SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL DAUN BENALU KEMIRI (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana)TERHADAP SEL KANKER SERVIKS(Sel HeLa)DENGAN METODE MTT SECARA IN VITRO
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Kanker adalah istilah umum untuk pertumbuhan sel yang tidak normal.
(yaitu, tumbuh sangat cepat, tidak terkontrol, dan tidak berirama). Penyakit
kanker merupakan penyebab kematian kedua setelah penyakit kardiovaskular
(Diananda; 2007, Nafrialdi dan Gan; 2011). Kanker adalah sekelompok lebih
dari 100 penyakit yang pertumbuhan selnya tidak terkontrol (Dipiro; 2008).
Sebanyak 7,6 juta orang di seluruh dunia meninggal karena kanker pada tahun
2008 (WHO; 2013).
Menurut Badan Kesehatan Dunia (WHO) penyakit kanker masuk dalam
urutan teratas dari kelompok penyakit. Berdasarkan kasus penyakit di dunia,
kanker menempati urutan kedua, setelah penyakit jantung. Di Indonesia kanker
masuk urutan ke-6 sebagai penyebab terjadinya kematian (Mulyadi; 1997).
Berdasarkan Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) tahun 2007, prevalensi
tumor/kanker di Indonesia adalah 4,3 per 1000 penduduk, dan kanker
merupakan penyebab kematian nomor 7 (5,7%) setelah stroke, tuberkulosis,
hipertensi, cedera, perinatal, dan diabetes Mellitus (Kemenkes RI; 2013).
Kanker serviks adalah kanker primer dari serviks. Kanker serviks
merupakan jenis kanker tersering kedua di dunia pada wanita, dengan estimasi
529.409 kasus baru dan 274.883 kematian pada tahun 2008 (Rachmawati dkk;
2013). Perjalanan penyakit karsinoma sel skuamosa serviks merupakan salah
satu model karsinogenesis yang awal sampai terjadinya perubahan morfologi
hingga tumbuh menjadi kanker invasive (Farid dkk; 2008). Angka kejadian
kanker leher rahim (serviks) di Indonesia menurut Depkes RI tahun 2010
mencapai angka 100/100.000 penduduk pertahun, sehingga pada tahun 2015
diperkirakan kasus baru kanker serviks di Indonesia akan meningkat sebesar
74% (Dewi dkk; 2013 dan Ocviyanti dkk; 2013).
1
2
Selama 40 tahun terakhir, kanker servikal invasif telah menurun dari 45
kasus per 100.000 hingga 15 kasus per 100.000 wanita. Kondisi ini terjadi paling
sering pada usia 30 sampai 45 tahun, tetapi dapat terjadi di usia dini yaitu 18
tahun (Smeltzer dan Brenda; 2002).
Hingga kini pengobatan neoplastik atau kanker dapat dilakukan dengan 3
cara yaitu: pembedahan, radiasi, dan dengan pemberian obat antineoplastik atau
antikanker (Mulyadi; 1997). Kemoterapi sering digunakan sebagai tambahan
untuk pembedahan atau terapi radiasi, namun dapat pula digunakan secara
tersendiri. Kemoterapi biasanya menyebabkan peneka- nan/supresi sumsum
tulang, yang akhirnya menyebabkan keletihan, anemia, kecenderungan
perdarahan, dan peningkatan resiko infeksi (Corwin; 2008).
Selain pengobatan konvensional tersebut, masyarakat banyak mencoba
kemungkinan penyembuhan dengan pengobatan alternatif menggunakan
tanaman herbal. Salah satunya yaitu dengan menggunakan tanaman benalu.
Benalu merupakan tanaman parasit yang pada awalnya dianggap tidak
bermanfaat ternyata berpotensi sebagai agen kemopreventif (Ikawati dkk; 2008).
Penggunaan tanaman benalu sebagai agen antikanker masih membutuhkan
eksplorasi lebih lanjut. Benalu berpeluang untuk dikembangkan sebagai
fitofarmaka (Ikawati; 2008 ), salah satunya yaitu benalu teh dan benalu mangga
yang tergolong dalam famili Loranthaceae dilaporkan memiliki efek sebagai
agen antikanker yang mempunyai nilai IC50 < 50 μg/ml. Benalu kelor
mempunyai IC50 = 33,89 μg/ml (Multiawati, 2013), benalu mangga dengan
konsentrasi 200 μg/ml dapat meningkatkan ekspresi caspase 3 aktif pada sel
Hela (Rachmawati dkk; 2013) dan juga pada ekstrak daun Dendrophthoe
pentandra (L.) Miq.) sebagai antioksidan mempunyai IC50 100 µg/ml, sehingga ekstrak daun benalu kemiri ini bersifat
sitotoksik dan dapat menghambat pertumbuhan dari sel kanker serviks (sel HeLa).
Kata kunci: Daun Benalu Kemiri, Sel HeLa, MTT Assay.
