48
PERCOBAAN 4
Kuning telur dan minyak jagung sebagai alternatif pengganti media pertumbuhan
Lagenidium giganteum serta media alternatif untuk produksi oospora.
METODE PENELITIAN A. Membandingkan 3 media dalam memproduksi koloni
L. giganteum dengan mengukur jumlah berat kering
1. Media PYG
Dalam pembuatan media PYG bahan yang digunakan berupa 1,2 gr pepton, 1,2 gr yeast ekstrak dan 3 gram glukosa . Ketiga bahan ini kemudian dicampur menjadi
satu dalam tabung erlenmeyer dan ditambah aquades steril 1000 ml dan dimasak sampai mendidih. Setelah mendidih kemudian disterilkan dengan menggunakan
autoklaf 2. Pembuatan media kuning telur
Media kuning telur ini dibuat menurut Misman dkk 1990. Kuning telur diambil dari telur ayam segar. Kuning telur diambil secara aseptis dan dimasukkan ke
dalam tabung Erlenmeyer ukuran 1000 ml. Setelah kuning telur dimasukkan kemudian ditambah 500 ml aquades steril dan diaduk menggunakan stirer. Setelah
tercampur rata, media ini kemudian disimpan disuhu kamar selama 24 jam dan setelah diinkubasikan kemudian dipisahkan dan diambil bagian supernatannya
3. Media Kuning telur plus ditambah minyak jagung Dalam pembuatan media kuning telur, dibuat seperti yang dilakukan oleh Misman
dkk 1990. Dalam penelitian ini media kuning telur ditambah dengan minyak jagung 1 steril.
49 Masing – masing media diambil 250 cc dan dimasukkan kedalam
erlenmeyer berukuran 500 cc. Dalam penelitian ini dibuat 5 kali ulangan. Koloni kapang L. giganteum dimasukkan dalam masing – masing media yaitu media
PYG, media kuning telur dan media kuning telur plus. Untuk memperoleh jumlah koloni yang sama dalam penelitian ini dipergunakan pangkal pipet yang
berdiameter empat milimeter Misman dkk, 1990. Jumlah koloni kapang yang dimasukkan dari masing – masing media adalah satu mata pipet, kemudian di
inkubasi pada suhu 25
o
C dalam shaker waterbath 110 rpm selama 7 hari. Setelah hari ketujuh diamati pertumbuhannya dan kemudian masing – masing di
saring dengan menggunakan kertas saring. Hasil panenan koloni dicuci dengan menggunakan aquades steril dan dikeringkan dalam suhu 40
o
C. Setiap hari masing – masing koloni dari ketiga media biakan di timbang sampai menemukan
jumlah timbangan berat kering yang stabil .
B. Membandingkan 3 media biakan cair dalam memproduksi oospora