Anthony Susilo 22010110120121 Bab8KTI

DAFTAR PUSTAKA

1. Winarno F.G. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka Utama; 2004.

2. Azizahwati, Kuniadi M, Hidayati H. Analisis Zat Warna Sintetik Terlarang untuk Makanan yang Beredar di Pasaran. Majalah Ilmu Kefarmasian, IV (1), 7-10, Departemen Farmasi FMIPA-Universitas Indonesia; 2007.

3. Astomo dan Azis Eko. Analisis Rhodamin B dan Metanil Yellow dalam Jelly di Pasar Kecamatan Jebres Kotamadya Surakarta dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis. Universitas Muhammadiyah Surakarta; 2008. 4. Laporan Tahunan Badan Pengawas Obat dan Makanan Tahun 2012 dari

http://www.pom.go.id/browse/laporan_tahunan diunduh pada 6 Februari 2014.

5. Djalil A.D, Hartanti D, Rahayu W.S, Prihatin R, dan Hidayah N. Identifikasi Zat Warna Kuning Metanil (Metanil Yellow) dengan Metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) pada Berbagai Komposisi Larutan Pengembang. Jurnal Farmasi Indonesia, 03 (2), 28-29, Fakultas Farmasi UMP, Purwokerto; 2005. 6. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor :

239/Men.Kes/Per/V/85 tentang Zat Warna Tertentu yang Dinyatakan Sebagai

Bahan Berbahaya diunduh dari

http://www.pom.go.id/pom/hukum_perundangan/pdf/SK_Dirjenpom_00386.p df pada tanggal 6 Februari 2014.

7. Anonima. Material Safety Data Sheet Metanil Yellow MSDS, (online), (http://datasheets.scbt.com/sc-215306.pdf, diakses 7 Desember 2013); 2007. 8. Sarkar, R. and A.R. Ghosh. Metanil yellow – An azo dye induced

hispathololgical and ultrastructural changes in albino rat (Rattus Norvegicus). The Bioscan. 7(1) : 427-432, 2012, [www.thebioscan.in] (diunduh 7 Desember 2013).

9. Budiarto T. Iwan, G. Nainggolan Sihombing, Oey Kam Nio. Kelainan Patologi pada Mencit dan Tikus Disebabkan Zat Warna Rhodamine B dan Metanil Yellow. Buletin Penelitian Kesehatan Vol XI No. 1; 1983.

10. Nagaraja, T.N. and T. Desiraju. Effects of chronic consumption of metanil yellow by developing and adult rats on brain regional levels of noradrenaline, dopamine and serotonin, on acetylcholine esterase activity and on operant

conditioning. Food Chem Toxicol. 1993.

[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/809524] (diunduh 7 Desember 2013). 11. Gartner, L. Hiatt. Color Textbook of Histology 3rd Edition. 2007. Available

from : www.studentconsult.com, diakses 7 Desember 2013.

12. Price SA. and Wilson LM. Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit. Vol.2. Ed 6. Jakarta: EGC; 2005.

13. Arief, I. Zat Berbahaya dalam Makanan; 2007 (online), (http://www.pjnhk.go.id/index2.php?option=com_content&do_pdf=1&id=58, diakses 24 Januari 2014).

14. Anonimb. Metanil Yellow; 2007. (online), (http://www.chemicalland21.com, diakses 24 Januari 2014).

15. Anonimc. Bahaya Keracunan Metanil Yellow Pada Pangan; 2012. (online), ( http://ik.pom.go.id/v2012/wp-content/uploads/2011/11/Bahaya-Metanil-Yellow-pada-Pangan3.pdf, diakses 24 Januari 2014).

16. Winarno F.G. Keamanan Pangan. Bogor: Himpunan Alumni Fakultas Teknologi Pertanian IPB; 2005.

17. Soekarto, S.T. Dasar-dasar Pengawasan dan Standarisasi Mutu Pangan. Bogor: Penerbit Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi Institut Pertanian Bogor; 1990.

18. Metanil Yellow. [http://www.chemicalbook.com], (diunduh bulan Februari 2014)

19. Gupta S, Sundarrajan M, and Rao K. V. Tumor Promotion by Metanil Yellow and Malachite Green during Rat Hepatocarcinogenesis is Associated with

Dysregulated Expression of Cell Cycle Regulatory Proteins. India: Carcinogenesis Division, Cancer Research Institute, Tata Memorial Centre; 2003.

