Cara Kerja Pengamatan Klorofil dan Metod

Cara Kerja Pengamatan Klorofil
1. Kandungan klorofil daun yang diamati terletak pada daun segar (jaga
kesegaran, simpan di tempat dingin)
2. Timbang 2 gram daun segar atau dengan metode luasan tertentu (1 atau 2
cm2)
3. Hancurkan dalam mortir dengan menambahkan 10 cc cairan (dapat
digunakan: aceton 100 atau 80% v/v, metanol 96% v/v atau dietil eter)
4. Daun yang telah hancur masukkan ke dalam erlenmeyer, simpan di almari
pendingin selama 24 jam
5. Saring sehingga diperoleh supernatan
6. Ambil supernatan 1 cc atau 1 ml tambahkan 10 cc cairan yang digunakan,
ulangi lagi pengenceran itu
7. Amati dengan spektrofotometer pada gelombang cahaya sesuai cairan
yang digunakan
8. Perhitungan kandungan klorofil sesuai cairan yang digunakan, bila
menggunakan:
a. Aceton 100%
 Klorofil a = 11,75 A662 - 2,35 A645
 Klorofil b = 18,61 A645 - 3,96 A662
Karoten=

1000 A 470 −2,27 klor a−81,4 klor b
227

b. Aceton 80%
 Klorofil a = 12,21 A663 - 2,81 A646
 Klorofil b = 20,13 A646 – 5,03 A663
Karoten=

1000 A 470 −3 ,27 klor a−10 4 klor b
229

c. Etanol 96%
 Klorofil a = 13,95 A665 - 6,88 A649
 Klorofil b = 24,96 A649 – 7,32 A665
Karoten=

1000 A 470 −2,05 klor a−114,8 klor b
245

d. Metanol

 Klorofil a = 15,65 A666 - 7,34 A653
 Klorofil b = 27,05 A653 – 11,21 A666
Karoten=

1000 A 470 −2,86 klor a−129,2 klor b
245

e. Dietil eter
 Klorofil a = 10,05 A662 – 0,766 A644
 Klorofil b = 16,37 A644 – 3,14 A662
Karoten=

1000 A 470 −1,28 klor a−56,7 klor b
230