Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus circulans Strain 9b3
PEMURNIAN DAN OPTIMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
"-.-,.
.'
II
I
.
.
ｾＮ＠
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
RINGKASAN
NURLAELA. Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus eireulans Strain 9b3 (Purification and
Optimation ofProtease from Bacillus eireulans Strain 9b3). Dibimbing oleh LAKSMI AMBARSARI dan
SRI WIDOWATI.
Protease yang diisolasi dari isolat B. eireuians adalah protease yang secara spesifik mampu
menghidrolisis struktur protein lipase yang terdapat dalam bekatul, sehingga terjadi penghambatan
aktivitas katalitik lipase.
Penghambatan aktivitas katalitik lipase ini dipedukan karena lipase
mempereepat proses ketengikan pada bekatul, sedangkan bekatul memiliki potensi yang besar untuk
dimanfaatkan, disamping harganya mural!, juga kualitasnya sebagai bahan makanan eukup tinggi.
Pada penelitian ini dicari media pertumbuhan dan waktu inkubasi optimum dari B. cireuians
dengan menggunakan dua macam media, yaitu media air rendaman kedelai dan media air rebusan kedelai.
Protease yang diperoleh dimumikan dengan earn pengendapan dengan (NH.,),S04 70% dan dialisis,
masing-masing fraksi diuji aktivitas dan aktivitas spesifiknya, ditentukan pula kondisi optimum kelja
enzim yang meliputi pH, sullU dan waktu inkubasi.
Penggunaan media air rendaman kedelai dengan pH awal media 8.14 dan pH akhir media 9.15
untuk produksi protease dari B. cireuians memberikan aktivitas tertinggi. Produksi protease pada media
tersebut optimum padajam ke-36 yang bertepatan dengan fase akhir eksponensial dari fase pertmnbulum
mikroba.
Pemurnian enzim dengan menggunakan garam (NH.,),S04 70% dan dialisis tidak meningkatkan
kemurnian enzim. Hasil perhitungan diperoleh fraksi (NH.,),S04 70% adalall 0.9 dan fraksi dialisis 0.6.
Sedangkanyieid pada fraksi (NH.;),SO, 70% dan dialisis rnasing-masing 39.51% dan 34.38%. Aktivitas
protease optimum diperoleh pada kondisi pH 7.5 ; sOOu 37°C dan waktu inkuibasi 35 menit, dari pH
optimum tersebut dapat disimputkan bal,wa jenis protease yang dibasitkan oleh B. circuians adalall
protease netral.
PEMURNIAN DAN OPTlMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains
Pada
Program Studi Kimia
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
Judul
: Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus circulans Strain 9b3
Nama
: Nurlaela
NIM
: G. 3l. 1045
Menyetujui,
ｾＬＮ＠
'-----
Dra. Laksmi Ambarsari, M. S.
Pembimbing I
If. Sri
Mengetahui,
Tanggal Lulus :
RIWAYATHIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada langgal 14 Juli 1976 sebagai anak pertama dari delapan
bersaudara, anak dari pasangan Mukri dan Marsidall.
Jenjang penelidikan penulis yailu SD Negri 01 (Iulus tahUll 1988), MTs Negri V Jakarta (lulus tal1Ull
1991), SMA Negri 73 Jakarta (Iulus tal111n 1994).
Setelall lulus SMA tal1Ull 1994, penulis dilerillla
lllenjaeli lllalJasiswa eli Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk lPB. Pada tal1Ull
1995 penulis diterima elijurusan kiruia, Fakultas Malelllatika dan Ihnu Pengetallllan AJrun.
Selama mengikuti perknliallan penulis pernah menjaeli asislen praktiknm Biokilllia pada tal1Ull ajaran
1998/1999. Penulis juga pernall magang profesi eli Balai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan Bogor
dari bulan J uli sampai Agustus 1997.
PEMURNIAN DAN OPTIMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
"-.-,.
.'
II
I
.
.
ｾＮ＠
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
RINGKASAN
NURLAELA. Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus eireulans Strain 9b3 (Purification and
Optimation ofProtease from Bacillus eireulans Strain 9b3). Dibimbing oleh LAKSMI AMBARSARI dan
SRI WIDOWATI.
Protease yang diisolasi dari isolat B. eireuians adalah protease yang secara spesifik mampu
menghidrolisis struktur protein lipase yang terdapat dalam bekatul, sehingga terjadi penghambatan
aktivitas katalitik lipase.
Penghambatan aktivitas katalitik lipase ini dipedukan karena lipase
mempereepat proses ketengikan pada bekatul, sedangkan bekatul memiliki potensi yang besar untuk
dimanfaatkan, disamping harganya mural!, juga kualitasnya sebagai bahan makanan eukup tinggi.
Pada penelitian ini dicari media pertumbuhan dan waktu inkubasi optimum dari B. cireuians
dengan menggunakan dua macam media, yaitu media air rendaman kedelai dan media air rebusan kedelai.
Protease yang diperoleh dimumikan dengan earn pengendapan dengan (NH.,),S04 70% dan dialisis,
masing-masing fraksi diuji aktivitas dan aktivitas spesifiknya, ditentukan pula kondisi optimum kelja
enzim yang meliputi pH, sullU dan waktu inkubasi.