x
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL............................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii
LEMBAR PENGUJIAN ...................................................................................iii
KATA PENGANTAR ...................................................................................... iv
RINGKASAN .................................................................................................. vii
ABSTRACT ....................................................................................................... ix
ABSTRAK ......................................................................................................... x
DAFTAR ISI ...................................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ........................................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xvi
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... xvii
BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar belakang ................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah Penelitian ............................................................ 4
1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4
1.4 Hipotesis Penelitian........................................................................... 4
1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................ 4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 6
2.1 Tinjauan Tentang Benalu Kemiri ...................................................... 6
2.1.1 Klasifikasi................................................................................ 6
2.1.2 Sinonim ................................................................................... 6
2.1.3 Nama Daerah ........................................................................... 7
2.1.4 Deskripsi.................................................................................. 7
2.1.5 Etiologi dan Penyebaran.......................................................... 7
2.1.6 Khasiat ..................................................................................... 7
2.1.7 Kandungan .............................................................................. 8
2.2 Tinjauan tentang Kanker .................................................................. 9
2.2.1 Definisi .................................................................................... 9
xi
2.2.2 Penyebab Terjadinya Kanker ................................................ 10
2.2.3 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker ........................................ 11
2.2.4 Proses Terjadinya Karsinogenesis ......................................... 13
2.3 Tinjauan tentang Kanker Serviks .................................................... 14
2.3.1 Definisi .................................................................................. 14
2.3.2 Tanda dan Gejala Kanker Serviks .......................................... 16
2.4 Tinjauan Sel HeLa ........................................................................... 17
2.5 Tinjauan tentang Ekstraksi ............................................................. 17
2.6 Tinjauan tentang MTT Assay .......................................................... 18
2.7 Tinjauan Nilai IC50 pada Tumbuhan Benalu ...............................19
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 20
BAB 4 METODE PENELITIAN...................................................................... 23
4.1 Bahan Penelitian ........................................................................... 23
4.1.1 Bahan Tanaman .................................................................... 23
4.1.2 Bahan Kimia dan Bahan Lainnya ......................................... 23
4.2 Alat-alat Penelitian........................................................................ 24
4.3 Variabel Penelitian ........................................................................ 24
4.3.1 Variabel Bebas ...................................................................... 24
4.3.2 Variabel Tergantung ............................................................. 25
4.4 Metode Penelitian ......................................................................... 25
4.4.1 Rancangan Percobaan Penelitian .......................................... 25
4.4.2 Kerangka Operasional ........................................................... 26
4.4.3 Prosedur Kerja ...................................................................... 27
4.4.3.1 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji ....................................... 27
4.4.3.2 Identifikasi
Golongan
Senyawa
kimia
dengan
Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........ 27
4.4.3.3 Pembuatan Media .......................................................... 29
4.4.3.4 Penumbuhan Sel ............................................................ 29
4.4.3.5 Penggantian Media ........................................................ 30
4.4.3.6 Panen Sel ....................................................................... 31
4.4.3.7 Perhitungan Sel .............................................................. 31
4.4.3.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji ................... 32
xii
4.4.3.9 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT ............ 33
4.4.3.10 Analisis Data ............................................................... 35
BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................ 36
5.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe
sp. grew on Aleurites moluccana) ............................................... 36
5.2 Hasil Uji KLT Bahan Uji Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri
(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) ..................... 37
5.3 Perhitungan Sel HeLa dan Volume Panenan Sel yang Ditransfer
ke Dalam Plate ............................................................................ 37
5.4
Uji
Sitotoksisitas
dari
Ekstrak
Daun
Benalu
Kemiri
(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) Terhadap Sel
Kanker Serviks (Sel HeLa) dengan Metode MTT ...................... 38
5.5 Analisis Data ............................................................................... 40
BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................ 41
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 45
7.1 Kesimpulan .................................................................................. 45
7.2 Saran ............................................................................................ 45
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 46
LAMPIRAN ..................................................................................................... 51
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
II.1 Stadium Kanker Serviks .......................................................................... 15
IV.1 Kelompok perlakuan kultur sel kanker serviks (sel HeLa) dalam tiap
percobaan ............................................................................... ................. 25
V.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew
on Aleurites moluccana) ......................................................................... 36
V.2 Data Hasil Uji MTT Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe
sp. grew on Aleurites moluccana) terhadap Sel Kanker Serviks (Sel
Hela) ....................................................................................................... 39
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Tanaman Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites
moluccana) ............................................................................................ 6
2.2 Struktur Kuersetin .................................................................................. 9
2.3 Proses Terjadinya Karsinogenesis .......................................................... 13
2.4 Sel HeLa ................................................................................................. 17
3.1 Kerangka Konseptual ............................................................................. 20
4.1 Kerangka Operasional ............................................................................ 26
4.2 Skema Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Daun Benalu Kemiri .............. 28
5.1 Ekstrak Kental Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew on
Aleurites moluccana) ............................................................................. 36
5.2 Hasil Identifikasi Golongan Flavonoid dengan Kromatografi Lapis
Tipis ...................................................................................................... 37
5.3 Kondisi Sel Antara Kontrol Sel dan Sel yang Sudah Diberikan Ekstrak
Etanol Daun Benalu Kemiri .................................................................. 39
5.4 Kondisi Sel Pada Kontrol dan Kelompok Uji Sesudah Pemberian MTT
Dilihat Di Bawah Mikroskop dengan Perbesaran 40 Kali .................... 40
5.5 Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri
(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) ............................. 40
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1. Daftar Riwayat Hidup........................................................................... 51
2. Surat Pernyataan …………………...................................................... 52
3. Surat Determinasi Tanaman……………….......................................... 53
4. Analisis Probit Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp.
grew on Aleurites moluccana) .............................................................. 54
5. Foto Alat dan Bahan yang digunakan ……......………………............. 56
xvi
DAFTAR SINGKATAN
CCRC
= Cancer Chemoprevention Research Center
DMEM
= Dulbecco’s Modified Eagle Medium
DMSO
= Dimethyl Sulfoxide
DNA
= Deoxyribose Nucleic Acid
EDTA
= Ethylenediamine tetraacetic acid
ELISA
= Enzyme Linked Immunosorbent Assay
ER
= Endoplasma Reticulum
FBS
= Fetal Bovine Serum
FIGO
= International Federation of Gynecologists and Obstetricians
HCl
= Hidroclhoride Acid
HIV
= Human Immunodificiency Virus
HPV
= Human Papiloma Virus
HTLV
= Human T-lympocyte Virus
IC50
= Inhibitory Concentration 50
LAF
= Laminar Air Flow
MK
= Media Kultur
MTT
= Microculture Tetrazolium Salt
NaOH
= Natrium Hidroksida
PBS
= Phospate Buffer Saline
RPMI
= Rosewell Park Memorial Institute
SDS
= Sodium Dedocyl Sulfate
USDA
= United State Department of Agricultural
WHO
= World Health Organization
xvii
DAFTAR PUSTAKA
Anggraini, Polis Novita, 2008. Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba
Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara Manusia
T47D In Vitro Dengan Metode MTT, Skripsi Fakultas Farmasi
Universitas Airlangga.
Artanti, N., Firmansyah, T., and Darmawan, A., 2012. Bioactivities Evaluation of
Indonesian Mistletoes (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.) Leaves Extracts.
Journal of Applied Pharmaceutical Science, Vol. 02 No. 01, p. 24-27.
Astuti, Retno Dwi., 2013. Uji Antiproliferasi Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu
Kepel (Dendrophtoe curvata (Blume) Miq.) Terhadap Cell Line Kanker
Payudara T47D. Yogyakarta: Skripsi Universitas Islam negeri Sunan
Kalijaga.
