Respon Tunas Gaharu ( Aquilaria malacensis) secara In Vitro terhadap Pemberian ZPT

RESPON TUNAS GAHARU (Aquilaria malaccensis)
SECARA IN VITRO TERHADAP
PEMBERIAN ZPT

SKRIPSI
Oleh :
ESRY NINTA SIPAYUNG
051202009

DEPARTEMEN KEHUTANAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2010

Universitas Sumatera Utara

RESPON TUNAS GAHARU (Aquilaria malaccensis)
SECARA IN VITRO TERHADAP
PEMBERIAN ZPT

SKRIPSI

Oleh :
ESRY NINTA SIPAYUNG
051202009/BUDIDAYA HUTAN

Skripsi Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Kehutanan
Pada Jurusan Kehutanan Fakultas Pertanian
Universitas Sumatera Utara

DEPARTEMEN KEHUTANAN
FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2010

Universitas Sumatera Utara

Judul Skripsi

: Respon Tunas Gaharu ( Aquilaria malacensis) secara In Vitro
terhadap Pemberian ZPT

Nama

: Esry Ninta Sipayung

Nim

: 051202009

Departemen

: Kehutanan

Program Studi

: Budidaya Hutan

Disetujui oleh

Komisi Pembimbing

Dr. Ir. Edy Batara Mulya Siregar, M. S
Ketua

Nelly Anna S.Hut, M.Si
Anggota

Mengetahui,

Dr. Ir. Edy Batara Mulya Siregar, M.S
Ketua Departemen Kehutanan

Universitas Sumatera Utara

RINGKASAN

ESRY NINTA SIPAYUNG; Respon Tunas Gaharu (Aquilaria malaccensis) secara In
vitro terhadap Pemberian ZPT. Dibawah bimbingan EDY BATARA MULYA SIREGAR
dan NELLY ANNA

Gaharu merupakan salah satu hasil hutan nonn kayu yang dihasilkan oleh
tanaman Aquilaria malaccensis. Perbanyakan gaharu hingga saat ini masih menggunakan
teknik konvensional. Secara generatif perbanyakan gaharu masih bergantung pada biji
yang tersedia di alam, sedangkan cara vegetatif ( in vitro, stek pucuk dan stek batang dll)
masih belum memberikan hasil yang maksimal. Sehingga dilakukan penelitian untuk
mengetahui pengaruh pemberian hormon BAP pada media ½ MS terhadap induksi tunas
A. malaccensis. Serta untuk mengetahui pengaruh kombinasim IAA dan GA terhadap
perpanjangan tunas dan induksi akar A. malaccensis.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian hormon BAP dengan konsentrasi
rendah (1 ppm) berpengaruh nyata terhadap panjang tunas A. malaccensis. Pada
pengamatan 14 hari setelah tanam diperoleh panjang tunas gaharu 11.9 mm. Pada
pemebrian IAA dan GA berpengaruh nyata terhadap pertambahan pajang tunas gaharu,
dimana tunas tertinggi terdapat pada perlakuan GA (0 ppm) dan IAA (0.5 ppm) dengan
nilai 18.33 yang diperoleh dari pengamatan 7 hari setelah tanam. Pemberian IAA dan GA
pada setiap perlakuan tidak dihasilkan adanya akar.
Kata Kunci: Gaharu , Induksi Tunas, Hormon IAA, BAP dan GA

Universitas Sumatera Utara

ABSTRACT

ESRY NINTA SIPAYUNG: Response of Gaharu (Aquilaria malaccensis) in in vitro
ways to giving ZPT. Under of Guidance of EDY BATARA MULYA SIREGAR and
NELLY ANNA
Gaharu is one of non wood crops which is originally of Aquilaria malaccensis
plant family. At this time, extension of gaharustill use conventional technic. In generatife
ways extension of gaharu still depends on natural available seeds. Whaile in vegetatife
way ( in vitro, slip of leaf tip, slip of stalk) still didn’t give maximum result. Until
research was done to know the effect of giving hormone BAP on media ½ MS to A.
malaccensisbud induction, and to know the effect of hormone GA anad IAA combination
to bud prolongation and root induction of A. malaccensis.
The result of research showed that by giving low concentration BAP (1 ppm) gave
real effect to the high of gaharu bud. The observation of 14 hst, it was known that the
length of gaharu bud become 11.9 mm. On 7 hst observation the effect of increasing A.
malaccensis bud high, which is the highest bud by giving IAA and GA was found at GA (o
ppm) and IAA 90.5 ppm), value 18.33mm. Giving IAA and GA on each treatment didn’t
give effect to root induction.
Key words : Gaharu, bud induction, IAA, GA and BAP hormone

Universitas Sumatera Utara

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Sembahe pada tanggal 16 November 1986.

Putri dari

Ayahanda K. Sipayung dan Ibunda G br Tarigan merupakan anak ke dua dari lima
bersaudara.
Pada tahun 2005 penulis lulus dari SMU N I, Sidikalang dan pada tahun yang
sama masuk ke FAkultas Pertanian USU melalui jalur SPMB (Seleksi Penerimaan
Mahasiswa Baru). Penulis memilih program studi Budidaya Hutan, Departemen
Kehutanan.
Selama dibangku perkuliahan, penulis merupakan anggota Himpunan Sylva
(HIMAS). Penulis juga aktif dalam Unit Kegiatan Mahasiswa Kebaktian Mahasiswa
Kristen (UKM KMK USU), sebagai asisten praktikum pemuliaan tanaman.
Penulis melaksanakan kegiatan Praktik Pengenalan dan Pengelolaann Hutan
(P3H) di Hutan Mangrove Tanjung Balai dan Hutan Pegunungan Sinabung, Lau Kawar
pada tahun 2007. Pada bulan Juni - Agustus 2009, penulis mengadakan Praktik Kerja
Lapangan (PKL) di PT. Andalas Merapi Timber (AMT), Kabupaten Solok Selatan,
Provinsi Sumatera Barat.

Universitas Sumatera Utara

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena atas
berkat karunia-Nya skripsi ini dapat diselesaikan. Adapun judul skripsi ini adalah “
Respon Tunas Gaharu (Aquilaria malaccensis) secara In Vitro terhadap Pemberian ZPT
”.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada Bapak Dr. Ir.
Edy Batara Mulya Siregar, MS dan Ibu Nelly Anna, S.Hut, M.Si selaku ketua dan
anggota komisi pembimbing yang telah membimbing dan memberikan masukan kepada
penulis hingga skripsi ini dapat diselesaikan dengan baik. Ungkapan terima kasih juga
saya sampaikan kepada ayah, ibu, serta seluruh keluarga atas segala doa dan
dukungannya baik secara moril maupun materi. Serta kepada kak Herawati Pane SP di
Laboratorium Kultur Jaringan Dinas Pertanian Provinsi Sumatera Utara, Medan yang
telah membantu penulis dalam mengarjakan penelitian.
Disamping itu, penulis juga mengucapkan terima kasih kepada semua staff
pengajar dan pegawai di Program Studi Budidaya Hutan Departemen Kehutanan, serta
semua rekan mahasiswa yang tak dapat disebutkan satu per satu di sini yang telah
membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Semoga skripsi ini bermanfaat.

