Isolasi dan karakterisasi sennyawa antibakteri Bacillus subtilis T4 isolat lapangan

ABSTRAK
*
g p p 0
b;g;gg
P

:ada

' Q s s

""3

1

SBB:

a s S'Q
s = s = Q

!g3a.'0,
Q

XTyo

C 3 s

gg

EJ$SIQ.'
S C Q S
QIQ.XTs

ps

EJ

3 3 g g p .
m XT

3sZp5

x2asg

5
Q - sQ ~
c z s
n'?

SpzS ;gs
Q Ca
* Q

IDS

EL s
30-0
E*g
z"
-.

.q g a.
*

s
9 - s

Q

3
g $j m=
g aQ

t ?i
i

;g

%

XT

-C

93

g!!

;5P
-.
2. = s
Q

p
Q

3
3
n m

r S

$ is

m

$
XT
Q

Eg
S E
3
3
Q

s

x-.% i

s

L

w

Tujustn penelitian ini adalah melakukan pengkajian senyawa antibakteri
dihasilkan oleh B. subtilis yang diisolasi dari susu sapi perah penderita
g dilakukan meliputi produksi, spektrum
a antibakteri. Seleksi bakteri penghasil
0 iso1at. Seleksi dilakukan dengan metode
tho4 dengan cara stab inoculation pada
ng agar darah. Bakteri indikator yang digunakan adalah Micrococcus
awa antibakteri dilakukan pada media cair nutrient broth.
enan dilakukan pada jam ke 18 inkubasi. Suhu inkubasi 37OC. Pemurnian
tein antibakteri dengan garam.Garam
dengan tingkat kejenuhan 90%. Protein
difraksinasi dengan metode filtrasi geI
an Sephadex G 75 yang dipasang pada HPLC (High
romatography). Sebagai fme gerak (mobile phase)

3 5

; 3 2u

B

Karakterisasi Senyawa Antibakteri
an. Dibimbing oleh FACHRIYAN HASMI
IBAWAN dan BIBIANA W. LAY.
isme yang termasuk bakteri, alctinomises,
nsi untuk rnenghasilkan antibiotika. Jamur
ang mencemari laboratorium Fleming
1928 yang diduga sebagai pencemar asal udara dan galur-galur tertentu
antimikroba. Jarnur dan bakteri ini berasal

q.

3
"

akterisasi senyawa antibakteri dilakukan pada supernatan aktif dan
murni. Karakterisasi yang dilakukan meliputi spektrum hambatan dengan
difusi sumur, ketahanan terhadap suhu dan lama pemanasan, pH, enzim
teolitik, amilase, lipase, pelarut organik, serta bobot molekul.

Hasil seleksi terhadap 120 isolat menunjukkan 9 isolat mempunyai aktivitas
us dengan potensi yang bervariasi. Aktivitas hambatan
tinggi ditunjwkkan oleh isolat berkode T4. Setelah dilakukan identifikasi
biokimiawi isolat ini adalah Bacillus subtilis, sehingga selanjutnya isolat

XT

8s

-.ss.
f!

3
E

8
2E

h
7

Senyawa antibakteri yang diproduksi oleh B. subtilis T4 ini menghambat M
us, Bacillus megaterium clan Salmonella enteritidis. Supernatan aktif yang
sal dari biakan B. subtilis T4 dengan kepadatan lo5/ml mampu menghambat
luteus dengan kepadatan 106/ml. Daya harnbat protein antibakteri terhadap
6/ml adalah 30 pg/rnl untuk fraksi 1 dan 10 pglml
antibakteri dimulai pada jam ke7 setelah inkubasi
37OC dm mencapai konsentrasi tertinggi pada jam ke18. Supernatan aktif
tap aktif pada pemanasan 50°C selama 20 menit,
pada pH 5-1 1, dapat diinaktivasi oleh enzim papain murni dan crude
se, tidak dapat diinaktivasi oleh enzim lipase, arnilase, dan pelarut organik.
i adalah 19,5 kDa untuk fraksi 1 dan 36