Uji Ktivitas Antiinfsi Senyawa Fukoidan yang Diisolasi Dari Rumput Laut Coklat (Sargassum ilicifolium (Turner) C.Agard) Pada Tikus Jantan

Lampiran 1. Surat hasil identifikasi tumbuhan

44
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Surat persetujuan etik penelitian kesehatan

45
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Gambar tumbuhan segar dan simplisia Sargassum ilicifolium
(Turner) C. Agard.

Tumbuhan Segar Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard

Simplisia Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard

46
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Gambar serbuk simplisia dan isolat fukoidan Sargassum ilicifolium

(Turner) C. Agard

Serbuk simplisia Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard

Serbuk isolat fukoidan Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard

47
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Bagan prosedur kerja
Rumput laut
coklat segar
Dicuci
Disortasi
Dikeringkan
Ditimbang
Rumput laut
coklat kering
Uji Makroskopik
Dihaluskan

Serbuk
Isolasi Fukoidan

Isolat senyawa
Fukoidan

Identifikasi
fukoidan

IR dan UV

Uji Efek
Antiinflamasi

Susut
pengeringan

48
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Bagan kerja isolasi senyawa fukoidan
50 g serbuk simplisia
Dimasukkan ke dalam beker gelas 1000
ml
Ditambahkan 500 ml HCl 0,1N
Diekstraksi pada suhu 1000C selama 4
jam sambil diaduk
Disaring / peras (pakai kain flanel)

Ampas

Filtrat

Disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 3000
rpm
Diambil filtrat
Filtrat
Ditambahkan etanol 96% sama banyak dengan filtrat
Disentrifugasi kembali dengan kecepatan 3000 rpm
selama 10 menit

Diambil endapan
Endapan
Dikeringkan dalam oven pada suhu 500C
Digerus dan dimasukkan kedalam botol
Isolat Fukoidan
(2,27 g)

49
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Bagan kerja antiinflamasi
Tikus Jantan
Sebelum pengujian tikus dipuasakan selama 18
jam (tetap diberi minum)
Diberi tanda pada bagian ekor dan kaki kanan
tikus dan ditimbang beratnya
Kaki kanan tikus dimasukkan ke dalam sel yang
berisi cairan pada alat pletismometer
Dicatat angka pada monitor
Volume telapak kaki

tikus mula-mula (Vo)

K (-)

D II

DI

D III

K (+)

Diberi suspensi bahan uji secara oral sesuai dengan
kelompoknya
Satu jam kemudian, telapak kaki tikus disuntik secara
intraplantar 0,05 ml larutan λ- karagenan 1%
Dilakukan pengukuran setiap 30 menit selama 360
menit dengan cara mencelupkan telapak kaki tikus
pada sel pletismometer yang berisi cairan khusus
Dicatat perubahan volume angka pada monitor.

Volume telapak kaki
tikus tiap 30 menit (Vt)
Keterangan : K (-)

: Kontrol negativ (Na CMC 0,5%)

DI

: Dosis suspensi fukoidan 100 mg/kg bb

D II

: Dosis suspensi fukoidan 200 mg/kg bb

D III

: Dosis suspensi fukoidan 400 mg/kg bb

K (+)

: Kontrol positif (Na diklofenak 2,25 mg/kg bb)

50
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Telapak kaki tikus sebelum dan sesudah diinduksi λ- karagenan

Telapak kaki tikus sebelum diinduksi λ -karagenan

Telapak kaki tikus setelah diinduksi λ –karagenan

51
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Perhitungan karakteristik senyawa isolat fukoidan yang diperoleh
dari Sargassum ilicifolium (Turner) C. Agard
1. Perhitungan % rendemen senyawa fukoidan
% rendemen fukoidan =

W1

x100%
Wo

1. W0 = 50 g
W1 = 2,6328 g
=

2,6328 g
x100% = 5,26%
50 g

2. W0 = 50 g
W1 = 2,1676 g
=

2,1676 g
x100% = 4,33%
50 g

3. W0 = 50 g

W1 = 2,0449 g
=

2,0449 g
x100% = 4,08%
50 g

% Rata-rata rendemen fukoidan =

5,2% + 4,33% + 4,08%
= 4,56%
3

2. Perhitungan susut pengeringan
% susut pengeringan =

W1 - W2
x100%
W1

W1 = botol timbang dan sampel sebelum pengeringan dikurang botol timbang
W2 = botol timbang dan sampel setelah pengeringan dikurang botol timbang
1.) W1 = 25,7959 - 24,7788 = 1,0171
W2 = 25,6023 - 24,7788 = 0,8235

52
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9 ( lanjutan )
W1 - W2 1,0171 − 0,8235
%=
=
x100% = 19,03%
W1
1,0171
2.) W1 = 24,6878 - 23,6667 = 1,0211
W2 = 24,4877 - 23,6667 = 0,821
%=