Awik, P.D.N., Sukardiman., dan Fadjri, H. T., 2011. Uji Toksisitas dan Efek
Ekstrak Spons Laut Aaptos suberitoides Terhadap Sel Kanker Serviks
(HeLa) Secara In Vitro. ITS Undergraduated Thesis of Biology.
BPOM RI., 2010. Acuan Sedian Herbal. Volume ke-5. Edisi ke-1, Jakarta:
Direktorat Obat Asli Indonesia Debuti Bidang Pengawas Obat Tradisional,
Kosmetik dan Produk Komplementer, 129-131.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Prosedur Tetap.
Yogyakarta
Fakultas
Farmasi
Universitas
Gadjah
Mada.
http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/protokol/. Diakses tanggal 30
Oktober 2013.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Kanker Leher
Rahim (serviks). Yogyakarta : Fakultas Farmasi Universitas Gadjah
Mada. http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopediakanker/kanker-serviks/. Diakses tanggal 19 September 2013.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Sel HeLa. Yogyakarta
:
Fakultas
Farmasi
Universitas
Gadjah
Mada.
http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopediakanker/sel-hela/. Diakses tanggal 19 September 2013.
Chrestella, Jessy., 2009. Neoplasma. Departemen Patologi Anatomi. Fakultas
Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Medan.
Corwin, J. E., 2008. Buku Saku Patofisiologi. Edisi 3, Jakarta: EGC. Hal 91.
Dalimartha, S., 2003. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker.
Cetakan VI. Jakarta : Penebar Swadaya.
Davey, Patrick., 2005. At A Glance Medicine. Jakarta: Penerbit Erlangga. Hal
335.
Dewi, I. G. A. N., Sawitri, A. A. S., dan Adiputra, N., 2013. Paparan Asap Rokok
dan Higiene Diri Merupakan Faktor Risiko Lesi Prakanker Leher Rahim di
Kota Denpasar Tahun 2012. Public Health and Preventive Medicine
Archive, Vol. 1 No. 1, Hal. 85.
Diananda, Rama., 2007. Seluk-Beluk Kanker. Jogjakarta: Kata Hati. Hal 17.
Dina, F., Prista, K. P., dan Iwang, Y., 2011. Efek Sitotoksik Ekstrak Etanol
Sarang Semut (Myrmecodia pendens) Pada Sel Line Kanker Serviks HeLa.
Uji
Eksperimental
Secara
In
Vitro.
Jurnal
Fakultas
KedokteranUniversitas Islam Sultan Agung (UNISSULA), Vol. 3 No. 2.
Hal 112-120
Dipiro, T. Joseph., Talbert, L. Robert., Yee, C. Gary., Matzke, R. Gary., Welss, G.
Barbara., Posey, Michael. L. 2008. .Pharmacotherapy A Pathophysiologic
Approach. Sevent Edition.
Direktorat Jendral PP&PL Kementrian Kesehatan RI., Apakah Anda Tahu
tentang Kanker., Panduan Memperingati Hari Kanker Sedunia Di
Indonesia Tahun 2013, Jakarta. Hal 3. Dinkes. Jatimprov.go.id. Diakses
pada tanggal 04 Oktober 2013.
Fajriah, S., Darmawan, A., Sundowa, A., dan Artanti, N., 2007. Isolasi Senyawa
Antioksidan dari Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu Dendrophthoe
pentandra L. Miq yang Tumbuh pada Inang Lobi-Lobi. Jurnal Kimia
Indonesia., Vol. 2 (1), p. 17-20.
Farid, A. dkk., 2008. Panduan Pelayanan Medik: Model Interdisiplin
Penatalaksanaan kanker Serviks dengan Gangguan Ginjal. Jakarta.
EGC.
Fitriana, N. A., Ambarini, T. K., 2012. Jurnal Psikologi Klinis dan Kesehatan
Mental, Vol. 1 No. 02. Departemen Psikologis Klinis dan Kesehatan
Mental. Fakultas Psikologi Unversitas Airlangga.
Fried, George. H., Hademenos, George. J., 1999. Schaum’s Outline of Theory
and Problems of Biology. Second edition. The McGraw-Hill Companies.
Ghofar, Abdul., 2009. Cara Mudah Mengenal & Mengobati Kanker. Cetakan
I, Jogjakarta: Flamingo. Hal 126.
Gibney, M. J., dkk., 2008. Gizi Kesehatan Masyarakat. Hal 422.
Health Technology Assessment Indonesia., 2008. Skrining Kanker Leher
Rahim Dengan Metode Inspeksi Visual Dengan Asam Asetat (IVA). Hal
10.
Ikawati, Muthi., Wibowo, A.E., Octa, N.S., dan Adelina, Rosa., 2008.
Pemanfaatan Benalu Sebagai Agen Antikanker. Fakultas Farmasi
Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Indiastuti, D. N., Purwaningsih, S., Setyawati, Y., dan Cholies, N., 2008. Skrining
Pendahuluan Toksisitas Beberapa Tumbuhan Benalu terhadap Larva Udang
Artemia salina Leach. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, Vol. 06, No.
02, ISSN 1693-1831.
Jong, D.W., 2004. Kanker, Apakah Itu? (Pengobatan, Harapan Hidup, dan
Dukungan Keluarga). Jakarta: Arcan. Hal 2.
Larasati, Y., 2013. MTT Assay. http://yonikalarasatijournal.wordpress.com/
author/yonikalarasatijournal/. Diakses pada tanggal 20 November 2013.
Mardiana, Lina. 2004. Kanker Pada Wanita, Pencegahan dan Pengobatan
dengan Tanaman Obat. Depok: Penebar Swadaya.
Multiawati, Nur., 2013. Uji Antikanker Ekstrak Metanol Daun Benalu Kelor
(Helixanthera sessiliflora) (Merr.) Denser) Terhadap Cell Line Kanker
Payudara T47D. Yogyakarta: Skripsi Program Sarjana.
Mulyadi., 1996. Kanker, Karsinogen, Karsinogenesis dan Antikanker.
Yogyakarta: PT Tiara Wacana Yogya. Hal 94.
