PERUBAHAN SKELETAL FETUS MENCIT (Mus musculus) DARI INDUK YANG DIINFEKSI Toxoplasma gondii INTRAVAGINA PENELITIAN EKSPERIMENTAL LABORATORIS Repository - UNAIR REPOSITORY

  TESIS PERUBAHAN SKELETAL FETUS MENCIT (Mus musculus) DARI INDUK YANG DIINFEKSI Toxoplasma gondii INTRAVAGINA PENELITIAN EKSPERIMENTAL LABORATORIS Oleh : ELFA ZUHROTUN NISA NIM 061314253006 PROGRAM STUDI MAGISTER

  PERUBAHAN SKELETAL FETUS MENCIT (Mus musculus) DARI INDUK YANG DIINFEKSI Toxoplasma gondii INTRAVAGINA PENELITIAN EKSPERIMENTAL LABORATORIS TESIS Untuk memperoleh gelar Magister Dalam Program Studi Ilmu Penyakit dan Kesehatan Masyarakat Veteriner Pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya Oleh: Elfa Zuhrotun Nisa NIM 061314253006 PROGRAM STUDI MAGISTER

  Tiada kata yang lebih tepat selain puji syukur kehadirat Allah SWT atas ridho dan karunia-Nya yang telah dilimpahkan sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan menulis tesis ini dengan judul : PERUBAHAN

  SKELETAL FETUS MENCIT (Mus musculus) DARI INDUK YANG DIINFEKSI Toxoplasma gondii INTRAVAGINA.

  Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar

• – besarnya kepada: Prof. Dr. H. Nasih, SE., MT., Ak., CMA. Selaku Rektor Universitas Airlangga atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan Program Magister pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.

  Prof. Dr. Pudji Srianto, drh., M.Kes. Selaku dekan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga dan para Wakil Dekan Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga atas kesempatan yang diberikan sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan tesis ini.

  Prof. Dr. Lucia Tri Suwanti, drh., M.P selaku Ketua Program Studi S2 Ilmu Penyakit dan Kesehatan Veteriner (IPKMV) sekaligus sebagai pembimbing pertama.

  Dr. Hani Plumeriastuti, drh., M.Kes selaku pembimbing kedua yang telah membimbing dan memberi masukan pada penelitian sampai penyusunan tesis berakhir. Semoga Allah SWT membalasnya dengan limpahan rahmat.

  Dr. Endang Suprihati, drh., M.S., Dr. Epy M. Luqman, drh., M.Si. dan Dr. Mufasirin, drh., M.Si., selaku penguji yang telah meluangkan waktu menguji, membimbing dan memberikan inovasi untuk dapat membantu penulis dalam menyelesaikan tesis ini.

  Prof. Dr. Setiawan K., drh., M.Sc, selaku ketua Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga. Seluruh staf pengajar dan staf kemahasiswaan Program Studi S2 Ilmu

  Penyakit Kesehatan Masyarakat Veteriner atas wawasan keilmuan selama mengikuti pendidikan di Program S2 Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.

  Laboratorium Protozoologi, Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga dan Laboratorium Embriologi, Departemen Anatomi, Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga sebagai tempat yang memfasilitasi penelitian.

  Ayahanda Sutoyo Zamzuri, ibunda Irfayana Trigiastari, saudara tercinta Ahmad Erfan Muharya, Vita Dwi Erlina dan Ahmad Ilham Real Aqsa, keponakan tersayang Kanaya Adzki Nurhafiza yang telah memberikan perhatian, dukungan, doa dan motivasi yang tak tergantikan hingga saat ini.

  Teman penelitian Sugiarto Sinar, drh., Khorlifiyanaidillah, drh. dan Alfiana Laili, drh atas kerjasama, semangat dan bantuan selama proses penelitian. Seluruh teman seangkatan di Program Studi Ilmu Penyakit dan Kesehatan

  Masyarakat Veteriner atas semangat, dukungan dan motovasi dalam penyusunan tesis ini dan semua pihak yang tidak bisa disebutkan satu persatu tetapi sudah membantu dalam menyusun tesis ini.