20. Cahyadi W. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan. Jakarta: Bumi Aksara. 2006: 19-27.

21. Drake et Al. Gray’s Anatomy for Students 2nd Edition. Philadephia: Elsenvier. 2010: 355-59.

22. Susanto Hardono, Erie B.P.S Andar, R.M Suryo Adji. Systema Urogenitale. Semarang: Bagian Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro. 2011: 5-8.

23. Faradz Sultana MH, Soejoto, Soetedjo, Bambang Witjahjo, Neni Susilaningsih, Ratna Damma P, dkk. Lecture Notes Histologi 2. Semarang: Bagian Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro 2011: 66-76. 24. Guyton, A.C. and John, E. Hall. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 11.

Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC; 2007.

25. Ganong, W. F. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 22. Jakarta: EGC. 2008: 725-56.

26. Soebowo, Sarjadi, Indra Wijaya, Siti Amarwati, Ika Pawitra Miranti, Awal Prasetyo. Patologi Anatomi. Semarang: Badan Penerbit Universitas Diponegoro. 2008: 125-47.

27. Mitchell, R.N. and Cotran, R.S. Jejas, Adaptasi, dan Kematian Sel. Dalam: Kumar, V, Cotran, R.S, Robbins, S.L (eds). Buku Ajar Patologi Robbins Volume 1. Edisi VII. Jakarta: EGC.2007: 7-26.

28. Alpers, C. E. And Fogo, A. B. 2007. The kidney and is collecting system. Kumar, V., Abbas, K., Fausto, N. and Mitchell, R.N., Robbins. Basic Pathology. 8th ed. Philadelphia: Saunders Elsevie.

29. Underwood, J.C.E. Patologi Umum dan Sistemik. Vol.2. 2nd ed. Jakarta: EGC; 2007.

30. Acute Tubular Necrosis diunduh dari

http://www.brown.edu/Courses/Digital_Path/systemic_path/renal/atn.html

pada tanggal 8 Februari 2014.

31. Macfarlane, Reid, and Callander. Pathology Illustrated 5th Edition.

Philadephia: Elsenvier.

32. Kumar, Abbas, Fausto, and Mitchell. Basic Pathology 8th Edition. Jakarta: EGC. 2007: 595-97.

33. Sudigdo S, Sofyan I. Dasar-Dasar Metodologi Penelitian Klinis, Edisi 2. Jakarta: Sagung Seto; 2002.

34. Dahlan M. Sopiyudin. Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta : Salemba Medika; 2011.

35. Khanna S K, Srivastava L P, and Singht G B. Toxicity studies on metanil yellow in rats. India: Industrial Toxicology Research Center; 1978.

36. Laurance, B., Keith, P., Donald, B., and Iain, B. Goodman and Gildman’s

LAMPIRAN

Lampiran 1. Cara Perhitungan Dosis

Tabel 15. Tabel Konversi Perhitungan Dosis Untuk Berbagai Hewan Uji36

Mencit 20 gr Tikus 20 gr Marmut 400 gr Kelinci 1,5 kg Kucing 2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit 20 gr

1,0 7,0 13,25 27,8 29,7 64,1 124,2 387,9

Tikus 200 gr

0,14 1,0 1,74 3,9 4,2 9,2 17,8 56,0

Marmut 400 gr

0,08 0,57 1,0 2,25 2,4 5,2 10,2 31,5

Kelinci 1,5 kg

0,04 0,25 0,44 1,0 1,08 2,4 4,5 14,2

Kucing 1,5 kg

0,03 0,23 0,41 0,92 1,0 2,2 4,1 13,0

Kera 4 kg

0,016 0,12 0,19 0,42 0,45 1,0 1,9 6,1

Anjing 12 kg

0,008 0,06 0,10 0,22 0,24 0,52 1,0 3,1

Manusia 70 kg

0,0026 0,018 0,031 0,07 0,076 0,16 0,32 1,0

Dosis sub letal metanil yellow yang dapat menimbulkan efek pada ginjal tikus adalah 3000 mg/kgBB8

= 200

1000 � 3000 �

=

600 �

Perhitungan:

Dosis metanil yellow untuk tikus dengan berat 200 gram adalah: Faktor konversi dosis tikus 200 gram ke mencit 20 gram = 0,14

Maka dosis metanil yellow untuk mencit dengan berat 20 gram adalah: = 600 mg � 0,14

=

84 �

20 � � � ��

= 4200 mg/kgBB

a) Perlakuan pertama = 1 x dosis sub letal = 1 x 4200 = 4200 mg/kgBB/hari b) Perlakuan kedua = ½ x dosis sub letal = ½ x 4200 = 2100 mg/kgBB/hari c) Perlakuan ketiga = ¼ x dosis sub letal = ¼ x 4200 = 1050 mg/kgBB/hari d) Perlakuan kontrol = 0 x dosis sub letal = 0 x 4200 = 0 mg/kgBB/hari

Lampiran 2. Metode Baku Histologis Pemeriksaan Jaringan

A. Cara pengambilan jaringan dan fiksasi

1) Mengambil jaringan sesegera mungkin setelah mencit Balb/c diterminasi dengan cara dislokasi leher (kurang dari 2 jam) dengan ukuran 1 cm3.