Nafrialdi, Gan., Sulistia., 2011. Farmakologi dan Terapi. Edisi V., Jakarta:
Badan Penerbit FKUI. Hal 732-733.
Nurwijaya, Hartati., Suheimi, H. K. A., 2010. Kanker Serviks. Surabaya: Hal 5.
Ocviyanti, D., Handoko, Y., 2013. Peran Dokter Umum Dalam Pencegahan
Kanker Serviks di Indonesia. J Indon Med Assoc, Vol. 63 No. 1, Hal. 1.
Putri, F. W., 2013. Pengetahuan dan Perilaku Mahasiswi Fakultas Farmasi
Universitas Surabaya Dalam Upaya Pencegahan Kanker Serviks. Jurnal
Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya, Vol. 2 No. 1, hal. 1-13.
Rachmawati, A, E, V., Muliartha, I, K, G., dan Kusworini. 2013. Pengaruh
Ekstrak Daun Benalu Mangga (Dendrophthoe pentandra) Terhadap
Viabilitas dan Ekspresi Caspase 3 Aktif pada Sel Kanker Serviks (Sel
HeLa). Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya. Malang.
Rosida, J., 2002. Uji Saponin Dalam Lidah Buaya, Limbah Buah Mengkudu dan
Daun Mimba. Temu Teknis Fungsional Non Peneliti, Hal 1-7.
Rossaria, Nella., 2007. Kajian Antiproliferatif Ekstrak Daun Benalu Duku
(Loranthaceae dendrophthoe species) Terhadap Sel Mieloma Secara
In Vitro. Artikel Ilmiah Universitas Airlangga.
Rusmana, Djaja., 2009. Aspek Onkologi Human Papillomavirus. JKM, Vol. 1
No.9, hal. 95-101.
Sari, R. K., Syafii, W., Achmadi, S. S., Hanafi, M., dan Laksana, Y. T., 2012.
Aktivitas Antikanker dan Kandungan Kimia Ekstrak Kayu Teras Suren
(Toona sureni). Jurnal Ilmu Teknologi Kayu Tropis, Vol. 10 No. 01, Hal
1-11.
Smeltzer, C. Suzanne., Brenda, G. Bare., 2002. Buku Ajar Keperawatan
Medikal-bedah Brunner&Suddarth. Edisi 8. Vol 2, Jakarta: Penerbit
Buku Kedokteran. Hal 1559.
Sudiana, I. K., 2008. Patologi Molekuler Kanker. Jakarta: Salemba Media. Hal
27.
Sundaryono, A., 2011. Teratogenitas Senyawa Flavonoid Dalam Ekstrak Metanol
Daun Benalu (Dendrophthoe pentandra (L) Miq. ) pada Mus musculus.
Jurnal Exacta., Vol. IX No. 1, ISSN 1412-3617.
Sundaryono, A., 2011. Uji Aktivitas Senyawa Flavonoid Total Dari Gynura
segetum (Lour) Terhadap Peningkatan Eritrosit dan Penurunan Leukosit
Pada Mencit (Mus musculus). Jurnal Exacta., Vol. IX No. 2 ISSN 14123617.
Suryapratama, A. S., 2012. Karakteristik Penderita Kanker Serviks di RSUP Dr.
Kariadi Semarang Tahun 2010. Semarang. Karya Tulis Ilmiah.
Syaifuddin, M., 2007. Agen Penekan Tumor p53, Kanker, dan Radiasi
Pengion. Buletin Alara. Hal 119-128.
Tjay, T. H., Rahardja, K., 2008. Obat-Obat Penting. Edisi ke enam. Cetakan I,
Jakarta: PT Elex Media Komputindo.
USDA., 2013. Species 2000 & ITIS Catalogue of Life. Taxonomic Information
for Dendrophthoe pentandra. http://eol.org/pages/2872661/names.
Diakses pada tanggal 08 Januari 2014.
Wahyuningsih, M. S. H., Syarif, R. A., Suharmi, S., Murini, T., Saputra, F., dan
Adiguno, S. W., 2013. Selectivity of Purified Extract From the Leaves of
Tithonia diversifolia (Hemsley) a. Gray) Againts HeLa Cell. Traditional
Medicine Journal, Vol. 18 No. 01, p 22-28.
Waji, R. A., Sugrani, A., 2009. Flavonoid (Quersetin). Makassar: Makalah
Kimia Organik Bahan Alam. Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Hasanuddin.
Wardhani, Lilies Kusuma dan Sulistyani, Nanik. 2012. Uji Aktivitas Antikbakteri Ekstrak
Etil Asetat Daun Binahong (Anredera scandens (L.) Moq.) terhadap Shigella
flexneri Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Yogyakarta : Fakultas Farmasi
Universitas Ahmad Dahlan.
WHO (World Health Organization). 2013. Cancer Mortality and Morbidity.
http://www.who.int/gho/ncd/mortality_morbidity/cancer/en/index.html.
Diakses tanggal 07 Oktober 2013.
Wicaksono, M. H. B., Permana, S., 2013. Potensi Fraksi Etanol Benalu Mangga
(Dendrophthoe pentandra) sebagai Agen Anti Kanker Kolon pada
Mencit (Mus musculus Balb/c) setelah Induksi Dextran Sulvat (DSS)
danAzoxymethane (AOM). Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya Jalan Veteran Malang,
Jawa Timur, Indonesia.
Wikanta, T., Prabukusuma, A., Ratih, D., dan Januar, H., 2013. Bioaktivitas
Ekstrak Kasar Aseton, Fraksi, dan Subfraksinya dari Ulva fasciata
Terhadap Sel Lestari Tumor HeLa. Hal 1-16.
Yan, L.L., Zhang, Y.J., Gao, W.Y., Man, S.l., Wang, Y., 2009. In Vitro and In
Vivo Anticancer Activity of Steroid Saponins of Paris polyphylla Var.
yunnanensis. Experimental Oncology, Vol. 31, pp 27-32.
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Kanker adalah istilah umum untuk pertumbuhan sel yang tidak normal.
(yaitu, tumbuh sangat cepat, tidak terkontrol, dan tidak berirama). Penyakit
kanker merupakan penyebab kematian kedua setelah penyakit kardiovaskular
(Diananda; 2007, Nafrialdi dan Gan; 2011). Kanker adalah sekelompok lebih
dari 100 penyakit yang pertumbuhan selnya tidak terkontrol (Dipiro; 2008).