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR ISI

Hal
ABSTRAK ............................................................................................................ ... ii
ABSTRACT............................................................................................................ .. iii
RIWAYAT HIDUP ............................................................................................... .. iv
KATA PENGANTAR ........................................................................................... ... v
DAFTAR TABEL ................................................................................................. .. vi
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ .. vii
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... . viii
PENDAHULUAN
Latar Belakang ...................................................................................................... ... 1
Tujuan Penelitian .................................................................................................. ... 5
Manfaat Penelitian................................................................................................. ... 5
Hipoteis Penelitian ................................................................................................ ... 5
TINJAUAN PUSTAKA
Botani Tanaman Gaharu ........................................................................................ ... 6

Manfaat Gaharu ............................................................................................ ... 8
Kandungan Gaharu ....................................................................................... ... 9
Kultur Jaringan ...................................................................................................... ... 9
Media Murashige and Skoog......................................................................... .. 14
Zat Pengatur Tumbuh ................................................................................... .. 15
Kondisi Lingkungan ..................................................................................... .. 17
METODE PENELITIAN
Tempat dan Waktu Penelitian ................................................................................ .. 19
Bahan dan Alat ...................................................................................................... .. 19
Prosedur penelitian ................................................................................................ .. 20
Induksi Tunas ............................................................................................... .. 20
Induksi Akar dan Perpanjangan Tunas .......................................................... .. 21
Pelaksanaan Penelitian
Sterilisasi Bahan dan Alat ............................................................................. .. 23
Pembuatan Media PDA................................................................................. .. 23
Pengambilan Sampel .................................................................................... .. 23
Sterilisasi eksplan ......................................................................................... .. 24
Induksi Tunas ............................................................................................... .. 25
Pemeliharaan ................................................................................................ .. 25
Penginduksian Akar dan Perpanjangan Tunas ............................................... .. 25

Pengamatan Parameter .................................................................................. .. 27
HASIL DAN PEMBAHASAN
Induksi tunas ......................................................................................................... .. 27
Perpanjangan tuna ................................................................................................. .. 32
Induksi akar........................................................................................................... .. 33

Universitas Sumatera Utara

KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan ........................................................................................................... .. 34
Saran ..................................................................................................................... .. 34
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR TABEL
No

Hal.

1. Persentase pertumbuhan tunas gaharu pada media ½ MS+BAP ................. 29
2. Respon tunas terhadap panjang tunas gaharu pada media ½ MS+BAP ....... 31
3. Rataan tinggi tunas gaharu pada media ½ MS + BAP ............................... 32
4. Rataan tinggi tunas gaharu pada media ½ MS + IAA dan GA .................... 34

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR GAMBAR
No.

Hal

1. Penampilan tunas gaharu pada media ½ MS+BAP ...................................

31

2. Penampilan tunas pada auksin rendah ........................................................

34

3. Penampilan tunas gaharu pada media ½ MS + IAA dan GA ......................

33

4. Bagan penelitian

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR LAMPIRAN
No.

Hal.

1.Komposisi Media Murashige and Skoog
2. Komposisi dan Cara Pembuatan Larutan Stok
3. Bagan Penelitian
4. Data Pembentukan Tunas (Hari) pada Media ½ MS+BAP
5. Data Panjang Tunas (mm) pada Media ½ MS+BAP
6. Sidik Ragam Panjang Tunas pada Media ½ MS+BAP
7. Data pertumbuhan tunas gaharu (hari) pada media ½ MS + IAA dan GA
8. Data pertambahan tunas gaharu (mm) pada media ½ MS + IAA dan GA
9. Sidik ragam pertambahan tunas gaharu pada media ½ MS + IAA dan GA .

Universitas Sumatera Utara

RINGKASAN

ESRY NINTA SIPAYUNG; Respon Tunas Gaharu (Aquilaria malaccensis) secara In
vitro terhadap Pemberian ZPT. Dibawah bimbingan EDY BATARA MULYA SIREGAR
dan NELLY ANNA
Gaharu merupakan salah satu hasil hutan nonn kayu yang dihasilkan oleh
tanaman Aquilaria malaccensis. Perbanyakan gaharu hingga saat ini masih menggunakan
teknik konvensional. Secara generatif perbanyakan gaharu masih bergantung pada biji
yang tersedia di alam, sedangkan cara vegetatif ( in vitro, stek pucuk dan stek batang dll)
masih belum memberikan hasil yang maksimal. Sehingga dilakukan penelitian untuk
mengetahui pengaruh pemberian hormon BAP pada media ½ MS terhadap induksi tunas
A. malaccensis. Serta untuk mengetahui pengaruh kombinasim IAA dan GA terhadap
perpanjangan tunas dan induksi akar A. malaccensis.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian hormon BAP dengan konsentrasi
rendah (1 ppm) berpengaruh nyata terhadap panjang tunas A. malaccensis. Pada
pengamatan 14 hari setelah tanam diperoleh panjang tunas gaharu 11.9 mm. Pada
pemebrian IAA dan GA berpengaruh nyata terhadap pertambahan pajang tunas gaharu,
dimana tunas tertinggi terdapat pada perlakuan GA (0 ppm) dan IAA (0.5 ppm) dengan
nilai 18.33 yang diperoleh dari pengamatan 7 hari setelah tanam. Pemberian IAA dan GA
pada setiap perlakuan tidak dihasilkan adanya akar.
Kata Kunci: Gaharu , Induksi Tunas, Hormon IAA, BAP dan GA

Universitas Sumatera Utara

ABSTRACT
ESRY NINTA SIPAYUNG: Response of Gaharu (Aquilaria malaccensis) in in vitro
ways to giving ZPT. Under of Guidance of EDY BATARA MULYA SIREGAR and
NELLY ANNA
Gaharu is one of non wood crops which is originally of Aquilaria malaccensis
plant family. At this time, extension of gaharustill use conventional technic. In generatife
ways extension of gaharu still depends on natural available seeds. Whaile in vegetatife
way ( in vitro, slip of leaf tip, slip of stalk) still didn’t give maximum result. Until
research was done to know the effect of giving hormone BAP on media ½ MS to A.
malaccensisbud induction, and to know the effect of hormone GA anad IAA combination
to bud prolongation and root induction of A. malaccensis.
The result of research showed that by giving low concentration BAP (1 ppm) gave
real effect to the high of gaharu bud. The observation of 14 hst, it was known that the
length of gaharu bud become 11.9 mm. On 7 hst observation the effect of increasing A.
malaccensis bud high, which is the highest bud by giving IAA and GA was found at GA (o
ppm) and IAA 90.5 ppm), value 18.33mm. Giving IAA and GA on each treatment didn’t
give effect to root induction.
Key words : Gaharu, bud induction, IAA, GA and BAP hormone

