PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL AKAR Jatropha gossypifoliaDARIBERBAGAI METODE REMASERASI
SKRIPSI
RACHMANUR KURNIANSYAH JAM’AN
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL AKAR Jatropha gossypifolia
DARI BERBAGAI METODE REMASERASI
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2015
ii
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Syukur Alhamdulillah senantiasa terpanjatkan kehadirat Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidyah-Nya serta telah memberikan nikmat berupa
petunjuk, kesehatan, serta kesabaran kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan
skripsi yang berjudul PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL AKAR Jatropha gossypifolia DARI BERBAGAI
METODE REMASERASI
Pada kesempatan yang berharga ini, penulis mengucapkan terima kasih
sebesar-besarnya kepada:
1.
Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya kepada umatNya, Rasulullah SAW yang telah menuntun kita menuju jalan yang lurus.
2.
Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing I dan Sovia
Aprina Basuki, S.Farm., M.Si., Apt selaku dosen pembimbing II atas saran,
bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu
untuk membimbing dan mengarahkan penulis.
3.
Drs. H. Achmad Inoni, Apt selaku penguji I dan Ahmad Shobrun Jamil,
S.Si., MP selaku penguji II atas saran dan kritik yang diberikan sehingga
penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik.
4.
Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep, M.Kep., Sp.Kom selaku Dekan Fakultas Ilmu
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
5.
Nailis Syifa’, S.Farm. Apt. M.Sc selaku Ketua Program Studi Farmasi dan
dosen wali, yang memberikan arahan akademik selama ini
6.
Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang
sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat
bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., dan Ibu
Sendi Lia Yunita, S. Farm., Apt. yang membantu jalanya ujian skripsi
sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.
7. Kepada mas Ferdi selaku laboran yang telah bersedia meluangkan waktu
untuk mendampingi dan memberikan tempat agar penulis dapat
melaksanakan penelitiannya dengan baik.
iv
8. Untuk yang terkasih dan tersayang dalam hidup ku kedua orang tua tercinta,
ayahanda Jamaluddin Goga dan ibunda Anna Harlaliyana atas kasih sayang,
doa, dan semangat yang takkan berhenti mengalir untuk ananda. Terima
kasih atas segala hal yang telah diberikan khususnya didikan dan kerja keras
nya sehingga ananda dapat menimba ilmu di Malang. Ananda tidak dapat
membalas semua jasa ayahanda dan ibunda, hanya dengan gelar sarjana ini
mungkin dapat membayar impian kalian.
9. Untuk semua saudara tersayang, mia, kiki, dan riska yang selalu
memberikan semangat dan tawa dalam hidup penulis.
10. Sahabat yang tersayang Maya, Errie, Banyu, Ageng, Wisian, Koko, Rima,
Dwi. Terima kasih atas kebersamaan dari SD, SMP, SMA, hingga bangku
kuliah. Terima kasih untuk semangat, canda, dan tawa yang kalian hadirkan
dalam hidup penulis.
11. Teman–teman seperjuangan bahan alam : Lina, Novi, Nita, Eta, Farida,
Mbak Lisna, dan Dila terimakasih atas kebersamaan, bantuan, semangat
serta kerjasamanya sehingga skripsi ini dapat terwujud.
12. Teman-teman Farmasi 2011, Farmasi B, khusunya Santi, Syifa, dan Ovi.
Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis
tidak mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak mendapat
imbalan dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran
dan kritik yang
membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini. Semoga penulisan skripsi ini
dapat berguna bagi penelitian berikutnya ataupun bagi semua pihak yang membaca
skripsi ini, amin.
Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh
Malang,13 Juni 2015
Penyusun
Rachmanur Kurniansyah Jam’an
v
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .................................................................................
Halaman
i
HALAMAN PENGESAHAN ...................................................................
ii
HALAMAN PENGUJIAN .......................................................................
iii
HALAMAN DAFTAR ISI........................................................................
iv
HALAMAN DAFTAR TABEL ...............................................................
ix
HALAMAN DAFTAR GAMBAR ...........................................................
x
HALAMAN DAFTAR LAMPIRAN .......................................................
xi
RINGKASAN ............................................................................................
xii
ABSTRAK .................................................................................................
xv
BAB I
PENDAHULUAN .......................................................................
1
1.1 Latar Belakang ........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................
4
1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................
4
1.5 Hipotesis .................................................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................
5
2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Jatropha gossypifolia.................
5
2.1.1 Klasifikasi Tanaman .....................................................
5
2.1.2 Morfologi Tanaman ......................................................
6
2.1.3 Daerah Asal dan Penyebaran Tanaman ........................
6
2.1.4 Kandungan Tanaman ....................................................
6
2.1.5 Kegunaan dan Khasiat Tanaman ..................................
7
2.2 Ekstraksi ..................................................................................
8
2.2.1 Maserasi ........................................................................
10
2.2.2 Pemilihan Solven ..........................................................
10
2.3 Radikal Bebas .........................................................................
11
2.4 Antioksidan .............................................................................
12
2.4.1 Sumber Antioksidan .....................................................
13
2.4.2 Mekanisme Kerja Antioksidan .....................................
14
vi
2.4.3 Flavonoid ......................................................................
14
2.4.4 Vitamin C ......................................................................
15
2.5 Uji Aktivitas Antioksidan .......................................................
15
2.5.1 DPPH ............................................................................
15
2.5.2 CUPRAC ......................................................................
16
2.5.3 FRAP ............................................................................
16
2.6 Pengembangan Obat Herbal ...................................................
17
2.7 Spektrofotometri .....................................................................
18
2.8 Kromatografi Lapis Tipis ........................................................
19
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ..................................................
20
3.1 Skema Kerangka Konseptual ..................................................
20
3.2 Uraian Teori Konseptual .........................................................
21
BAB IV METODE PENELITIAN ..........................................................
23
4.1 Tempat Penelitian ...................................................................
23
4.2 Bahan Penelitian .....................................................................
23
4.2.1 Bahan Tanaman ............................................................
23
4.2.2 Bahan Kimia .................................................................
23
4.3 Alat Penelitian .........................................................................
24
4.3.1 Pembuatan Serbuk Simplisia ........................................
24
4.3.2 Proses Ekstraksi ............................................................
24
4.3.3 Identifikasi Profil KLT .................................................
24
4.3.4 Uji Aktivitas Antioksidan .............................................
25
4.4 Rancangan Penelitian ..............................................................
25
4.4.1 Desain Penelitian ..........................................................
25
4.4.2 Variabel Penelitian ........................................................
25
4.5 Prosedur Kerja ........................................................................
26
4.5.1 Persiapan Ekstrak ..........................................................
26
4.5.2 Profil Kromatografi Lapis Tipis dan Reaksi Warna .....
26
4.5.3 Pembuatan Larutan Uji Aktivitas Antioksidan .............
27
4.5.4 Pengukuran Absorbansi dengan Spektrofotometri .......
30
4.8 Analisis Data ...........................................................................
31
4.8.1 Perhitungan Persen Penghambatan ...............................
31
vii
4.8.2 Perhitungan IC50 ...........................................................
32
4.8.3 Analisis Analitik ...........................................................
32
BAB V HASIL PENELITIAN ................................................................
33
5.1 Pembuatan Simplisia Serbuk ..................................................
33
5.2 Hasil Ekstrak Etanol Akar Jarak Merah
(Jatropha gossypifolia) ...........................................................
33
5.3 Profil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ..................................
33
5.3.1 Identifikasi Senyawa Alkaloid dengan KLT dan Reaksi
Warna ..............................................................................
34
5.3.2 Identifikasi Senyawa Terpenoid dengan KLT ...............
35
5.3.3 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ................
36
5.3.4 Identifikasi Senyawa Antrakinon dengan KLT ..............
37
5.3.5 Identifikasi Senyawa Polifenol dengan KLT .................
38
5.4 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Menggunakan
Radikal Bebas DPPH Secara Spektrofotometri ......................
38
5.4.1 Hasil Pengukuran Operating Time .................................
38
5.4.2 Hasil Pengukuran Absorbansi ........................................
40
5.5 Analis data ..............................................................................
43
BAB VI PEMBAHASAN.........................................................................
44
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN .................................................
49
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
50
LAMPIRAN ...............................................................................................
55
viii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
II.1 Isolasi senyawa akar Jatropha gossypifolia .........................................
6
II.2 Sumber antioksidan ..............................................................................
13
V.1 Hasil Pengukuran Derajat Halus Serbuk Akar Jarak Merah ................
33
V.2 Hasil Ekstraksi Akar Jarak Merah ........................................................
33
V.3 Hasil Operating Time Vitamin C .........................................................
38
V.4 Hasil Operating Time Ekstrak Kinetik .................................................
39
V.5 Hasil Operating Time Ekstrak Non Kinetik .........................................
39
V.6 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Vitamin C ..........................
40
V.7 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kinetik ...................
41
V.8 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Non Kinetik ...........
43
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Akar Jatropha gossypifolia(A) ............................................................
5
Tanaman Jatropha gossypifolia(B) .....................................................
