Pengaruh Periode Subkultur Terhadap Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis sp.)

Pengaruh Periode Subkultur Terhadap Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis Sp.) SKRIPSI OLEH :
Putri Hasanah Jumroh 080307050/PEMULIAAN TANAMAN
PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013
Universitas Sumatera Utara

PENGARUH PERIODE SUBKULTUR TERHADAP MIKROPROPAGASI PUAR TENANGAU (Elettariopsis sp.) SKRIPSI OLEH : PUTRI HASANAH JUMROH
080307050/PEMULIAAN TANAMAN Skripsi Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Mendapatkan Gelar Sarjana
Di Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan
PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013
Universitas Sumatera Utara

Judul Penelitian
Nama NIM Program Studi Minat Studi

: Pengaruh Periode Subkultur Terhadap Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis sp.)
: Putri Hasanah Jumroh : 080307050 : Agroekoteknologi : Pemuliaan Tanaman

Disetujui oleh : Komisi Pembimbing


(Lutfi A. M. Siregar, SP. MSc. Ph. D) Ketua

(Ir. Syafruddin Ilyas) Anggota

Mengetahui :

(Ir. T. Sabrina, M. Agr, Sc, Ph.D) Ketua Program Studi Agroekoteknologi

Universitas Sumatera Utara

ABSTRAK
PUTRI HASANAH JUMROH : Pengaruh Periode Sub Kultur Terhadap Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis sp.), dibimbing oleh Luthfi A. M Siregar dan Syafruddin Ilyas.
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan periode sub kultur yang tepat untuk mendapatkan mikropopagasi tanaman puar tenangau (Elettariopsis sp.) yang terbaik sebagai planlet. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan dari November 2012 sampai Agustus 2013. Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 1 (satu) faktor yaitu periode sub kultur dengan 4 (empat) perlakuan yaitu 0 minggu, 2 minggu, 4 minggu, dan 6 minggu setelah pengkulturan dari 10 minggu masa inkubasi.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa periode subkultur berpengaruh nyata terhadap persentase jumlah tunas dan jumlah akar, tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap persentase pertumbuhan eksplan, persentase eksplan membentuk tunas, tinggi tanaman, dan jumlah daun. Periode sub kultur 2 minggu setelah pengkulturan adalah periode yang sangat tepat untuk menghasilkan jumlah tunas dan jumlah akar terbaik. Kata kunci : Mikropopagasi, Elettariopsis sp., Periode Subkultur
Universitas Sumatera Utara

ABSTRACT
Putri Hasanah Jumroh : The Influence of Sub Culture Period on Micropropagation of Puar Tenangau (Elettariopsis sp.), supervised by Luthfi A. M. Siregar and Syafruddin Ilyas.
The research aimed to determine the appropriate sub culture period to obtain the micropropagation of Puar Tenangau (Elettariopsis sp.) the best as plantlets. The research was carried out in Plant Tissue Culture Laboratory, Department of Agroecotechnology, Faculty of Agriculture, University of North Sumatera, Medan from November 2012 to August 2013. The research used Completely Randomized Design with 1 (one) factor that sub culture period with 4 (four) treatment , which are : 0 week, 2 weeks, 4 weeks, and 6 weeks after culturing from 10 weeks of incubation.
The result showed that subculture period give affected on shoots number and roots number, but not affected on the percentage of explant growth, percentage of explant shoots, plant length, and leaves number. Two weeks Sub-culture period after culturing is very exactly period to produce a optimum number of shoots and roots. Key words : Micropopagation, Elettariopsis sp., Subculture Period

Universitas Sumatera Utara

RIWAYAT HIDUP Putri Hasanah Jumroh dilahirkan di Lhokseumawe pada tanggal 31 Agustus 1990, putri dari pasangan Hasbullah dan Nurbaiti merupakan anak kelima dari lima bersaudara. Pendidikan formal yang pernah ditempuh adalah SD Yayasan Pembangunan Didikan Islam Pangkatan lulus pada tahun 2002, SMP Yayasan Pendidikan Arun lulus tahun 2005 dan tahun 2008 penulis lulus dari SMA Yayasan Pendidikan Arun dan pada tahun yang sama lulus seleksi penerimaan mahasiswa baru melalui jalur SNMPTN (Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri) pada program studi Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan. Selama mengikuti Perkuliahan penulis berkesempatan mengikuti Praktek Kerja Lapangan (PKL) di PTPD Paya Pinang Kabupaten Batubara Provinsi Sumatera Utara pada tahun 2012.
Universitas Sumatera Utara

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis ucapkan kehadirat Allah swt, karena atas berkat dan rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi.
Adapun judul dari skripsi ini adalah “Pengaruh Periode Sub Kultur Terhadap Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis sp.)”, yang merupakan salah satu syarat untuk dapat memperoleh gelar sarjana di Departemen Agroekoteknologi, Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera Utara, Medan.
Pada kesempatan ini penulis ucapkan terima kasih kepada Bapak Lutfi Aziz Mahmud Siregar, SP. MSc. PhD. dan Ir. Syafruddin Ilyas selaku ketua dan anggota komisi pembimbing, dan seluruh pihak yang telah membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari usulan penelitian ini masih jauh dari sempurna oleh sebab itu saran dan kritik penulis harapkan demi kesempurnaan skripsi di masa yang akan datang.
Semoga penelitian ini bermanfaat bagi kita semua. Akhir kata penulis ucapkan terima kasih.
Medan, Agustus 2013 Penulis
Universitas Sumatera Utara

DAFTAR ISI
ABSTRAK................................................................................................... i
ABSTRACT ................................................................................................ ii
RIWAYAT HIDUP..................................................................................... iii
KATA PENGANTAR................................................................................. iv
DAFTAR ISI ............................................................................................... vi

DAFTAR TABEL ....................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... x
PENDAHULUAN Latar belakang................................................................................... 1 Tujuan Penelitian .............................................................................. 4 Hipotesis Penelitian........................................................................... 4 Kegunaan Penelitian.......................................................................... 4
TINJAUAN PUSTAKA Pengenalan Tanaman......................................................................... 5 Kultur Jaringan.................................................................................. 7 Eksplan ............................................................................................. 9 Media Kultur..................................................................................... 10 Lingkungan in vitro .......................................................................... 11 Zat pengatur Tumbuh ........................................................................ 12 Sub Kultur......................................................................................... 14
BAHAN DAN METODE PENELITIAN Tempat dan Waktu ............................................................................ 16 Bahan dan Alat.................................................................................. 16 Metode Penelitian.............................................................................. 16
PELAKSANAAN PENELITIAN SubKultur.......................................................................................... 18 Sterilisasi Alat................................................................................... 18 Pembuatan Media.............................................................................. 18 Persiapan Ruang Tanam ................................................................... 19 Penanaman........................................................................................ 20 Pemeliharaaan Tanaman ................................................................... 20 Peubah Amatan ................................................................................. 21
Universitas Sumatera Utara