2) Kemudian memasukkan ke dalam larutan fiksasi dengan urutan sebagai berikut :

a) Fiksasi dalam larutan formalin 10%.

b) Dehidrasi dengan alkohol 30% selama 20 menit I, 20 menit II, dan 20 menit III.

 Lalu lanjutkan dengan alkohol 40% 1 jam

 alkohol 50% 1 jam

 alkohol 60% 1 jam

 alkohol 70% 1 jam

 alkohol 80% 1 jam

 alkohol 90% 1 jam (alkohol 70%-80% dapat ditunda sampai keesekan harinya).

c) Larutan xylol alkohol 1 : 1 dengan waktu kurang lebih 24 jam. d) Clearing dengan larutan xylol 1, 2, 3 dengan waktu

e) Xylol parafin 1 : 1 selama 20 menit/24 jam dengan dipanaskan dalam oven 600C.

f) Embeding dan bloking: parafin 1, 2, 3 selama 20 menit, lalu jaringan dicetak blok paraffin kemudian didinginkan, sehingga cetakan dapat dibuka.

g) Trimming: memotong balok-balok paraffin sehingga jaringan mudah dipotong dengan mikrotom.

B. Cara pemotongan blok (sectioning)

1) Menyiapkan kaca objek bersih.

2) Kaca objek diberi albumin ditengahnya dan direkatkan.

3) Blok yang sudah disiapkan dipotong dengan ketebalan 5 mikron, lalu dimasukkan dalam air panas kurang lebih 600C. Setelah jaringan mengembang, jaringan diambil dengan kaca objek yang sudah diberi albumin.

4) Kemudian dikeringkan.

5) Parafin yang ada pada kaca objek atau jaringan dihilangkan dengan dipanaskan dalam oven 600C atau dengan tungku.

C. Pewarnaan HE

Slide jaringan dimasukkan dalam :

1) Xylol 1, 2, 3 masing-masing 10 menit.

2) Rehidrasi dengan alkohol xylol selama 5 menit.

4) Bilas aquades 1x kurang lebih 10 menit.

5) Rendam dalam hematosiklin kurang lebih 10 menit. 6) Bilas dengan air mengalir sampai bersih.

7) Bilas aquades, lalu acid alcohol (alkohol+NaCl 0,9%). 8) Bilas alkohol 50-96%.

9) Eosin kurang lebih 2-5%. 10) Bilas alkohol 96% sebanyak 2x. 11) Bilas alkohol xylol.

12) Keringkan dengan kertas saring, langsung dibersihkan kotoran-kotoran yang ada disekitar jaringan.

13) Xylol 1 (5 menit), xylol 2 (5 menit) tetesi asam canada, langsung ditutup kaca penutup.

Lampiran 3 : Hasil Gambaran Histopatologi Ginjal

Kelompok Kontrol Kelompok Perlakuan P1

Kelompok Perlakuan P2 Kelompok Perlakuan P3

Keterangan :

Sel Normal

Sel Degenerasi ditandai dengan pembengkakan sel Sel Nekrosis ditandai dengan inti yang menghilang

Lampiran 4 : Diagram Batang Indeks Degenerasi dan Nekrosis

Keterangan:

Kontrol : Kelompok yang hanya diberikan pakan dan minum standar tanpa pemberian metanil yellow

Perlakuan 1 : Kelompok dengan pemberian metanil yellow dosis 84 mg/KgBB/hari selama 30 hari

Perlakuan 2 : Kelompok dengan pemberian metanil yellow dosis 42 mg/KgBB/hari selama 30 hari

Perlakuan 3 : Kelompok dengan pemberian metanil yellow dosis 21 mg/KgBB/hari selama 30 hari

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4

Degenerasi

Kontrol Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3

0 0.5 1 1.5 2 2.5

Nekrosis

Kontrol Perlakuan 1 Perlakuan 2 Perlakuan 3

Lampiran 5 : Hasil Analisis SPSS

Degenerasi

Case Summaries Degenerasi

5 1,000 ,0000 1,000 1,0 1,0

5 2,520 ,6099 2,400 1,8 3,4

5 2,920 ,4817 2,800 2,4 3,6

5 3,680 ,2280 3,600 3,4 4,0

20 2,530 1,0687 2,700 1,0 4,0

Kelompok K P1 P2 P3 Total

N Mean St d. Dev iation Median Minimum Maximum

Tests of Normalityb

,178 5 ,200* ,981 5 ,940

,198 5 ,200* ,957 5 ,787

,237 5 ,200* ,961 5 ,814

Kelompok P1 P2 P3 Degenerasi

St at ist ic df Sig. St at ist ic df Sig.