5
2.2 Rumus Kimia Flavonoid .....................................................................
15
2.3 Reaksi DPPH.......................................................................................
16
3.1 Skema Konseptual ...............................................................................
20
5.1 Hasil Profil KLT Senyawa Alkaloid ...................................................
34
5.2 Hasil Profil KLT Senyawa Alkaloid ...................................................
34
5.3 Hasil Reaksi Warna Senyawa Alkaloid ..............................................
34
5.4 Hasil Profil KLT Senyawa Terpenoid.................................................
35
5.5 Hasil Profil KLT Senyawa Terpenoid.................................................
35
5.6 Hasil Profil KLT Senyawa Flavonoid .................................................
36
5.7 Hasil Profil KLT Senyawa Flavonoid .................................................
36
5.8 Hasil Profil KLT Senyawa Antrakinon ...............................................
37
5.9 Hasil Profil KLT Senyawa Antrakinon ...............................................
37
5.10 Hasil Profil KLT Senyawa Polifenol ..................................................
38
5.11 Hasil Profil KLT Senyawa Polifenol ..................................................
38
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Daftar Riwayat Hidup ..........................................................................
Surat Pernyataan ...................................................................................
Surat Determinasi Tanaman ..................................................................
Perhitungan ...........................................................................................
Bagan Alir Kerja ...................................................................................
Penentuan Operating Time....................................................................
Pengukuran Absorbansi Ekstrak Akar Jarak Merah
Remaserasi Kinetik ...............................................................................
8. Pengukuran Absorbansi Ekstrak Akar Jarak Merah
Remaserasi Non Kinetik .......................................................................
9. Pengukuran Absorbansi Vitamin C.......................................................
10. Grafik Pengukuran Antioksidan............................................................
11. Hasil Analisis Analitik Dengan SPSS ...................................................
12. Alat dan Bahan ......................................................................................
xi
55
56
57
58
67
74
75
81
87
92
94
95
RINGKASAN
Radikal bebas adalah senyawa yang mengandung satu atau lebih elektron
tidak berpasangan pada orbital luarnya, yang menyebabkan senyawa tersebut
reaktif menyerang dan mengikat elektron molekul yang berada di sekitarnya
sehingga dapat menginisiasi timbulnya berbagai penyakit seperti kanker,
aterosklerosis, dan diabetes melitus. Antioksidan merupakan senyawa yang
meredam aktivitas radikal bebas dengan cara menjadi sasaran pengganti oksidasi
oleh radikal bebas. Salah satu tanaman yang memiliki aktivitas antioksidan adalah
akar jarak merah (Jatropha gossypifolia) yang memiliki senyawa metabolit
sekunder antara lain alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakinon.
Pada penelitian ini digunakan akar jarak merah yang kemudian di ekstraksi
dengan remaserasi kinetik dan non kinetik kemudian dilakukan uji aktivitas
antioksidan dengan menggunakan radikal DPPH. Nilai IC50 yang didapatkan dari
kedua ekstrak kemudian dibandingkan untuk mendapatkan metode ekstraksi yang
optimal.
Serbuk akar jarak merah ditimbang masing-masing 100 g untuk remaserasi
kinetik dan non kinetik. Pelarut etanol 96% yang digunakan adalah 3000 ml untuk
tiga kali ekstraksi. Remaserasi kinetik dilakukan pengadukan konstan selama 4 jam
sedangkan remaserasi non kinetik serbuk direndam dalam pelarut selama 24 jam
lalu di saring, hal ini dilakukan sebanyak tiga kali untuk masing masing metode
ekstraksi. Filtrat yang didapatkan di uapkan dengan rotary evaporator. Profil KLT
dilakukan dengan dua fase gerak yaitu N-Heksana : Etil Asetat (8:2) dan N-Heksana
:Kloroform: Etil Asetat (5:3:3) yang kemudian diberi penampak noda untuk
mengetahui kandungan metabolit sekunder.
Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan radikal DPPH. Tahap awal
yang dilakukan adalah pengukuran panjang gelombang maksimal dari larutan
pereaksi. Kemudian diukur operating time sampel dan kontrol positif. Hasil
operating time digunakan untuk waktu inkubasi dari seri konsentrasi baku kerja
sampel dan kontrol positif. Sampel yang digunakan ekstrak akar jarak merah
dengan remaserasi kinetik dan non kinetik pada konsentrasi 12,5; 25,0; 50,0; 75,0;
100,0; 150,0; 200,0 µg/ml sedangkan konsentrasi baku kerja kontrol positif adalah
0,2; 0,4; 1,0; 1,6; 2,0; 3,0 µg/ml. Sampel maupun kontrol positif kemudian
ditambahkan 1,0 ml DPPH 0,4 mM lalu ditambahkan metanol ad 10,0 ml dan di
inkubasi sesuai operating time. Hasil absorbansi yang didapatkan kemudian di
analisa untuk mendapatkan nilai persen penghambatan Konsentrasi sampel/kontrol
positif dan persen penghambatan kemudian dilakukan regresi linier untuk
mendapatkan persamaan regresi sehingga didapatkan nilai IC50. Nilai IC50 yang
didapatkan dari ekstrak akar jarak merah kinetik dan non kinetik kemudian
dilakukan uji T independen dengan SPSS untuk melihat perbedaan aktivitas
antioksidan pada kedua ekstrak.
Hasil ekstraksi akar jarak merah remaserasi kinetik mendapat rendemen
sebesar 9,03% dan remaserasi non kinetik sebesar 9,45 %. Hasil identifikasi profil
KLT yang dilakukan menunjukkan ekstrak akar jarak merah mengandung senyawa
metabolit sekunder seperti alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakinon.
xii
Hasil pengukuran operating time yang di dapatkan untuk ektrak akar jarak
merah remaserasi kinetik selama 70 menit, ekstrak akar jarak merah remaserasi non
kinetik selama 55 menit dan vitamin c sebagai kontrol positif selama 20 menit. Nilai
IC50 ekstrak akar jarak merah remaserasi kinetik sebesar 98,63 µg/ml , remaserasi
non kinetik sebesar 83,28 µg/ml dan vitamin c sebesar 1,47 µg/ml dari hasil analisis
statistika menggunakan SPSS didapatkan nilai P sebesar 0,071>0,05 sehingga dapat
disimpulkan tidak ada perbedaan aktivitas antioksidan ekstrak akar jarak merah
remaserasi kinetik dengan non kinetik secara statistik.
xiii
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, G. 2007. Teknologi bahan alam.Bandung: ITB Press.
Aliyu, A.B., Ibrahim, M.A., Ibrahim, H., Musa, A.M., Lawal, A.Y., Oshanimi, J.A.,
Usman, M., Abdulkadir, I.E., Oyewale, A.O., Amupitan, J.O., 2012. Free
radical scavenging and total antioxidant capacity of methanol extract of
Ethulia conyzoides growing in Nigeria. Romanian Biotechnological
Letters, Vol.17 No.4, P. 7460.
Apak, R., Guclu, K., Demirata, B., Ozyurek, M., Celik, S.E., Bektasoglu, B.,
Berker, K.I., Ozyurt, D., 2007. Comparative Evaluation of Various Total
Antioxidant Capacity Assays Applied to Phenolic Compounds with the
CUPRAC Assay. Molecules, Vol.12, pp.1511-1512.
Ardhie, A.M., 2011. Radikal Bebas dan Peran Antioksidan dalam Mencegah
Penuaan. Medicinus, Vol.24 No.1, pp.4-7.
Benzie, I.F.F., Strain, J.J., 1996. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as
a Measure of ‘‘Antioxidant Power’’: The FRAP Assay. Analytical
biochemistry, Vol. 239 No. 292, pp.70-71.
Budiyati, E., Tridayana, A., 2013. Pengaruh kecepatan putaran pengaduk
terhadap konsentrasi polifenol, kca, dan de pada ekstraksi polifenol
dari kulit apel malang, Simposium nasional RAPI XII,
http://publikasiilmiah.ums.ac.id/handle/123456789/4163, Diakses tanggal 1
februari 2015.
Campos-vega, R., Oomah, B.D., 2013. Chemistry and classification of
phytochemicals. In: B.K Tiwari, N.P Brunton, and C.S Brennan (Eds.).
Handbook of Plant Food Phytochemicals: Sources, Stability and
Extraction, Manchester: Wiley-Blackwell., pp.8-22.
Devasayagam, T.P.A., Tilak, J.C., Boloor, K.K., Sane, K.S., Ghaskadbi, S.S., Lele,
R.D., 2004. Free Radicals and Antioxidants in Human Health: Current
Status and Future Prospects. Journal of the Assocoation of Physicians of
India, Vol.52, P.799.
Dewi, H.K., Silsia, D., Susanti, L., Markom, M., Mendra, H. (2010) Ekstraksi
Teripang Pasir (Holothuria Scabra) Sebagai Sumber Testosteron Pada
Berbagai Kecepatan dan Lama Pengadukan, Prosiding Seminar Nasional
Teknik Kimia “Kejuangan”.
Dewoto, H.R., 2007. Pengembangan Obat Tradisional Indonesia Menjadi
Fitofarmaka. Majalah Kedokteran Indonesia, Vol.57 No.7, pp.205-210.