Persentase Tumbuh (%) ......................................................... 21 Persentase Eksplan Membentuk Tunas(5) .............................. 21 Jumlah Tunas (tunas) ............................................................. 21 Tinggi Planlet (cm) ................................................................ 21 Jumlah Daun (helai)............................................................... 21 Jumlah Akar (buah) ............................................................... 21 HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil .................................................................................................. 22 Persentase Tumbuh (%) ......................................................... 22 Persentase Eksplan Membentuk Tunas (%) .......................... 22 Jumlah Tunas (tunas) ............................................................. 23 Tinggi Planlet (cm) ................................................................ 24 Jumlah Daun (helai)............................................................... 24 Jumlah Akar (buah) ............................................................... 24 Pembahasan ...................................................................................... 25 KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan .........................................................................................30 Saran ...................................................................................................30 DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN
Universitas Sumatera Utara

DAFTAR TABEL No. Hal. 1. Pengaruh periode subkultur terhadap persentase pertumbuhan eksplan...... 22 2. Pengaruh periode subkultur terhadap persentase pembentukan tunas ......... 22 3. Pengaruh periode subkultur terhadap jumlah tunas (tunas) ...................... 23 4. Pengaruh periode subkultur terhadap tinggi planlet (cm) ......................... 24 5. Pengaruh periode subkultur terhadap jumlah daun (Helai)....................... 24 6. Pengaruh periode subkultur terhadap jumlah akar (buah) ........................ 24
Universitas Sumatera Utara

DAFTAR GAMBAR No. Hal. 1. Tanaman Puar Tenangau ......................................................................... 7 2. Foto Planlet Tanpa Subkultu dan Subkultur Setelah 2 Minggu ................ 23 3. Foto Perlakuan W0 ................................................................................. 41 4. Foto Perlakuan W1 ................................................................................. 41 5. Foto Perlakuan W2 ................................................................................. 41 6. Foto Perlakuan W3 ................................................................................. 41
Universitas Sumatera Utara

DAFTAR LAMPIRAN No. Hal. 1. Data Pengamatan Persentase Pertumbuhan Eksplan (%) ........................ 35 2. Data Pengamatan Persentase Eksplan Membentuk Tunas (%)................ 35 3. Data Pengamatan Jumlah Tunas (Buah)................................................. 36 4. Data Transformasi Jumlah Tunas √X+0.5.............................................. 36 5. Daftar Sidik Ragam Jumlah Tunas......................................................... 37 6. Uji Duncan Jumlah Tunas...................................................................... 37 7. Data Pengamatan Tinggi Planlet (cm).................................................... 38 8. Daftar Sidik Ragam Tinggi Planlet ........................................................ 38 9. Data Pengamatan Jumlah Daun (Helai).................................................. 39 10. Daftar Sidik Ragam Jumlah Daun.......................................................... 39 11. Data Pengamatan Jumlah Akar (Buah)................................................... 40 12. Data Transformasi Jumlah Akar √X+0.5................................................ 40 13. Daftar Sidik Ragam Jumlah Akar .......................................................... 41 14. Uji Duncan Jumlah Akar ....................................................................... 41 15. Komposisi Medium Murashige dan Skoog (MS) ................................... 42 16. Bagan Penelitian.................................................................................... 43 17. Kegiatan penelitian................................................................................ 44 18. Foto hasil Penelitian .............................................................................. 45
Universitas Sumatera Utara


ABSTRAK
PUTRI HASANAH JUMROH : Pengaruh Periode Sub Kultur Terhadap Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis sp.), dibimbing oleh Luthfi A. M Siregar dan Syafruddin Ilyas.
Penelitian ini bertujuan untuk menentukan periode sub kultur yang tepat untuk mendapatkan mikropopagasi tanaman puar tenangau (Elettariopsis sp.) yang terbaik sebagai planlet. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan, Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan dari November 2012 sampai Agustus 2013. Rancangan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 1 (satu) faktor yaitu periode sub kultur dengan 4 (empat) perlakuan yaitu 0 minggu, 2 minggu, 4 minggu, dan 6 minggu setelah pengkulturan dari 10 minggu masa inkubasi.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa periode subkultur berpengaruh nyata terhadap persentase jumlah tunas dan jumlah akar, tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap persentase pertumbuhan eksplan, persentase eksplan membentuk tunas, tinggi tanaman, dan jumlah daun. Periode sub kultur 2 minggu setelah pengkulturan adalah periode yang sangat tepat untuk menghasilkan jumlah tunas dan jumlah akar terbaik. Kata kunci : Mikropopagasi, Elettariopsis sp., Periode Subkultur
Universitas Sumatera Utara

ABSTRACT
Putri Hasanah Jumroh : The Influence of Sub Culture Period on Micropropagation of Puar Tenangau (Elettariopsis sp.), supervised by Luthfi A. M. Siregar and Syafruddin Ilyas.
The research aimed to determine the appropriate sub culture period to obtain the micropropagation of Puar Tenangau (Elettariopsis sp.) the best as plantlets. The research was carried out in Plant Tissue Culture Laboratory, Department of Agroecotechnology, Faculty of Agriculture, University of North Sumatera, Medan from November 2012 to August 2013. The research used Completely Randomized Design with 1 (one) factor that sub culture period with 4 (four) treatment , which are : 0 week, 2 weeks, 4 weeks, and 6 weeks after culturing from 10 weeks of incubation.
The result showed that subculture period give affected on shoots number and roots number, but not affected on the percentage of explant growth, percentage of explant shoots, plant length, and leaves number. Two weeks Sub-culture period after culturing is very exactly period to produce a optimum number of shoots and roots. Key words : Micropopagation, Elettariopsis sp., Subculture Period
Universitas Sumatera Utara