  Akhirnya penulis menyadari bahwa tesis ini jauh dari sempurna, untuk itu penulis mengharap kritik dan saran dari pembaca sebagai upaya penyempurnaan tesis ini. Semoga hasil yang dituangkan dalam tesis ini dapat bermanfaat bagi pembaca sekalian.

  Surabaya, 1 Februari 2016 Penulis

  RINGKASAN Perubahan Skeletal Fetus Mencit (Mus musculus) Dari Induk Yang Diinfeksi Toxoplasma gondii Intravagina

  Toksoplasmosis adalah penyakit yang bersifat zoonosis, disebabkan oleh

  Toxoplasma gondii . Termasuk parasit intraseluler obligat, dengan predileksi pada semua tipe sel hospes. Menyerang hewan berdarah panas dan manusia.

  Manusia, ternak dan unggas tertular menelan ookista yang sudah berspora yang mencemari lingkungan. Manusia juga dapat tertular karena memakan daging ternak atau unggas yang kurang masak yang mengandung kista jaringan. Ookista keluar bersama feses kucing. Toksoplasmosis dapat menular melalui jalur kongenital dari induk ke fetus melalui jalur plasenta. Infeksi T. gondii pada induk semang menimbulkan manifestasi termasuk kecacatan pada fetus yang dilahirkan. Salah satu kecacatan yang ditimbulkan adalah microcepaly.

  Tujuan dari penelitian ini untuk membuktikan infeksi T. gondii dapat mempengaruhi penurunan panjang fetus, os cranium, os nasal, os frontal, os

  parietal , os radius ulna, os tibia fibula, os humerus, panjang os costae dan lebar os costae . Diharapkan dapat memberikan informasi sebagai acuan pengendalian

  toksoplasmosis.

  Penelitian ini dilakukan selama 3 (tiga) bulan, mulai bulan Juni hingga Agustus 2015. 18 ekor mencit betina dibuntingkan, dibagi menjadi dua kelompok. Kelompok pertama sebagai kontrol, mencit betina tidak diinfeksi.

  Kelompok kedua mencit betina diinfeksi dengan 10 takizoit T. gondii. Mencit diinfeksi umur kebuntingan 8,5 hari. Penentu umur kebuntingan didasarkan pada adanya vaginal plug setelah perkawinan, dihitung umur kebuntingan 0,5 hari. Mencit dikorbankan umur kebuntingan 18 hari. Mencit dikorbankan dengan cara

  dislocatio os cervicalis kemudian dilakukan pembedahan pada bagian perut

  untuk mengeluarkan fetus dari uterus. Dilakukan pengukuran panjang fetus, os

  cranium , os nasal, os frontal, os parietal, os radius ulna, os tibia fibula, os humerus , lebar os costae dan panjang os costae.

  Hasil perhitungan statistik menggunakan uji t, skeletal fetus mencit dari induk yang tidak diinfeksi T. gondii (kontrol) dengan skeletal fetus mencit dari induk yang diinfeksi T. gondii (perlakuan) menunjukkan adanya penurunan ukuran yang sangat berbeda nyata (p<0,01) pada kelompok panjang fetus, os

  cranium , os nasal, os frontal, os parietal, os radius ulna, os tibia fibula, os

  , panjang os costae 1, panjang os costae 2, panjang os costae 3, panjang

  humerus os costae 4, panjang os costae 5, panjang os costae 6, panjang os costae 7,

  panjang os costae 8, panjang os costae 9, panjang os costae 10, panjang os

  costae 11, panjang os costae 12, lebar os costae 1, lebar os costae 2, lebar os costae 3, lebar os costae 4, lebar os costae 5, lebar os costae 6, lebar os costae 7,

  lebar os costae 8, lebar os costae 9, dan lebar os costae 11. Sedangkan pada kelompok lebar os costae 10, dan lebar os costae 12 tidak menunjukkan adanya penurunan ukuran yang sangat berbeda nyata (p>0,01).