Kolmogorov -Smirnova Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true signif icance. *.

Lillief ors Signif icance Correction a.

Degenerasi is constant when Kelompok = K. It has been omit ted. b.

Test of Homogeneity of Variancea

2,023 2 12 ,175

1,182 2 12 ,340

1,182 2 9,161 ,349

1,954 2 12 ,184

Based on Mean Based on Median Based on Median and with adjusted df

Based on t rimmed mean Degenerasi

Lev ene

St at ist ic df 1 df 2 Sig.

Degenerasi is constant when Kelompok = K. It has been omitted. a.

Box Plot

Oneway Anova

Post Hoc Tests

ANOVA

Degenerasi

19,078 3 6,359 38,776 ,000

2,624 16 ,164

21,702 19

Between Groups Within Groups Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Multi ple Comp ariso ns

Dependent Variable: Degenerasi Bonf erroni

-1,5200* ,2561 ,000 -2,291 -,749 -1,9200* ,2561 ,000 -2,691 -1,149 -2,6800* ,2561 ,000 -3,451 -1,909 1,5200* ,2561 ,000 ,749 2,291 -,4000 ,2561 ,827 -1,171 ,371 -1,1600* ,2561 ,002 -1,931 -,389 1,9200* ,2561 ,000 1,149 2,691 ,4000 ,2561 ,827 -,371 1,171 -,7600 ,2561 ,054 -1,531 ,011 2,6800* ,2561 ,000 1,909 3,451 1,1600* ,2561 ,002 ,389 1,931 ,7600 ,2561 ,054 -,011 1,531 (J) Kelom pok

P1 P2 P3 K P2 P3 K P1 P3 K P1 P2 (I) Kelompok K P1 P2 P3 Mean Dif f erence

(I-J) St d. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 95% Conf idence Interv al

The mean dif f erence is signif icant at the .05 lev el. *.

Nekrosis

Case Summaries Nekrosis

5 1,000 ,0000 1,000 1,0 1,0

5 2,400 ,5831 2,400 1,6 3,2

5 2,040 ,5550 2,200 1,2 2,6

5 1,280 ,2683 1,400 1,0 1,6

20 1,680 ,6971 1,500 1,0 3,2

Kelompok K P1 P2 P3 Total

N Mean St d. Dev iation Median Minimum Maximum

Tests of Normalityb

,166 5 ,200* ,989 5 ,977

,213 5 ,200* ,939 5 ,656

,273 5 ,200* ,852 5 ,201

Kelompok P1 P2 P3 Nekrosis

St at ist ic df Sig. St at ist ic df Sig.

Kolmogorov -Smirnova Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true signif icance. *.

Lillief ors Signif icance Correction a.

Nekrosis is const ant when Kelompok = K. I t has been omitted. b.

Test of Homogeneity of Variancea

,840 2 12 ,456

,625 2 12 ,552

,625 2 10,039 ,555

,807 2 12 ,469

Based on Mean Based on Median Based on Median and with adjusted df

Based on t rimmed mean Nekrosis

Lev ene

St at ist ic df 1 df 2 Sig.

Nekrosis is constant when Kelompok = K. It has been omitt ed. a.

Box Plot

Oneway Anova

Post Hoc Tests

ANOVA

Nekrosis

6,352 3 2,117 11,763 ,000

2,880 16 ,180

9,232 19

Between Groups Within Groups Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Multi ple Comp ariso ns

Dependent Variable: Nekrosis Bonf erroni

-1,4000* ,2683 ,001 -2,207 -,593 -1,0400* ,2683 ,008 -1,847 -,233 -,2800 ,2683 1,000 -1,087 ,527 1,4000* ,2683 ,001 ,593 2,207 ,3600 ,2683 1,000 -,447 1,167 1,1200* ,2683 ,004 ,313 1,927 1,0400* ,2683 ,008 ,233 1,847 -,3600 ,2683 1,000 -1,167 ,447 ,7600 ,2683 ,072 -,047 1,567 ,2800 ,2683 1,000 -,527 1,087 -1,1200* ,2683 ,004 -1,927 -,313 -,7600 ,2683 ,072 -1,567 ,047 (J) Kelom pok

P1 P2 P3 K P2 P3 K P1 P3 K P1 P2 (I) Kelompok K P1 P2 P3 Mean Dif f erence

(I-J) St d. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 95% Conf idence Interv al

The mean dif f erence is signif icant at the .05 lev el. *.