PENDAHULUAN
Latar Belakang Tanaman dari famili Zingiberaceae merupakan contoh keanekaragaman
hayati yang banyak terdapat di Indonesia dan memiliki potensi untuk dikomersialkan karena akan meningkatkan pendapatan jika pengelolaannya dilakukan dengan baik. Zingiberaceae belum banyak dikembangkan di negaranegara lain yang tidak termasuk negara tropis, karena tanaman ini hanya dapat berkembang dan tumbuh baik di daerah tropis, seperti Indonesia. Dengan kondisi yang demikian, penting sekali dalam mempopulerkan jenis tanaman ini (Oktaviani, 2009).
Elettariopsis merupakan salah satu tanaman obat berbentuk perennial yang pertama kali ditemukan di bagian selatan Thailand (Bumrungthai et al, 2004) dan di kawasan Malaya dan Borneo (Cowley, 2006). Elettariopsis sp. Baker merupakan keluarga Zingiberaceae. Genus Elettariopsis terdapat 30 species yang tiga diantaranya ditemukan di Thailand, yaitu E. curtisii, E. smithiae dan E. Tribola (Kharukanunt dan Promchum, 2001; Sangjun et al, 2008).
Elettariopsis sp. memiliki rimpang yang berwarna putih, menjalar dan ramping, dengan batang semu dengan panjang sekitar 90 cm. Di Thailand, Elettariopsis umumnya dikenal sebagai "Putsing" dan sangat penting dalam obat tradisional untuk sifat karminatifnya (aromanya). Ramuan putsing ini memiliki bau yang kuat dan seluruh tanaman digunakan sebagi obat-obatan, baik dalam bentuk rebusan atau mandi (ARCBC, 2004; Sangjun et al, 2008). Di daerah pedesaan Thailand daun segar juga dimakan sebagai sayuran salad, dan
Universitas Sumatera Utara


ditambahkan ke pasta cabe untuk meningkatkan rasa dan merangsang sekresi lambung. Di Malaysia tanaman ini digunakan sebagai perasa masakan menggantikan serai, melancarkan peredaran darah dan obat penenang (Agrobiosolution, 2010).
Pemanfaatan tumbuhan sebagai bahan obat terus meningkat, sampai saat ini sebagaian besar bahan baku tumbuhan obat masih dipanen dari alam. Di lain pihak, kebutuhan akan bahan baku terus meningkat, seiring dengan kembalinya masyarakat memanfaatkan tumbuhan sebagai bahan baku alami. Apabila upaya budidaya, pelestarian serta pemanfaatannya tidak diperhatikan, dikhawatirkan akan terjadi kekurangan bahan baku dan bahkan akan terjadi kepunahan spesies tumbuhan tertentu (Amzu, 1990). Rifai et al (1992) menyatakan bahwa tumbuhan obat di Indonesia merupakan kelompok komoditas pertanian yang erosi genetiknya berlangsung sangat cepat. Pelangkaan yang sangat cepat tersebut terjadi karena pengurasan bahan tanaman obat dari hutan belantara karena ketergantungan industri jamu.
Selanjutnya Rifai et al (1992) menyatakan bahwa Puar Tenangau (Elettariopsis) termasuk obat langka kategori jarang. Populasi tanaman ini termasuk besar tetapi daerah penyebarannya tidak banyak diketahui dan mengalami erosi berat. Untuk mengatasi atau menghambat laju erosi tumbuhan obat, terutama yang sudah dikategorikan langka, perlu diupayakan pelestariannya agar dapat dimanfaatkan apabila diperlukan. Salah satu teknologi yang dapat dimanfaatkan untuk menyelamatkan tumbuhan langka adalah melalui kultur in vitro.
Universitas Sumatera Utara

Dalam mendukung upaya pelestarian plasma nutfah tanaman, konservasi in vitro merupakan salah satu alternatif yang dapat dilakukan. Teknologi ini memiliki beberapa keunggulan dibandingkan konvensional diantaranya adalah tidak memerlukan areal yang luas, bebas hama dan penyakit serta hemat tenaga dan biaya. Selain itu akan memudahkan pertukaran koleksi kepada pengguna (Syahid dan Mariska, 1997).
Untuk meningkatkan daya regenerasi dari eksplan tunas diperlukan penambahan zat pengatur tumbuh dalam media tanam. Kebutuhan nutrisi dan zat pengatur tumbuh untuk memacu proses morfogenesis pada kultur in vitro akan berbeda untuk setiap jenis tanaman dan eksplan yang digunakan. Menurut Van and Trinh (1990) dalam Marlin (2005) lebih jauh menyatakan bahwa suplai hormon secara eksogen sangat mempengaruhi proses tersebut, sejalan dengan laju metabolismenya.
Penelitian sebelumnya yang berkaitan dengan penanaman Puar Tenangau secara invitro sudah dilakukan oleh Triningsih (2012) dengan judul Mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis Sp.) dengan Pemberian Benzil Amino Purin Dan Naftalen Asam Asetat. Hasil yang diperoleh setelah 12 minggu masa inkubasi adalah pemberian BAP pada media MS menunjukkan pengaruh yang nyata untuk persentase membentuk tunas, jumlah tunas dan panjang tunas, dengan hasil yang terbaik pada konsentrasi 2 mg/l BAP. Karena itu media yang digunakan dalam penelitian ini adalah media MS + 2mg/l BAP.
Media yang telah ditumbuhi eksplan terlalu lama, dapat mengurangi volume media sehingga menyebabkan eksplan tidak lagi mendapat nutrisi untuk terus tumbuh. Karena itu eksplan yang sudah tidak mendapat nutrisi lagi dari
Universitas Sumatera Utara

medianya, perlu dipindahkan ke media yang baru yang disebut subkultur (Pierik, 1987).
Mikropopagasi tanaman Puar Tenangau selama 10 minggu dapat diperbaiki dengan cara perpindahan eksplan atau subkultur dengan periode yang berbeda. Karna periode yang tepat untuk melakukan subkultur agar dapat tumbuh cepat dan sempurna tergantung dari kecepatan pertumbuhan eksplan itu sendiri (Dodds & Robert, 1983).
Untuk mendukung upaya pelestarian tanaman ini, maka peneliti tertarik untuk melakukan perbanyakan tanaman Elettariopsis sp. secara in vitro dengan perlakuan perbedaan periode subkulturnya. Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui pengaruh periode subkultur yang berbeda terhadap mikropropagasi Puar Tenangau (Elettariopsis sp.) secara in vitro. Hipotesa Penelitian
Terdapat pengaruh terhadap mikropropagasi Puar Tenangau akibat tingkat perbedaan periode subkultur Puar Tenangau (Elettariopsis sp.) secara in vitro. Kegunaan Penelitian
Penelitian ini berguna untuk mendapatkan bahan penyusunan skripsi sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan gelar sarjana pertanian di Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan dan sebagai bahan informasi bagi pihak yang memerlukan.
Universitas Sumatera Utara

