7
III. Membuat Media Kultur
A. Pendahuluan Media merupakan faktor utama dalam perbanyakan
dengan kultur jaringan. Keberhasilan perbanyakan dan perkembangbiakan tanaman dengan metode kultur
jaringan secara umum sangat tergantung pada jenis media .
Media tumbuh pada kultur jaringan sangat besar pengaruhnya terhadap pertumbuhan dan perkembangan
eksplan serta bibit yang dihasilkannya. Oleh karena itu, macam-macam media kultur jaringan telah ditemukan
sehingga jumlahnya cukup banyak. Nama-nama media tumbuh untuk eksplan ini biasanya sesuai dengan nama
penemunya.
Pada umumnya komposisi utama media tanam kultur jaringan, terdiri dari hormon zat pengatur tumbuh dan
sejumlah unsur yang biasanya terdapat di dalam tanah yang dikelompokkan ke dalam unsur makro, unsur mikro.
Hasil yang lebih baik akan dapat kita peroleh bila, kedalam media tersebut, ditambahkan vitamin, asam amino, dan
hormon, bahan pemadat media agar, glukosa dalam bentuk gula maupun sukrosa, air destilata akuades, dan
bahan organik tambahan Gunawan, 1992.
B. Tujuan 1. Mengetahui jenis-jenis media kultur jaringan
tumbuhan 2. Mengetahui cara pembuatan meduia kultur jaringan
tumbuhan C. Alat
8 1. Gelas piala 1 liter
2. Botol Kultur 3. Plastik
4. Karet 5. Hotplate and stirer
6. pH meter 7. Autoklaf
D. Bahan 1. Media MS
2. ZPT 3. Agar
4. Gula 5. NaOH
6. HCl 7. Aquades
E. Cara Kerja 1. Siapkan alat-alat dan bahan-bahan yang akan
digunakan dalam proses pembuatan media kultur 2. Timbang media MS sebesar 21,7gr, gula 20gr dan
agar 7gr 3. Larutkan MS, gula dan ZPT ke dalam gelas piala
kemudian tambahkan aquades mencapai 1 liter 4. Ukur pH larutan media, atur menggunakan NaOH
dan HCl hingga mencapai pH 5,7 5. Masukkan agar dan didihkan larutan
6. Stelah larutan masak, masukkan ke dalam botol- botol kultur kemudian ditutup dengan plastik
5. Masukkan botol-botol kultur yang berisi larutan media ke dalam autoklaf selama 20 menit dengan
pengaturan tekanan sebesar 17,5 psi dan suhu 121
o
C 7. Setelah suhu autoklaf dingin, angkat botol-botol
kultur yang berisi larutan media tersebut
9 8. Simpan botol-botol kultur di tempat steril
10
IV. Sterilisisasi Eksplan
Kategori