C selama 30 menit Didinginkan tabung Ditambahkan 1 ml isooktan, divortex selama 1-2 menit Ditambahkan NaCl jenuh 5 ml, divortex, terbentuk 2 lapisan Dipisahkan 2 lapisan tersebut Diekstraksi kembali dengan 1 ml isooktan Dipisahkan terbentuk 2 lapisan

Lampiran 1. Bagan Alir Pembuatan Metil Ester Asam Lemak ASI
250 mg sampel ASI
Ditambahkan 1,5 mL Na-metanolik 0,5 N
Dipanaskan dalam penangas air suhu 100oC
selama 5 menit
Didinginkan tabung hingga suhu 30o- 40oC
Ditambahkan 2 ml BF3-metanol tabung
ditutup
Dipanaskan suhu 100oC selama 30 menit
Didinginkan tabung
Ditambahkan 1 ml isooktan, divortex
selama 1-2 menit
Ditambahkan NaCl jenuh 5 ml, divortex,
terbentuk 2 lapisan
Dipisahkan 2 lapisan tersebut

Lapisan isooktan

Lapisan air
Diekstraksi kembali dengan
1 ml isooktan

Dipisahkan terbentuk 2
lapisan

Lapisan isooktan

Lapisan air

Digabung dengan lapisan isooktan pertama
lalu dimasukkan dalam vial
Lapisan isooktan
Diambil 1 µL untuk diinjeksikan ke alat Kromatografi Gas

39

Lampiran 2. Kondisi Alat Kromatografi Gas
Kondisi alat kromatografi Gas sebagai berikut :
1. Jenis GC

: Shimadzu, GC-14B dari Jepang

2. Jenis Detektor

: FID (Flame Ionization Detector)

3. Jenis Kolom

: DB-23 J&W Scientific (30 m x 0,25 mm x 0,25 µm)

4. Kondisi Operasi Alat Kromatografi Gas
a. Suhu Detektor
: 260o C
b. Suhu Injektor
: 260o C
c. Gas Pembawa
: N2 dengan tekanan 100 kPa
5. Temperatur kolom terprogram :
a. Suhu pertama : 90oC dipertahankan selama 5 menit
b. Suhu Kedua : 220oC dipertahankan selama 12 menit naik 7oC/menit
6. Volume injeksi
: 1.0 µL

7. Kecepatan alir

: 1.04 mL/meit

40

Lampiran 3. Karakteristik Kromatogram Standar Metil Ester Asam Lemak
(C8-C20)

Lampiran 4. Karakteristik Kromatogram Standar Metil Ester Asam Lemak
(C12-C22)

41

Lampiran 5. Kromatogram I, II, dan III Relawan 1 (R1)

42

Lampiran 6. Kromatogram I,II, dan II Relawan 2 (R2)

43

44

Lampiran 7. Kromatogram I,II dan III Relawan 3 (R3)

45

Lampiran 8. Kromatogram I,II dan III Relawan 4 (R4)

46

47

Lampiran 9. Kromatogram I,II dan III Relawan 5 (R5)

48

Lampiran 10. Kromatogram I,II dan III Relawan 6 (R6)