TINJAUAN PUSTAKA

Pengenalan Tanaman Elettariopsis sp. Genus Elettariopsis Baker adalah genus kecil dalam keluarga
Zingiberaceae dengan 8 - 15 taksa, terutama tersebar di Asia Tenggara (Mabberley, 1993; Yupparach, 2008). Genus Elettariopsis pertama kali ditemukan oleh Baker (1892). Baker mendeskripsikan terdapat tiga jenis yang termasuk genus ini, dua di antaranya adalah ditemukan di Penang Hill. E. serpentina Bak. dan E.curtisii Bak. dikumpulkan oleh Curtis. Sedangkan yang ketiga takson Baker yakni E. exserta dikumpulkan oleh Scortechini dari 'Goping Straits Settlements' pada Juni 1885. Pada tahun 1907 tercatat tujuh spesies termasuk kedalam genus Baker, menambahkan E. latiflora Ridl. (yang pertama ditemukan di Singapura sebelum 1899) (Sivasothy, 2008).
Menurut Plantamor (2001), tanaman Elettariopsis termasuk kedalam Kingdom Plantae, Sub-divisi Spermatophyta, Divisi Magnoliophyta, Kelas Liliopsida, Ordo Zingiberales, Famili Zingiberaceae, genus dan Spesies Elettariopsis sp.Val. nama lain dari tanaman ini adalah Puar Tenangau (Aceh/Malaysia) dan putsing (Thailand).
Elattariopsis sp. memiliki rimpang yang berwarna putih, menjalar dan ramping, dengan batang semu dengan panjang sekitar 90 cm. Di Thailand, Elattariopsis umumnya sebagai "Putsing" dan penting dalam obat tradisional untuk sifat karminatifnya (aromanya) (ARCBC, 2004; Sangjun et al, 2008).
Daun Elettariopsis sp. keluar dari rizom tumbuh tegak di atas tanah, seludang daun tersusun berlapis membentuk seperti batang palsu, daun berwarna
Universitas Sumatera Utara

hijau pekat dan berkilat, tekturnya tebal dan lembut. Daunnya melentur ke tanah pada satu arah saja. Daun mengeluarkan aroma yang tajam apabila diremas (UPM Press, 2009).
Daun tanaman Elettariopsis sp. Memiliki bentuk daun lanset. Kelopak daun hijau, tubular, 2,6-3,0 cm. Corolla berbentuk tabung berwarna merah, ramping, lebih pendek dari kelopak, 2,1-2,5 cm; lobus 3, kehijauan; punggung lobus lonjong, 1,6-1,8 cm dengan 5 – 6 mm, berkerudung, kehijauan. Labellum berwarna putih dengan dasar kemerahan dan ditengah berwarna kuning (Picheansoonthon and Yupparach, 2010).
Sebagian besar famili Zingiberaceae menghasilkan bunga. Bunga pada Zingiber sp berada di ujung tangkai bunga yang muncul secara langsung dari rimpang. Bunga berbentuk kerucut tertutup oleh rangkaian braktea. Braktea merupakan kantong tempat munculnya bunga, satu bunga dalam satu braktea. Beberapa species mempunyai braktea berwarna hijau seperiode muda dan berubah warna menjadi merah setelah terjadi pembuahan. Bunga biasanya mekar pada siang hari dan bertahan hanya beberapa jam saja. Ciri paling unik adalah bunganya dapat menyediakan serbuk sari dalam periode yang lama (Larsen et al. 1999).
Tanaman ini memiliki bentuk yang agak kecil dengan rimpang menjalar panjang, ramping. Tunas daun timbul dari rimpang dengan ukuran 6-20 cm. Setiap tunas terdiri dari 1-5 daun. Daunnya tumpul dan tegak, dengan panjang 530 dan melepaskan aroma yang aneh ketika dipetik. Daunnya digunakan sebagai rasa dan obat tradisional. Helaian daun bulat panjang, dengan dimensi 24 x 4-68 x 10 cm, meruncing ke kedua ujungnya. Perbungaannya panjang dan langsing,
Universitas Sumatera Utara

muncul dari pangkal tunas daun, tepat di bawah permukaan tanah. Braktea kecil dengan warna kelopak putih. Buah berbentuk kapsul bulat, dengan diameter 3 cm. Buah bergerigi, merah muda berbintik dengan titik-titik merah gelap dan berisi biji putih (Sivasothy, 2008).
Bunga pada genus Zingiber jarang menghasilkan buah. Penyebab kegagalan produksi buah dan biji diduga disebabkan oleh beberapa faktor, diantaranya kegagalan penyerbukan akibat terbatasnya vektor penyerbukan (Larsen, et al, 1999). Ratio serbuk sari fertil dan serbuk sari berkecambah tergantung pada banyaknya serbuk sari yang berkecambah pada stigma atau ada tidaknya self incompatibility.
Gambar 1. Tanaman Puar Tenangau (Sumber: Agrobiosolutions, 2010)
Kultur Jaringan Kultur jaringan adalah istilah umum yang ditujukan pada budidaya secara
in vitro terhadap berbagai bagian tanaman yang meliputi batang, daun, akar, bunga, kalus, sel, protoplas, dan embrio. Bagian-bagian tersebut yang diistilahkan
Universitas Sumatera Utara


sebagai eksplan, diisolasi dari kondisi in vivo dan dikulturkan pada medium buatan yang steril sehingga dapat beregenerasi dan berdiferensiasi menjadi tanaman lengkap. Hartman et al. (2002) menggunakan istilah yang lebih spesifik, yaitu mikropropogasi terhadap pemanfaatan teknik kultur jarigan dalam upaya perbanyakan tanaman, dimulai dari pengkulturan bagian tanaman yang sangat kecil (eksplan) secara spesifik di dalam tabung kultur atau wadah lain yang serupa (Zulkarnain, 2009).
Praktik kultur jaringan tanaman bermula dari pembuktian sifat totipotensi (total genetic potensial) sel, yaitu bahwa setiap sel tanaman yang hidup dilengkapi dengan informasi genetik dan perangkat fisiologis yang lengkap untuk tumbuh dan berkembang menjadi tanaman utuh, jika kondisinya sesuai (Yusnita, 2003).
Kultur jaringan tanaman terdiri dari sejumlah teknik untuk menumbuhkan organ, jaringan, dan sel tanaman. Jaringan dapat dikulturkan pada agar padat atau dalam medium hara cair. Jika ditanam dalam agar, jaringan akan membentuk kalus, yaitu massa atau sel-sel yang tak tertata. Kultur agar juga merupakan teknik untuk meristem dan juga untuk mempelajari organogenesis (Wetter and Constabel, 1991).
Berhasilnya pertumbuhan tunas terutama bergantung pada sumber jaringan, kadar medium hara, dan jenis serta kadar hormon pertumbuhan yang digunakan. Pada tanaman berkayu dengan daun lebar, jaringan terbaik berasal dari daerah ruas yang belum dewasa (Kartha, 1982).
Pada tahap multiplikasi, perbanyakan dapat dilakukan dengan cara merangsang terjadinya pertumbuhan tunas cabang dan percabangan aksiler atau merangsang terbentuknya tunas pucuk tanaman secara adventif, baik secara
Universitas Sumatera Utara

