45
Lampiran 2. Komposisi dan Pembuatan Medium Pertumbuhan A.
Medium Nutrient AgarNutrient Broth Komposisi :
Beef Extract 3 g
Peptone 5 g
Agar 15 g
Akuades 1000 ml
pH medium 7,0 ± 0,2
Cara Pembuatan :
Larutkan semua bahan dalam akuades, untuk medium Nutrient Agar ditambahkan dengan agar sebagai pemadat, atur pH medium hingga sesuai lalu dimasukkan dalam labu
Erlenmeyerbotol Schott. Sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121
o
C, 2 atm selama 20 menit. Untuk membuat medium Nutrient Broth 50, komposisi yang dibutuhkan untuk
1000 ml medium adalah 1,5 g Beef Extract dan 2,5 g Peptone.
B. Medium Caceres medium selektif Azospirillum spp.
Komposisi :
K
2
HPO
4
0,5 g MgSO
4
.7H
2
O 0,2 g
NaCl 0,1 g
Yeast Extract 0,5 g
FeCl
3
.6H
2
O 0,015 g
DL-Malic Acid 5 g
KOH 4,8 g
Congo Red 0,25 15 ml
Agar 20 g
Akuades 1000 ml
pH medium 7,0 ± 0,2
Cara Pembuatan :
Larutkan seluruh bahan ke dalam akuades kemudian ditambahkan dengan Congo Red Solution 0,25, aduk hingga merata. atur pH medium hingga sesuai menggunakan
NaOHHCl lalu dimasukkan dalam labu Erlenmeyerbotol Schott. Sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121
o
C, 2 atm selama 20 menit.
bio.unsoed.ac.id
46
C. Medium Pikovskaya medium selektif Mikroorganisme Pelarut Fosfat
Komposisi :
Glukosa 10 g
Ca
3
PO
4 2
5 g NH
4 2
SO
4
0,5 g NaCl
0,2 g MgSO
4
.7H
2
O 0,1 g
KCl 0,2 g
Yeast Extract 0,5 g
MnSO
4
0,001 g FeSO
4
.7H
2
O 0,001 g
Agar 22 g
Akuades 1000 ml
pH medium 7,0 ± 0,2 Cara Pembuatan :
Larutkan seluruh bahan ke dalam akuades kemudian ditambahkan dengan Ca
3
PO
4 2
, aduk hingga merata. atur pH medium hingga sesuai menggunakan NaOHHCl lalu dimasukkan
dalam labu Erlenmeyerbotol Schott. Sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121
o
C, 2 atm selama 20 menit.
D. Medium Potato Dextrose Agar
Komposisi :
Potato Extract 4 g
Dextrose 20 g
Agar 20 g
pH medium 5,6 ± 0,2
Cara Pembuatan :
Larutkan seluruh bahan ke dalam akuades aduk hingga merata. atur pH medium hingga sesuai menggunakan NaOHHCl lalu dimasukkan dalam labu Erlenmeyerbotol Schott.
Sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121
o
C, 2 atm selama 20 menit.
E. Medium Dworkin-Foster Salt
Komposisi : Macroelement
KH
2
PO
4
4 g Na
2
HPO
4
6 g MgSO
4
.7H
2
O 0,2 g
bio.unsoed.ac.id
47 Glukosa
2 g Gluconic Acid
2 g Citric Acid
2 g Akuades
1000 ml
Microelement Solution Stock I larutkan dalam 10 ml akuades FeSO
4
.7H
2
O 100 mg
Akuades 10 ml
Microelement Solution Stock II larutkan dalam 100 ml akuades H
3
BO
3
10 mg MnSO4.H
2
O 11,19 mg
ZnSO
4
.7H
2
O 124,6 mg
CuSO
4
.5H
2
O 78,22 mg
MoO3 10 mg
Cara Pembuatan :
Larutkan seluruh bahan macroelement secara berurutan penambahan bahan hanya boleh dilakukan setelah bahan sebelumnya larut sempurna. Setelah seluruh bahan macroelement
larut, tambahkan dengan masing-masing 0,1 ml microelement solution stock I dan II dalam akuades berisi macroelement tersebut. Atur ph hingga 6,8 ± 0,2 dengan NaOHHCl.
Sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121
o
C, 2 atm selama 20 menit.
F. Medium Chrome Azurol Sulfate medium selektif penghasil Siderofor
