UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 1. Alur Kerja
a. Escherichia coli
Herba Kemangi Ocimum americanum L
Destilasi Minyak Atsiri Escherichia coli
Identifikasi Herba Kemangi
Pembuatan Suspensi Bakteri dan Pengukuran OD bakteri
Analisis Data
dan
Pembacaan dengan Microplate Reader Inkulasi Bakteri Escherichia coli
Media EMB dan Heterotrof
Analisis Komponen Kimia dengan GCMS
Uji Pencegahan Biofilm
Uji Penghancuran Biofilm
Uji Penghambatan Biofilm Pembuatan Seri Konsentrasi
0,25, 0,5, 0,75, 1 Uji Pertumbuhan Biofilm
Escherichia coli
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
b. Pseudomonas aeruginosa
Uji Pencegahan Biofilm
Herba Kemangi Ocimum americanum L
Destilasi Minyak Atsiri Pseudomonas aeruginosa
Identifikasi Herba Kemangi
Pembuatan Suspensi Bakteri dan Pengukuran OD bakteri
Analisis Data
dan
Pembacaan dengan Microplate Reader Inokulasi Bakteri Pseudomonas
aeruginosa di Media PIA dan Heterotrof
Analisis Komponen Kimia dengan GCMS
Uji Penghancuran Biofilm
Uji Penghambatan Biofilm
Pembuatan Seri Konsentrasi 0,25, 0,5, 0,75, 1
Uji Pertumbuhan Biofilm Pseudomonas aeruginosa
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
c. Staphylococcus aureus
Analisis Data
dan
Pembacaan dengan Microplate Reader Uji Pencegahan
Biofilm Uji Penghancuran
Biofilm Uji Penghambatan
Biofilm
Optimasi Aktivitas
terseleksi
Herba Kemangi Ocimum americanum L
Destilasi Minyak Atsiri Staphylococcus aureus
Identifikasi Herba Kemangi
Pembuatan Suspensi Bakteri dan Pengukuran OD Bakteri
Isolasi dan Karakterisasi Bakteri Staphylococcus aureus
Inokulasi di Media Heterotrof
Analisis Komponen Kimia dengan GCMS
Pembuatan Seri Konsentrasi 0,25, 0,5, 0,75, 1
Uji Pertumbuhan Biofilm Staphylococcus aureus
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
d. Pewarnaan Gram
Penyiapan reagen pewarnaan Gram Kristal violet, safranin, lugol, dan etanol 70
Tambahkan kirstal violet 1 tetes, lalu diamkan 1 menit, setelah itu dibilas dengan air
Isolat bakteri digorekan pada kaca objek dan ditetesi dengan NaCl fisiologis. Diamkan kaca objek beberapa saat hingga NaCl kering lalu
difiksasi di atas bunsen
Tambahkan lugol 1 tetes dan diamkan selama 1 menit, setelah itu bilas dengan air
Tambahkan safranin 1 tetes dan diamkan selama 1 menit, setelah itu bilas dengan etanol dan dikering-anginkan
Pengamatan dengan mikroskop
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 2. Hasil Determinasi
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 3. Hasil Destilasi Minyak Atsiri Herba Kemangi
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 4. Alat dan Bahan
Timbangan Analitik Mikroskop
Mikropipet
Inkubator Microwave
Spectrophotometer
Mikroplate Reader Laminar Air Flow
Oven
Vortex Autoklaf
Microplate
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
GC-MS Destilasi
Mikro Tip
BIOREM Etanol 96
Bahan Pewarnaan Gram
Minyak Atsiri Kemangi Media HTR
Kristal Violet 1
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 5. Hasil Pembuatan Larutan Uji
1. Minyak Atsiri 100
2. Variasi Konsentrasi Minyak Atsiri
Lampiran 6. Hasil Uji Pertumbuhan Biofilm Bakteri Uji.
Bakteri Uji Absorbansi
1 2
3 Rata-Rata
Escherichia coli 0,427
0,246 0,299
0,324 Pseudomonas aerginosa
0,645 0,680
0,655 0,660
Staphylococcus aureus 0,756
0,905 0,826
0,829
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
Lampiran 7. Hasil Uji Antibiofilm Terhadap Escherichia coli
a. Densitas Optik Pencegahan Biofilm