langsung maupun melalui induksi kalus terlebih dahulu. Seperti halnya dalam kultur fase inisiasi, di dalam media harus terkandung mineral, gula, vitamin, dan hormon dengan perbandingan yang dibutuhkan secara tepat. Hormon yang digunakan untuk merangsang pembentukan tunas tersebut berasal dari golongan sitokinin seperti BAP, 2-iP, kinetin, atau thidiadzuron (TDZ). Eksplan
Bahan tanaman yang dikulturkan lazim disebut eksplan. Dalam hal perbanyakan tanaman secara kultur jaringan, eksplan merupakan faktor penting penentu keberhasilan. Umur fisiologis, umur otogenetik, ukuran eksplan, serta bagian tanaman yang diambil merupakan hal-hal yang harus dipertimbangkan dalam memilih eksplan yang akan digunakan sebagai bahan awal kultur (Yusnita, 2003).
Menurut Gunawan (1995), ukuran eksplan yang dikulturkan turut menentukan keberhasilan dari suatu teknik kultur jaringan. Ukuran eksplan yang terlalu kecil akan kurang daya tahannya bila dikulturkan. Sedangkan bila ukurannya terlalu besar akan sulit didapatkan eksplan yang steril. Mariska dan Sukmadjaja (2003) juga menambahkan bahwa ukuran eksplan yang dapat digunakan dalam teknik kultur jaringan bervariasi dari ukuran mikroskopik (± 0,1 mm) hingga 5 cm.
Secara visual tanaman Elattariopsis sp tersebut mirip jahe dan secara konvensional mudah diperbanyak. Dengan kondisi tersebut timbul anggapan bahwa tanaman tersebut mudah diperbanyak melalui kultur jaringan. Tetapi setelah dicoba, system regenerasinya sangat lambat dan terdapat masalah pelayuan yang cepat. Apabila tumbuh sedikit, tunasnya cepat mati, keadaan yang
Universitas Sumatera Utara

sama ditemukan pada garut (Maranta arundinacea). Masalah oksidasi fenol yang sering dijumpai pada tanaman lain tidak ditemukan pada tanaman tersebut. Diduga masalah ini terjadi karena ada metabolik sekunder yang dikeluarkan oleh jaringan tanaman dan masalah semakin meningkat dengan kondisi formulasi media yang kaya akan garam-garam mineral yang dapat menimbulkan tekanan osmosa tinggi (Mariska, 2010). Media Kultur
Media kultur merupakan salah satu faktor penentu keberhasilan perbanyakan tanaman secara kultur jaringan. Berbagai komposisi media kultur telah diformulasikan untuk mengoptimalkan pertumbuhan dan perkembangan tanaman yang dikulturkan. Contohnya, komposisi Knudson C (1946), Heller (1953), Nitsch dan Nitsch (1965), Gamborg dkk. (1976), Linsmaier dan Skoog-LS (1965), Murashige dan Skoog-MS (1962), Lwoody plant medium-WPM (Lloyd dan McCown (1980). Media kultur tersebut fisiknya dapat berbentuk cair atau padat. Media berbentuk padat menggunakan pemadat media, seperti agar-agar atau gelrite (Yusnita, 2003).
Sebelum membuat medium, maka telebih dahulu kita harus menentukan medium apa yang akan kita buat. Jenis medium dengan komposisi unsur kimia yang berbeda dapat digunakan untuk media tumbuh dari jaringan tanaman yang berbeda pula (Hendaryono dan wijayani, 1994).
Media yang digunakan secara luas adalah media Murashige & Skoog (MS) yang dikembangkan pada tahun 1962. Dari berbagai komposisi dasar ini kadang-kadang dibuat modifikasi, misalnya hanya menggunakan ½ dari konsentrasi dari garam-garam makro yang digunakan (1/2 MS) atau menggunakan
Universitas Sumatera Utara

komposisi garam makro berdasarkan MS tetapi mikro dan vitamin berdasarkan komposisi Heller. Zat pengatur tumbuh yang akan digunakan disesuaikan dengan tujuan inisiasi kultur (Gunawan, 1995). Lingkungan In vitro

Ada beberapa faktor yang harus diperhatikan dalam keberhasilan kultur jaringan, yaitu: lingkungan kerja (cahaya, temperatur dalam ruangan dan botol kultur, dan kelembaban), sterilisasi alat dan media (media tanaman, zat pengatur tumbuh, pH meter, peralatan yang dipakai pada saat penanaman), dan sterilisasi bahan tanaman. Disamping itu Hendaryono dan Wijayani (1994), menyebutkan ada 4 faktor lingkungan yang harus tetap terkontrol untuk keberhasilan tujuan kultur jaringan, yaitu keasaman, kelembaban, cahaya, dan temperatur. Untuk keasaman media atau pH memiliki nilai yang relatif sempit dengan titik optimal pH 5.0-6.0. Bila eksplan mulai tumbuh, pH dalam lingkungan kultur jaringan umumnya akan naik apabila nutrien habis terpakai. Kelembaban relatif (RH) lingkungan yang diperlukan biasanya mendekati 100%. Sedangkan intensitas cahay yang rendah mempertinggi embryogenesis dan organogenesis. Hartmanm, et al (2002) menyebutkan bahwa intensitas cahaya yang berkualitas secara tidak langsung juga dapat mempengaruhi perkembangan tunas. Yeoman (1990) mengatakan bahwa penyinaran dalam kultur jaringan menggunakan lampu fluorescens dengan intensitas antara 1000-1500 Lux selama 16 jam sehari. Oksigen juga merupakan salah satu faktor pembatas bagi pembelahan dan pertumbuhan sel-sel pada jaringan yang dikulturkan secara in vitro (Read, 1990).
Temperatur yang sering digunakan pada kultur jaringan adalah kisaran antara 20-30ºC (68-81 F) (Hartmann, et al 2002). Untuk pertumbuhan kalus
Universitas Sumatera Utara