Penggunaan media air rendaman kedelai dengan pH awal media 8.14 dan pH akhir media 9.15
untuk produksi protease dari B. cireuians memberikan aktivitas tertinggi. Produksi protease pada media
tersebut optimum padajam ke-36 yang bertepatan dengan fase akhir eksponensial dari fase pertmnbulum
mikroba.
Pemurnian enzim dengan menggunakan garam (NH.,),S04 70% dan dialisis tidak meningkatkan
kemurnian enzim. Hasil perhitungan diperoleh fraksi (NH.,),S04 70% adalall 0.9 dan fraksi dialisis 0.6.
Sedangkanyieid pada fraksi (NH.;),SO, 70% dan dialisis rnasing-masing 39.51% dan 34.38%. Aktivitas
protease optimum diperoleh pada kondisi pH 7.5 ; sOOu 37°C dan waktu inkuibasi 35 menit, dari pH
optimum tersebut dapat disimputkan bal,wa jenis protease yang dibasitkan oleh B. circuians adalall
protease netral.
PEMURNIAN DAN OPTlMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains
Pada
Program Studi Kimia
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
Judul
: Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus circulans Strain 9b3
Nama
: Nurlaela
NIM
: G. 3l. 1045
Menyetujui,
ｾＬＮ＠
'-----
Dra. Laksmi Ambarsari, M. S.
Pembimbing I
If. Sri
Mengetahui,
Tanggal Lulus :
RIWAYATHIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada langgal 14 Juli 1976 sebagai anak pertama dari delapan
bersaudara, anak dari pasangan Mukri dan Marsidall.
Jenjang penelidikan penulis yailu SD Negri 01 (Iulus tahUll 1988), MTs Negri V Jakarta (lulus tal1Ull
1991), SMA Negri 73 Jakarta (Iulus tal111n 1994).
Setelall lulus SMA tal1Ull 1994, penulis dilerillla
lllenjaeli lllalJasiswa eli Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk lPB. Pada tal1Ull
1995 penulis diterima elijurusan kiruia, Fakultas Malelllatika dan Ihnu Pengetallllan AJrun.
Selama mengikuti perknliallan penulis pernah menjaeli asislen praktiknm Biokilllia pada tal1Ull ajaran
1998/1999. Penulis juga pernall magang profesi eli Balai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan Bogor
dari bulan J uli sampai Agustus 1997.
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
"-.-,.
.'
II
I
.
.
ｾＮ＠
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
RINGKASAN
NURLAELA. Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus eireulans Strain 9b3 (Purification and
Optimation ofProtease from Bacillus eireulans Strain 9b3). Dibimbing oleh LAKSMI AMBARSARI dan
SRI WIDOWATI.
Protease yang diisolasi dari isolat B. eireuians adalah protease yang secara spesifik mampu
menghidrolisis struktur protein lipase yang terdapat dalam bekatul, sehingga terjadi penghambatan
aktivitas katalitik lipase.
Penghambatan aktivitas katalitik lipase ini dipedukan karena lipase
mempereepat proses ketengikan pada bekatul, sedangkan bekatul memiliki potensi yang besar untuk
dimanfaatkan, disamping harganya mural!, juga kualitasnya sebagai bahan makanan eukup tinggi.
Pada penelitian ini dicari media pertumbuhan dan waktu inkubasi optimum dari B. cireuians
dengan menggunakan dua macam media, yaitu media air rendaman kedelai dan media air rebusan kedelai.
Protease yang diperoleh dimumikan dengan earn pengendapan dengan (NH.,),S04 70% dan dialisis,
masing-masing fraksi diuji aktivitas dan aktivitas spesifiknya, ditentukan pula kondisi optimum kelja
enzim yang meliputi pH, sullU dan waktu inkubasi.
Penggunaan media air rendaman kedelai dengan pH awal media 8.14 dan pH akhir media 9.15
untuk produksi protease dari B. cireuians memberikan aktivitas tertinggi. Produksi protease pada media
tersebut optimum padajam ke-36 yang bertepatan dengan fase akhir eksponensial dari fase pertmnbulum
mikroba.
Pemurnian enzim dengan menggunakan garam (NH.,),S04 70% dan dialisis tidak meningkatkan
kemurnian enzim. Hasil perhitungan diperoleh fraksi (NH.,),S04 70% adalall 0.9 dan fraksi dialisis 0.6.
Sedangkanyieid pada fraksi (NH.;),SO, 70% dan dialisis rnasing-masing 39.51% dan 34.38%. Aktivitas
protease optimum diperoleh pada kondisi pH 7.5 ; sOOu 37°C dan waktu inkuibasi 35 menit, dari pH
optimum tersebut dapat disimputkan bal,wa jenis protease yang dibasitkan oleh B. circuians adalall
protease netral.
PEMURNIAN DAN OPTlMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains
Pada
Program Studi Kimia
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
Judul
: Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus circulans Strain 9b3
Nama
: Nurlaela
NIM
: G. 3l. 1045
Menyetujui,
ｾＬＮ＠
'-----
Dra. Laksmi Ambarsari, M. S.