Sebanyak 7,6 juta orang di seluruh dunia meninggal karena kanker pada tahun
2008 (WHO; 2013).
Menurut Badan Kesehatan Dunia (WHO) penyakit kanker masuk dalam
urutan teratas dari kelompok penyakit. Berdasarkan kasus penyakit di dunia,
kanker menempati urutan kedua, setelah penyakit jantung. Di Indonesia kanker
masuk urutan ke-6 sebagai penyebab terjadinya kematian (Mulyadi; 1997).
Berdasarkan Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas) tahun 2007, prevalensi
tumor/kanker di Indonesia adalah 4,3 per 1000 penduduk, dan kanker
merupakan penyebab kematian nomor 7 (5,7%) setelah stroke, tuberkulosis,
hipertensi, cedera, perinatal, dan diabetes Mellitus (Kemenkes RI; 2013).
Kanker serviks adalah kanker primer dari serviks. Kanker serviks
merupakan jenis kanker tersering kedua di dunia pada wanita, dengan estimasi
529.409 kasus baru dan 274.883 kematian pada tahun 2008 (Rachmawati dkk;
2013). Perjalanan penyakit karsinoma sel skuamosa serviks merupakan salah
satu model karsinogenesis yang awal sampai terjadinya perubahan morfologi
hingga tumbuh menjadi kanker invasive (Farid dkk; 2008). Angka kejadian
kanker leher rahim (serviks) di Indonesia menurut Depkes RI tahun 2010
mencapai angka 100/100.000 penduduk pertahun, sehingga pada tahun 2015
diperkirakan kasus baru kanker serviks di Indonesia akan meningkat sebesar
74% (Dewi dkk; 2013 dan Ocviyanti dkk; 2013).
1
2
Selama 40 tahun terakhir, kanker servikal invasif telah menurun dari 45
kasus per 100.000 hingga 15 kasus per 100.000 wanita. Kondisi ini terjadi paling
sering pada usia 30 sampai 45 tahun, tetapi dapat terjadi di usia dini yaitu 18
tahun (Smeltzer dan Brenda; 2002).
Hingga kini pengobatan neoplastik atau kanker dapat dilakukan dengan 3
cara yaitu: pembedahan, radiasi, dan dengan pemberian obat antineoplastik atau
antikanker (Mulyadi; 1997). Kemoterapi sering digunakan sebagai tambahan
untuk pembedahan atau terapi radiasi, namun dapat pula digunakan secara
tersendiri. Kemoterapi biasanya menyebabkan peneka- nan/supresi sumsum
tulang, yang akhirnya menyebabkan keletihan, anemia, kecenderungan
perdarahan, dan peningkatan resiko infeksi (Corwin; 2008).
Selain pengobatan konvensional tersebut, masyarakat banyak mencoba
kemungkinan penyembuhan dengan pengobatan alternatif menggunakan
tanaman herbal. Salah satunya yaitu dengan menggunakan tanaman benalu.
Benalu merupakan tanaman parasit yang pada awalnya dianggap tidak
bermanfaat ternyata berpotensi sebagai agen kemopreventif (Ikawati dkk; 2008).
Penggunaan tanaman benalu sebagai agen antikanker masih membutuhkan
eksplorasi lebih lanjut. Benalu berpeluang untuk dikembangkan sebagai
fitofarmaka (Ikawati; 2008 ), salah satunya yaitu benalu teh dan benalu mangga
yang tergolong dalam famili Loranthaceae dilaporkan memiliki efek sebagai
agen antikanker yang mempunyai nilai IC50 < 50 μg/ml. Benalu kelor
mempunyai IC50 = 33,89 μg/ml (Multiawati, 2013), benalu mangga dengan
konsentrasi 200 μg/ml dapat meningkatkan ekspresi caspase 3 aktif pada sel
Hela (Rachmawati dkk; 2013) dan juga pada ekstrak daun Dendrophthoe
pentandra (L.) Miq.) sebagai antioksidan mempunyai IC50 100 µg/ml, sehingga ekstrak daun benalu kemiri ini bersifat
sitotoksik dan dapat menghambat pertumbuhan dari sel kanker serviks (sel HeLa).
Kata kunci: Daun Benalu Kemiri, Sel HeLa, MTT Assay.
x
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL............................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ ii
LEMBAR PENGUJIAN ...................................................................................iii
KATA PENGANTAR ...................................................................................... iv
RINGKASAN .................................................................................................. vii
ABSTRACT ....................................................................................................... ix
ABSTRAK ......................................................................................................... x
DAFTAR ISI ...................................................................................................... xi
DAFTAR TABEL ........................................................................................... xiv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xvi
DAFTAR SINGKATAN ............................................................................... xvii
BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar belakang ................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah Penelitian ............................................................ 4
1.3 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4
1.4 Hipotesis Penelitian........................................................................... 4
1.5 Manfaat Penelitian ............................................................................ 4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 6
2.1 Tinjauan Tentang Benalu Kemiri ...................................................... 6
2.1.1 Klasifikasi................................................................................ 6
2.1.2 Sinonim ................................................................................... 6
2.1.3 Nama Daerah ........................................................................... 7
2.1.4 Deskripsi.................................................................................. 7
2.1.5 Etiologi dan Penyebaran.......................................................... 7
2.1.6 Khasiat ..................................................................................... 7
2.1.7 Kandungan .............................................................................. 8
2.2 Tinjauan tentang Kanker .................................................................. 9
2.2.1 Definisi .................................................................................... 9
xi
2.2.2 Penyebab Terjadinya Kanker ................................................ 10
2.2.3 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker ........................................ 11
2.2.4 Proses Terjadinya Karsinogenesis ......................................... 13
2.3 Tinjauan tentang Kanker Serviks .................................................... 14
2.3.1 Definisi .................................................................................. 14
2.3.2 Tanda dan Gejala Kanker Serviks .......................................... 16
2.4 Tinjauan Sel HeLa ........................................................................... 17
2.5 Tinjauan tentang Ekstraksi ............................................................. 17
2.6 Tinjauan tentang MTT Assay .......................................................... 18
2.7 Tinjauan Nilai IC50 pada Tumbuhan Benalu ...............................19
BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 20
BAB 4 METODE PENELITIAN...................................................................... 23
4.1 Bahan Penelitian ........................................................................... 23
4.1.1 Bahan Tanaman .................................................................... 23
4.1.2 Bahan Kimia dan Bahan Lainnya ......................................... 23
