BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN
4.1 Rancangan penelitian : Posttest Only Control Group Design
Jenis penelitian : Eksperimental Laboratorium
4.2 Tempat dan Waktu Penelitian 4.2.1 Tempat Penelitian
:1. Laboratorium FMIPA Terpadu USU
2. Tropical Diseases Laboratory UNAIR
4.2.2 Waktu Penelitian : Oktober 2009 - Desember 2009
4.3 Sampel dan Besar Sampel Penelitian 4.3.1 Sampel penelitian
: Suspensi E.faecalis ATCC 29212 yang telah diisolasi dan dibiakkan dengan media Mueller Hinton Agar.
4.3.2 Besar Sampel
Adapun penentuan besar sampel dilakukan berdasarkan standard laboratorium tropical diseases, Universitas Airlangga :
a. Penentuan nilai MIC
Kelompok I : ekstrak dengan konsentrasi 100 =6 sampel
Kelompok II : ekstrak dengan konsentrasi 50
=6 sampel
Kelompok III : ekstrak dengan konsentrasi 25 = 6 sampel
Kelompok IV : ekstrak dengan konsentrasi 12,5 = 6 sampel
Kelompok V : ekstrak dengan konsentrasi 6,25 = 6 sampel
Kelompok VI : kontrol Mc Farland
= 1 sampel
Universitas Sumatera Utara
Kelompok VII
: kontrol negatif ekstrak buah mahkota dewa tanpa suspensi E.faecalis
= 1
sampel Jumlah sampel = 32 sampel
Dari masing-masing konsentrasi dilakukan dilusi pengenceran untuk mendapatkan konsentrasi minimal yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri.
b. Penentuan nilai MBC Dari hasil penentuan nilai MIC diperoleh beberapa kelompok yang
dilanjutkan perhitungan jumlah koloni bakteri dengan metode Drop Plate Mills Mesra.
Kelompok I
: ekstrak dengan konsentrasi 100 = 6 sampel
Kelompok II : ekstrak dengan konsentrasi 50
= 6 sampel
Kelompok III : ekstrak dengan konsentrasi 25 = 6 sampel
Kelompok IV : ekstrak dengan konsentrasi 12,5
= 6 sampel
Kelompok V : ekstrak dengan konsentrasi 6,25 = 6 sampel
Kelompok VI : kontrol Mc Farland
= 1 sampel
Kelompok VII : kontrol negatif ekstrak buah mahkota dewa tanpa suspensi E.faecalis
= 1 sampel Jumlah sampel = 32 sampel
Universitas Sumatera Utara
V V
A A
R R
I I
A A
B B
E E
L L
B B
E E
B B
A A
S S
: :
E E
k k
s s
t t
r r
a a
k k
b b
u u
a a
h h
m m
a a
h h
k k
o o
t t
a a
d d
e e
w w
a a
p p
e e
l l
a a
r r
u u
t t
e e
t t
a a
n n
o o
d d
e e
n n
g g
a a
n n
k k
o o
n n
s s
e e
n n
t t
r r
a a
s s
i i
1 1
, ,
5 5
, ,
2 2
5 5
, ,
1 1
2 2
, ,
5 5
, ,
6 6
, ,
2 2
5 5
. .
VARIABEL TERKENDALI : •
Pada rotary-evaporator 1 ATM dan temperatur
≤ 60 C
• Asal tumbuh buah mahkota dewa
Karangsari, Medan Polonia •
Kandungan buah mahkota dewa saponin, tanin, alkaloid
• Suspensi Enterococcus faecalis ATCC
29212 •
Media MHA sebagai media pertumbuhan bakteri E. Faecalis
• Suhu untuk menumbuhkan E.faecalis
37°C •
Individu asal E.faecalis diisolasi •
Waktu untuk mengamati pertumbuhan atau pembiakan E.faecalis yaitu 24 jam
• Alat dan bahan percobaan
• Jumlah sampel bahan percobaan
yang diteteskan ke media padat 50µl
4.4. Variabel Penelitian
Kategori