49

50

Lampiran 11. Tabel Data Kromatogram Asam Lemak Relawan
R

K

C 6:0

C 8:0

C 10:0

C 12:0

C 14:0

C 16:0

C 18:0

C 20:0

C 16:1

C 18:1

C 18:1 tr

C 20:1

C 18:2

C 18:3

C 18:4

C 20:4

C 20:5

C 22:6

I

0,0558

0,2094

1,1587

4,8651

3,4924

27,8946

9,6111

0,2453

2,6310

38,9919

0,0970

0,3053

9,4012

0,2426

0,0387

0,3107

0,1190

0,3301

II

0,0671

0,2582

1,1458

4,7705

3,4378

28,0671

9,6497

0,2495

2,2617

39,3355

0,0935

0,3080

9,3553

0,2478

0,0369

0,3142

0,1096

0,2920

III

0,0570

0,2052

1,1325

4,7645

3,4344

27,7741

9,6183

0,2431

2,5997

39,1089

0,0964

0,3122

9,4216

0,2517

-

0,3138

0,1101

0,5566

Rata-Rata

0,0600

0,2243

1,1457

4,8000

3,4549

27,9119

9,6264

0,2460

2,4975

39,1454

0,0956

0,3085

9,3927

0,2474

0,0252

0,3129

0,1129

0,3929

I

0,0747

0,1913

0,1258

5,3131

4,2316

28,8976

4,3639

0,1297

3,0712

40,3619

0,1032

0,2823

11,0361

0,3535

-

0,1649

-

0,1991

II

0,0711

0,1910

1,2433

5,3376

4,2503

28,8709

4,3524

0,1284

3,0723

40,3324

0,0995

0,2734

11,0188

0,2814

-

0,2806

-

0,1964

III

0,0776

0,1954

1,2300

5,3148

4,2524

28,9206

4,3419

0,1323

3,1028

40,2749

0,1058

0,2683

11,0196

0,2775

-

0,2777

-

0,2085

Rata-Rata

R1

R2

0,0745

0,1926

0,8664

5,3218

4,2448

28,8964

4,3527

0,1301

3,0821

40,3231

0,1028

0,2747

11,0248

0,3041

-

0,2411

-

0,2013

I

-

0,1983

1,1800

6,4269

6,5391

32,8037

4,3045

0,1506

5,1971

32,6972

-

0,2638

9,3440

0,3722

-

0,1934

-

0,3293

II

-

0,2922

1,1956

6,3184

6,4011

32,5590

4,3277

0,1531

5,1522

32,4859

-

0,2818

9,3216

0,3932

-

0,2498

-

0,8687

III

-

0,1741

1,1365

6,1257

6,2920

31,8221

4,2055

0,1660

5,0589

33,0515

-

0,2310

10,9450

0,3470

-

0,2202

-

0,2243

Rata-Rata

-

0,2215

1,1707

6,2903

6,4107

32,3949

4,2792

0,1566

5,1361

32,7449

-

0,2589

9,8702

0,3708

-

0,2211

-

0,4741

I

0,0774

0,2007

1,2465

7,7044

8,9577

27,7553

4,0614

0,1355

4,0816

44,2855

0,1373

0,2851

-

0,7068

-

0,2032

-

0,1616

II

0,0740

0,2006

1,2361

7,7003

8,9631

27,7674

4,0724

0,1300

4,0952

44,3617

0,1180

0,3002

-

0,5210

-

0,2137

-

0,2462

III

0,0753

0,1992

1,2349

7,7209

9,0075

27,8449

4,0484

0,1292

4,1031

44,2464

0,1136

0,2756

-

0,5200

-

0,2055

-

0,2755

R3

51

R4

Rata-Rata

0,0756

0,2002

1,2392

7,7085

8,9761

27,7892

4,0607

0,1316

4,0933

44,2979

0,1230

0,2870

-

0,5826

-

0,2075

-

0,2278

I

0,1768

0,2013

1,6155

9,6939

8,4537

28,5632

3,5017

0,1336

1,0591

33,4056

-

0,2548

11,4113

0,8059

-

0,2286

0,1252

0,3698

II

-

0,2866

1,6269

9,7275

8,4681

28,5792

3,4934

0,1423

1,0611

33,8033

-

0,2492

11,0025

0,8179

-

0,2178

0,1201

0,4041

III

0,1123

0,3063

1,7169

10,2002

8,8196

29,6269

3,6046

0,1573

1,0827

32,1330

-

0,2714

10,4373

0,8365

-

0,2236

0,0943

0,3772

Rata-Rata

0,0964

0,2647

1,6531

9,8739

8,5805

28,9231

3,5332

0,1444

1,0676

33,1140

-

0,2585

10,9504

0,8201

-

0,2233

0,1132

0,3837

I

0,0720

0,2413

1,6175

10,3750

10,6839