Universitas Sumatera Utara

PENDAHULUAN
Latar Belakang
Gaharu merupakan produk Hasil Hutan Bukan Kayu dalam bentuk gumpalan,
serpihan atau bubuk yang memiliki aroma keharuman khas yang bersumber dari
kandungan bahan kimia berupa resin (α-β oleoresin). Gaharu terbentuk dalam jaringan
kayu, akibat pohon terinfeksi penyakit cendawan (fungi) yang masuk melalui luka batang
(patah cabang). Gaharu yang pertama dikenal adalah berbentuk gubal ditemukan di
Assam, India dari pohon jenis Aquilaria agaloccha Rottb pada abad ke-7 (SNI, 1999).
Komoditas gaharu telah cukup lama dikenal masyarakat secara umum. Beberapa
jenis tanaman gaharu yang dikenal antara lain Aquilaria malaccensis (A. malaccensis),
A. filaria, A. hirta, A. agalloccha, A. macrophylum dan beberapa puluh jenis lainnya.
Dari puluhan jenis tanaman yang berpotensi tersebut, A. malaccensis adalah tanaman
penghasil gaharu berkualitas terbaik dengan nilai jual yang sangat tinggi. Jenis ini juga
merupakan jenis yang paling banyak ditemukan di Sumatera Utara (Yusnita, 2009).
A. malaccensis sangat terkenal karena memiliki aroma yang sangat khas yang pada
umumnya banyak dimanfaatkan untuk bahan wewangian dan kosmetik serta pewangi
ruangan. Selain itu, secara klinis juga dapat bermanfaat sebagai obat-obatan, antara lain
obat penghilang stress, gangguan ginjal, hepatitis, sirosis, pembengkakan liver dan ginjal,
TBC, reumatik, kanker, malaria dan radang lambung. Beragamnya pemanfaatan A.
malaccensis berdampak terhadap harga dari gaharu yang terus meningkat. Data terakhir
menyebutkan bahwa saat ini harga A. malaccensis kelas super king adalah Rp 60 juta/kg
sedangkan untuk kelas biasa Rp 2 juta/kg. Semakin tingginya tingkat permintaan akan A.
malaccensis menyebabkan terjadinya eksploitasi A. malaccensis secara besar-besaran
yang terjadi di hutan alam. Saat ini tanaman gaharu berada diambang kepunahan hal ini

Universitas Sumatera Utara

sesuai dengan hasil penelitian dari CITES yang memasukkan tanaman A. malaccensis
kedalam jenis tanaman terancam punah (Apendix II) (Sumarna, 2005).
Untuk menjawab masalah yang sedang terjadi maka perlu diadakan perbaikan
budidaya terhadap tanaman ini. Perbanyakan tanaman A. malaccensis hingga saat ini
masih dilakukan secara generatif. Namun hal tersebut tidak menjawab permasalahan
yang ada. Sulitnya dilakukan budidaya secara generatif disebabkan karena ketersediaan
gaharu dialam yang hanya tersedia pada musim tertentu saja. Sedangkan secara vegetatif
hingga saat ini masih jarang dilakukan karena dalam pelaksanaannya biasanya
membutuhkan waktu yang lama dan membutuhkan tempat yang sangat luas. Oleh sebab
itu di beberapa negara maju telah dikembangkan sistem perbanyakan tanaman secara
vegetatif yang lebih cepat dan hasil yang lebih banyak. Sistem perbanyakan ini dikenal
dengan sistem kultur jaringan atau dapat juga disebut dengan perbanyakan tanaman
secara vegetatif modern.
Teknik In vitro telah banyak dimanfaatkan dan memberikan harapan untuk
mengatasi kesulitan dalam penyediaan bibit

A. malaccensis. Aplikasi teknologi ini

dibidang pertanian juga dimanfaatkan untuk perbanyakan serta konservasi dan perbaikan
tanaman. Pemanfaatan teknik in vitro terutama metode mikropropagasi dan
embriogenesis somatic menjadi alternatif utama dalam pengembangan dan konservasi
gaharu (Kosmiati, 2005).
Kultur jaringan merupakan salah satu teknik perbanyakan tanaman secara in vitro
yang sudah menggunakan teknologi baru. Perbanyakan tanaman dengan kultur jaringan
biasanya dapat menyediakan bibit A. malaccensis yang berkualitas baik dengan jumlah
yang banyak dalam jangka waktu tertentu. Bibit yang dihasilkan biasanya memiliki sifat

Universitas Sumatera Utara

fisiologi dan morfologi yang sama persis dengan induknya dan untuk budidayanya tidak
dipengaruhi oleh keadaan musim. Tunas hipokotil atau bagian meristem yang ditanam
pada media yang mengandung nutrisi atau zat pengatur tumbuh (ZPT) yang tepat akan
menghasilkan tanaman baru dalam waktu singkat dan jumlah yang banyak (Hendaryono
dan Wijayani, 1994).
Teknik kultur jaringan ini memiliki beberapa keuntungan, diperolehnya bibit yang
seragam dalam jumlah besar dan sifat yang sama persis dengan induknya. Teknik ini
sangat bermanfaat untuk tanaman yang diperbanyak secara vegatatif. Adapun tanaman
yang telah berhasil diperbanyak antara lain tanaman hias (misal: anggrek dan mawar),
tanaman obat (misal: purwoceng dan bidara upas), tanaman berkayu (misal: jati dan
cendana), serta tanaman buah-buahan (misal: pisang dan manggis) ( Dinyunita, 2007).
Namun demikian ada kendala teknik yang sering ditemukan sebagai penghambat
keberhasilan teknik kultur jaringan yaitu kurangnya sterilisasi bahan tanaman sehingga
sering terjadi kontaminasi pada biakan serta diperlukan tenaga kerja yang intensif,
terdidik serta mempunyai keterampilan khusus (Mariska dan Sukmadjaja, 2003).
Walau demikian hal ini tidak mengurangi tingkat keberhasilan pembudidayaan
tanaman dengan kultur jaringan. Beberapa peneliti telah berhasil melakukan perbanyakan
tanaman dengan cara kultur jaringan seperti kultur jaringan manggis oleh Mariska dkk,
perbanyakan tanaman gaharu secara in vitro oleh Mariska dkk, kultur ramin oleh Hardi
dkk, kultur cendana oleh Sukmadjaya dll.
Pada tahun 2005 Kosmiati dkk telah melakukan penelitian tentang kultur jaringan
tanaman A. malaccensis. Dari penelitian yang telah dilakukan diketahui bahwa A.
malaccensis dapat diperbanyak secara kultur jaringan dengan menggunakan media yang

