,65–7,4 ppm
Spektrum 1H-NMR senyawa hasil isolasi pada δ =
0,75–1,7 ppm
Spektrum 1H-NMR senyawa hasil isolasi pada δ =
3,1–5,2 ppm
Spektrum 1H-NMR senyawa pembanding Flavonoida

56
57
58

59
60
61
62
62
63
63
64

Universitas Sumatera Utara