26,6116

3,4196

0,1221

2,7279

28,4741

0,1288

0,3550

13,7907

0,3946

-

0,2451

0,0867

0,6541

II

0,0666

0,2424

1,5863

10,2069

10,5678

26,5828

3,4515

0,1156

2,6978

28,1961

0,1305

0,3637

14,4379

0,3944

-

0,2480

0,0822

0,6296

III

0,0732

0,2473

1,6182

10,3697

10,6712

26,5967

3,4208

0,1213

2,7118

28,6968

0,1225

0,3531

13,6708

0,3895

-

0,2472

0,0904

0,5996

Rata-Rata

0,0706

0,2437

1,6073

10,3172

10,6410

26,5970

3,4306

0,1197

2,7125

28,4557

0,1273

0,3573

13,9665

0,3928

-

0,2468

0,0864

0,6278

R5

R6

Keterangan :
R : Relawan
K : Kromatogram

51

Lampiran 12. Tabel komposisi asam lemak total ASI
Kelompok
Asam
Lemak

Asam
Lemak

SFA

C 6:0
C 8:0
C 10:0
C 12:0
C 14:0
C 16:0
C 18:0
C 20:0
Total

MUFA

C 16:1
C 18:1
C 18:1 tr
C 20:1

Total
C 18:2
C 18:3
C 18:4
C 20:4
C 20:5
C 22:6

PUFA

Total

4 bulan
R1
R2
0,06
0,07
0,22
0,19
1,15
0,87
4,80
5,32
3,45
4,24
27,91 28,90
9,63
4,35
0,25
0,13
47,47 44,08
2,50
3,08
39,15 40,32
0,10
0,10
0,31
0,27
42,05 43,78
9,39
11,02
0,25
0,30
0,03
0,31
0,24
0,11
0,39
0,20
10,48 11,77

Masa Laktasi
5 bulan
R3
R4
0,08
0,22
0,20
1,17
1,24
6,29
7,71
6,41
8,98
32,39 27,79
4,28
4,06
0,16
0,13
50,92 50,18
5,14
4,09
32,74 44,30
0,12
0,26
0,29
38,14 48,80
9,87
0,37
0,58
0,22
0,21
0,47
0,23
10,94
1,02

6 bulan
R5
R6
0,10
0,07
0,26
0,24
1,65
1,61
9,87
10,32
8,58
10,64
28,92 26,60
3,53
3,43
0,14
0,12
53,07 53,03
1,07
2,71
33,11 28,46
0,13
0,26
0,36
34,44 31,65
10,95 13,97
0,82
0,39
0,22
0,25
0,11
0,09
0,38
0,63
12,49 15,32

Keterangan :
Data diatas merupakan rata-rata 3 kali pengulangan penyuntikan sampel (% b/b).
SFA : saturated fatty acid, MUFA : monosaturated fatty acid, PUFA :
polyunsaturated fatty acid.
R : Relawan.

52

Lampiran 13. Perhitungan nilai gizi asam lemak pada ASI
Contoh perhitungan evaluasi nilai gizi ASI berdasarkan komposisi asam lemak
sebagai berikut :
Δ = | 33,33% - %SFA| + | 33,33% - %MUFA| + | 33,33% - %PUFA|

Nilai gizi ASI pada R1 :
Δ = | 33,33% - %SFA| + | 33,33% - %MUFA| + | 33,33% - %PUFA|
= | 33,33% - 47,47%| + | 33,33% - 42,05%| + | 33,33% - 10,48%|
= 14,14% + 8,72% + 22,85%
= 45,71%
Perbandingan persentase komposisi asam lemak dan nilai gizi ASI
Sampel

Komposisi Asam Lemak (Penyimpangan)
SFA (%)

MUFA (%)
33,33 (0)

PUFA (%)
33,33 (0)

Total
Penyimpangan (%)

Ideal

33,33 (0)

R1

47,47 (14,14) 42,05 (8,72)

10,48 (22,85)

45,71

R2

44,08 (10,75) 43,78 (10,45) 11,77 (21,56)

42,76

R3

50,92 (17,59) 38,14 (4,81)

45,24

R4

50,18 (16,85) 48,80 (15,47) 1,02 (32,31)

64,63

R5

53,07 (19,74) 34,44 (1,11)

12,49 (20,84)

41,69

R6

53,03 (19,70) 31,65 (1,68)

15,32 (18,01)

39,39

53

10,94 (22,84)

0

Lampiran 14. Sertifikat Analisis Standar FAME

54

Lampiran 15. Surat Pernyataan Relawan 1

55

Lampiran 16. Surat Pernyataan Relawan 2

56

Lampiran 17. Surat Pernyataan Relawan 3

57

Lampiran 18. Surat Pernyataan Relawan 4

58

Lampiran 19. Surat Pernyataan Relawan 5

59

Lampiran 20. Surat Pernyataan Relawan 6

60

Lampiran 21. Gambar Sampel Asi Relawan

Lampiran 22. Gambar Alat Pompa ASI

61

Lampiran 23. Gambar Alat Kromatografi Gas (GC)

62