Universitas Sumatera Utara

berbeda serta ZPT yang berbeda pula. Dan dari penelitian tersebut diketahui bahwa A.
malaccensis sangat

baik tumbuh apabila dikulturkan pada media ½ MS tanpa

penambahan vitamin dengan ZPT Benzyl amino purin (BAP) dengan konsentrasi 1 ppm.
Berdasarkan uraian diatas penulis tertarik untuk melakukan penelitian lanjutan.
Dimana peneliti tertarik untuk mengkulturkan tanaman A. malaccensis pada media ½ MS
dengan penambahan BAP (1,2 dan 3 ppm) serta menginduksikan akar dan perpanjangan
tunas dengan Giberelin (GA) (0, 0.5 dan 1 ppm) serta Indol Asam Asetat (IAA) (0, 0.5
dan 1 ppm).
Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi BAP pada media
½ MS terhadap induksi tunas A. malaccensis, dan untuk mengetahui pengaruh pemberian
GA dan IAA terhadap pertumbuhan tunas dan induksi akar gaharu A. malaccensis.

Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi tentang alternatif
perbanyakan tunas A. malaccensis secara In vitro.

Hipotesis Penelitian
Adapun hipotesis dari penelitian ini adalah :
1. Pemberian BAP berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan tunas
A. malaccensis
2. Pemberian GA dan IAA berpengaruh nyata terhadap perpanjangan tunas dan
induksi akar A. malaccensis.

Universitas Sumatera Utara

TINJAUAN PUSTAKA

Botani Tanaman Gaharu
Gaharu adalah sejenis resin tapi bukan resin yang dihasilkan oleh pohon gaharu,
melainkan resin yang terbentuk karena adanya infeksi pada pohon tersebut. Infeksi ini
mengakibatkan sumbatan pada pengaturan makanan, sehingga menghasilkan suatu zat
phytalyosin sebagai reaksi dari infeksi tersebut. Infeksi didapat dari hasil perlukaan yang
disebabkan oleh alam (serangan hama dan penyakit seperti serangga, jamur, bakteri) atau
karena sengaja dilukai oleh manusia. Zat phytalyosin inilah yang merupakan resin gubal
gaharu di dalam pohon karas dari jenis Aquilaria spp. Zat yang berbau wangi jika dibakar
ini tidak keluar dari batang gubalnya, tetapi mengendap menjadi satu dalam batang. Hal
ini terjadi pada tanaman yang sakit dan tidak pada pohon yang sehat. Proses inilah yang
menyebabkan terbentuknya gaharu dalam batang. Gubal gaharu adalah bagian gubal
gaharu yang mengandung damar wangi dengan konsentrasi yang lebih rendah
(Wulandari, 2000).
Gaharu diperoleh dari sejenis tumbuhan famili Thymeliaceae dan bermarga
Aquilaria yaitu Aquilaria agaloccha Rox, namun gaharu dapat juga diperoleh dari family
lain yaitu Leguminoceae dan Euphorbiaceae. Saat ini
A. Malaccensis merupakan jenis yang paling baik dalam menghasilkan minyak gaharu
(Tarigan, 2004).
A. malaccensis merupakan salah satu tanaman kehutanan yang telah
dikembangkan dengan teknik kultur jaringan. Tanaman ini merupakan salah satu hasil
hutan non kayu Indonesia yang memiliki nilai jual yang sangat mahal. Potensi gaharu
yang sangat tinggi biasanya berasal dari jenis A. malaccensis,

Universitas Sumatera Utara

A. hirta, A. macrophylum dll. Dan yang paling tinggi hasil gaharunya adalah jenis A.
malaccensis (Sumarna, 2005).
A. malaccensis memiliki morfologi atau ciri-ciri fisiologi yang sangat unik,
dimana tinggi pohon ini mencapai 40 meter dengan diameter 60 cm. Pohon ini memiliki
permukaan batang licin, warna keputihan, kadang beralur dan kayunya agak keras.
Tanaman ini memiliki bentuk daun lonjong agak memanjang, panjang 6-8 cm, lebar 3-4
cm, bagian ujung meruncing. Daun yang kering berwarna abu-abu kehijaun, agak
bergelombang, melengkung, permukaan daun atas-bawah licin dan mengkilap, tulang
daun sekunder 12-16 pasang. Tanaman ini memiliki bunga yang terdapat diujung ranting,
ketiak daun, kadang-kadang di bawah ketiak daun. Berbentuk lancip, panjang sampai 5
mm.

Dan buahnya berbentuk bulat telor, tertutup rapat oleh rambut-rambut yang

berwarna merah. Biasanya memiliki panjang hingga 4 cm lebar 2,5 cm (Tarigan, 2004).
A. malaccensis sesuai ditanam di antara kawasan dataran rendah hingga ke
pergunungan pada ketinggian 0 – 750 meter dari permukaan laut dengan curah hujan
kurang dari 2000 mm/Thn. Suhu yang sesuai adalah antara 27°C hingga 32°C dengan
kadar cahaya matahari sebanyak 70%. Kesesuaian tanah adalah jenis lembut dan liat
berpasir dengan pH tanah antara 4.0 hingga 6.0 (Sumarna, 2005).
Biji yang berkualitas baik amat penting untuk tujuan pembenihan. Buah

A.

malaccensis berbentuk kapsul, dengan panjang 3.5 cm hingga 5 cm, ovoid dan berwarna
coklat. Kulitnya agak keras dan berbaldu. Mengandung 3 hingga 4 biji benih bagi setiap
buah (Sumarna, 2005).
Di Indonesia letak tanaman gaharu menyebar dari Sumatera hingga Irian Jaya.
Dari hasil survei tahun 2001 yang dilakukan oleh ASGARIN diketahui bahwa sisa pohon

Universitas Sumatera Utara

gaharu di daerah penghasil utama gaharu adalah Sumatera 26%, Kalimantan 27% Nusa
Tenggara 5%, Sulawesi 4%, Maluku 6% dan Papua 37% (Tarigan, 2004).
Sampai saat ini sistem produksi gaharu masih sangat tradisional. Biasanya hanya
mengandalkan keberadaan gaharu di hutan secara alami. Sehingga masih dapat
dikategorikan kedalam sistem pertanian ekstraktif, yang artinya tanpa ada perlakuan
budidaya hanya melakukan pengambilan hasil saja (Sumarna, 2005).
Sistem perbanyakan gaharu masih dikerjakan dengan 2 cara yaitu secara generatif
dan secara vegetatif. Perbanyakan tanaman secara generatif masih dilakukan dengan cara
penyemaian biji dan pengambilan anakan atau cabutan langsung dari alam atau hutan.
Namun cara ini kurang dapat menjadi solusi bagi kelangkaan gaharu. Hal ini disebabkaan
karena ketersediaan biji dilapangan yang terbatas. Sedangkan untuk perbanyakan
tanaman secara vegetatif dapat dilakukan dengan teknik stek batang, stek pucuk, cangkok
batang dan kultur jaringan (Tarigan, 2004).
Manfaat Gaharu
Pemanfaatan gaharu hingga saat ini masih dalam bentuk produk bahan baku, yaitu
bentuk kayu bulat, cacahan, bubuk atau fosil kayu yang sudah terkubur. Setiap produk
yang dihasilkan memiliki sifat dan warna yang berbeda. Kayu gaharu memiliki manfaat
yang besar dalam industri perkayuaan di mana kayunya digunakan dalam industri
pembuatan kotak pembungkus, papan lapis, cenderamata, perabot, sepatu, sarung senjata,
chopstick dll. Selain itu gaharu banyak juga digunakan dalam upacara keagamaan Cina,
Yunani, Ayurvedic dan upacara kaum di Tibet. Di Timur Tengah, gaharu biasanya
digunakan sebagai pengharum rumah.