Lampiran 8 : Dokumentasi Penelitian

Pemeliharaan Penyondean

Terminasi Pembedahan

Lampiran 9 : Biodata Mahasiswa

Identitas

Nama : Anthony Susilo

NIM : 22010110120121

Tempat/tanggal lahir : Jakarta, 13 September 1992 Jenis kelamin : Laki-Laki

Alamat : Jalan Sawo Raya No. 7, Rawamangun, Jakarta Timur

Nomor HP : 08979449294

Email : an.thony@windowslive.com

Riwayat Pendidikan Formal

1. SD : SD Tarakanita 5 Lulus tahun : 2004

2. SMP : SMP Tarakania 4 Lulus tahun : 2007

3. SMA : SMA Kolese Kanisius Lulus tahun : 2010 4. S1 : Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Masuk tahun: 2010

Nekrosis

Case Summaries Nekrosis

5 1,000 ,0000 1,000 1,0 1,0

5 2,400 ,5831 2,400 1,6 3,2

5 2,040 ,5550 2,200 1,2 2,6

5 1,280 ,2683 1,400 1,0 1,6

20 1,680 ,6971 1,500 1,0 3,2

Kelompok K P1 P2 P3 Total

N Mean St d. Dev iation Median Minimum Maximum

Tests of Normalityb

,166 5 ,200* ,989 5 ,977

,213 5 ,200* ,939 5 ,656

,273 5 ,200* ,852 5 ,201

Kelompok P1 P2 P3 Nekrosis

St at ist ic df Sig. St at ist ic df Sig.

Kolmogorov -Smirnova Shapiro-Wilk

This is a lower bound of the true signif icance. *.

Lillief ors Signif icance Correction a.

Nekrosis is const ant when Kelompok = K. I t has been omitted. b.

Test of Homogeneity of Variancea

,840 2 12 ,456

,625 2 12 ,552

,625 2 10,039 ,555

,807 2 12 ,469

Based on Mean Based on Median Based on Median and with adjusted df

Based on t rimmed mean Nekrosis

Lev ene

St at ist ic df 1 df 2 Sig.

Nekrosis is constant when Kelompok = K. It has been omitt ed. a.

Box Plot

Oneway Anova

Post Hoc Tests

ANOVA

Nekrosis

6,352 3 2,117 11,763 ,000

2,880 16 ,180

9,232 19

Between Groups Within Groups Total

Sum of

Squares df Mean Square F Sig.

Multi ple Comp ariso ns

Dependent Variable: Nekrosis Bonf erroni

-1,4000* ,2683 ,001 -2,207 -,593 -1,0400* ,2683 ,008 -1,847 -,233 -,2800 ,2683 1,000 -1,087 ,527

1,4000* ,2683 ,001 ,593 2,207

,3600 ,2683 1,000 -,447 1,167

1,1200* ,2683 ,004 ,313 1,927

1,0400* ,2683 ,008 ,233 1,847

-,3600 ,2683 1,000 -1,167 ,447

,7600 ,2683 ,072 -,047 1,567

,2800 ,2683 1,000 -,527 1,087

-1,1200* ,2683 ,004 -1,927 -,313

-,7600 ,2683 ,072 -1,567 ,047

(J) Kelom pok P1 P2 P3 K P2 P3 K P1 P3 K P1 P2 (I) Kelompok K P1 P2 P3 Mean Dif f erence

(I-J) St d. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 95% Conf idence Interv al

The mean dif f erence is signif icant at the .05 lev el. *.

Lampiran 8 : Dokumentasi Penelitian

Pemeliharaan Penyondean

Terminasi Pembedahan

Lampiran 9 : Biodata Mahasiswa

Identitas

Nama : Anthony Susilo

NIM : 22010110120121

Tempat/tanggal lahir : Jakarta, 13 September 1992 Jenis kelamin : Laki-Laki

Alamat : Jalan Sawo Raya No. 7, Rawamangun, Jakarta Timur

Nomor HP : 08979449294

Email : an.thony@windowslive.com

Riwayat Pendidikan Formal

1. SD : SD Tarakanita 5 Lulus tahun : 2004

2. SMP : SMP Tarakania 4 Lulus tahun : 2007

3. SMA : SMA Kolese Kanisius Lulus tahun : 2010 4. S1 : Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Masuk tahun: 2010