endosperm temperatur optimum yang diperlukan sekitar 25ºC. Nasir (2002) mengatakan temperatur yang dipakai pada masa inkubasi adalah 20ºC atau kurang, dalam kegelapan total dilanjutkan oleh masa inkubasi singkat dan suhu diatas 20ºC dalam kondisi ada cahaya. Zat Pengatur Tumbuh
Zat pengatur tumbuh (ZPT) didefinisikan sebagai senyawa organik bukan nutrisi yang aktif dalam jumlah kecil (10-6-10-5 mM) yang disintesiskan pada bagian tertentu tanaman dan pada umumnya diangkut ke bagian lain tanaman dimana zat tersebut menimbulkan tanggapan secara biokimia, fisiologis dan morfologis (Wattimena et al, 1992). Dua golongan zat pengatur tumbuh yang penting dalam kultur jaringan yaitu auksin dan sitokinin. Zat pengatur tumbuh ini mempengaruhi pertumbuhan dan morfogenesis dalam kultur sel dan organ. Interaksi dan perimbangan antara zat pengatur tumbuh yang diberikan dalam media dan yang diproduksi oleh sel secara endogen menentukan arah perkembangan suatu kultur (Gunawan, 1995). Armini et al (1991) menambahkan bahwa untuk pertumbuhan dan perkembangan kultur in vitro diperlukan komposisi dan atau konsentrasi zat pengatur tumbuh yang berbeda untuk satu varietas dengan varietas lain dari suatu tanaman.
Pertumbuhan tanaman secara alami dikendalikan oleh hormon endogen dan hormon ini terdapat pada tanaman dalam jumlah yang kecil. Pemberian senyawa-senyawa sintetik tersebut akan mengubah keseimbangan hormon dalam tanaman hingga menimbulkan suatu respon tertentu (Manurung, 1995).
Dalam pemakaian pada kultur jaringan tanaman, konsentrasi efektif untuk masing-masing ZPT berbeda. Penentuan taraf konsentrasi disesuaikan dengan
Universitas Sumatera Utara

tipe organ atau eksplan, metode kultur jaringan, dan tingkat kultur jaringan (pembuatan kalus, induksi akar, induksi tunas, dan lain-lain) (Wattimena et al, 1992).
Sitokinin merupakan senyawa organik yang menyebabkan pembelahan sel yang dikenal dengan proses sitokinesis. Menurut Wattimena et al (1992), sitokinin mempengaruhi berbagai proses fisiologis di dalam tanaman terutama mendorong pembelahan sel. Salah satu jenis ZPT dari golongan sitokinin yang sering dipakai dalam kultur jaringan yaitu BAP (6-benzylaminopurine). 6-Benzilaminopurine (BAP) merupakan salah satu sitokinin sintetik yang aktif dan daya merangsangnya lebih lama karena tidak mudah dirombak oleh enzim dalam tanaman. Penggunaan BAP dengan konsentrasi tinggi dan masa yang panjang dapat menentukan kemampuan pembentukan jumlah tunas dan bentuk tunas. Pada konsentrasi BAP yang lebih tinggi dan masa induksi yang lebih lama menyebabkan penampakan abnormal dan menyebabkan penurunan jumlah regenerant yang diperoleh (Gunawan, 1995).
Aktivitas sitokinin tergantung juga dari aktivitas fitohormon yang lainnya, terutama auksin baik dalam efek menghambat maupun efek yang mendorong pembelahan sel (Wattimena et al, 1992). Sitokinin dan auksin memiliki peran yang sangat penting dalam hal menginduksi tunas adventif. Nisbah keduanya akan menentukan apakah suatu kalus akan membentuk tunas adventif, akar, atau tunas adventif dan akar (Armini et al, 1991).
Peran sitokinin dalam kultur in vitro mempunyai dua peran penting yaitu merangsang pembelahan sel serta pembentukan dan perbanyakan tunas aksilar dan
Universitas Sumatera Utara

tunas adventif, tetapi kadar sitokinin yang optimum ini dapat menghambat pertumbuhan dan pembentukan akar Subkultur
Sub kultur adalah pemindahan kultur ke media yang baru, baik yang sama maupun berbeda komposisi kimianya. Sub kultur merupakan kebutuhan untuk memperbanyak tanaman dan mempertahankan kultur (George dan Sherrington, 1984). Sub kultur diperlukan bila unsur hara dan hormon dalam media telah berkurang atau habis untuk merubah pola pertumbuhan dan perkembangan kultur dan bila kultur telah memenuhi wadah atau botol (Pierik, 1987).
Setiap tanaman memiliki sensitifitas masing-masing terhadap media tumbuh, namum umumnya disubkultur secara periodik antara 3 sampai 6 bulan. Namun untuk tanaman tertentu periode subkultur harus lebih cepat karena respon dari tanaman yang kurang baik, seperti pada purwoceng (Pimpinella pruatjan) yang harus disubkultur antara 4 – 6 minggu, karena tunas cepat layu bila melewati periode tersebut (Bermawie dan Kristina, 2003).
Massa kultur yang ditumbuhkan terlalu lama dalam media yang tetap, akan menyebabkan terjadinya kehabisan hara dan air. Kehabisan hara dan air dapat terjadi karena selain terhisap untuk pertumbuhan juga karena media menguapkan air dari masa ke masa (Mariska, 1987).

Pada kalus massa sel yang dipindahkan pada subkultur harus cukup banyak antara 5-10 mm atau seberat 20-100 mg, supaya ada pertumbuhan yang cepat dalam media baru. Subkultur sebaiknya dilakukan 28 hari sekali (4-6
Universitas Sumatera Utara

minggu sekali). Namun periode yang tepat untuk memindahkan kultur, tergantung dari kecepatan pertumbuhan eksplan (Dodds & Robert, 1983).
Alasan dilakukan subkultur • Unsur hara dalam media sudah banyak berkurang. • Nutrisi dalam media menguap karena kering, akibatnya media mengandung
garam dan gula tinggi. • Pertumbuhan tanaman sudah memenuhi botol atau tabung sehingga
berdesakan. • Sudah saatnya dipindah untuk diperbanyak atau diakarkan. • Terjadi pencoklatan pada media sehingga bila dibiarkan akan mematikan
jaringan. • Eksplan memerlukan komposisi media baru untuk membentuk organ atau
struktur baru. • Media berubah, menjadi cair karena penurunan pH oleh tanaman. (Wardiyati,1998)
Dalam penelitian Mariska, et al (1998) pada tanaman jahe sampai dengan periode kultur ke-7 jumlah tunas yang dihasilkan tetap tinggi yaitu 9,7 tunas, di mana vigor tanaman tetap normal. Tetapi dalam penelitian Herwinia (1993) penurunan daya tumbuh jahe terjadi setelah memasuki periode subkultur ke- 9 dengan rata-rata jumlah tunas 8,5.
Universitas Sumatera Utara

