Appendix Isolasi dan Karakterisasi Triterpenoid dari Tanaman Patah Tulang (Euphorbia tirucalli L.)
Lampiran 2.Makroskopik tumbuhan patah tulang (Euphorbia tirucalli L.)
40
Gambar 1: Gambar Ranting Tanaman Patah Tulang
41
Lampiran 3.Bagan kerja penelitian
Batang Patah tulang
Dibersihkan dengan air mengalir
Ditiriskan
Dipotong
Dikeringkan dilemari pengering
Diserbuk
Serbuk simplisia patah tulang
42
Lampiran 3. Lanjutan
Serbuk simplisia
dimasukkan ke dalam wadah
dimasukkan n-heksan sampai serbuk
terendam sempurna
dibiarkan selama 5 hari terlindung dari
cahaya, sambil sesekali diaduk
disaring
Ampas
Maserat
dimaserasi kembali dengan
pelarut n-heksan
dienap tuang
Maserat
Ampas
diuapkan dengan rotary evaporator pada 40oC
Ekstrak n-heksan kental
43
Lampiran 3. Lanjutan
Ekstrak n-heksan kental
Di KLT preparatif:
- fase gerak : n-heksana-etilasetat
(80:20)
- fase diam : silikagel 60 F254
Di KLT:
- fase gerak : n-heksana-etilasetat
(90:10), (80:20), (70:30)
- fase diam = plat lapis tipis
Kromatogram
Noda (ungu) dikerok
Kromatogram
Isolat-isolat
Dielusidenganpelarutmetanol
Isolat
Diisolasi secara KLT
preparatif kemudian di KLT
satu arah dan dua arah
Isolat murni
Dikarakterisasi dengan
spektrofotometri UV dan IR
Spektrum
44
Lampiran 4. Gambar kromatogram ekstrak n-heksana batang patah tulang
70 : 30
80 : 20
90 : 10
Keterangan : Fase gerak n-heksanaetilasetatdanfasediam plat lapis tipis, jarak
rambat 8 cm, TP = 1 cm, BP= 1 cm.
TP = titik penotolan, BP = batas penotolan
Gambar 2:Gambar kromatogram ekstrak n-heksana batang patah tulang
45
Lampiran 5.Gambar kromatogram dari ekstrak n-heksan
BP
TP
B
Keterangan: TP = titikpenotolan, BP = bataspenotolan
Dilihatsetelahpenyemprotandengan Liebermann-bourchard
Gambar 3:Gambar kromatogram dari ekstrak n-heksan
46
Lampiran 6.Gambar kromatogram KLT satuarahdanduaarah
BP
TP
A
BP
TP
B
Keterangan : TP = titik penotolan, BP = batas penotolan
A. KLT satu arah n-heksana:etilasetat = 8 ml:2 ml(Rf 0,78)
B. KLT dua arah n-heksana:etil asetat = 8 ml : 2 ml (Rf 0,78)
Toluen : etil asetat = 9 ml : 1 ml
Gambar 4:Gambar kromatogram KLT satuarahdanduaarah
47
Lampiran 7.Gambar alat spektrofotometer yang digunakan analisis isolat murni
A
B
Keterangan : A. Spektrofotometer ultraviolet
B. Spektrofotometer inframerah
Gambar 5:Gambar alat spektrofotometer yang digunakan analisis isolat murni
48
Lampiran 8. Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer ultraviolet.
Gambar 8:Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer ultraviolet
49
Lampiran 9. Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer inframerah isolat
Tabel hasil analisis spektrum inframerah dengan isolat murni triterpen
No.
1
2
3
4
5
Bilangan gelombang (cm-1)
1720,50
2935,66
1377,17
1107,14
3429,43
Ikatan kimia / gugus fungsi
C=O
-CHalifatik
-CH3
C-H
-OH
Gambar 7:Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer inframerah isolat
50
Lampiran 10.Perhitungan hasil penetapan kadar
a. Perhitungan hasil penetapan kadar air
No.
Berat sempel
1
5,012 g
2
5,013 g
3
5,034 g
Kadar air =
volume air (ml)
berat sampel (g)
1. Kadar air
=
2. Kadar air
=
3. Kadar air
=
Kadar air rata – rata
=
Volume air
0,3 ml
0,3 ml
0,3 ml
� 100%
0,3
5,012
x100%
= 5,98 %v�b
x100%
= 5,98 %v�b
x100%
= 5,95 %v�b
0,3
5,013
0,3
5,034
5,98%+5,98%+5,95%
3
= 6,64%v�b
b. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air
No.