DITJEN BPOM, 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Jakarta:DEPKES.
Fauzana, D.L., 2010. Perbandingan metode maserasi, remaserasi, perkolasi dan
reperkolasi terhadap rendemen ekstrak temulawak (curcuma xanthorrhiza
roxb.). Bandung: Skripsi Program Sarjana.
Felix-silva, J., Giodani, R.B., Silva-Jr, A.A., Zucolotto, S.M., Fernandes-Pedrosa,
M.F., 2014. Jatropha gossypiifolia L. (Euphorbiaceae): A Review of
Traditional Uses, Phytochemistry, Pharmacology, and Toxicology of This
Medicinal Plant. Evidence-Based Complementary and Alternative
Medicine, Vol. 2014, pp.1-32.
xiv
Gibbons, S., 2005. An Introduction to Planar Chromatography. In: S.D. Sarker, Z.
Latif, A.I. Gray (Eds.). Natural Product Isolation, Ed. 2nd, New Jersey:
Humana Press., P.78.
Hamid, A.A., Aiyelaagbe, O.O., Usman, L.A., Ameen, O.M., Lawal, A., 2010.
Antioxidants: Its medicinal and pharmacological applications. African
Journal of Pure and Applied Chemistry, Vol.4 No.8, pp. 142-150.
Handa, S.S., 2008. An Overview of Extraction Techniques for Medicinal and
Aromatic Plants. In: S.S. Handa, S.P.S. Khanuja, G. Longo, and D.D.
Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic
Plants, Trieste : International centre for science and high technology., pp.
21-22.
Harmita, 2004. Petunjuk Validasi Metode dan Perhitungannya. Majalah Ilmu
Kefarmasian, Vol.1 No.3, P.122.
Jain, S., Choudhary, G.P., Jaina, D.K., 2012. In vitro free radical scavenging
activity of Jatropha gossgypifolia Linn. containing phenolic compounds.
Journal of Medicinal Plants Research, Vol.7 No.20, pp. 1424-1427.
Kumar, S., Pandey, A.K., 2013. Chemistry and Biological Activities of Flavonoids:
An Overview. The ScientificWorld Journal, Vol.2013, pp.1-11.
Leong, L.P., Shui, G., 2002. An Investigation of Antioxidant Capacity of Fruits in
Singapore Markets. Food Chemistry, Vol.76, pp.69–75
Lisdawati, V., Kardono, Broto.S., 2006.Aktivitas antioksidan dari berbagai fraksi
ekstrak daging buah dan kulit biji mahkota dewa (Phaleria
macrocarpa).Media Litbang Kesehatan, Vol. XVI No.4, pp. 1-2.
Marks, D.B., Marks, A.D., Smith, C.M. 2000. Biokimia kedokteran dasar:
sebuah pendekatan klinis. Jakarta:EGC.
Molyneux, P., 2004. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci.
Technol, Vol.26 No.2, pp.216-218.
Mukhriani, 2014. Ekstraksi, pemisahan senyawa, dan identifikasi senyawa aktif.
Jurnal Kesehatan, Vol.VII No.2, pp.363-364.
Nwokocha., Blessing, A., Agbagwa, I.O., Okoli, B.E., 2011. Comparative
phytochemical screening of Jatropha gossypifolia L. Spesies in the niger
delta. Research Journal of Phytochemistry, P.5.
Padayatty, S.J., Katz, A., Wang, Y., Eck, P., Kwon, O., Lee, J.H., Chen, S., Corpe,
C., Dutta, A., Dutta, S.K., Levine, M.,2003. Vitamin C as an Antioxidant:
Evaluation of Its Role in Disease Prevention. Journal of the American
College of Nutrition, Vol.22 No.1, pp.19-20.
Pandey, A., Tripathi, S., 2014. Concept of standardization, extraction and pre
phytochemical screening strategies for herbal drug. Journal of
Pharmacognosy and Phytochemistry, Vol.2 No.5, pp.117.
Patras, A., Yuan, Y.V., Costa, H.S., Sanches-silva, A., 2013. Antioxidant activity
of phytochemicals. In: B.K Tiwari, N.P Brunton, and C.S Brennan (Eds.).
Handbook of Plant Food Phytochemicals: Sources, Stability and
Extraction, Manchester: Wiley-Blackwell., P.456.
xv
Percival, M., 1998. Antioxidants. Clinical Nutrition Insights, Vol.31 No.1, pp.14.
Pietta, P.G., 2000. Flavonoids as Antioxidant. Journal of Natural Product, Vol.
63 No. 7, pp 1035-37
Randall, A., Chambel, S., Vogler, W., Bebawi, F., Madigan, B. 2009. Bellyache
bush (Jatropha gossypiifolia) management manual: control options and
management case studies from across Australia. Australia: Autralia
goverment.
Rohmatussolihat,
2009.
Antioksidan
,Penyelamat
Sel-Sel
Tubuh
Manusia.Biotrend, Vol.4 No.1, pp. 5-8
Sabandar, C.W., Ahmat, N., Jaafar, F.M., Sahidin, I., 2012. Medicinal property,
phytochemistry and pharmacology of several Jatropha species
(Euphorbiaceae): A review. Phytochemistry, Vol 85, pp.7-29.
Sandhiutami, N.M.D., Rahayu, L., 2014. Uji Toksisitas Akut, Aktivitas
Antioksidan In Vitro dan efek Rebusan Bunga Kamboja Merah (Plumeria
rubra L.) terhadap Kadar Malondialdehid. Jurnal Ilmu Kefarmasian
Indonesia, Vol.12 No.1, pp. 43-49.
Sharma, V., Kumawat, T.K., Seth, R., Sharma, A., 2013. Bioefficacy of Crude
Extracts from Jatropha gossypifolia against Human Pathogens.
International Journal of Biotechnology and Bioengineering Research,
Vol.4 No.4, pp. 403-405.
Singh, B.N., Shankar, S., Srivastava, R.K., 2011. Green tea catechin,
epigallocatechin-3-gallate (EGCG): mechanisms, perspectives and clinical
applications. Biochem Pharmacol, Vol.82 No.12, P.1
Singh, H., Sharma, S.K., 2013. Antidiabetic activity of Jatropha gossypifolia linn
root extracts in alloxan induced diabetic mice. International research
journal of pharmacy, Vol 4 No.5, P. 212.
Singh, J., 2008. Maceration, Percolation and Infusion Techniques for the Extraction
of Medicinal and Aromatic Plants. In: S.S. Handa, S.P.S. Khanuja, G.
Longo, and D.D. Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal
and Aromatic Plants, Trieste : International centre for science and high
technology., pp. 67-69.
Supriyadi, D.,2008. Optimalisasi Ekstraksi Kurkuminoid Temulawak (Curcuma
Xanthorrhiza Roxb.). Bogor:Skripsi Program Sarjana
Tiong, S.H., Looi, C.Y., Hazni, H., Arya, A., Paydar, M., Wong, W.F., Cheah, S.C.,
Mustafa, M.R., Awang, K., 2013. Antidiabetic and Antioxidant Properties
of Alkaloids from Catharanthus roseus (L.) G. Don. Molecules, Vol.18,
P.9777.
Tripathi, B., Bhatia, R., Pandey, A., Gaur, J., Chawala, G., Walia, S., Choi, E.H.,
Attri, P., 2014. Potential Antioxidant Anthraquinones Isolated from Rheum
emodi Showing Nematicidal Activity against Meloidogyne incognita.
Journal of Chemistry, pp. 1-9.
Triyatti, E., 1985. spektrofotometer ultra-violet dan sinar tampak serta aplikasinya
dalam oseanologi.Oseana, Vol.X No.1, pp.39-40.
Young, I.S., and Woodside, J.W. 2001. Antioxidant in health and disease. J Clin
Pathol, Vol. 54, pp. 176-186.
xvi
Yuhernita, Juniati., 2011. Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dari Ekstrak
Metanol Daun Surian yang Berpotensi Sebagai Antioksidan. Makara, Sains,
Vol. 15 No.1, pp 48-51
Valko,M., Rhodes, C.J., Moncol, J., Izakovic, M., Mazur, M., 2006. Free radicals,
metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer. ChemicoBiological Interaction., Vol. 160, pp.8-14.
Vasisht, K. 2008. Quality Control of Medicinal and Aromatic Plants and their
Extracted Products by HPLC and High Performance Thin Layer
Chromatography. In: S.S. Handa, S.P.S. Khanuja, G. Longo, and D.D.
Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic
Plants, Trieste : International centre for science and high technology., P.
247.
Winarsi H. 2007. Antioksidan Alami dan radikal Bebas. Yogyakarta :Kanisius.
xvii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang
Pola hidup, lingkungan, dan makanan merupakan hal yang sering diabaikan
manusia. Pola hidup yang buruk, paparan polutan, asap rokok, limbah pabrik,
serta makanan yang tidak sehat dapat memicu pembentukan senyawa radikal
bebas yang menyebabkan berbagai penyakit. Sisa metabolisme tubuh yang tidak
sempurna juga menyebabkan terbentuknya senyawa radikal bebas.