BAHAN DAN METODE
Tempat dan Periode Penelitian Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Fakultas
Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan. Penelitian ini dimulai pada bulan November 2012 sampai dengan Agustus 2013. Bahan dan Alat Penelitian
Bahan eksplan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tunas dari planlet Puar Tenangau yang merupakan hasil subkultur ketiga yang dipelihara dalam media MS + 0,5 mg/ NAA +1 mg/BAP selama 5 minggu yang diperoleh dari Penang, Malaysia. Eksplan yang digunakan dengan panjang 2 cm. Bahan penyusun media MS, BAP, agar-agar, akuades steril, dan bahan lainnya yang mendukung penelitian ini.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Laminar Air Flow, autoclave, timbangan analitik, rak kultur, hot plate dengan magnetik stirer, erlenmeyer, gelas ukur, petridish, pipet ukur, pinset, lampu bunsen, kertas sampul, aluminium foil, dan alat-alat lainnya yang mendukung penelitian ini. Metode Penelitian
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) nonfaktorial dengan 11 ulangan. Masing-masing perlakuannya adalah:: W0 = 0 minggu (tanpa subkultur) dengan masa inkubasi 10 minggu W1 = 2 minggu (subkultur setelah 2 minggu) dengan masa inkubasi 10 minggu W2 = 4 minggu (subkultur setelah 4 minggu) dengan masa inkubasi 10 minggu W3 = 6 minggu (subkultur setelah 6 minggu) dengan masa inkubasi 10 minggu
Universitas Sumatera Utara


Sehingga diperoleh:

Jumlah perlakuan

:4

Jumlah ulangan

: 11

Jumlah eksplan tiap botol : 1

Jumlah seluruh eksplan

: 44

Jumlah seluruh tanaman : 44

Model statistika yang digunakan sebagai berikut:


Yijk = μ + Ti + Σij

i = 1,2,3,4

j = 1,2,3…11

Dimana :

Yijk = nilai pengamatan dari perlakuan ke-i dan ulangan ke-j

μ = nilai tengah umum

Ti = pengaruh perlakuan ke-i

Σij = pengaruh galat percobaan dari perlakuan ke-i dan ulangan ke-j

Jika perlakuan berbeda nyata dalam sidik ragam maka dilanjutkan dengan

Uji Jarak Berganda Duncan (DMRT) pada α = 5% (Steel and Torrie, 1995).

Universitas Sumatera Utara

PELAKSANAAN PENELITIAN
SubKultur Subkultur dilakukan untuk perbanyakan pucuk/tunas/klon tanaman untuk
mendapatkan eksplan dalam jumlah besar dengan cara memindahkan tunas-tunas dari dalam wadah kultur secara aseptik ditanam lagi dalam botol kultur lain yang berisi media dan hormon yang mampu merangsang pertunasan. Subkultur Puar Tenangau dilakukan dengan cara tunas/planlet dikeluarkan dari botol kultur lalu dimasukan ke dalam cawan petri, tunas/planlet dipisah-pisah dengan menggunakan scalpel steril. Tunas-tunas yang telah dipisahkan dimasukan ke dalam media multiplikasi yang baru (MS + 0,5 mg/ NAA + 1 mg/BAP) kemudian dipelihara selama 5 minggu. Sterilisasi Alat-Alat
Sebelum semua alat-alat seperti botol kultur, petridish, gelas ukur, erlenmeyer, pinset, scapel, dan alat-alat gelas lainnya terlebih dahulu direndam dalam detergen dan dicuci bersih dengan air, selanjutnya dikeringkan. Kemudian alat seperti scapel, pipet ukur, pinset dan petridish dibungkus dengan kertas sampul sedangkan erlenmeyer dan gelas ukur permukaannya ditutup dengan aluminium foil. Setelah itu, semua botol kultur dan alat-alat disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121°C dengan tekanan 17,5 psi selama 60 menit. Kemudian alat-alat tersebut dimasukkan ke dalam oven kecuali botol kultur. Pembuatan Media
Media yang digunakan dalam penelitian ini adalah media MS padat. Tahap pertama dalam pembuatan media adalah membuat larutan stok bahan kimia
Universitas Sumatera Utara

hara makro dengan pembesaran 20x, hara mikro dengan pembesaran 200x, larutan iron dengan pembesaran 100x, larutan vitamin dengan pembesaran 200x, sukrosa 90 g, myo-inositol 0,3 g dan agar 1.75 g masing-masing 3 tempat. Tahap berikutnya, sukrosa dimasukkan ke dalam beaker glass yang telah berisi akuades 1000 ml, lalu diaduk dengan menggunakan magnetic stirrer sebagai pengaduk. Kemudian ditambahkan myo-inositol diaduk hingga larut. Dimasukkan unsur hara makro 150 ml, larutan stok hara mikro 15 ml, iron 30 ml dan vitamin 15 ml. Kemudian larutan ditempatkan menjadi 1500 ml. Kemudian diberi zat pengatur tumbuh BAP 2 mg/l. Keasaman diukur dengan pH meter. pH yang dikehendaki adalah 5,8. Untuk mengatur pH yaitu menaikkan atau menurunkan pH dapat digunakan larutan NaOH dan HCl 0,1 N. Kemudian dipindahkan 500 ml ke dalam dua erlenmeyer yang lain sehingga di dapat 500 ml tiap erlenmeyer. Dan masing-masing erlenmeyer ditetap menjadi 1000 ml.
Agar ditambahkan ke dalam erlenmeyer, lalu dipanaskan diatas hot plate dengan pengaduk magnetic stirer sampai larutan menjadi bening (semua agar telah larut). Media siap dipindahkan ke dalam botol kultur berdiameter 2,5 cm sebanyak +15 ml/botol. Kemudian botol kultur tersebut ditutup dengan aluminium foil dan diberi label sesuai dengan perlakuan. Media dalam botol tersebut disterilisasikan di dalam autoklaf dengan tekanan 17,5 Psi, suhu 121°C selama 30 menit. Selanjutnya dapat disimpan dalam ruang kultur sebelum digunakan.
Persiapan Ruang Tanam Seluruh permukaan laminar air flow cabinet sebelumnya dibersihkan
terlebih dahulu dengan di lap menggunakan alkohol 96% lalu di sterilkan dengan sinar Ultra Violet selama 1 jam sebelum proses penanaman dilakukan. Semua alat
Universitas Sumatera Utara

dan bahan yang akan dipakai harus disemprot dengan alkohol 96% sebelum dimasukkan ke dalam laminar air flow cabinet. Hal ini dilakukan untuk menghindari resiko bahan penelitian terkontaminasi. Penanaman
Eksplan yang digunakan adalah tunas-tunas yang diperoleh dari planlet Puar Tenangau yang dikulturkan dalam media subkultur. Planlet dikeluarkan dari botol kultur dengan menggunakan pinset, setelah itu tunas dibersihkan dan dibuang bahagian helaian daunnya sehingga diperoleh ukuran organ propagul (tunas) sepanjang 2 cm. Kemudian organ propagul (tunas) ditanamkan ke dalam botol media berdiameter ±2.5 cm, setiap botol kultur terdiri dari 1 eksplan. Botol kultur diletakkan di rak kultur di bawah cahaya. Kemudian setiap 2 minggu sekali kultur dipindahkan ke media baru (sub kultur) sesuai dengan perlakuannya dan diinkubasi selama 10 minggu. Pemeliharaan Eksplan
Botol-botol kultur diletakkan pada rak kultur di dalam ruang kultur. Ruangan ini diusahakan bebas dari bakteri dan cendawan, dan setiap hari rak-rak kultur disemprot dengan alkohol 96%. Dalam penelitian ini suhu ruangan kultur yang digunakan + 20-22°C dan intensitas cahaya 2000 lux.
Peubah Amatan Persentase Pertumbuhan Eksplan (%)
Kultur dikatakan tumbuh adalah berwarna hijau, secara visual ukuran bertambah dan perubahan morfogenesis. Persentase tumbuh dihitung pada akhir penelitian dengan rumus:
Universitas Sumatera Utara