Universitas Sumatera Utara

Selain itu secara klinis gaharu juga dapat digunakan sebagai obat tradisional oleh
masyarakatnya. Seperti obat untuk penyakit ginjal, sakit perut, asma, hepatitis, sironis,
pembengkakan lever, limpa bahan antibiotik untuk TBC, reumatik, kangker, malaria
radang lambung dll. Selain itu gaharu juga sudah dimanfaatkan bukan hanya gubalnya
akan tetapi bagian daun, batang, kulit batang dan akarnya juga sudah dimanfaatkan
sebagai bahan untuk merawat wajah dan menghaluskan kulit (Tarigan, 2004).
Kandungan yang Terdapat pada Gaharu
Dari analisis kandungan kimia yang telah dilakukan gaharu memiliki enam
komponen utama berupa furanoid sesquiterpen diantaranya a-agarofuran,b-agarofuran
dan agarospirol. Selain itu gaharu juga mengandung minyak berupa chromone.
Chromone biasanya dapat menyebabkan bau harum dari gaharu ketika dibakar.
Sementara kandungan

minyak

atsiri yang

banyak

dikandung

gaharu

adalah

sequiterpenoida, cudesmana dan paleman (Sumarna, 2005).

Kultur Jaringan
Kultur jaringan / cultur In Vitro / Tissue Culture adalah suatu teknik untuk
mengisolasi, sel, protoplasma, jaringan, dan organ dan menumbuhkan bagian tersebut
pada nutrisi yang mengandung zat pengatur tumbuh tanaman pada kondisi aseptik,
sehingga bagian-bagian tersebut dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi
tanaman sempurna kembali (Trisetyagunadi, 2008).
Menurut Yusnita (2003) ada beberapa prinsip dasar yang harus diperhatikan
dalam melaksanakan teknik kultur jaringan yaitu :

Universitas Sumatera Utara

a. Mengetahui teori totipotensi sel yang dikemukakan oleh Schleiden dan Schwann
yaitu sel mempunyai kemampuan autonom, bahkan mempunyai kemampuan
totipotensial. Totipotensial adalah kemampuan setiap sel, yang dimbil dari suatu
tempat dan apabila diletakkan pada tempat yang lain dapat tumbuh menjadi
tanaman yang sempurna .
b. Memahami konsep Skoog dan Miller yang menyatakan bahwa regenerasi tunas
dan akar in vitro dikontrol secara hormonal oleh ZPT sitokinin dan auksin.
Organogenesis adalah proses terbentuknya organ seperti tunas atau akar baik
secara langsung dari permukaan eksplan atau secara tidak langsung melalui
pembentukan kalus terlebih dahulu.
c. Memahami sifat kompeten, diferensiasi dan determinasi dimana suatu sel akan
dikatakan kompeten apabila sel atau jaringan tersebut mampu memberikan
tanggapan terhadap signal lingkungan atau signal hormonal.
d. Memahami tata cara perbanyakan tanaman secara kultur jaringan
Dalam melakukan kultur jaringan pekerjaan yang dilakukan meliputi: pemilihan
dan penyiapan tanaman induk sumber eksplan, inisiasi kultur, persiapan media, isolasi
bahan tanam (eksplan), sterilisasi eksplan, inokulasi eksplan, aklimatisasi dan usaha
pemindahan tanaman hasil kultur jaringan ke lapang. Pelaksana harus bekerja dengan
teliti dan serius, karena setiap tahapan pekerjaan tersebut memerlukan penanganan
tersendiri dengan dasar pengetahuan tersendiri (Dinyunita, 2007).
Teknik kultur jaringan ini memiliki beberapa keuntungan apabila dibandingkan
dengan teknik yang lain. Adapun keuntungannya yaitu diperolehnya bibit yang seragam
dalam jumlah besar dan memiliki sifat yang sama persis dengan induknya. Teknik ini

Universitas Sumatera Utara

sangat bermanfaat untuk tanaman-tanaman yang diperbanyak secara vegetatif. Adapun
tanaman yang telah berhasil diperbanyak antara lain tanaman hias (anggrek dan mawar),
tanaman obat (purwoceng dan bidara upas), tanaman berkayu (jati dan cendana), serta
tanaman buah-buahan (pisang dan manggis) (Dinyunita, 2007).
Namun demikian ada beberapa kendala teknik yang sering ditemukan, sebagai
penghambat keberhasilan teknik kultur jaringan ini antara lain, adanya mutasi pada bibit
yang dihasilkan sehingga tidak sama dengan pohon induknya, tingkat keberhasilan
induksi perakaran dari tunas yang telah dibentuk secara

in vitro sedikit, aklimatisasi

(adaptasi tanaman hasil kultur jaringan pada lingkungan yang baru di luar botol kultur)
sering gagal, tingkat keanekaragamannya di setiap generasi turun terutama apabila sering
dilakukan subkultur, kurang sterilisasi bahan tanaman sehingga sering terjadi kontaminasi
pada biakan serta diperlukan tenaga kerja yang intensif, terdidik serta mempunyai
keterampilan khusus (Mariska dan Sukmadjaja, 2003).
Teknik kultur akan berhasil dengan baik apabila syarat yang diperlukan telah
terpenuhi dengan baik. Syarat-syarat tersebut meliputi pemilihan eksplan sebagai bahan
dasar untuk pembentukan kalus, penggunaan medium yang sesuai, keadaan yang aseptik
dan pengaturan udara yang baik. Untuk eksplan tanaman yang baik digunakan adalah
bagian tanaman yang masih muda yaitu bagian meristemnya (Harahap, 2005).
Menurut Hendaryono dan Wijayani (1994) terdapat beberapa teknik

kultur

jaringan tanaman yaitu:
1. Kultur meristem yaitu budidaya jaringan dengan menggunakan eksplan dari
jaringan tanaman yang masih muda