Radikal bebas didefinisikan sebagai setiap molekul yang keberadaannya
bebas berisi elektron yang tidak berpasangan, dalam orbital atom nya bersifat
reaktif dan dapat memberi atau menarik elektron dari molekul lain sehingga
berperilaku sebagai oksidan atau reduktan. Senyawa radikal bebas dapat
menyebabkan aterosklerosis, inflamasi, diabetes, kanker, dan berperan dalam
proses penuaan (Young & Woodside, 2001).
Radikal bebas yang merusak DNA dan RNA pada tubuh akan berkembang
menjadi sel kanker. DNA yang rusak akan mengalami proses perbaikan, pada
proses ini DNA kemungkinan akan mengalami mutasi sehingga berkembang
menjadi karsinogenesis Aterosklerosis yang menjadi penyebab berbagai penyakit
kardiovaskular, diabetes, dan kanker merupakan penyakit tidak menular (PTM)
utama menurut WHO. Prevalensi kanker di indonesia sebesar 1,4 per mil dimana
berdasarkan tempat tinggal masyarakat perkotaan memiliki proporsi lebih besar
yaitu 1,7 per mil di banding daerah pedesaan 1,1 per mil. Prevalensi diabetes
melitus berdasarkan diagnosa dokter atau gejala (D/G) sebesar 2,1%, dimana
pravelensi yang lebih tinggi didapatkan pada masyarakat yang tinggal di daerah
perkotaan sebesar 2,5 %. Penyakit kardiovaskular antara lain penyakit jantung
koroner dan stroke berdasarkan diagnosa dokter atau gejala memiliki prevalensi
sebesar 12,1 per mil (DEPKES, 2013; Valko et al, 2004).
Data prevalensi di atas semakin meningkat setiap tahun. Penanganan berupa
langkah preventif menjadi pilihan utama untuk mencegah timbulnya penyakit
1
2
penyakit di atas yakni dengan mengatasi senyawa radikal bebas dengan senyawa
antioksidan.
Senyawa antioksidan adalah senyawa pemberi elektron (electron donors).
Secara biologis, pengertian antioksidan adalah senyawa yang mampu menangkal
atau meredam dampak oksidan dalam tubuh. Antioksidan bekerja dengan
mendonorkan salah satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan
sehingga aktivitas senyawa tersebut dapat dihambat (Winarsi,2007).
Senyawa antioksidan dapat berasal dari alam maupun sintetik. Pada
dasarnya senyawa sintetik berasal dari alam, oleh karena itu penelitian terhadap
penemuan senyawa antioksidan pada tanaman banyak dilakukan. Metabolit
sekunder yang di kenal sebagai senyawa antioksidan antara lain fenol, alkaloid,
saponin, flavonoid, dan antra-kuinon. Salah satu tanaman yang terbukti berkhasiat
sebagai antioksidan adalah daun teh hijau yang mengandung senyawa
epigallocatechin gallate (ECGC) yang merupakan senyawa golongan flavonoid
dan buah tomat yang mengandung senyawa licopene yang termasuk golongan
senyawa terpenoid (Lisdawati, 2006; Singh et al, 2011).
Kebutuhan sumber antioksidan dari alam sangat penting disebabkan
prevalensi penyakit yang disebabkan radikal bebas semakin meningkat setiap
tahunnya. Pemerintah, industri, serta akademisi memiliki peran penting dalam
pemanfaatan sumber daya alam untuk penemuan tanaman yang memiliki aktivitas
antioksidan. Tanaman jarak merah khususnya daun memiliki aktivitas sebagai
antioksidan, tetapi akar jarak merah belum di teliti akan aktivitas antioksidannya,
berdasarkan pendekatan secara taksonomi kemungkinan bagian tanaman lain juga
mempunyai aktivitas antioksidan khususnya akar (Jain et al, 2013).
Jarak merah (Jatropha gossypifolia) merupakan tanaman yang sering
digunakan sebagai obat tradisional yaitu penghilang nyeri, pereda demam serta
obat disentri. Jarak merah (Jatropha gossypifolia)
mengandung golongan
senyawa alkaloid, tannin, flavonoid, saponin, dan fenol. Pada penelitian
Nwokocha pada tahun 2011 telah di identifikasi golongan senyawa metabolit
sekunder terutama pada akar jarak merah yaitu alkaloid (1,60%), tanin (2,73%),
flavonoid (1,75%), saponin (2,83%), dan fenol (0,24%). Golongan senyawa
terpen juga berhasil di identifikasi dan di isolasi dari akar jarak merah yaitu
3
senyawa golongan diterpenoid jatrophane (Sabandar et al, 2013; Nwokocha et al,
2011).
Penggunaan tanaman menjadi obat tradisional bukan merupakan hal baru di
Indonesia. Indonesia merupakan negara majemuk dengan banyak suku, setiap
daerah di Indonesia memiliki tanaman khas yang digunakan sebagai obat
tradisional dalam berbagai macam bentuk. Pengembangan obat tradisional di
Indonesia semakin baik dengan adanya pembuktian secara klinis khasiat dari obat
tradisional. Obat tradisional di indonesia di bedakan menjadi jamu, obat herbal
terstandar, dan fitofarmaka. Pengembangan tanaman menjadi obat perlu dilakukan
standardisasi agar bahan baku yang akan dijadikan obat tradisonal terjamin mutu
nya. Standardisasi dilakukan mulai dari simplisia dan ekstrak. Standardisasi juga
menjamin mutu produk obat herbal yang dihasilkan. Mutu produk dipengaruhi
beberapa faktor salah satu nya metode ekstraksi yang digunakan. Metode
ekstraksi sangat mempengaruhi aktivitas biologis dari suatu ekstrak, jika metode
yang digunakan tidak tepat maka aktivitas yang diinginkan tidak memberikan
hasil yang maksimal. Metode ekstraksi mempengaruhi jumlah senyawa metabolit
sekunder yang dapat ditarik dari tanaman. Metode yang digunakan pada penelitian
ini adalah remaserasi kinetik dan remaserasi non kinetik. Remaserasi kinetik
merupakan modifikasi dari metode maserasi konvensional dimana dilakukan
pengadukan terus menerus sehingga akan didapatkan rendemen ekstrak yang lebih
banyak dan dimungkinkan metabolit sekunder yang terekstraksi dari tanaman juga
lebih banyak sehingga mutu produk herbal yang didapatkan lebih baik (DITJEN
BPOM, 2000; Fauzana, 2010; Agoes, 2007).
Oleh karena itu peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang ekstrak
etanol akar jarak merah yang diekstraksi menggunakan metode remaserasi kinetik
dan remaserasi non kinetik serta dibandingkan aktivitas antioksidan dari kedua
metode tersebut.
Banyak metode yang dapat digunakan untuk mengukur aktivitas
antioksidan.
Salah
satu
metode
yang
sering
digunakan
adalah
diphenylpicrylhydrazyl (DPPH). DPPH adalah senyawa radikal bebas yang
stabil,senyawa yang berkhasiat sebagai antioksidan akan mereduksi DPPH dengan
4
memberikan satu atom hidrogen, sehingga terbentuk senyawa baru yang bersifat
tidak radikal.
1.2
Rumusan Masalah
1. Bagaimana kemampuan peredaman ekstrak etanol 96% akar jarak merah
yang diekstraksi dengan metode remaserasi kinetik terhadap radikal
bebas DPPH ?
2. Bagaimana kemampuan peredaman ekstrak etanol 96% akar jarak merah
yang diekstraksi dengan metode remaserasi non kinetik terhadap radikal
bebas DPPH ?
3. Apakah ada perbedaan kemampuan peredaman ekstrak etanol 96% akar
jarak merah yang diesktraksi dengan metode remaserasi kinetik dan
remaserasi non kinetik terhadap radikal bebas DPPH ?
1.3
Tujuan Penelitian
1. Mengetahui nilai IC50 ekstrak akar jarak merah (Jatropha gossypifolia)
dengan metode remaserasi kinetik.
2. Mengetahui nilai IC50 ekstrak akar jarak merah (Jatropha gossypifolia)
dengan metode remaserasi non kinetik.
3. Mengetahui metode ekstraksi yang optimal dengan membandingkan
aktivitas antioksidan dari kedua metode ekstraksi di atas.
1.4
Manfaat Penelitian
Manfaat bagi masyarakat :
Di harapkan memberikan informasi ilmiah tentang potensi ekstrak akar
jarak merah sebagai antioksidan alami yang dapat dipakai luas oleh masyarakat.
Manfaat bagi lembaga yang berwenang :
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai
metode ekstraksi yang optimal yang memberikan aktivitas antioksidan lebih besar
dari kedua metode ekstraksi dari akar jarak merah.