  Hasil penelitian ini memperkuat hasil penelitian sebelumnya yang menunjukan bahwa Infeksi buatan T. gondii pada embrio ayam menyebabkan penurunan panjang embrio dan pengecilan ukuran otak (Suwanti dkk., 2011). Peningkatan apoptosis pada ukuran kepala fetus mencit dapat mengakibatkan ukuran otak mengecil akibat infeksi T. gondii (Suwanti, 2014). Mengecilnya ukuran otak kemungkinan berimplikasi pada mengecilnya tulang kepala.

  Hasil tersebut juga sejalan dengan pendapat (Luqman, 2005) yang menyatakan umur kebuntingan 10 hari pada mencit merupakan periode kritis dari oganogenesis, palatum, anggota dan organ indra (pembentukan mata, telinga dan hidung) serta axial dan skeletal.

  SUMMARY Skeletal Change in Mice (Mus Musculus) Foetus of Parent Infected by Toxoplasma gondii Intravaginal Toxoplasmosis is a zoonosis disease caused by Toxoplasma gondii.

  Toxoplasma gondii is an obligate intracellular parasites with predilection in all cell types of hospes. This parasite could infect warm-blooded animals and human.

  Human, livestock and poultry infected by swallowed sporulated oocysts that contaminate the environment. Humans can also be infected by eating undercooked meat containing tissue cysts. Toxoplasmosis can be transmitted via congenital from mother to foetus through placenta. Toxoplasma gondii in hospes cause many manifestations including defect in born foetus. One of the defect is microcephaly.

  The aim of this research is are to prove that T. gondii infection may affect in decrease of foetus length, length decrease in os cranium, os nasal, os frontal,

  os parietal, os humerus, os tibia fibula, os radius ulna of foetus, length and width

  decrease in os costae of foetus. The results of this research are expected to provide information as a reference for toxoplasmosis control.

  This research was carried out during 3 (three) months, from June to August 2015. Eighteen female mice were impregnated and divided into two groups. The first group is a control group in which female mice were not infected. The second group is a treatment group in which female mice infected with dose 10 tackyzoite of T. gondii. Mice infected with tackyzoite at the gestational age of 8,5 days.

  Determination of gestational age are based on the presence of vaginal plug after mating counted as 0,5 day gestational age. Mice were euthanized at 18 days of gestational age by dislocatio os cervicalis. The surgery was performed on the abdomen of mice to remove foetus. Foetus were observed by measuring the length of foetus, os cranium, os nasal, os frontal, os parietal, os humerus, os tibia fibula, os radius ulna and length and width of os costae.

  In result of statistical calculation by t test, the skeletal of mice foetus from parent which not infected by T. gondii (control) compare to skeletal of mice foetus from parent infected with T. gondii (treatment) showed significantly different (p <0.01) size decrease in group of foetus length, length of os cranium, os nasal, os

  st frontal, os parietal, os radius ulna, os tibia fibula, os humerus, length of 1 os nd rd th costae , length of 2 os costae , length of 3 os costae , length of 4 os costae , th th th th

  length of 5 os costae , length of 6 os costae , length of 7 os costae , length of 8

  th th th os costae , length of 9 os costae , length of 10 os costae , length of 11 os costae , th st nd rd

  length of 12 os costae , width of 1 os costae , width of 2 os costae , wide of 3

  th th th os costae , width of 4 os costae , width 5 os costae , width 6 os costae , width of th th th th

  7 os costae , width of 8 os costae , width of 9 os costae and width of 11 os

  th th costae . Meanwhile at group of width of 10 os costae and and width of 12 os

costae did not show any significantly different (p > 0,01) of size decrease. Result of this research support the previous research results which showed that artificial infection of T. gondii in chicken embryos caused decrease of length in embryo and brain size reduction (Suwanti et al., 2011).