Universitas Sumatera Utara

2. Kultur antera yaitu budidaya jaringan dengan menggunakan serbuksari dari
tanaman tersebut
3. Kultur embrio yaitu memisahkan embrio tanaman yang belum dewasa dan
menumbuhkannya secara kultur jaringan untuk mendapatkan tanaman yang viabel
4. Kultur protoplasma yaitu budidaya jaringan dengan menggunakan eksplan dari
protoplasma. Dimana protoplasma adalah sel hidup yang telah dihilangkan selnya.
Teknik kultur akan berhasil dengan baik apabila syarat yang diperlukan telah
terpenuhi dengan baik. Syarat-syarat tersebut meliputi pemilihan eksplan sebagai bahan
dasar untuk pembentukan kalus, penggunaan medium yang sesuai, keadaan yang aseptik
dan pengaturan udara yang baik. Untuk eksplan tanaman yang baik digunakan adalah
bagian tanaman yang masih muda yaitu bagian meristemnya (Harahap, 2005).
Menurut Santoso dan Nursandi (2004) ada beberapa faktor yang dapat
mempengaruhi keberhasilan kultur jaringan yaitu:
1. Genotipe
Pada beberapa jenis tumbuhan embrio mudah tumbuh akan tetapi pada beberapa
jenis tumbuhan lain sukar untuk tumbuh. Hal ini disebabkan oleh perbedaan
kultivar dari jaringan yang sama
2. Komposisi media makanan
Media untuk pertumbuhanembrio harus mengandung unsur hara makro, unsur
hara mikro dan gula. Faktor penting lainnya yang tidak boleh diabaikan adalah
adanya ion ammonium dan potassium.
3. Oksigen

Universitas Sumatera Utara

Suplai oksigen yang cukup sangat menentukan laju multiplikasi tunas dalam
usaha perbanyakan secara In vitro.
4. Cahaya
Kadang-kadang untuk perkembangan embrio membutuhkan tempat gelap kirakira selama 7-14 hari. Baru dipindah ke tempat terang untuk pembentukan
klorofil.
5. Temperatur
Temperatur optimum yang dibutuhkan umumnya tergantung dari jenis tumbuhan
yang digunakan.Secara normal temperatur yang digunakan adalah antara 220-280
C.
6. Lingkungan yang aseptik
Kondisi lingkungan sangat menentukan terhadap tingkat keberhasilan pembiakan
tanaman dengan kultur jaringan
Perbanyakan melalui kultur jaringan dikatakan berhasil apabila memenuhi
beberapa kriteria, menurut Mariska dan Sukmadjaja (2003) kriteria yang harus dimiliki
adalah:
1. Tidak merubah sifat genetik tanaman induk apabila dilakukan perbanyakan secara
klonal.
2. Seleksi yang kuat pada bahan tanaman yang bebas penyakit.
3. Pemindahan tanaman / bibit hasil kultur jaringan ke dalam tanah tidak sukar.
4. Teknik perbanyakannya tidak terlalu rumit.
5. Kemampuan regenerasi tidak menurun.

Universitas Sumatera Utara

Media Kultur Jaringan
Pada awalnya media kultur jaringan memiliki komposisi yang didasarkan pada
bahan-bahan yang digunakan untuk kegiatan hydroponic yang berkembang sebelumnya.
Biasanya dalam kultur jaringan unsur hara diberikan dalam bentuk garam organik. Pada
perkembangan selanjutnya para peneliti mulai menambahkan vitamin, senyawa kompleks
dan zat pengatur tumbuh (Santoso dan Nursandy, 2004).
Menurut Hendaryono dan Wijayati (1994) menyatakan bahwa dalam kultur
jaringan ada beberapa jenis media yang umum digunakan yaitu:
1. Medium dasar B5 atau Gamborg biasanya digunakan unttuk kultur suspensi sel
kedelai, a alfafa, legume dll
2. Medium dasar White biasanya digunakan untuk kultur akar. Medium ini merupakan
medium dasar dengan konsentrasi garam-garam mineral yang sangat rendah
3. Medium VW biasanya digunakan khusus untuk media anggrek
4. Media WPM biasanya digunakan untuk tanaman berkayu
5. Media MS adalah media yang paling banyak digunakan. Media ini merupakan media
yang sangat lengkap kandungan unsur hara nya dan biasanya diperkaya juga oleh
adanya vitamin dan hormon. Namun untuk berbagai jenis tanaman biasanya media ini
masih tetap digunakan sebagai media dasar, yang berbeda adalah kombinasi maupun
konsentrasi dari media tersebut.
Zat Pengatur Tumbuh ( ZPT)
Konsep ZPT diawali dengan konsep hormon tanaman, hormon ini adalah
senyawa-senyawa organik tanaman yang dalam konsentrasi yang rendah dapat
mempengaruhi fungsi fisiologis dari tanaman. Proses ini seperti pembukaan stomata,

Universitas Sumatera Utara

translokasi serta penyerapan hara. ZPT sangat dibutuhkan sebagai komponen media bagi
pertumbuhan dan diferensiasi. Tanpa penambahan ZPT dalam

medium

biasanya

pertumbuhan tanaman akan sangat lambat. Pembentukan kalus dan organ-organ tanaman
ditentukan oleh penggunaan yang tepat dari ZPT tersebut (Santoso dan Nursandi, 2005).
Auksin digunakan secara luas dalam kultur jaringan untuk merangsang kalus,
suspensi sel dan organ. Golongan auksin yang sering ditambahkan dalam medium adalah
2,4-D (2,4-Dikhloro fenoksiasetat), IAA (Indol Asam Asetat), NAA (Naftalen Asam
Asetat) dan IBA (Indol Buterik Asetat). Dalam kultur jaringan ada sel-sel yang dapat
tumbuh dan berkembang tanpa auksin.
Sedangkan golongan sitokinin yang sering ditambahkan dalam medium antara
lain Kinetin, Zeatin, dan Benzilaminopurin(BAP). Golongan ini merupakan turunan dari
adenin. Sitokinin ini sangat penting peranannya dalam pembelahan sel dan morfogenesis.
Menurut Hendaryono (1994) ada beberapa fungsi sitokonin yang sangat penting bagi
tanaman yaitu:
1. Memacu terbentuknya organogenesis dan morfogenesis
2. Memacu terjadinya pembelahan sel
3. kombinasi antara auksin dan sitokinin akan memacu pertumbuhan kalus.
Menurut Santoso dan Nursandi (2005) menyatakan bahwa penggunaan Giberilin
dalam kultur jaringan tanaman, berperan dalam membantu proses morfogenesis. Tetapi
dalam kultur kalus dimana pertumbuhan tanaman sudah cepat hanya dengan auksin dan
sitokinin, maka penambahan Giberelin sering menghambat.