Persentase tumbuh = Jumlah eksplan yang tumbuh x 100% Jumlah eksplan per perlakuan
Persentase eksplan membentuk tunas (%) Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah
eksplan membentuk tunas. Persentase eksplan membentuk tunas = Jumlah eksplan memb. tunas x100%
Jumlah eksplan per perlakuan Jumlah Tunas (tunas)
Dihitung di akhir penelitian dengan menghitung jumlah tunas baru yang terbentuk dari setiap eksplan. Tinggi Planlet (cm)
Tinggi tanaman diukur pada tunas tertinggi dengan menggunakan kertas milimeter yang diukur dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas tertinggi. Pengukuran dilakukan di akhir penelitian. Jumlah Daun (helai)
Jumlah daun dihitung dari daun yang terbentuk yang telah terbuka sempurna pada eksplan yang dilakukan pada akhir penelitian. Jumlah Akar (buah)
Jumlah akar dihitung dari jumlah akar yang terbentuk dari leher akar (panjang akar > 0.5 cm diukur dengan menggunakan kertas milimeter) pada eksplan yang dilakukan di akhir penelitian.
Universitas Sumatera Utara

Hasil

HASIL DAN PEMBAHASAN

Dari hasil analisis data yang dilakukan, diperoleh bahwa perbedaan periode subkultur berpengaruh nyata terhadap jumlah tunas dan jumlah akar, tetapi tidak berpengaruh nyata terhadap persentase pertumbuhan eksplan, persentase eksplan membentuk tunas, jumlah daun, dan tinggi eksplan.

Persentase Pertumbuhan Eksplan

Data persentase pertumbuhan eksplan dapat dilihat pada Lampiran 1.

Untuk mengetahui data persentase eksplan yang tumbuh dapat dilihat pada

Tabel 1.

Tabel 1. Pengaruh periode subkultur terhadap persentase pertumbuhan eksplan

Periode Subkultur (minggu)

% Eksplan Tumbuh

0 100

2 100

4 100

6 100

Dari Tabel 1 diatas menunjukan bahwa persentase eksplan yang hidup

untuk semua perlakuan sebesar 100 %.

Persentase Eksplan Membentuk Tunas

Data persentase eksplan membentuk tunas dapat dilihat pada Lampiran 2.

Untuk mengetahui data persentase eksplan membentuk tunas dapat dilihat pada

Tabel 2.

Tabel 2. Pengaruh periode subkultur terhadap persentase eksplan membentuk

tunas

Periode Subkultur (minggu)

% Eksplan Tumbuh

0 100

2 100

4 100

6 100

Universitas Sumatera Utara

Dari Tabel 2 diatas menunjukan bahwa persentase eksplan membentuk

tunas untuk semua perlakuan sebesar 100 %

Jumlah Tunas

Data jumlah tunas dan sidik ragamnya dapat dilihat pada Lampiran 3, 4

dan 5. Dari hasil analisis sidik ragam dapat diketahui bahwa perbedaan periode

sub kultur berpengaruh nyata terhadap jumlah tunas. Untuk mengetahui data

rataan jumlah tunas dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3. Pengaruh periode subkultur terhadap jumlah tunas

Periode Subkultur (minggu)

Rataan

0 2.64b

2 5.27a

4 4.45a

6 3.55ab

Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan

tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5 %.

Berdasarkan Uji Jarak Berganda Duncan pada Tabel 3, dapat dilihat bahwa

jumlah tunas pada perbedaan periode subkultur, jumlah tunas tertinggi terdapat

pada perlakuan W1 (subkultur setelah 2 minggu) yaitu 5.27 buah yang berbeda

nyata terhadap perlakuan W0 (tanpa subkultur) yaitu 2.64 buah tetapi tidak

berbeda nyata terhadap perlakuan W2 (subkultur setelah 4 minggu) yaitu 4.45

buah dan W3 (subkultur setelah 6 minggu) yaitu 3.55 buah dan jumlah tunas yang

terendah terdapat pada perlakuan W0 (tanpa subkultur) yaitu 2.64 buah.

AB

Gambar 2. Planlet puar tanpa subkultur (A); planlet puar subkultur setelah 2 minggu (B)
Universitas Sumatera Utara

Tinggi Planlet

Data tinggi planlet dan sidik ragamnya dapat dilihat pada Lampiran 6 dan

7. Dari hasil analisis sidik ragam dapat diketahui bahwa perbedaan periode

subkultur tidak berpengaruh nyata terhadap tinggi planlet. Untuk mengetahui data

rataan tinggi planlet dapat dilihat pada Tabel 4.

Tabel 4. Pengaruh periode subkultur terhadap tinggi planlet

Periode Subkultur (minggu)

Rataan

0 6.29

2 7.50

4 6.16

6 6.53

Jumlah Daun

Data jumlah daun dan sidik ragamnya dapat dilihat pada Lampiran 10 dan

11. Dari hasil analisis sidik ragam dapat diketahui bahwa perbedaan periode

subkultur tidak berpengaruh nyata terhadap jumlah daun. Untuk mengetahui data

rataan jumlah daun dapat dilihat pada Tabel 5.

Tabel 5. Pengaruh periode subkultur terhadap jumlah daun

Periode Subkultur (minggu)

Rataan

0 3.27

2 5.09

4 4.64

6 5.09

Jumlah Akar

Data jumlah akar dan sidik ragamnya dapat dilihat pada Lampiran 10, 11

dan 12. Dari hasil analisis sidik ragam dapat diketahui bahwa perbedaan periode

subkultur berpengaruh nyata terhadap jumlah akar. Untuk mengetahui data rataan

jumlah akar dapat dilihat pada Tabel 6.

Universitas Sumatera Utara

Tabel 6. Pengaruh periode subkultur terhadap jumlah akar

Periode Subkultur (minggu)

Rataan

0 3.45b

2 7.27a

4 6.09a

6 5.73a

Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan

tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5 %.

Berdasarkan Uji Jarak Berganda Duncan pada Tabel 6, dapat dilihat bahwa

jumlah akar pada p