4.2 Alat-alat Penelitian........................................................................ 24
4.3 Variabel Penelitian ........................................................................ 24
4.3.1 Variabel Bebas ...................................................................... 24
4.3.2 Variabel Tergantung ............................................................. 25
4.4 Metode Penelitian ......................................................................... 25
4.4.1 Rancangan Percobaan Penelitian .......................................... 25
4.4.2 Kerangka Operasional ........................................................... 26
4.4.3 Prosedur Kerja ...................................................................... 27
4.4.3.1 Pembuatan Ekstrak Bahan Uji ....................................... 27
4.4.3.2 Identifikasi
Golongan
Senyawa
kimia
dengan
Menggunakan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........ 27
4.4.3.3 Pembuatan Media .......................................................... 29
4.4.3.4 Penumbuhan Sel ............................................................ 29
4.4.3.5 Penggantian Media ........................................................ 30
4.4.3.6 Panen Sel ....................................................................... 31
4.4.3.7 Perhitungan Sel .............................................................. 31
4.4.3.8 Pembuatan Larutan Induk dan Larutan Uji ................... 32
xii
4.4.3.9 Uji Aktivitas Antikanker dengan Metode MTT ............ 33
4.4.3.10 Analisis Data ............................................................... 35
BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................ 36
5.1 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe
sp. grew on Aleurites moluccana) ............................................... 36
5.2 Hasil Uji KLT Bahan Uji Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri
(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) ..................... 37
5.3 Perhitungan Sel HeLa dan Volume Panenan Sel yang Ditransfer
ke Dalam Plate ............................................................................ 37
5.4
Uji
Sitotoksisitas
dari
Ekstrak
Daun
Benalu
Kemiri
(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) Terhadap Sel
Kanker Serviks (Sel HeLa) dengan Metode MTT ...................... 38
5.5 Analisis Data ............................................................................... 40
BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................ 41
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 45
7.1 Kesimpulan .................................................................................. 45
7.2 Saran ............................................................................................ 45
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 46
LAMPIRAN ..................................................................................................... 51
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
II.1 Stadium Kanker Serviks .......................................................................... 15
IV.1 Kelompok perlakuan kultur sel kanker serviks (sel HeLa) dalam tiap
percobaan ............................................................................... ................. 25
V.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew
on Aleurites moluccana) ......................................................................... 36
V.2 Data Hasil Uji MTT Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe
sp. grew on Aleurites moluccana) terhadap Sel Kanker Serviks (Sel
Hela) ....................................................................................................... 39
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Tanaman Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew on Aleurites
moluccana) ............................................................................................ 6
2.2 Struktur Kuersetin .................................................................................. 9
2.3 Proses Terjadinya Karsinogenesis .......................................................... 13
2.4 Sel HeLa ................................................................................................. 17
3.1 Kerangka Konseptual ............................................................................. 20
4.1 Kerangka Operasional ............................................................................ 26
4.2 Skema Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Daun Benalu Kemiri .............. 28
5.1 Ekstrak Kental Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp. grew on
Aleurites moluccana) ............................................................................. 36
5.2 Hasil Identifikasi Golongan Flavonoid dengan Kromatografi Lapis
Tipis ...................................................................................................... 37
5.3 Kondisi Sel Antara Kontrol Sel dan Sel yang Sudah Diberikan Ekstrak
Etanol Daun Benalu Kemiri .................................................................. 39
5.4 Kondisi Sel Pada Kontrol dan Kelompok Uji Sesudah Pemberian MTT
Dilihat Di Bawah Mikroskop dengan Perbesaran 40 Kali .................... 40
5.5 Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri
(Dendrophthoe sp. grew on Aleurites moluccana) ............................. 40
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1. Daftar Riwayat Hidup........................................................................... 51
2. Surat Pernyataan …………………...................................................... 52
3. Surat Determinasi Tanaman……………….......................................... 53
4. Analisis Probit Ekstrak Etanol Daun Benalu Kemiri (Dendrophthoe sp.
grew on Aleurites moluccana) .............................................................. 54
5. Foto Alat dan Bahan yang digunakan ……......………………............. 56
xvi
DAFTAR SINGKATAN
CCRC
= Cancer Chemoprevention Research Center
DMEM
= Dulbecco’s Modified Eagle Medium
DMSO
= Dimethyl Sulfoxide
DNA
= Deoxyribose Nucleic Acid
EDTA
= Ethylenediamine tetraacetic acid
ELISA
= Enzyme Linked Immunosorbent Assay
ER
= Endoplasma Reticulum
FBS
= Fetal Bovine Serum
FIGO
= International Federation of Gynecologists and Obstetricians
HCl
= Hidroclhoride Acid
HIV
= Human Immunodificiency Virus
HPV
= Human Papiloma Virus
HTLV
= Human T-lympocyte Virus
IC50
= Inhibitory Concentration 50
LAF
= Laminar Air Flow
MK
= Media Kultur
MTT
= Microculture Tetrazolium Salt
NaOH
= Natrium Hidroksida
PBS
= Phospate Buffer Saline
RPMI
= Rosewell Park Memorial Institute
SDS
= Sodium Dedocyl Sulfate
USDA
= United State Department of Agricultural
WHO
= World Health Organization
xvii
DAFTAR PUSTAKA
Anggraini, Polis Novita, 2008. Aktivitas Campuran Ekstrak Etanol Herba
Sambiloto dan Rimpang Kunyit Terhadap Sel Kanker Payudara Manusia
T47D In Vitro Dengan Metode MTT, Skripsi Fakultas Farmasi
Universitas Airlangga.
Artanti, N., Firmansyah, T., and Darmawan, A., 2012. Bioactivities Evaluation of
Indonesian Mistletoes (Dendrophthoe pentandra (L.) Miq.) Leaves Extracts.
Journal of Applied Pharmaceutical Science, Vol. 02 No. 01, p. 24-27.