W1 −W 2

1,0211 − 0,821
x100% =
x100% = 19,59%
W1
1,0211

3.) W1 = 25,242 - 24,2229 = 1,0191
W2 = 25, 0451 - 24,2229 = 0,8222
%=

W1 − W 2
1,0191 − 0,8222
x100% =
x100% = 19,32%
W1
1,0191

% Rata-rata susut pengeringan =

19,03% + 19,59% + 19,32%

3

= 19,32%

53
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Konversi dosis
Tabel 3. Konversi Dosis Antara Jenis Hewan Dengan Manusia

Mencit
20 kg
Tikus
200 g
Marmot
400 g
Kelinci
1,5 kg
Kera 4
kg
Anjing
12 kg
Manusi
a 70 kg

Mencit
20 g

Tikus
200 g

Marmot
400 g

Kelinci
1,5 kg

Kera
4 kg

Anjing
12 kg

Manusia
70 kg

1,0

7,0

12,25

27,8

64,1

124,3

387,9

0,14

1,0

1,74

3,0

9,2

17,8

56,0

0,008

0,57

1,0

2,25

5,2

10,2

31,5

0,04

0,25

0,44

1,0

2,4

4,5

14,2

0,016

0,11

0,19

0,42

1,0

1,9

6,1

0,008

0,06

0,10

0,22

0,52

1,0

3,1

0,0026

0,018

0,031

0,07

0,16

0,32

1,0

54
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Contoh perhitungan dosis
1. Perhitungan Senyawa Fukoidan Rumput Laut Coklat
-

Dosis suspensi senyawa fukoidan rumput laut coklat yang akan dibuat
adalah 100 mg/kg bb, 200mg/kg bb dan 400 mg/kg bb. Berarti dosis 100
mg, 200 mg dan 400 mg tersebut diberikan untuk hewan dengan 1 kg berat
badan. Karena 1 kg = 1000 g = 10 ml. Maka tiap dosis dilarutkan dalam
10,0 ml suspensi Na-CMC.

-

Volume suspensi isolat senyawa fukoidan rumput laut coklat yang
diberikan kepada tikus adalah volume pemberian 1% dari bb tikus
Misal bb tikus = 200 g
Maka suspensi yang diberikan 200 g = 2 ml

2. Perhitungan Dosis Natrium Diklofenak
-

Tiap tablet natrium diklofenak mengandung 50 mg natrium diklofenak

-

Dosis maksimum untuk manusia dewasa = 25 – 50 mg

-

Konversi dosis manusia (70 kg) kedosis hewan uji tikus dikali 0,018

Pemberian larutan natrium diklofenak
Konversi dosis untuk tikus = 25 mg x 0,018 = 0,45 mg
Maka dosis natrium diklofenak yang digunakan adalah 0,45 mg untuk tikus
200 g, sehingga dosis dalam mg/kg bb adalah :
=

1000kg
X 0.45mg = 2,25 mg/kg bb
200

Volume pemberian 1% dari bb tikus
Misal bb tikus = 200 g
Maka volume suspensi natrium diklofenak yang diberikan x 200 g = 2 ml.

55
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Contoh perhitungan persen radang dan persen inhibisi radang
1. Persen Radang
Persen Radang =

vt − vo
x100%
vo

dimana: Vt = volume radang setelah waktu t
Vo = volume awal kaki tikus
Misalnya: Senyawa fukoidan rumput laut coklat dosis 100mg/kg bb pada menit
ke-30
Diketahui :Vt

= 04,59

Vo = 03,52
Persen Radang =
Persen Radang (%R)

4.59 − 3.52
x100% = 30,39%
3.52

= 30,39 %

2. Persen Inhibisi Radang
Persen Inhibisi Radang =

a −b
x100%
a

Dimana : a = Persen radang rata-rata kelompok kontrol
b = Persen radang rata-rata kelompok perlakuan yang mendapat bahan
uji atau obat pembanding
Persen peredaan radang senyawa fukoidan rumput laut coklat dosis 100 mg/kgb
=

a -b
a

=

60,71 − 40,23
x100% = 33,73%
60,71

56
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Hasil analisis persen radang metode duncan efek antiinflamasi
suspensi senyawa fukoidan rumput laut coklat

57
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-30

Menit ke-60

Menit ke-90

58
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-120

Menit ke-150

Menit ke-180

59
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-210

Menit ke-240

Menit ke-270

60
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13 (lanjutan)
Menit ke-300

Menit ke-330

Menit ke-360

61
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14.Hasil analisis persen inhibisi radang metode duncan efek
antiinflamasi suspensi senyawa fukoidan rumput laut coklat

62
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-30

Menit ke-60

Menit ke-90

63
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-120

Menit ke-150

Menit ke-180

64
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-210

Menit ke-240

Menit ke-270

65
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14 (lanjutan)
Menit ke-300

Menit ke-330

Menit ke-360

66

Universitas Sumatera Utara