Berat sampel
Berat sari
1
5,004 g
0,166 g
2
5,025 g
0,195 g
3
5,053 g
0,163 g
Kadar sari larut air =
berat sari
berat sampel
1. Kadar sari larut air
=
2. Kadar sari larut air
=
3. Kadar sari larut air
=
Kadar sari larut air rata – rata =
0,166
5,004
0,195
5,025
0,163
5,053
x
x
x
x
100
20
100
20
100
20
100
20
x 100%
x 100%
= 16,59%
x 100%
= 19,40%
x 100%
= 16,12%
16,59%+19,40%+16,12%
3
51
= 17,37%
c. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
No.
Berat sempel
Berat sari
1
5,004 g
0,142 g
2
5,020 g
0,104 g
3
5,001 g
0,124 g
Kadar sari larut etanol
=
berat sari
berat sempel
1. Kadar sari larut etanol
=
2. Kadar sari larut etanol
=
3. Kadar sari larut etanol
=
0,142
5,004
0.104
5,020
0,124
5,001
Kadar sari larut etanol rata-rata =
x
x
x
100
20
100
20
100
20
x
100
20
x100%
= 13,94%
x100%
= 10.35%
x 100%
= 12.39%
13,94%+10,35%+12,39%
= 12,22%
3
d. Perhitungan hasilpenetapankadarabu total
No.
Berat sampel
1
2,0010 g
2
2,0015 g
3
2,0010 g
Kadar abu total
=
berat abu
berat sempel
1. Kadar abu total
=
2. Kadar abu total
=
3. Kadar abu total
=
Kadarabu total rata-rata =
x 100%
Berat abu
0,0649 g
0,0660 g
0,0662 g
x 100%
0,0649
x100%
=3,24%
x100%
= 3,29%
x 100%
= 3,21%
2,0010
0,0660
2,0015
0,0662
2,0010
3,24%+3,29%+3,21%
=3,21%
3
e. Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam
No.
Berat sempel
Berat abu
1
2,0010 g
0,0172 g
2
2,0015 g
0,0155 g
3
2,0012 g
0,0143 g
52
Kadar abu tidak larut dalam asam
1. Kadar abu tidak larut asam
=
2. Kadar abu tidak larut asam
=
3.Kadar abu tidak larut asam
=
Kadarabu tidak larut asam rata-rata=
=
0,0172
2,0010
0,0155
2,0015
0,0143
2,0012
berat abu
berat sempel
x100%
x 100%
= 0,86%
x 100%
= 0,77%
x 100%
= 0,71%
0,84%+0.77%+0,71%
= 0,78%
3
53
40
Gambar 1: Gambar Ranting Tanaman Patah Tulang
41
Lampiran 3.Bagan kerja penelitian
Batang Patah tulang
Dibersihkan dengan air mengalir
Ditiriskan
Dipotong
Dikeringkan dilemari pengering
Diserbuk
Serbuk simplisia patah tulang
42
Lampiran 3. Lanjutan
Serbuk simplisia
dimasukkan ke dalam wadah
dimasukkan n-heksan sampai serbuk
terendam sempurna
dibiarkan selama 5 hari terlindung dari
cahaya, sambil sesekali diaduk
disaring
Ampas
Maserat
dimaserasi kembali dengan
pelarut n-heksan
dienap tuang
Maserat
Ampas
diuapkan dengan rotary evaporator pada 40oC
Ekstrak n-heksan kental
43
Lampiran 3. Lanjutan
Ekstrak n-heksan kental
Di KLT preparatif:
- fase gerak : n-heksana-etilasetat
(80:20)
- fase diam : silikagel 60 F254
Di KLT:
- fase gerak : n-heksana-etilasetat
(90:10), (80:20), (70:30)
- fase diam = plat lapis tipis
Kromatogram
Noda (ungu) dikerok
Kromatogram
Isolat-isolat
Dielusidenganpelarutmetanol
Isolat
Diisolasi secara KLT
preparatif kemudian di KLT
satu arah dan dua arah
Isolat murni
Dikarakterisasi dengan
spektrofotometri UV dan IR
Spektrum
44
Lampiran 4. Gambar kromatogram ekstrak n-heksana batang patah tulang
70 : 30
80 : 20
90 : 10
Keterangan : Fase gerak n-heksanaetilasetatdanfasediam plat lapis tipis, jarak
rambat 8 cm, TP = 1 cm, BP= 1 cm.