Astuti, Retno Dwi., 2013. Uji Antiproliferasi Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu
Kepel (Dendrophtoe curvata (Blume) Miq.) Terhadap Cell Line Kanker
Payudara T47D. Yogyakarta: Skripsi Universitas Islam negeri Sunan
Kalijaga.
Awik, P.D.N., Sukardiman., dan Fadjri, H. T., 2011. Uji Toksisitas dan Efek
Ekstrak Spons Laut Aaptos suberitoides Terhadap Sel Kanker Serviks
(HeLa) Secara In Vitro. ITS Undergraduated Thesis of Biology.
BPOM RI., 2010. Acuan Sedian Herbal. Volume ke-5. Edisi ke-1, Jakarta:
Direktorat Obat Asli Indonesia Debuti Bidang Pengawas Obat Tradisional,
Kosmetik dan Produk Komplementer, 129-131.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Prosedur Tetap.
Yogyakarta
Fakultas
Farmasi
Universitas
Gadjah
Mada.
http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/protokol/. Diakses tanggal 30
Oktober 2013.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Kanker Leher
Rahim (serviks). Yogyakarta : Fakultas Farmasi Universitas Gadjah
Mada. http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopediakanker/kanker-serviks/. Diakses tanggal 19 September 2013.
CCRC (Cancer Chemoprevention Research Center)., 2009. Sel HeLa. Yogyakarta
:
Fakultas
Farmasi
Universitas
Gadjah
Mada.
http://ccrcfarmasiugm.wordpress.com/ensiklopedia/ensiklopediakanker/sel-hela/. Diakses tanggal 19 September 2013.
Chrestella, Jessy., 2009. Neoplasma. Departemen Patologi Anatomi. Fakultas
Kedokteran Universitas Sumatera Utara. Medan.
Corwin, J. E., 2008. Buku Saku Patofisiologi. Edisi 3, Jakarta: EGC. Hal 91.
Dalimartha, S., 2003. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Kanker.
Cetakan VI. Jakarta : Penebar Swadaya.
Davey, Patrick., 2005. At A Glance Medicine. Jakarta: Penerbit Erlangga. Hal
335.
Dewi, I. G. A. N., Sawitri, A. A. S., dan Adiputra, N., 2013. Paparan Asap Rokok
dan Higiene Diri Merupakan Faktor Risiko Lesi Prakanker Leher Rahim di
Kota Denpasar Tahun 2012. Public Health and Preventive Medicine
Archive, Vol. 1 No. 1, Hal. 85.
Diananda, Rama., 2007. Seluk-Beluk Kanker. Jogjakarta: Kata Hati. Hal 17.
Dina, F., Prista, K. P., dan Iwang, Y., 2011. Efek Sitotoksik Ekstrak Etanol
Sarang Semut (Myrmecodia pendens) Pada Sel Line Kanker Serviks HeLa.
Uji
Eksperimental
Secara
In
Vitro.
Jurnal
Fakultas
KedokteranUniversitas Islam Sultan Agung (UNISSULA), Vol. 3 No. 2.
Hal 112-120
Dipiro, T. Joseph., Talbert, L. Robert., Yee, C. Gary., Matzke, R. Gary., Welss, G.
Barbara., Posey, Michael. L. 2008. .Pharmacotherapy A Pathophysiologic
Approach. Sevent Edition.
Direktorat Jendral PP&PL Kementrian Kesehatan RI., Apakah Anda Tahu
tentang Kanker., Panduan Memperingati Hari Kanker Sedunia Di
Indonesia Tahun 2013, Jakarta. Hal 3. Dinkes. Jatimprov.go.id. Diakses
pada tanggal 04 Oktober 2013.
Fajriah, S., Darmawan, A., Sundowa, A., dan Artanti, N., 2007. Isolasi Senyawa
Antioksidan dari Ekstrak Etil Asetat Daun Benalu Dendrophthoe
pentandra L. Miq yang Tumbuh pada Inang Lobi-Lobi. Jurnal Kimia
Indonesia., Vol. 2 (1), p. 17-20.
Farid, A. dkk., 2008. Panduan Pelayanan Medik: Model Interdisiplin
Penatalaksanaan kanker Serviks dengan Gangguan Ginjal. Jakarta.
EGC.
Fitriana, N. A., Ambarini, T. K., 2012. Jurnal Psikologi Klinis dan Kesehatan
Mental, Vol. 1 No. 02. Departemen Psikologis Klinis dan Kesehatan
Mental. Fakultas Psikologi Unversitas Airlangga.
Fried, George. H., Hademenos, George. J., 1999. Schaum’s Outline of Theory
and Problems of Biology. Second edition. The McGraw-Hill Companies.
Ghofar, Abdul., 2009. Cara Mudah Mengenal & Mengobati Kanker. Cetakan
I, Jogjakarta: Flamingo. Hal 126.
Gibney, M. J., dkk., 2008. Gizi Kesehatan Masyarakat. Hal 422.
Health Technology Assessment Indonesia., 2008. Skrining Kanker Leher
Rahim Dengan Metode Inspeksi Visual Dengan Asam Asetat (IVA). Hal
10.
Ikawati, Muthi., Wibowo, A.E., Octa, N.S., dan Adelina, Rosa., 2008.
Pemanfaatan Benalu Sebagai Agen Antikanker. Fakultas Farmasi
Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Indiastuti, D. N., Purwaningsih, S., Setyawati, Y., dan Cholies, N., 2008. Skrining
Pendahuluan Toksisitas Beberapa Tumbuhan Benalu terhadap Larva Udang
Artemia salina Leach. Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia, Vol. 06, No.
02, ISSN 1693-1831.
Jong, D.W., 2004. Kanker, Apakah Itu? (Pengobatan, Harapan Hidup, dan
Dukungan Keluarga). Jakarta: Arcan. Hal 2.
Larasati, Y., 2013. MTT Assay. http://yonikalarasatijournal.wordpress.com/
author/yonikalarasatijournal/. Diakses pada tanggal 20 November 2013.
Mardiana, Lina. 2004. Kanker Pada Wanita, Pencegahan dan Pengobatan
dengan Tanaman Obat. Depok: Penebar Swadaya.
Multiawati, Nur., 2013. Uji Antikanker Ekstrak Metanol Daun Benalu Kelor
(Helixanthera sessiliflora) (Merr.) Denser) Terhadap Cell Line Kanker
Payudara T47D. Yogyakarta: Skripsi Program Sarjana.