1.5
Hipotesis
Ekstrak etanol 96% akar jarak merah (Jatropha gossypifolia) dengan
metode remaserasi kinetik dapat memberikan nilai IC50 lebih kecil daripada
dengan metode remaserasi non kinetik dengan metode diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH)
RACHMANUR KURNIANSYAH JAM’AN
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL AKAR Jatropha gossypifolia
DARI BERBAGAI METODE REMASERASI
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2015
ii
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Syukur Alhamdulillah senantiasa terpanjatkan kehadirat Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidyah-Nya serta telah memberikan nikmat berupa
petunjuk, kesehatan, serta kesabaran kepada penulis sehingga dapat menyelesaikan
skripsi yang berjudul PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN
EKSTRAK ETANOL AKAR Jatropha gossypifolia DARI BERBAGAI
METODE REMASERASI
Pada kesempatan yang berharga ini, penulis mengucapkan terima kasih
sebesar-besarnya kepada:
1.
Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya kepada umatNya, Rasulullah SAW yang telah menuntun kita menuju jalan yang lurus.
2.
Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing I dan Sovia
Aprina Basuki, S.Farm., M.Si., Apt selaku dosen pembimbing II atas saran,
bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu
untuk membimbing dan mengarahkan penulis.
3.
Drs. H. Achmad Inoni, Apt selaku penguji I dan Ahmad Shobrun Jamil,
S.Si., MP selaku penguji II atas saran dan kritik yang diberikan sehingga
penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik.
4.
Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep, M.Kep., Sp.Kom selaku Dekan Fakultas Ilmu
Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
5.
Nailis Syifa’, S.Farm. Apt. M.Sc selaku Ketua Program Studi Farmasi dan
dosen wali, yang memberikan arahan akademik selama ini
6.
Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang
sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat
bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., dan Ibu
Sendi Lia Yunita, S. Farm., Apt. yang membantu jalanya ujian skripsi
sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.
7. Kepada mas Ferdi selaku laboran yang telah bersedia meluangkan waktu
untuk mendampingi dan memberikan tempat agar penulis dapat
melaksanakan penelitiannya dengan baik.
iv
8. Untuk yang terkasih dan tersayang dalam hidup ku kedua orang tua tercinta,
ayahanda Jamaluddin Goga dan ibunda Anna Harlaliyana atas kasih sayang,
doa, dan semangat yang takkan berhenti mengalir untuk ananda. Terima
kasih atas segala hal yang telah diberikan khususnya didikan dan kerja keras
nya sehingga ananda dapat menimba ilmu di Malang. Ananda tidak dapat
membalas semua jasa ayahanda dan ibunda, hanya dengan gelar sarjana ini
mungkin dapat membayar impian kalian.
9. Untuk semua saudara tersayang, mia, kiki, dan riska yang selalu
memberikan semangat dan tawa dalam hidup penulis.
10. Sahabat yang tersayang Maya, Errie, Banyu, Ageng, Wisian, Koko, Rima,
Dwi. Terima kasih atas kebersamaan dari SD, SMP, SMA, hingga bangku
kuliah. Terima kasih untuk semangat, canda, dan tawa yang kalian hadirkan
dalam hidup penulis.
11. Teman–teman seperjuangan bahan alam : Lina, Novi, Nita, Eta, Farida,
Mbak Lisna, dan Dila terimakasih atas kebersamaan, bantuan, semangat
serta kerjasamanya sehingga skripsi ini dapat terwujud.
12. Teman-teman Farmasi 2011, Farmasi B, khusunya Santi, Syifa, dan Ovi.
Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis
tidak mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak mendapat
imbalan dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran
dan kritik yang
membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini. Semoga penulisan skripsi ini
dapat berguna bagi penelitian berikutnya ataupun bagi semua pihak yang membaca
skripsi ini, amin.
Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh
Malang,13 Juni 2015
Penyusun
Rachmanur Kurniansyah Jam’an
v
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .................................................................................
Halaman
i
HALAMAN PENGESAHAN ...................................................................
ii
HALAMAN PENGUJIAN .......................................................................
iii
HALAMAN DAFTAR ISI........................................................................
iv
HALAMAN DAFTAR TABEL ...............................................................
ix
HALAMAN DAFTAR GAMBAR ...........................................................
x
HALAMAN DAFTAR LAMPIRAN .......................................................
xi
RINGKASAN ............................................................................................
xii
ABSTRAK .................................................................................................
xv
BAB I
PENDAHULUAN .......................................................................
1
1.1 Latar Belakang ........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................
4
1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................
4
1.5 Hipotesis .................................................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................
5
2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Jatropha gossypifolia.................
5
2.1.1 Klasifikasi Tanaman .....................................................
5
2.1.2 Morfologi Tanaman ......................................................
6
2.1.3 Daerah Asal dan Penyebaran Tanaman ........................
6
2.1.4 Kandungan Tanaman ....................................................
6
2.1.5 Kegunaan dan Khasiat Tanaman ..................................
7
2.2 Ekstraksi ..................................................................................
8
2.2.1 Maserasi ........................................................................
10
2.2.2 Pemilihan Solven ..........................................................
10
2.3 Radikal Bebas .........................................................................
11
2.4 Antioksidan .............................................................................
12
2.4.1 Sumber Antioksidan .....................................................
13
2.4.2 Mekanisme Kerja Antioksidan .....................................
14
vi
2.4.3 Flavonoid ......................................................................
14
2.4.4 Vitamin C ......................................................................
15
2.5 Uji Aktivitas Antioksidan .......................................................
15
2.5.1 DPPH ............................................................................
15
2.5.2 CUPRAC ......................................................................
16
2.5.3 FRAP ............................................................................
16
2.6 Pengembangan Obat Herbal ...................................................
17
2.7 Spektrofotometri .....................................................................
18
2.8 Kromatografi Lapis Tipis ........................................................
19
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ..................................................
20
3.1 Skema Kerangka Konseptual ..................................................
20
3.2 Uraian Teori Konseptual .........................................................
21
BAB IV METODE PENELITIAN ..........................................................
23
4.1 Tempat Penelitian ...................................................................
23
4.2 Bahan Penelitian .....................................................................
23
4.2.1 Bahan Tanaman ............................................................
23
4.2.2 Bahan Kimia .................................................................
23
4.3 Alat Penelitian .........................................................................
24
4.3.1 Pembuatan Serbuk Simplisia ........................................
24
4.3.2 Proses Ekstraksi ............................................................
24
4.3.3 Identifikasi Profil KLT .................................................
24
4.3.4 Uji Aktivitas Antioksidan .............................................
25
4.4 Rancangan Penelitian ..............................................................
25
4.4.1 Desain Penelitian ..........................................................
25
4.4.2 Variabel Penelitian ........................................................
25
4.5 Prosedur Kerja ........................................................................
26
4.5.1 Persiapan Ekstrak ..........................................................
26
4.5.2 Profil Kromatografi Lapis Tipis dan Reaksi Warna .....
26
4.5.3 Pembuatan Larutan Uji Aktivitas Antioksidan .............
27
4.5.4 Pengukuran Absorbansi dengan Spektrofotometri .......
30
4.8 Analisis Data ...........................................................................
31
4.8.1 Perhitungan Persen Penghambatan ...............................
31
vii
4.8.2 Perhitungan IC50 ...........................................................
32
4.8.3 Analisis Analitik ...........................................................
32
BAB V HASIL PENELITIAN ................................................................
33
5.1 Pembuatan Simplisia Serbuk ..................................................
33
5.2 Hasil Ekstrak Etanol Akar Jarak Merah
(Jatropha gossypifolia) ...........................................................
33
5.3 Profil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ..................................
33
5.3.1 Identifikasi Senyawa Alkaloid dengan KLT dan Reaksi
Warna ..............................................................................
34
5.3.2 Identifikasi Senyawa Terpenoid dengan KLT ...............
35
5.3.3 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ................
36
5.3.4 Identifikasi Senyawa Antrakinon dengan KLT ..............
37
5.3.5 Identifikasi Senyawa Polifenol dengan KLT .................
38
5.4 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Menggunakan
Radikal Bebas DPPH Secara Spektrofotometri ......................
38
5.4.1 Hasil Pengukuran Operating Time .................................
38
5.4.2 Hasil Pengukuran Absorbansi ........................................
40
5.5 Analis data ..............................................................................
43
BAB VI PEMBAHASAN.........................................................................
44
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN .................................................
49
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................
50
LAMPIRAN ...............................................................................................
55
viii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
II.1 Isolasi senyawa akar Jatropha gossypifolia .........................................
6
II.2 Sumber antioksidan ..............................................................................
13
V.1 Hasil Pengukuran Derajat Halus Serbuk Akar Jarak Merah ................
33
V.2 Hasil Ekstraksi Akar Jarak Merah ........................................................
33
V.3 Hasil Operating Time Vitamin C .........................................................
38
V.4 Hasil Operating Time Ekstrak Kinetik .................................................
39
V.5 Hasil Operating Time Ekstrak Non Kinetik .........................................
39
V.6 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Vitamin C ..........................
40
V.7 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kinetik ...................
41
V.8 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Non Kinetik ...........
43
ix
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Akar Jatropha gossypifolia(A) ............................................................
5
Tanaman Jatropha gossypifolia(B) .....................................................
