DAFTAR ISI AKTIVITAS ANTIPLASMODIUM FRAKSI POLAR EKSTRAK METANOL KULIT BATANG MIMBA (Azadirachta indica A. Juss.) PADA KULTUR Plasmodium falciparum SECARA In Vitro DAN PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS.

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ..................................................................................

i

HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................

iii

MOTTO .......................................................................................................

iv

PERSEMBAHAN .......................................................................................

v

DEKLARASI ...............................................................................................

vi

KATA PENGANTAR ..................................................................................

vii

DAFTAR ISI................................................................................................

x

DAFTAR GAMBAR....................................................................................

xiii

DAFTAR TABEL ........................................................................................

xv

DAFTAR LAMPIRAN ...............................................................................

xvi

DAFTAR SINGKATAN ..............................................................................

xvii

INTISARI .................................................................................................... xviii
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah....................................................................

1

B. Perumusan Masalah...........................................................................

4

C. Tujuan Penelitian ..............................................................................

4

D. Tinjauan Pustaka...............................................................................

5

1. Tanaman mimba............................................................................

5

a. Sistematika Tanaman .................................................................

5

b. Morfologi Tanaman ...................................................................

5

c. Kandungan Kimia .....................................................................

6

x

d. Kegunaan A. indica A Juss ........................................................

8

2. Kromatografi Lapis Tipis ............................................................

9

3. Metode Ekstraksi Simplisia .........................................................

12

4. Metode Fraksinasi Esktrak ..........................................................

12

a. Kromatografi ...........................................................................

12

b. Kromatografi Cair Vakum (KCV) ............................................

13

5. Malaria ........................................................................................

14

6. Plasmodium falciparum ..............................................................

16

7. Senyawa Antimalaria ..................................................................

19

E. Landasan Teori ................................................................................

27

F. Hipotesis ..........................................................................................

27

BAB II. CARA PENELITIAN
A. Kategori dan Rancangan Penelitian ...................................................

28

B. Alat dan Bahan .................................................................................

28

1. Alat ..............................................................................................

28

2. Bahan ...........................................................................................

29

C. Jalan Penelitian ................................................................................

30

1. Pengambilan bahan ......................................................................

30

2. Determinasi ..................................................................................

31

3. Pembuatan Serbuk Simplisia ........................................................

31

4. Pembuatan Ekstrak Kulit Batang A. indica A Juss .....................

31

5. Proses Fraksinasi Ekstrak Kulit Batang A. indica A Juss ............

32

6. Uji aktivitas antiplasmodium ........................................................

32

xi

a. Pembiakan P. falciparum strain D10 ........................................

33

b. Sinkronisasi .............................................................................

33

c. Uji Aktivitas Antiplasmodium ..................................................

34

7. Uji Kualitatif Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............................

36

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Determinasi ..............................................................................

38

B. Ekstraksi dan Fraksinasi ....................................................................

38

1. Ekstraksi .......................................................................................

38

2. Fraksinasi .....................................................................................

40

a. Penentuan Sistem Eluen ............................................................

40

b. Penyiapan Kolom KCV .............................................................

41

c. Penyiapan Sampel .....................................................................

42

d. Fraksinasi .................................................................................

43

C. Hasil Identifikasi Kandungan Kimia Kulit Batang Mimba .................

45

D. Aktivitas Antiplasmodium Fraksi Polar Ekstrak Metanol Kulit
Batang Mimba (A. indica A Juss) ......................................................

51

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan ........................................................................................

58

B. Saran ..................................................................................................

58

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................

59

LAMPIRAN-LAMPIRAN .........................................................................

64

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 1. Kandungan Kimia Kimia dari Beberapa Bagian Tumbuhan
Mimba (A. indica A Juss) ...........................................................

7

Gambar 2. Struktur Kimia dari Kulit Batang Mimba (A. indica A Juss) yang
Memiliki Empat Kandungan trisiklik diterpenoid ......................

8

Gambar 3. Siklus Kehidupan Parasit P. falciparum pada Fase Seksual dan
Aseksual ....................................................................................

18

Gambar 4. Struktur Kimia Kloroquin ...........................................................

20

Gambar 5. Struktur Kimia Kuinin dan Turunannya ......................................

20

Gambar 6. Struktur

Kimia

Bisbenzylisoquinoline

Alkaloid

yang

Menghambat Pertumbuhan Kultur P. falciparum Strain Resisten
dan Sensitif Kloroquin ................................................................
Gambar 7. Struktur

Kimia

Tubulosine,

Psychotrin

dan

21

Cephaeline

Merupakan Alkaloid Aktif Terhadap Aktivitas Antimalaria
Secara in vivo maupun in vitro ....................................................

22

Gambar 8. Struktur Kimia Quassin dan Neoquassin .....................................

23

Gambar 9. Struktur Kimia Artemisin Merupakan Golongan Sesquiterpen
Lakton yang Sangat Efektif Terhadap Strain Plasmodium yang
Resistensi Terhadap Obat Malaria ...............................................

23

Gambar 10.Struktur Kimia Gedunin dan Dihidrogedunin Merupakan
Turunan Triterpenoid yang Memiliki Aktivitas Antimalaria ........

xiii

24

Gambar 11.Struktur Kimia Turunan Flavonoid yang Dilaporkan oleh
Mendoza et al. pada Tahun 2006 yang Memiliki Aktivitas
Antimalaria Secara in vitro..........................................................

25

Gambar 12.Struktur Kimia dari Turunan Xanton yang Memiliki Aktivitas
Terhadap P. falciparum Strain yang Resisten Kloroquin..............

26

Gambar 13.Struktur Kimia dari Plumbagin dan 2-Metilnaptazarin yang
Memiliki Aktivitas Terhadap P. falciparum.................................