Mulyadi., 1996. Kanker, Karsinogen, Karsinogenesis dan Antikanker.
Yogyakarta: PT Tiara Wacana Yogya. Hal 94.
Nafrialdi, Gan., Sulistia., 2011. Farmakologi dan Terapi. Edisi V., Jakarta:
Badan Penerbit FKUI. Hal 732-733.
Nurwijaya, Hartati., Suheimi, H. K. A., 2010. Kanker Serviks. Surabaya: Hal 5.
Ocviyanti, D., Handoko, Y., 2013. Peran Dokter Umum Dalam Pencegahan
Kanker Serviks di Indonesia. J Indon Med Assoc, Vol. 63 No. 1, Hal. 1.
Putri, F. W., 2013. Pengetahuan dan Perilaku Mahasiswi Fakultas Farmasi
Universitas Surabaya Dalam Upaya Pencegahan Kanker Serviks. Jurnal
Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya, Vol. 2 No. 1, hal. 1-13.
Rachmawati, A, E, V., Muliartha, I, K, G., dan Kusworini. 2013. Pengaruh
Ekstrak Daun Benalu Mangga (Dendrophthoe pentandra) Terhadap
Viabilitas dan Ekspresi Caspase 3 Aktif pada Sel Kanker Serviks (Sel
HeLa). Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran
Universitas Brawijaya. Malang.
Rosida, J., 2002. Uji Saponin Dalam Lidah Buaya, Limbah Buah Mengkudu dan
Daun Mimba. Temu Teknis Fungsional Non Peneliti, Hal 1-7.
Rossaria, Nella., 2007. Kajian Antiproliferatif Ekstrak Daun Benalu Duku
(Loranthaceae dendrophthoe species) Terhadap Sel Mieloma Secara
In Vitro. Artikel Ilmiah Universitas Airlangga.
Rusmana, Djaja., 2009. Aspek Onkologi Human Papillomavirus. JKM, Vol. 1
No.9, hal. 95-101.
Sari, R. K., Syafii, W., Achmadi, S. S., Hanafi, M., dan Laksana, Y. T., 2012.
Aktivitas Antikanker dan Kandungan Kimia Ekstrak Kayu Teras Suren
(Toona sureni). Jurnal Ilmu Teknologi Kayu Tropis, Vol. 10 No. 01, Hal
1-11.
Smeltzer, C. Suzanne., Brenda, G. Bare., 2002. Buku Ajar Keperawatan
Medikal-bedah Brunner&Suddarth. Edisi 8. Vol 2, Jakarta: Penerbit
Buku Kedokteran. Hal 1559.
Sudiana, I. K., 2008. Patologi Molekuler Kanker. Jakarta: Salemba Media. Hal
27.
Sundaryono, A., 2011. Teratogenitas Senyawa Flavonoid Dalam Ekstrak Metanol
Daun Benalu (Dendrophthoe pentandra (L) Miq. ) pada Mus musculus.
Jurnal Exacta., Vol. IX No. 1, ISSN 1412-3617.
Sundaryono, A., 2011. Uji Aktivitas Senyawa Flavonoid Total Dari Gynura
segetum (Lour) Terhadap Peningkatan Eritrosit dan Penurunan Leukosit
Pada Mencit (Mus musculus). Jurnal Exacta., Vol. IX No. 2 ISSN 14123617.
Suryapratama, A. S., 2012. Karakteristik Penderita Kanker Serviks di RSUP Dr.
Kariadi Semarang Tahun 2010. Semarang. Karya Tulis Ilmiah.
Syaifuddin, M., 2007. Agen Penekan Tumor p53, Kanker, dan Radiasi
Pengion. Buletin Alara. Hal 119-128.
Tjay, T. H., Rahardja, K., 2008. Obat-Obat Penting. Edisi ke enam. Cetakan I,
Jakarta: PT Elex Media Komputindo.
USDA., 2013. Species 2000 & ITIS Catalogue of Life. Taxonomic Information
for Dendrophthoe pentandra. http://eol.org/pages/2872661/names.
Diakses pada tanggal 08 Januari 2014.
Wahyuningsih, M. S. H., Syarif, R. A., Suharmi, S., Murini, T., Saputra, F., dan
Adiguno, S. W., 2013. Selectivity of Purified Extract From the Leaves of
Tithonia diversifolia (Hemsley) a. Gray) Againts HeLa Cell. Traditional
Medicine Journal, Vol. 18 No. 01, p 22-28.
Waji, R. A., Sugrani, A., 2009. Flavonoid (Quersetin). Makassar: Makalah
Kimia Organik Bahan Alam. Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Hasanuddin.
Wardhani, Lilies Kusuma dan Sulistyani, Nanik. 2012. Uji Aktivitas Antikbakteri Ekstrak
Etil Asetat Daun Binahong (Anredera scandens (L.) Moq.) terhadap Shigella
flexneri Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Yogyakarta : Fakultas Farmasi
Universitas Ahmad Dahlan.
WHO (World Health Organization). 2013. Cancer Mortality and Morbidity.
http://www.who.int/gho/ncd/mortality_morbidity/cancer/en/index.html.
Diakses tanggal 07 Oktober 2013.
Wicaksono, M. H. B., Permana, S., 2013. Potensi Fraksi Etanol Benalu Mangga
(Dendrophthoe pentandra) sebagai Agen Anti Kanker Kolon pada
Mencit (Mus musculus Balb/c) setelah Induksi Dextran Sulvat (DSS)
danAzoxymethane (AOM). Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Brawijaya Jalan Veteran Malang,
Jawa Timur, Indonesia.
Wikanta, T., Prabukusuma, A., Ratih, D., dan Januar, H., 2013. Bioaktivitas
Ekstrak Kasar Aseton, Fraksi, dan Subfraksinya dari Ulva fasciata
Terhadap Sel Lestari Tumor HeLa. Hal 1-16.
Yan, L.L., Zhang, Y.J., Gao, W.Y., Man, S.l., Wang, Y., 2009. In Vitro and In
Vivo Anticancer Activity of Steroid Saponins of Paris polyphylla Var.
yunnanensis. Experimental Oncology, Vol. 31, pp 27-32.