5
2.2 Rumus Kimia Flavonoid .....................................................................
15
2.3 Reaksi DPPH.......................................................................................
16
3.1 Skema Konseptual ...............................................................................
20
5.1 Hasil Profil KLT Senyawa Alkaloid ...................................................
34
5.2 Hasil Profil KLT Senyawa Alkaloid ...................................................
34
5.3 Hasil Reaksi Warna Senyawa Alkaloid ..............................................
34
5.4 Hasil Profil KLT Senyawa Terpenoid.................................................
35
5.5 Hasil Profil KLT Senyawa Terpenoid.................................................
35
5.6 Hasil Profil KLT Senyawa Flavonoid .................................................
36
5.7 Hasil Profil KLT Senyawa Flavonoid .................................................
36
5.8 Hasil Profil KLT Senyawa Antrakinon ...............................................
37
5.9 Hasil Profil KLT Senyawa Antrakinon ...............................................
37
5.10 Hasil Profil KLT Senyawa Polifenol ..................................................
38
5.11 Hasil Profil KLT Senyawa Polifenol ..................................................
38
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Daftar Riwayat Hidup ..........................................................................
Surat Pernyataan ...................................................................................
Surat Determinasi Tanaman ..................................................................
Perhitungan ...........................................................................................
Bagan Alir Kerja ...................................................................................
Penentuan Operating Time....................................................................
Pengukuran Absorbansi Ekstrak Akar Jarak Merah
Remaserasi Kinetik ...............................................................................
8. Pengukuran Absorbansi Ekstrak Akar Jarak Merah
Remaserasi Non Kinetik .......................................................................
9. Pengukuran Absorbansi Vitamin C.......................................................
10. Grafik Pengukuran Antioksidan............................................................
11. Hasil Analisis Analitik Dengan SPSS ...................................................
12. Alat dan Bahan ......................................................................................
xi
55
56
57
58
67
74
75
81
87
92
94
95
RINGKASAN
Radikal bebas adalah senyawa yang mengandung satu atau lebih elektron
tidak berpasangan pada orbital luarnya, yang menyebabkan senyawa tersebut
reaktif menyerang dan mengikat elektron molekul yang berada di sekitarnya
sehingga dapat menginisiasi timbulnya berbagai penyakit seperti kanker,
aterosklerosis, dan diabetes melitus. Antioksidan merupakan senyawa yang
meredam aktivitas radikal bebas dengan cara menjadi sasaran pengganti oksidasi
oleh radikal bebas. Salah satu tanaman yang memiliki aktivitas antioksidan adalah
akar jarak merah (Jatropha gossypifolia) yang memiliki senyawa metabolit
sekunder antara lain alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakinon.
Pada penelitian ini digunakan akar jarak merah yang kemudian di ekstraksi
dengan remaserasi kinetik dan non kinetik kemudian dilakukan uji aktivitas
antioksidan dengan menggunakan radikal DPPH. Nilai IC50 yang didapatkan dari
kedua ekstrak kemudian dibandingkan untuk mendapatkan metode ekstraksi yang
optimal.
Serbuk akar jarak merah ditimbang masing-masing 100 g untuk remaserasi
kinetik dan non kinetik. Pelarut etanol 96% yang digunakan adalah 3000 ml untuk
tiga kali ekstraksi. Remaserasi kinetik dilakukan pengadukan konstan selama 4 jam
sedangkan remaserasi non kinetik serbuk direndam dalam pelarut selama 24 jam
lalu di saring, hal ini dilakukan sebanyak tiga kali untuk masing masing metode
ekstraksi. Filtrat yang didapatkan di uapkan dengan rotary evaporator. Profil KLT
dilakukan dengan dua fase gerak yaitu N-Heksana : Etil Asetat (8:2) dan N-Heksana
:Kloroform: Etil Asetat (5:3:3) yang kemudian diberi penampak noda untuk
mengetahui kandungan metabolit sekunder.
Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan radikal DPPH. Tahap awal
yang dilakukan adalah pengukuran panjang gelombang maksimal dari larutan
pereaksi. Kemudian diukur operating time sampel dan kontrol positif. Hasil
operating time digunakan untuk waktu inkubasi dari seri konsentrasi baku kerja
sampel dan kontrol positif. Sampel yang digunakan ekstrak akar jarak merah
dengan remaserasi kinetik dan non kinetik pada konsentrasi 12,5; 25,0; 50,0; 75,0;
100,0; 150,0; 200,0 µg/ml sedangkan konsentrasi baku kerja kontrol positif adalah
0,2; 0,4; 1,0; 1,6; 2,0; 3,0 µg/ml. Sampel maupun kontrol positif kemudian
ditambahkan 1,0 ml DPPH 0,4 mM lalu ditambahkan metanol ad 10,0 ml dan di
inkubasi sesuai operating time. Hasil absorbansi yang didapatkan kemudian di
analisa untuk mendapatkan nilai persen penghambatan Konsentrasi sampel/kontrol
positif dan persen penghambatan kemudian dilakukan regresi linier untuk
mendapatkan persamaan regresi sehingga didapatkan nilai IC50. Nilai IC50 yang
didapatkan dari ekstrak akar jarak merah kinetik dan non kinetik kemudian
dilakukan uji T independen dengan SPSS untuk melihat perbedaan aktivitas
antioksidan pada kedua ekstrak.
Hasil ekstraksi akar jarak merah remaserasi kinetik mendapat rendemen
sebesar 9,03% dan remaserasi non kinetik sebesar 9,45 %. Hasil identifikasi profil
KLT yang dilakukan menunjukkan ekstrak akar jarak merah mengandung senyawa
metabolit sekunder seperti alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakinon.
xii
Hasil pengukuran operating time yang di dapatkan untuk ektrak akar jarak
merah remaserasi kinetik selama 70 menit, ekstrak akar jarak merah remaserasi non
kinetik selama 55 menit dan vitamin c sebagai kontrol positif selama 20 menit. Nilai
IC50 ekstrak akar jarak merah remaserasi kinetik sebesar 98,63 µg/ml , remaserasi
non kinetik sebesar 83,28 µg/ml dan vitamin c sebesar 1,47 µg/ml dari hasil analisis
statistika menggunakan SPSS didapatkan nilai P sebesar 0,071>0,05 sehingga dapat
disimpulkan tidak ada perbedaan aktivitas antioksidan ekstrak akar jarak merah
remaserasi kinetik dengan non kinetik secara statistik.
xiii
DAFTAR PUSTAKA
Agoes, G. 2007. Teknologi bahan alam.Bandung: ITB Press.
Aliyu, A.B., Ibrahim, M.A., Ibrahim, H., Musa, A.M., Lawal, A.Y., Oshanimi, J.A.,
Usman, M., Abdulkadir, I.E., Oyewale, A.O., Amupitan, J.O., 2012. Free
radical scavenging and total antioxidant capacity of methanol extract of
Ethulia conyzoides growing in Nigeria. Romanian Biotechnological
Letters, Vol.17 No.4, P. 7460.
Apak, R., Guclu, K., Demirata, B., Ozyurek, M., Celik, S.E., Bektasoglu, B.,
Berker, K.I., Ozyurt, D., 2007. Comparative Evaluation of Various Total
Antioxidant Capacity Assays Applied to Phenolic Compounds with the
CUPRAC Assay. Molecules, Vol.12, pp.1511-1512.
Ardhie, A.M., 2011. Radikal Bebas dan Peran Antioksidan dalam Mencegah
Penuaan. Medicinus, Vol.24 No.1, pp.4-7.
Benzie, I.F.F., Strain, J.J., 1996. The Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP) as
a Measure of ‘‘Antioxidant Power’’: The FRAP Assay. Analytical
biochemistry, Vol. 239 No. 292, pp.70-71.
Budiyati, E., Tridayana, A., 2013. Pengaruh kecepatan putaran pengaduk
terhadap konsentrasi polifenol, kca, dan de pada ekstraksi polifenol
dari kulit apel malang, Simposium nasional RAPI XII,
http://publikasiilmiah.ums.ac.id/handle/123456789/4163, Diakses tanggal 1
februari 2015.
Campos-vega, R., Oomah, B.D., 2013. Chemistry and classification of
phytochemicals. In: B.K Tiwari, N.P Brunton, and C.S Brennan (Eds.).
Handbook of Plant Food Phytochemicals: Sources, Stability and
Extraction, Manchester: Wiley-Blackwell., pp.8-22.
Devasayagam, T.P.A., Tilak, J.C., Boloor, K.K., Sane, K.S., Ghaskadbi, S.S., Lele,
R.D., 2004. Free Radicals and Antioxidants in Human Health: Current
Status and Future Prospects. Journal of the Assocoation of Physicians of
India, Vol.52, P.799.
Dewi, H.K., Silsia, D., Susanti, L., Markom, M., Mendra, H. (2010) Ekstraksi
Teripang Pasir (Holothuria Scabra) Sebagai Sumber Testosteron Pada
Berbagai Kecepatan dan Lama Pengadukan, Prosiding Seminar Nasional
Teknik Kimia “Kejuangan”.
Dewoto, H.R., 2007. Pengembangan Obat Tradisional Indonesia Menjadi
Fitofarmaka. Majalah Kedokteran Indonesia, Vol.57 No.7, pp.205-210.