  Increasing of apoptosis fetal skeletal head size can cause brain size reduction caused by T. gondii infection (Suwanti, 2014). Brain size reduction may implicated in reduction of skeletal head.

  These results are similar to the opinion of Luqman (2005), which stated that gestational age of 10 days in mice is a critical period of palate organogenesis, sense organs (the formation of eyes, ears and nose) organogenesis, axial and skeletal organogenesis.

  Skeletal Change in Mice (Mus Musculus) Foetus of Parent Infected by Toxoplasma gondii Intravaginal

  Elfa Zuhrotun Nisa

  ABSTRACT Toxoplasmosis is a zoonosis disease caused by Toxoplasma gondii.

  Toxoplasmosis can be transmitted via congenital from mother to foetus through placenta. Eighteen female mice were impregnated and divided into two groups. The first group is a control group in which female mice were not infected. The second group is a treatment group in which female mice infected with dose 10 tackyzoite of T. gondii. Mice infected with tackyzoite at the gestational age of 8,5 days. Determination of gestational age are based on the presence of vaginal plug after mating counted as 0,5 day gestational age. Mice were euthanized at 18 days of gestational age by dislocatio os cervicalis. Skeletal changes were observed by alizerin red method. In result of statistical calculation by t test, the skeletal of mice fetus from parent which not infected by T. gondii (control) compare to skeletal of mice fetus from parent infected with T. gondii (treatment) showed significantly different (P>0.01) size decrease in group of fetus length, length of os cranium, os

  nasal, os frontal, os parietal, os radius ulna, os tibia fibula, os humerus and st th st th th

  length of 1 os costae to 12 os costae, width of 1 os costae to 9 and 11 os

  th th costae , while in group of width of 10 and 12 os costae did not show any

  significantly different (P>0.01) size decrease. These results are similar to the opinion of Luqman (2005), which stated that gestational age of 10 days in mice is a critical period of palate organogenesis, sense organs (the formation of eyes, ears and nose) organogenesis axial and skeletal organogenesis. Key words: Toxoplasma gondii, congenital, organogenesis, skeletal, alizerin red.

  DAFTAR ISI

  2.4 Gejala Klinis Infeksi T. gondii ............................................................. 12

  2.8 Mencit (Mus musculus) ........................................................................ 21

  2.8.5 Periode organogenesis pada embrio ......................................... 28

  2.8.4 Periode perkembangan embrio ................................................. 26

  2.8.3 Siklus birahi ................................................................................ 24

  2.8.2 Organ reproduksi ........................................................................ 22

  2.8.1 Klasifikasi mencit........................................................................ 21

  2.8 Mencit (Mus musculus) ........................................................................ 21

  2.7 Invasi T. gondii ke Sel Hospes ............................................................. 19

  2.6 Patogenesis Infeksi T. gondii ............................................................... 16

  2.5 Infeksi T. gondii Pada Saat Kebuntingan ............................................. 14

  2.3 Penularan Infeksi T. gondii .................................................................. 11

  Halaman HALAMAN SAMPUL DALAM ....................................................................... ii PRASYARAT GELAR ....................................................................................... iii PERNYATAAN ................................................................................................. iv PERSETUJUAN ................................................................................................ v PENETAPAN PANITIA PENGUJI .................................................................. vi UCAPAN TERIMA KASIH ............................................................................... vii RINGKASAN ix

  2.2 Morfologi Stadium dan Siklus Hidup T. gondii ................................... 6

  2.1 Klasifikasi Toxoplasma gondii ............................................................. 6

  BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 6

  1.4.2 Manfaat praktis ........................................................................... 5

  1.4.1 Manfaat teoritis ........................................................................... 5

  1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................... 5

  1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................. 4

  1.2 Rumusan Masalah ............................................................................... 4

  1.1 Latar Belakang ..................................................................................... 1

  BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1

  SUMMARY ....................................................................................................... xi ABSTRACT ........................................................................................................ xiii DAFTAR ISI ...................................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xvii DAFTAR TABEL .............................................................................................. xviii DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xix DAFTAR SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG ........................................... xx