26

Gambar 14. Skema Pembuatan Serbuk Kulit Batang A. indica A. Juss........

31

Gambar 15. Profil KLT Hasil KCV dengan Fase Gerak Kloroform:Metanol
(9:1) dan Deteksi dengan Serium Sulfat.......................................

44

Gambar 16.Kromatogram Fraksi Polar dari Ekstrak Metanol Deteksi dengan
Sinar UV254 nm Dan UV366 nm ....................................................

46

Gambar 17.Kromatogram Fraksi Polar Ekstrak Kulit Batang Mimba,
Deteksi dengan Uap Amonia ......................................................

48

Gambar 18.Kromatogram Fraksi Polar Ekstrak Kulit Batang Mimba,
Deteksi dengan Pereaksi Semprot Dragendorff............................

49

Gambar 19.Kromatogram Fraksi Polar Ekstrak Kulit Batang Mimba,
Deteksi dengan Pereaksi Semprot Liebermann Burchard ............

50

Gambar 20. Kurva Log Konsentrasi vs % Penghambatan ............................

53

Gambar 21. Kurva Log Konsentrasi vs % Probit ..........................................

54

xiv

DAFTAR TABEL

Halaman
Tabel 1. Daftar Eluen KCV .........................................................................

41

Tabel 2. KLT Penggabungan Fraksi .............................................................

44

Tabel 3. Hasil Analisis KLT di Bawah Sinar UV254 nm dan UV366 nm .........

46

Tabel 4. Hasil Analisis KLT dengan Deteksi Uap Amonia............................

47

Tabel 5. Hasil Analisis KLT dengan Deteksi Pereaksi Semprot Dragendorff

48

Tabel 6. Hasil Analisis KLT dengan Deteksi Pereaksi Semprot Liebermann
Burchard ........................................................................................

50

Tabel 7. Jumlah Sel Eritrosit Terinfeksi Pada Setiap Perlakuan ....................

52

Tabel 8. Persen Pertumbuhan P. falciparum strain D10 ...............................

52

Tabel 9. Persen Penghambatan Berbagai Konsentrasi Fraksi Polar Ekstrak
Metanol

Kulit

Batang

Mimba

Terhadap

Pertumbuhan

P. falciparum strain D10 ...............................................................

53

Tabel 10. Profil KLT pada Fraksi Polar, Semi Polar dan Non Polar .............

55

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi .................................................

64

Lampiran 2. Foto Tanaman dan Serbuk Mimba (A. indica A. Juss.) .............

65

Lampiran 3. Foto KCV .................................................................................

66

Lampiran 4. Foto LAF .................................................................................

67

Lampiran 5. Foto Candle Jar .......................................................................

68

Lampiran 6. Perhitungan Rendemen ............................................................

69

Lampiran 7. Perhitungan Dosis Pemberian dan Pembuatan Inokulum ..........

70

Lampiran 8. Perhitungan % Parasitemia ......................................................

72

Lampiran 9. Perhitungan % Penghambatan ................................................

75

Lampiran 10. Perhitungan Probit .................................................................

76

Lampiran 11. Perhitungan IC50 ...................................................................

78

Lampiran 12. Tabel Angka Probit ................................................................

80

xvi

DAFTAR SINGKATAN

KLT

: Kromatografi Lapis Tipis

Rf

: Retardation factor

KCV

: Kromatografi Cair Vakum

MCM

: Malaria Culture Medium

RPMI

: Roswel Park Memorial Institute

HEPES

: N-2-Hidroksi Etil Piperazin-N-2-Etan Sulfonic Acid

HS

: Human Serum

NRBC

: Normal Red Blood Cell

DMSO

: Dimethyl Sulfoxide

Rotavapor

: Rotary Evaporator

UV

: Ultra Violet

LB

: Liebermann Burchard

VS

: Versus

xvii

INTISARI

Tanaman mimba telah diyakini dapat menyembuhkan penyakit malaria.
Hasil aktivitas antiplasmodium secara in vitro dari ekstrak metanol kulit batang
mimba memberikan efek penghambatan terhadap Plasmodium falciparum.
Sehingga perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terhadap kulit batang mimba.
Penelitian ini dilakukan untuk membuktikan aktivitas antiplasmodium fraksi polar
ekstrak metanol kulit batang mimba terhadap P. falciparum secara in vitro,
menetapkan nilai IC50 dan mengidentifikasi kandungan senyawa secara
kromatografi lapis tipis.
Aktivitas antiplasmodium dilakukan secara in vitro terhadap P. falciparum
strain D10 dengan 6 kelompok perlakuan. Kelompok I adalah kontrol negatif;
Kelompok II-VI dengan perlakuan berturut-turut pada konsentrasi 3,125 µg/mL,
6,25 µg/mL, 12,5 µg/mL, 25 µg/mL, dan 50 µg/mL. Kandungan senyawa kimia
dalam fraksi polar ekstrak metanol kulit batang mimba diuji secara kualitatif
dengan kromatografi lapis tipis. Identifikasi senyawa kimia menggunakan UV254
dan UV366 serta pereaksi semprot Dragendorf, Lieberman Burchard, uap amonia.
Hasil uji aktivitas antiplasmodium menunjukkan nilai IC50 fraksi polar
ekstrak metanol kulit batang mimba sebesar 11,37µg/mL sehingga aktif sebagai
antiplasmodium. Hasil analisis KLT menunjukkan golongan senyawa yang
terkandung dalam fraksi polar ekstrak metanol kulit batang mimba adalah
flavonoid.

Kata Kunci : Kulit Batang Mimba (Azadirachta indica A. Juss.), Fraksi Polar
Ekstrak Metanol Kulit Batang Mimba, Plasmodium falciparum, in
vitro, Kromatografi Lapis Tipis

xviii