DITJEN BPOM, 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Jakarta:DEPKES.
Fauzana, D.L., 2010. Perbandingan metode maserasi, remaserasi, perkolasi dan
reperkolasi terhadap rendemen ekstrak temulawak (curcuma xanthorrhiza
roxb.). Bandung: Skripsi Program Sarjana.
Felix-silva, J., Giodani, R.B., Silva-Jr, A.A., Zucolotto, S.M., Fernandes-Pedrosa,
M.F., 2014. Jatropha gossypiifolia L. (Euphorbiaceae): A Review of
Traditional Uses, Phytochemistry, Pharmacology, and Toxicology of This
Medicinal Plant. Evidence-Based Complementary and Alternative
Medicine, Vol. 2014, pp.1-32.
xiv
Gibbons, S., 2005. An Introduction to Planar Chromatography. In: S.D. Sarker, Z.
Latif, A.I. Gray (Eds.). Natural Product Isolation, Ed. 2nd, New Jersey:
Humana Press., P.78.
Hamid, A.A., Aiyelaagbe, O.O., Usman, L.A., Ameen, O.M., Lawal, A., 2010.
Antioxidants: Its medicinal and pharmacological applications. African
Journal of Pure and Applied Chemistry, Vol.4 No.8, pp. 142-150.
Handa, S.S., 2008. An Overview of Extraction Techniques for Medicinal and
Aromatic Plants. In: S.S. Handa, S.P.S. Khanuja, G. Longo, and D.D.
Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic
Plants, Trieste : International centre for science and high technology., pp.
21-22.
Harmita, 2004. Petunjuk Validasi Metode dan Perhitungannya. Majalah Ilmu
Kefarmasian, Vol.1 No.3, P.122.
Jain, S., Choudhary, G.P., Jaina, D.K., 2012. In vitro free radical scavenging
activity of Jatropha gossgypifolia Linn. containing phenolic compounds.
Journal of Medicinal Plants Research, Vol.7 No.20, pp. 1424-1427.
Kumar, S., Pandey, A.K., 2013. Chemistry and Biological Activities of Flavonoids:
An Overview. The ScientificWorld Journal, Vol.2013, pp.1-11.
Leong, L.P., Shui, G., 2002. An Investigation of Antioxidant Capacity of Fruits in
Singapore Markets. Food Chemistry, Vol.76, pp.69–75
Lisdawati, V., Kardono, Broto.S., 2006.Aktivitas antioksidan dari berbagai fraksi
ekstrak daging buah dan kulit biji mahkota dewa (Phaleria
macrocarpa).Media Litbang Kesehatan, Vol. XVI No.4, pp. 1-2.
Marks, D.B., Marks, A.D., Smith, C.M. 2000. Biokimia kedokteran dasar:
sebuah pendekatan klinis. Jakarta:EGC.
Molyneux, P., 2004. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH) for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci.
Technol, Vol.26 No.2, pp.216-218.
Mukhriani, 2014. Ekstraksi, pemisahan senyawa, dan identifikasi senyawa aktif.
Jurnal Kesehatan, Vol.VII No.2, pp.363-364.
Nwokocha., Blessing, A., Agbagwa, I.O., Okoli, B.E., 2011. Comparative
phytochemical screening of Jatropha gossypifolia L. Spesies in the niger
delta. Research Journal of Phytochemistry, P.5.
Padayatty, S.J., Katz, A., Wang, Y., Eck, P., Kwon, O., Lee, J.H., Chen, S., Corpe,
C., Dutta, A., Dutta, S.K., Levine, M.,2003. Vitamin C as an Antioxidant:
Evaluation of Its Role in Disease Prevention. Journal of the American
College of Nutrition, Vol.22 No.1, pp.19-20.
Pandey, A., Tripathi, S., 2014. Concept of standardization, extraction and pre
phytochemical screening strategies for herbal drug. Journal of
Pharmacognosy and Phytochemistry, Vol.2 No.5, pp.117.
Patras, A., Yuan, Y.V., Costa, H.S., Sanches-silva, A., 2013. Antioxidant activity
of phytochemicals. In: B.K Tiwari, N.P Brunton, and C.S Brennan (Eds.).
Handbook of Plant Food Phytochemicals: Sources, Stability and
Extraction, Manchester: Wiley-Blackwell., P.456.
xv
Percival, M., 1998. Antioxidants. Clinical Nutrition Insights, Vol.31 No.1, pp.14.
Pietta, P.G., 2000. Flavonoids as Antioxidant. Journal of Natural Product, Vol.
63 No. 7, pp 1035-37
Randall, A., Chambel, S., Vogler, W., Bebawi, F., Madigan, B. 2009. Bellyache
bush (Jatropha gossypiifolia) management manual: control options and
management case studies from across Australia. Australia: Autralia
goverment.
Rohmatussolihat,
2009.
Antioksidan
,Penyelamat
Sel-Sel
Tubuh
Manusia.Biotrend, Vol.4 No.1, pp. 5-8
Sabandar, C.W., Ahmat, N., Jaafar, F.M., Sahidin, I., 2012. Medicinal property,
phytochemistry and pharmacology of several Jatropha species
(Euphorbiaceae): A review. Phytochemistry, Vol 85, pp.7-29.
Sandhiutami, N.M.D., Rahayu, L., 2014. Uji Toksisitas Akut, Aktivitas
Antioksidan In Vitro dan efek Rebusan Bunga Kamboja Merah (Plumeria
rubra L.) terhadap Kadar Malondialdehid. Jurnal Ilmu Kefarmasian
Indonesia, Vol.12 No.1, pp. 43-49.
Sharma, V., Kumawat, T.K., Seth, R., Sharma, A., 2013. Bioefficacy of Crude
Extracts from Jatropha gossypifolia against Human Pathogens.
International Journal of Biotechnology and Bioengineering Research,
Vol.4 No.4, pp. 403-405.
Singh, B.N., Shankar, S., Srivastava, R.K., 2011. Green tea catechin,
epigallocatechin-3-gallate (EGCG): mechanisms, perspectives and clinical
applications. Biochem Pharmacol, Vol.82 No.12, P.1
Singh, H., Sharma, S.K., 2013. Antidiabetic activity of Jatropha gossypifolia linn
root extracts in alloxan induced diabetic mice. International research
journal of pharmacy, Vol 4 No.5, P. 212.
Singh, J., 2008. Maceration, Percolation and Infusion Techniques for the Extraction
of Medicinal and Aromatic Plants. In: S.S. Handa, S.P.S. Khanuja, G.
Longo, and D.D. Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal
and Aromatic Plants, Trieste : International centre for science and high
technology., pp. 67-69.
Supriyadi, D.,2008. Optimalisasi Ekstraksi Kurkuminoid Temulawak (Curcuma
Xanthorrhiza Roxb.). Bogor:Skripsi Program Sarjana
Tiong, S.H., Looi, C.Y., Hazni, H., Arya, A., Paydar, M., Wong, W.F., Cheah, S.C.,
Mustafa, M.R., Awang, K., 2013. Antidiabetic and Antioxidant Properties
of Alkaloids from Catharanthus roseus (L.) G. Don. Molecules, Vol.18,
P.9777.
Tripathi, B., Bhatia, R., Pandey, A., Gaur, J., Chawala, G., Walia, S., Choi, E.H.,
Attri, P., 2014. Potential Antioxidant Anthraquinones Isolated from Rheum
emodi Showing Nematicidal Activity against Meloidogyne incognita.
Journal of Chemistry, pp. 1-9.
Triyatti, E., 1985. spektrofotometer ultra-violet dan sinar tampak serta aplikasinya
dalam oseanologi.Oseana, Vol.X No.1, pp.39-40.
Young, I.S., and Woodside, J.W. 2001. Antioxidant in health and disease. J Clin
Pathol, Vol. 54, pp. 176-186.
xvi
Yuhernita, Juniati., 2011. Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dari Ekstrak
Metanol Daun Surian yang Berpotensi Sebagai Antioksidan. Makara, Sains,
Vol. 15 No.1, pp 48-51
Valko,M., Rhodes, C.J., Moncol, J., Izakovic, M., Mazur, M., 2006. Free radicals,
metals and antioxidants in oxidative stress-induced cancer. ChemicoBiological Interaction., Vol. 160, pp.8-14.
Vasisht, K. 2008. Quality Control of Medicinal and Aromatic Plants and their
Extracted Products by HPLC and High Performance Thin Layer
Chromatography. In: S.S. Handa, S.P.S. Khanuja, G. Longo, and D.D.
Rakesh (Eds.). Extraction Technologies for Medicinal and Aromatic
Plants, Trieste : International centre for science and high technology., P.
247.
Winarsi H. 2007. Antioksidan Alami dan radikal Bebas. Yogyakarta :Kanisius.
xvii
BAB I
PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang
Pola hidup, lingkungan, dan makanan merupakan hal yang sering diabaikan
manusia. Pola hidup yang buruk, paparan polutan, asap rokok, limbah pabrik,
serta makanan yang tidak sehat dapat memicu pembentukan senyawa radikal
bebas yang menyebabkan berbagai penyakit. Sisa metabolisme tubuh yang tidak
sempurna juga menyebabkan terbentuknya senyawa radikal bebas.