  2.9 Mekanisme Kerja Teratogenik ............................................................. 31

  BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL PENELITIAN DAN HIPOTESIS ....... 36

  3.1 Kerangka Konseptual Penelitian .......................................................... 36

  3.2 Hipotesis ............................................................................................... 38

  BAB 4 MATERI DAN METODE ..................................................................... 39

  4.1 Rancangan Penelitian ........................................................................... 39

  4.2 Populasi, Sampel dan Besar Sampel .................................................... 39

  4.2.1 Populasi ...................................................................................... 39

  4.2.2 Sampel ........................................................................................ 39

  4.2.3 Besar sampel .............................................................................. 40

  4.3 Tempat dan Waktu Penelitian .............................................................. 40

  4.4 Materi Penelitian .................................................................................. 41

  4.4.1 Bahan penelitian ........................................................................ 41

  4.4.2 Alat penelitian ............................................................................. 41

  4.5 Definisi Operasional ............................................................................. 41

  4.6 Instrumen Penelitian............................................................................. 42

  4.6.1 Perbanyakan isolasi dan cara infeksi pada mencit ...................... 42

  4.6.2 Perkawinan mencit ...................................................................... 43

  4.6.3 Perlakuan terhadap mencit ........................................................ 43

  4.7 Pewarnaan dan Pengamatan Skeletal ................................................... 44

  4.8 Pengukuran Panjang Skeletal ............................................................... 45

  4.9 Analisis Data ........................................................................................ 45

  4.10 Bagan Kerangka Operasional ........................................................... 46

  BAB 5 HASIL PENELITIAN ............................................................................ 47

  4.1 Pewarnaan dan Pengamatan Skeletal ................................................... 44

  5.1 Infeksi Induk Mencit ............................................................................ 47

  5.2 Hasil Perkawinan ................................................................................. 48

  5.3 Hasil Pengukuran Skeletal ................................................................... 49

  BAB 6 PEMBAHASAN ..................................................................................... 57

  6.1 Pembahasan .......................................................................................... 57

  BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 62

  7.1 Kesimpulan ......................................................................................... 62

  7.2 Saran .................................................................................................. 62 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 63 LAMPIRAN .......................................................................................................... 70

  DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1 Takizoit T. gondii ............................................................................

  7 Kista 2.2 T. gondii ..................................................................................

  7 2.3 Ookista T. gondii .............................................................................

  8 2.4 Siklus hidup T. gondii .....................................................................

  10 2.5 Anatomisistem urogenital mencit betina .........................................

  24 2.6 Foto efek teratogenik asam retinoik pada fetus mencit ...................

  35 5.1 Takizoit dari cairan peritoneal ........................................................

  48 5.2 Ditemukan vaginal plug pada vagina mencit ..................................

  48

  5.3 Panjang fetus ;(A) Kontrol. Menggunakan kamera dslr

  51 canon eos 60d kit 1………………………………………………

  5.4 Panjang fetus ; (B) Perlakuan. Menggunakan kamera

  52 dslr canon eos 60d kit 1…………………………………………

  5.5 Kepala fetus ; (A) Kontrol, (B) Perlakuan. Menggunakan mikroskop stereo (P 8X). ................................................................

  53

  5.6 Vertebrae fetus ; (A) Kontrol. Menggunakan mikroskop stereo (P8X) ..............................................................................................

  54

  5.7 Vertebrae fetus ;(B) Perlakuan. Menggunakan mikroskop stereo (P 8X) ............................................................................................

  55

  DAFTAR TABEL Tabel Halaman 5.1 Mean dan Standar Deviasi Tulang Fetus Mencit. Kontrol (tidak diinfeksi T. gondii ), Perlakuan (diinfeksi T. gondii). ..........................................

  50