TP = titik penotolan, BP = batas penotolan
Gambar 2:Gambar kromatogram ekstrak n-heksana batang patah tulang
45
Lampiran 5.Gambar kromatogram dari ekstrak n-heksan
BP
TP
B
Keterangan: TP = titikpenotolan, BP = bataspenotolan
Dilihatsetelahpenyemprotandengan Liebermann-bourchard
Gambar 3:Gambar kromatogram dari ekstrak n-heksan
46
Lampiran 6.Gambar kromatogram KLT satuarahdanduaarah
BP
TP
A
BP
TP
B
Keterangan : TP = titik penotolan, BP = batas penotolan
A. KLT satu arah n-heksana:etilasetat = 8 ml:2 ml(Rf 0,78)
B. KLT dua arah n-heksana:etil asetat = 8 ml : 2 ml (Rf 0,78)
Toluen : etil asetat = 9 ml : 1 ml
Gambar 4:Gambar kromatogram KLT satuarahdanduaarah
47
Lampiran 7.Gambar alat spektrofotometer yang digunakan analisis isolat murni
A
B
Keterangan : A. Spektrofotometer ultraviolet
B. Spektrofotometer inframerah
Gambar 5:Gambar alat spektrofotometer yang digunakan analisis isolat murni
48
Lampiran 8. Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer ultraviolet.
Gambar 8:Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer ultraviolet
49
Lampiran 9. Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer inframerah isolat
Tabel hasil analisis spektrum inframerah dengan isolat murni triterpen
No.
1
2
3
4
5
Bilangan gelombang (cm-1)
1720,50
2935,66
1377,17
1107,14
3429,43
Ikatan kimia / gugus fungsi
C=O
-CHalifatik
-CH3
C-H
-OH
Gambar 7:Gambar spektrum senyawa triterpenoid hasil isolasi dengan
spektrofotometer inframerah isolat
50
Lampiran 10.Perhitungan hasil penetapan kadar
a. Perhitungan hasil penetapan kadar air
No.
Berat sempel
1
5,012 g
2
5,013 g
3
5,034 g
Kadar air =
volume air (ml)
berat sampel (g)
1. Kadar air
=
2. Kadar air
=
3. Kadar air
=
Kadar air rata – rata
=
Volume air
0,3 ml
0,3 ml
0,3 ml
� 100%
0,3
5,012
x100%
= 5,98 %v�b
x100%
= 5,98 %v�b
x100%
= 5,95 %v�b
0,3
5,013
0,3
5,034
5,98%+5,98%+5,95%
3
= 6,64%v�b
b. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air
No.
Berat sampel
Berat sari
1
5,004 g
0,166 g
2
5,025 g
0,195 g
3
5,053 g
0,163 g
Kadar sari larut air =
berat sari
berat sampel
1. Kadar sari larut air
=
2. Kadar sari larut air
=
3. Kadar sari larut air
=
Kadar sari larut air rata – rata =
0,166
5,004
0,195
5,025
0,163
5,053
x
x
x
x
100
20
100
20
100
20
100
20
x 100%
x 100%
= 16,59%
x 100%
= 19,40%
x 100%
= 16,12%
16,59%+19,40%+16,12%
3
51
= 17,37%
c. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
No.
Berat sempel
Berat sari
1
5,004 g
0,142 g
2
5,020 g
0,104 g
3
5,001 g
0,124 g
Kadar sari larut etanol
=
berat sari
berat sempel
1. Kadar sari larut etanol
=
2. Kadar sari larut etanol
=
3. Kadar sari larut etanol
=
0,142
5,004
0.104
5,020
0,124
5,001
Kadar sari larut etanol rata-rata =
x
x
x
100
20
100
20
100
20
x
100
20
x100%
= 13,94%
x100%
= 10.35%
x 100%
= 12.39%
13,94%+10,35%+12,39%
= 12,22%
3
d. Perhitungan hasilpenetapankadarabu total
No.
Berat sampel
1
2,0010 g
2
2,0015 g
3
2,0010 g
Kadar abu total
=
berat abu
berat sempel
1. Kadar abu total
=
2. Kadar abu total
=
3. Kadar abu total
=
Kadarabu total rata-rata =
x 100%
Berat abu
0,0649 g
0,0660 g
0,0662 g
x 100%
0,0649
x100%
=3,24%
x100%
= 3,29%
x 100%
= 3,21%
2,0010
0,0660
2,0015
0,0662
2,0010
3,24%+3,29%+3,21%
=3,21%
3
e. Perhitungan Hasil Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam
No.
Berat sempel
Berat abu
1
2,0010 g
0,0172 g
2
2,0015 g
0,0155 g
3
2,0012 g
0,0143 g
52
Kadar abu tidak larut dalam asam
1. Kadar abu tidak larut asam
=
2. Kadar abu tidak larut asam
=
3.Kadar abu tidak larut asam
=
Kadarabu tidak larut asam rata-rata=
=
0,0172
2,0010
0,0155
2,0015
0,0143
2,0012
berat abu
berat sempel
x100%
x 100%
= 0,86%
x 100%
= 0,77%
x 100%
= 0,71%
0,84%+0.77%+0,71%
= 0,78%
3
53