Radikal bebas didefinisikan sebagai setiap molekul yang keberadaannya
bebas berisi elektron yang tidak berpasangan, dalam orbital atom nya bersifat
reaktif dan dapat memberi atau menarik elektron dari molekul lain sehingga
berperilaku sebagai oksidan atau reduktan. Senyawa radikal bebas dapat
menyebabkan aterosklerosis, inflamasi, diabetes, kanker, dan berperan dalam
proses penuaan (Young & Woodside, 2001).
Radikal bebas yang merusak DNA dan RNA pada tubuh akan berkembang
menjadi sel kanker. DNA yang rusak akan mengalami proses perbaikan, pada
proses ini DNA kemungkinan akan mengalami mutasi sehingga berkembang
menjadi karsinogenesis Aterosklerosis yang menjadi penyebab berbagai penyakit
kardiovaskular, diabetes, dan kanker merupakan penyakit tidak menular (PTM)
utama menurut WHO. Prevalensi kanker di indonesia sebesar 1,4 per mil dimana
berdasarkan tempat tinggal masyarakat perkotaan memiliki proporsi lebih besar
yaitu 1,7 per mil di banding daerah pedesaan 1,1 per mil. Prevalensi diabetes
melitus berdasarkan diagnosa dokter atau gejala (D/G) sebesar 2,1%, dimana
pravelensi yang lebih tinggi didapatkan pada masyarakat yang tinggal di daerah
perkotaan sebesar 2,5 %. Penyakit kardiovaskular antara lain penyakit jantung
koroner dan stroke berdasarkan diagnosa dokter atau gejala memiliki prevalensi
sebesar 12,1 per mil (DEPKES, 2013; Valko et al, 2004).
Data prevalensi di atas semakin meningkat setiap tahun. Penanganan berupa
langkah preventif menjadi pilihan utama untuk mencegah timbulnya penyakit
1
2
penyakit di atas yakni dengan mengatasi senyawa radikal bebas dengan senyawa
antioksidan.
Senyawa antioksidan adalah senyawa pemberi elektron (electron donors).
Secara biologis, pengertian antioksidan adalah senyawa yang mampu menangkal
atau meredam dampak oksidan dalam tubuh. Antioksidan bekerja dengan
mendonorkan salah satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan
sehingga aktivitas senyawa tersebut dapat dihambat (Winarsi,2007).
Senyawa antioksidan dapat berasal dari alam maupun sintetik. Pada
dasarnya senyawa sintetik berasal dari alam, oleh karena itu penelitian terhadap
penemuan senyawa antioksidan pada tanaman banyak dilakukan. Metabolit
sekunder yang di kenal sebagai senyawa antioksidan antara lain fenol, alkaloid,
saponin, flavonoid, dan antra-kuinon. Salah satu tanaman yang terbukti berkhasiat
sebagai antioksidan adalah daun teh hijau yang mengandung senyawa
epigallocatechin gallate (ECGC) yang merupakan senyawa golongan flavonoid
dan buah tomat yang mengandung senyawa licopene yang termasuk golongan
senyawa terpenoid (Lisdawati, 2006; Singh et al, 2011).
Kebutuhan sumber antioksidan dari alam sangat penting disebabkan
prevalensi penyakit yang disebabkan radikal bebas semakin meningkat setiap
tahunnya. Pemerintah, industri, serta akademisi memiliki peran penting dalam
pemanfaatan sumber daya alam untuk penemuan tanaman yang memiliki aktivitas
antioksidan. Tanaman jarak merah khususnya daun memiliki aktivitas sebagai
antioksidan, tetapi akar jarak merah belum di teliti akan aktivitas antioksidannya,
berdasarkan pendekatan secara taksonomi kemungkinan bagian tanaman lain juga
mempunyai aktivitas antioksidan khususnya akar (Jain et al, 2013).
Jarak merah (Jatropha gossypifolia) merupakan tanaman yang sering
digunakan sebagai obat tradisional yaitu penghilang nyeri, pereda demam serta
obat disentri. Jarak merah (Jatropha gossypifolia)
mengandung golongan
senyawa alkaloid, tannin, flavonoid, saponin, dan fenol. Pada penelitian
Nwokocha pada tahun 2011 telah di identifikasi golongan senyawa metabolit
sekunder terutama pada akar jarak merah yaitu alkaloid (1,60%), tanin (2,73%),
flavonoid (1,75%), saponin (2,83%), dan fenol (0,24%). Golongan senyawa
terpen juga berhasil di identifikasi dan di isolasi dari akar jarak merah yaitu
3
senyawa golongan diterpenoid jatrophane (Sabandar et al, 2013; Nwokocha et al,
2011).
Penggunaan tanaman menjadi obat tradisional bukan merupakan hal baru di
Indonesia. Indonesia merupakan negara majemuk dengan banyak suku, setiap
daerah di Indonesia memiliki tanaman khas yang digunakan sebagai obat
tradisional dalam berbagai macam bentuk. Pengembangan obat tradisional di
Indonesia semakin baik dengan adanya pembuktian secara klinis khasiat dari obat
tradisional. Obat tradisional di indonesia di bedakan menjadi jamu, obat herbal
terstandar, dan fitofarmaka. Pengembangan tanaman menjadi obat perlu dilakukan
standardisasi agar bahan baku yang akan dijadikan obat tradisonal terjamin mutu
nya. Standardisasi dilakukan mulai dari simplisia dan ekstrak. Standardisasi juga
menjamin mutu produk obat herbal yang dihasilkan. Mutu produk dipengaruhi
beberapa faktor salah satu nya metode ekstraksi yang digunakan. Metode
ekstraksi sangat mempengaruhi aktivitas biologis dari suatu ekstrak, jika metode
yang digunakan tidak tepat maka aktivitas yang diinginkan tidak memberikan
hasil yang maksimal. Metode ekstraksi mempengaruhi jumlah senyawa metabolit
sekunder yang dapat ditarik dari tanaman. Metode yang digunakan pada penelitian
ini adalah remaserasi kinetik dan remaserasi non kinetik. Remaserasi kinetik
merupakan modifikasi dari metode maserasi konvensional dimana dilakukan
pengadukan terus menerus sehingga akan didapatkan rendemen ekstrak yang lebih
banyak dan dimungkinkan metabolit sekunder yang terekstraksi dari tanaman juga
lebih banyak sehingga mutu produk herbal yang didapatkan lebih baik (DITJEN
BPOM, 2000; Fauzana, 2010; Agoes, 2007).
Oleh karena itu peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang ekstrak
etanol akar jarak merah yang diekstraksi menggunakan metode remaserasi kinetik
dan remaserasi non kinetik serta dibandingkan aktivitas antioksidan dari kedua
metode tersebut.
Banyak metode yang dapat digunakan untuk mengukur aktivitas
antioksidan.
Salah
satu
metode
yang
sering
digunakan
adalah
diphenylpicrylhydrazyl (DPPH). DPPH adalah senyawa radikal bebas yang
stabil,senyawa yang berkhasiat sebagai antioksidan akan mereduksi DPPH dengan
4
memberikan satu atom hidrogen, sehingga terbentuk senyawa baru yang bersifat
tidak radikal.
1.2
Rumusan Masalah
1. Bagaimana kemampuan peredaman ekstrak etanol 96% akar jarak merah
yang diekstraksi dengan metode remaserasi kinetik terhadap radikal
bebas DPPH ?
2. Bagaimana kemampuan peredaman ekstrak etanol 96% akar jarak merah
yang diekstraksi dengan metode remaserasi non kinetik terhadap radikal
bebas DPPH ?
3. Apakah ada perbedaan kemampuan peredaman ekstrak etanol 96% akar
jarak merah yang diesktraksi dengan metode remaserasi kinetik dan
remaserasi non kinetik terhadap radikal bebas DPPH ?
1.3
Tujuan Penelitian
1. Mengetahui nilai IC50 ekstrak akar jarak merah (Jatropha gossypifolia)
dengan metode remaserasi kinetik.
2. Mengetahui nilai IC50 ekstrak akar jarak merah (Jatropha gossypifolia)
dengan metode remaserasi non kinetik.
3. Mengetahui metode ekstraksi yang optimal dengan membandingkan
aktivitas antioksidan dari kedua metode ekstraksi di atas.
1.4
Manfaat Penelitian
Manfaat bagi masyarakat :
Di harapkan memberikan informasi ilmiah tentang potensi ekstrak akar
jarak merah sebagai antioksidan alami yang dapat dipakai luas oleh masyarakat.
Manfaat bagi lembaga yang berwenang :
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai
metode ekstraksi yang optimal yang memberikan aktivitas antioksidan lebih besar
dari kedua metode ekstraksi dari akar jarak merah.
1.5
Hipotesis
Ekstrak etanol 96% akar jarak merah (Jatropha gossypifolia) dengan
metode remaserasi kinetik dapat memberikan nilai IC50 lebih kecil daripada
dengan metode remaserasi non kinetik dengan metode diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH)