27
Sampel D: ditambahkan dengan 20 g tepung tulang ayam. Sampel E: ditambahkan dengan 25 g tepung tulang ayam.
Kemudian diaduk sampai larutan homogen dengan menggunakan magnetic stirrer pada kecepatan 200 rpm selama 15 menit dan didiamkan selama
beberapa hari variasi waktu fermentasi 4, 8 dan 12 hari, kemudian dianalisis kadar N, P dan K. Diba, 2012.
3.5.2.Tahap Pengujian 3.5.2.1.Penetapan Kadar N
3.5.2.1.1 Penetapan N-organik dan N-NH
4
Menimbang 0,2500 g sampel yang telah dihaluskan dan memasukkan kedalam labu kjeldahltabung digestor ditambah 0,25 g selenium mixture
dan 3 mL H
2
SO
4
pa, dikocok hingga campuran merata dan dibiarkan 2 jam. Didestruksi sampai sempurna dengan suhu bertahap 150˚C hingga akhirnya
suhu maks 350˚C dan diperoleh cairan jernih 3 jam. Setelah dingin diencerkan dengan sedikit aquades agar tidak mengkristal. Dipindah larutan
secara kuantitatif kedalam labu didih destilator volume 250 mL, ditambah aquades hingga setengah volume labu didih dan sedikit batu didih, ditambah
10 mL NaOH 40. Menyiapkan penampung destilat yaitu 10 mL asam borat 1 dalam erlenmeyer volume 100 mL yang ditambahkan dengan 3
tetes indikator conway, cairan dalam erlenmeyer sudah mencapai volume 75 mL. Destilat dititrasi dengan H
2
SO
4
0,05 N hingga titik akhir warna larutan berubah dari warna hijau menjadi merah muda. Volume titrasi ini
dinamakan dengan A mL, kemudian penetapan blanko dikerjakan sama
28
seperti diatas, dengan volume dinamakan A1 mL Eviati dan Suleman, 2009.
3.5.2.1.2. Penetapan N-NH
4
Menimbang 1,000 g sampel halus dan dimasukan kedalam labu didih destilator, ditambahkan sedikit batu didih 0,5 mL parafin cair dan 10 mL
aquades. Blangko adalah 100 mL aquades ditambah batu didih dan parafin cair. Menyiapkan penampung destilat yaitu 10 mL asam borat 1 dalam
erlenmeyer 100 mL yang ditambahkan 3 tetes indikator conway 0,100 g metil red + 0,15 g bromcresol green, dilarutkan dalam 100 ml etanol 96,
didestilasi dengan menambahkan 10 mL NaOH 40. Destilasi selesai bila volume cairan dalam erlenmeyer sudah mencapai volume 75 mL. Destilat
dititrasi dengan larutan baku HCl 0,1N hingga titik akhir warna larutan berubah dari hijau menjadi merah jambu. Volume titran ini dinamakan
sebagai B mL, dan blanko dikerjakan sama seperti diatas dengan volume dinamakan B1 mL Eviati dan Sulaeman, 2009.
3.5.2.1.3 Penetapan N-NO