Pembimbing I
If. Sri
Mengetahui,
Tanggal Lulus :
RIWAYATHIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada langgal 14 Juli 1976 sebagai anak pertama dari delapan
bersaudara, anak dari pasangan Mukri dan Marsidall.
Jenjang penelidikan penulis yailu SD Negri 01 (Iulus tahUll 1988), MTs Negri V Jakarta (lulus tal1Ull
1991), SMA Negri 73 Jakarta (Iulus tal111n 1994).
Setelall lulus SMA tal1Ull 1994, penulis dilerillla
lllenjaeli lllalJasiswa eli Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk lPB. Pada tal1Ull
1995 penulis diterima elijurusan kiruia, Fakultas Malelllatika dan Ihnu Pengetallllan AJrun.
Selama mengikuti perknliallan penulis pernah menjaeli asislen praktiknm Biokilllia pada tal1Ull ajaran
1998/1999. Penulis juga pernall magang profesi eli Balai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan Bogor
dari bulan J uli sampai Agustus 1997.
PEMURNIAN DAN OPTIMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
"-.-,.
.'
II
I
.
.
ｾＮ＠
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
RINGKASAN
NURLAELA. Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus eireulans Strain 9b3 (Purification and
Optimation ofProtease from Bacillus eireulans Strain 9b3). Dibimbing oleh LAKSMI AMBARSARI dan
SRI WIDOWATI.
Protease yang diisolasi dari isolat B. eireuians adalah protease yang secara spesifik mampu
menghidrolisis struktur protein lipase yang terdapat dalam bekatul, sehingga terjadi penghambatan
aktivitas katalitik lipase.
Penghambatan aktivitas katalitik lipase ini dipedukan karena lipase
mempereepat proses ketengikan pada bekatul, sedangkan bekatul memiliki potensi yang besar untuk
dimanfaatkan, disamping harganya mural!, juga kualitasnya sebagai bahan makanan eukup tinggi.
Pada penelitian ini dicari media pertumbuhan dan waktu inkubasi optimum dari B. cireuians
dengan menggunakan dua macam media, yaitu media air rendaman kedelai dan media air rebusan kedelai.
Protease yang diperoleh dimumikan dengan earn pengendapan dengan (NH.,),S04 70% dan dialisis,
masing-masing fraksi diuji aktivitas dan aktivitas spesifiknya, ditentukan pula kondisi optimum kelja
enzim yang meliputi pH, sullU dan waktu inkubasi.
Penggunaan media air rendaman kedelai dengan pH awal media 8.14 dan pH akhir media 9.15
untuk produksi protease dari B. cireuians memberikan aktivitas tertinggi. Produksi protease pada media
tersebut optimum padajam ke-36 yang bertepatan dengan fase akhir eksponensial dari fase pertmnbulum
mikroba.
Pemurnian enzim dengan menggunakan garam (NH.,),S04 70% dan dialisis tidak meningkatkan
kemurnian enzim. Hasil perhitungan diperoleh fraksi (NH.,),S04 70% adalall 0.9 dan fraksi dialisis 0.6.
Sedangkanyieid pada fraksi (NH.;),SO, 70% dan dialisis rnasing-masing 39.51% dan 34.38%. Aktivitas
protease optimum diperoleh pada kondisi pH 7.5 ; sOOu 37°C dan waktu inkuibasi 35 menit, dari pH
optimum tersebut dapat disimputkan bal,wa jenis protease yang dibasitkan oleh B. circuians adalall
protease netral.
PEMURNIAN DAN OPTlMASI PROTEASE DARI Bacillus
circulans STRAIN 9 b3
NURLAELA
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains
Pada
Program Studi Kimia
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
1999
Judul
: Pemurnian dan Optimasi Protease dari Bacillus circulans Strain 9b3
Nama
: Nurlaela
NIM
: G. 3l. 1045
Menyetujui,
ｾＬＮ＠
'-----
Dra. Laksmi Ambarsari, M. S.
Pembimbing I
If. Sri
Mengetahui,
Tanggal Lulus :
RIWAYATHIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada langgal 14 Juli 1976 sebagai anak pertama dari delapan
bersaudara, anak dari pasangan Mukri dan Marsidall.
Jenjang penelidikan penulis yailu SD Negri 01 (Iulus tahUll 1988), MTs Negri V Jakarta (lulus tal1Ull
1991), SMA Negri 73 Jakarta (Iulus tal111n 1994).
Setelall lulus SMA tal1Ull 1994, penulis dilerillla
lllenjaeli lllalJasiswa eli Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk lPB. Pada tal1Ull
1995 penulis diterima elijurusan kiruia, Fakultas Malelllatika dan Ihnu Pengetallllan AJrun.
Selama mengikuti perknliallan penulis pernah menjaeli asislen praktiknm Biokilllia pada tal1Ull ajaran
1998/1999. Penulis juga pernall magang profesi eli Balai Penelitian Bioteknologi Tanaman Pangan Bogor
dari bulan J uli sampai Agustus 1997.