Universitas Sumatera Utara

Pada umumnya Giberelin terutama GA3 menghambat perakaran. Secara umum
fungsi Giberelin adalah:
1. Mematahkan dormansi
2. Memicu perkecambahan
3. memacu terjadinya proses imbibisi
IAA, NAA dan IBA biasanya digunakan dengan konsentrasi 0.01-10 mg/l. Untuk
percobaan eksplorasi, biasanya konsentrasi yang digunakan 0.01mg/l, 0.1 mg/l dan 1
mg/l dan 10 mg/l. Selain auksin, sitokinin juga sangat dibutuhkan dalam kultur jaringan.
Sitokinin biasanya sangat berpengaruh terutama pada proses pembelahan sel. Biasanya
kedua hormon ini digunakan secara bersama-sama sehingga dihasilkan interaksi terhadap
diferensiasi jaringan tanaman (Mariska, 2002).
Kondisi Lingkungan
Menurut Yusnita (2003) menyatakan bahwa dalam kultur jaringan ada beberapa
faktor yang harus diperhatikan yang berhubungan dengan kondisi lingkungan yaitu:
1)

pH (Keasaman) dimana sel-sel yang dikembangkan dengan kutur jaringan
memiliki toleransi pH yang relatif sempit dan tidak normal antara 5-6. Bila
eksplan sudah tumbuh biasanya pH dalam media umumnya akan naik

2)

Kelembaban dimana biasanya mendekati 100%. Kelembaban sangat berpengaru
pada pola pengembangannya.

3)

Cahaya dimana intensitas cahaya yang rendah dapat mempertinggi embriogenesis
dan organogenesis. Cahaya ultra violet dapat mendorong pertumbuhan dan
pembentukan tunas dari kalus pada intensitas yang rendah. Intensitas cahaya yang

Universitas Sumatera Utara

optimum untuk tanaman pada kultur jaringan 0-1000 lux (inisiasi), 1000-10000
(multiplikasi), 10000-30000 (pengakaran) dan 30000 ke atas untuk aklimatisai.
4)

Temperatur atau suhu juga berpengaruh terhadap kesehatan tanaman yang
dikulturkan. Suhu yang umum digunakan untuk pengkulturan berbagai jenis
tanaman adalah 26±20C. Untuk kebanyakan tanaman suhu yang terlalu rendah
dapat menghambat pertumbuhan tanaman dan suhu yang terlaalu tinggi dapat
membuat tanaman merana.

Masalah dalam Kultur Jaringan
Dalam kegiatan kultur jaringan, tidak sedikit masalah yang dapat terjadi yang
menyebabkan kegagalan dalam kultur jaringan. Permasalahan yang dihadapi biasanya
ada yang dapat diprediksi sebelumnya dan ada yang sulit dipredikasi. Masalah yang biasa
timbul dalam kegiatan kultur jaringan adalah :
a.Kontaminasi
kontaminasi adalah gangguan yang paling sering terjadi dalam kegiatan kultur
jaringan. Kontaminasi biasanya dapat kita lihat dari jenis kontaminannya seperti bakteri,
jamur, virus dll. Selain itu dapat juga berdasarkan waktunya yaitu ada yang dalam
hitungan jam, ada yang dalam hitungan hari dan ada juga yang dalam hitungan bulan atau
minggu, serta berdasarkan apa yang terkontaminasi seperti media atau eksplan.
b. Browning
Browning/pencoklatan adalah suatu karakter yang muncul yang sering
menghambat pertumbuhan dan perkembangan eksplan. Biasanya menyebabkan
perubahan warna pada eksplan ada yang hitam atau cokelat. Hal ini merupakan terjadi

Universitas Sumatera Utara

perubahan aditif dari eksplan yang disebabkan oleh pengaruh fisik maupun biokimia
(memar, luka, atau serangan penyakit).
c. Vitrifikasi
Vitrifikasi umunya terjadi akibat kegagalan pada proses pembentukan daging sel
dan hambatan pada proses pembentukan lignin. Hal ini dapat diatasi dengan

cara

menaikkan sukrosa, menambah pektin, memindahkan eksplan pada suhu 40C selama 15
hari. dll.

Universitas Sumatera Utara

METODE PENELITIAN

Tempat dan Waktu Penelitian
Eksplan dimbil dari desa Bahorok, Kabupaten Langkat Provinsi Sumatera Utara.
Penelitian dilakukan di Laboratorium Kultur Jaringan Dinas Pertanian Propinsi Sumatera
Utara, Medan. Penelitian ini dilaksanakan bulan Februari – Juni 2010.

Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tunas yang berasal dari anakan
A.malaccensis yang berumur 2 bulan. Alumumium foil, alkohol 70 %, aquades, bahan
kimia media MS, zat pengatur tumbuh (BAP, IAA dan GA), deterjen, kloroks, plastik,
karet, label nama, kertas saring, tissu, kapas, anti septik dan fungisida.
Sedangkan alat yang digunakan adalah timbangan analitik, petridis, sendok, pipet
tetes, PH meter, stirer, hotplate, beaker glass, erlenmeyer, gelas ukur, botol kultur,
autoklaf, bunsen, pinset, laminar air flow (LAF), lampu neon 10 watt, cutter, sprayer,
air conditioner dan rak kultur.

Prosedur Penelitian
Penelitian ini terdiri dari dua tahap percobaan yaitu:
1. Induksi tunas
2. Perpanjangan tunas dan induksi akar

Universitas Sumatera Utara

1. Induksi Tunas
Induksi tunas dilakukan dengan menanam bagian pucuk gaharu kedalam media ½
MS yang telah ditambahkan ZPT (BAP) sebagai hormon pemicu pertumbuhan tunas.
Penggunaan BAP dilakukan dengan konsentrasi yang berbeda yaitu 1 ppm, 2 ppm dan 3
ppm.
Tiap konsentrasi dilakukan sebanyak 10 ulangan hingga diperoleh percobaan
sebanyak 30 satuan percobaan yaitu:
NB0 sebanyak 10 ulangan
NB1 sebanyak 10 ulangan
NB2 sebanyak 10 ulangan.
Dimana N adalah media ½ MS
B0 adalah BAP 1 ppm
B1 adalah BAP 2 ppm
B2 adalah BAP 3 ppm
Untuk menganalisis data yang diperoleh dari percobaan I ini dapat dilakukan
dengan menggunakan rancangan acak lengkap non faktorial dengan model matematis
sebagai berikut:
Yij
i

= 1,2,3

j

= 1,2,3

t

= Jumlah Perlakuan

r

= Ulangan

= µ + ti + ∑ij

Universitas Sumatera Utara

Dimana :
Yij= Data yang disebabkan pengaruh perlakuan pada taraf ke i dan ulangan ke j
µ = Nilai tengah umum/ rataan
Ti = Efek yang sebenarnya dari perlakuan pada taraf ke i
∑ij = Pengaruh error dari perlakuan ke i dan ulangan ke j
Apabila hasil analisis sidik ragam berbeda nyata maka dilakukan uji Duncan pada taraf
5% (Bangun, 2008).

2. Induksi Akar dan Perpanjangan Tunas
Tahap ini merupakan

lanjutan dari percobaan pertama. Tunas gaharu yang

digunakan adalah tunas yang tumbuh paling baik pada media ½ MS dengan konsentrasi
BAP tertentu. Kemudian tunas ditanam kembali pada media ½ MS dengan ZPT (GA dan
IAA) dengan konsentrasi yang berbeda.
Pada tahap ini ada 2 faktor perlakuan yang digunakan yaitu:
Faktor 1. GA (Giberelin)
G0

= 0.0 ppm

G1

= 0.5 ppm

G2

= 1.0 ppm

Faktor 2: IAA (Indoel Asam Acid)
I0

= 0.0 ppm

I1

= 0.5 ppm

I2

= 1.0 ppm

Universitas Sumatera Utara

Masing-masing kombinasi dibuat dengan 3 ulangan

sehingga terdapat 27 satuan

percobaan.
GoIo

G0I1

G0I2

G1Io

G1I1

GII2

G2Io

G2I1

G2I2

Untuk menganalisis data yang diperoleh dari percobaan tersebut dapat dilakukan
dengan menggunakan rancangan acak lengkap faktorial dengan model matematis sebagai
berikut:
Yijk
i

= 1,2,3

j

= 1,2,3

k

= 1,2,3

= µ + αi + βj + ( α β)ij + ∑ijk

Dimana :
Yijk

= Respon tanaman yang diamati

µ

= Nilai tengah umum

αi

= Pengaruh taraf ke i dari faktor ZPT IAA dan BA

βj

= Pengaruh taraf ke j dari faktor media MS

(α β)ij = Pengaruh interaksi taraf ke i dari faktor ZPT IAA dan BA dan taraf ke j dari
faktor media ½ MS
∑ijk

= Pengaruh sisa percobaan taraf ke i dari faktor ZPT IAA dan BA dan taraf ke j
dari faktor media MS pada ulangan ke k

Apabila hasil analisis sidik ragam berbeda nyata maka dilakukan uji Duncan pada taraf
5% (Gomez Gomez, 1995).

Universitas Sumatera Utara

Pelaksanaan Penelitian
1. Sterilisasi Alat dan Bahan
Semua alat yang akan digunakan terlebih dahulu dicuci dan dikeringkan,
kemudian dibungkus dengan kertas koran dan disterilkan dengan autoklaf pada tekanan
17.5 Psi (121-1260C) selama 30 menit. Dikeluarkan dan didinginkan, kemudian botol
kultur diberi label nama untuk berbagai perlakuan. Bahan-bahan yang akan kita gunakan
juga harus disterilkan dalam autoklaf dengan tekanan yang sama selama 15 menit.
2. Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan adalah tunas yang diambil dari anakan gaharu yang
berumur 2 bulan. Pengambilan sampel dilakukan pada tanaman yang bebas dari penyakit
serta yang memiliki pucuk yang sehat.
3. Pembuatan Media
Media dibuat dengan menuang stok AB (NH4NO3 dan KNO3) sebanyak 20 ml,
stok C (CaCl2H2O) sebanyak 5 ml, stok D (MgSO47H2O dan KH2PO4) sebanyak 5 ml,
stok E (FeSO4.7H2O dan Na2EDTA) sebanyak 5 ml, stok hara mikro (MnSO4.4H2O,
ZnSO4.7H2O, H3BO3) sebanyak 5 ml,

stok mio inositol sebanyak 1 ml kedalam

erlenmeyer ukuran 1 liter kemudian ditambahkan aquades hingga volume larutan 1 liter.
Diukur pH dari larutan dengan pH meter hingga pH nya 5.6/5.8. Larutan
dipanaskan dengan suhu 700 C dengan api sedang hingga larutan mendidih. Dimasukkan
gula sebanyak 30 gr, tambahkan agar sebanyak 8 gr aduk hingga rata. Tuang larutan ke
dalam 30 botol kultur tambahkan BAP dengan konsentrasi 1, 2, 3 ppm dimasukkan
kedalam botol kultur 10 untuk 1 ppm, 10 untuk 2 ppm dan 10 lagi untuk 3 ppm. Lalu

Universitas Sumatera Utara

ditutup kembali dengan alumunium foil hingga rapat. Botol kultur dimasukkan ke dalam
autoklaf untuk sterilisasi, biarkan selama 1 jam botol disusun pada rak kultur.
4. Sterilisasi Eksplan
Proses sterilisasi eksplan dilaksanakan dengan 2 tahapan yaitu di luar LAF dan di
dalam LAF.
a. Sterilisasi di luar LAF
Pengambilan pucuk dilapangan dilakukan dengan menggunakan cutter yang
steril. Pucuk yang diambil berukuran 3 cm atau 2 daun dari pucuk. Dicuci sebanyak 3
kali dengan air mengalir hingga pucuk beserta daunnya bersih dari debu dan kotoran.
Pucuk yang telah dibersihkan dicuci kembali dengan deterjen, bilas dengan air
mengalir sebanyak 3 kali hingga pucuk benar-benar bersih . Pucuk yang sudah bersih
direndam dengan fungisida selama 1 jam, bilas dengan air mengalir sebanyak 3 kali
hingga tidak ada sisa fungisida yang menempel pada pucuk gaharu.
Dilarutan HgCl2 konsentrasi 0,01 sebanyak 500 ml kedalam beaker glass. Rendam
pucuk selama 15 menit. Cuci dengan aquades hingga bersih. Semprot atau lumuri pucuk
dengan alkohol 90% bilas dengan aquades hingga bersih.
b. Sterilisasi di dalam LAF
Pucuk steril dibawa ke dalam ruang tanam dan diletakkan pada LAF. Rendam
pucuk dalam kloroks 10 % selama 15 menit. Lalu dibilas dengan aquades steril sebanyak
4 kali hingga tidak ada lagi kloroks yang menempel pada pucuk. Pucuk direndam dengan
anti septik dengan kepekatan 20% selama 5 menit dibersihkan dengan aquades steril lalu
dikeringkan dengan kertas saring yang diletakkan pada cawan petri. Pucuk siap ditanam.

Universitas Sumatera Utara

5. Induksi Tunas
Tunas yang sudah steril k dipotong atau dibuang bagian daunnya hingga panjang
tunas yang tersisa 1 cm. Tanam pucuk yang sudah steril pada media yang telah disiapkan.
Bagian pangkal tunas ditanam pada media. Tunas ditanam dengan posisi tegak lurus.
Botol ditutup dengan alumunium foil, plastik dan karet agar udara tidak masuk ke dalam
botol.
6. Pemeliharaan
Eksplan yang telah ditanam pada botol kultur disusun pada rak kultur yang telah
dibersihkan terlebih dahulu. Diatur suhu dan kelembaban dari ruang kultur. Suhu ruang
kultur adalah 210C. Setiap hari botol disemprot dengan alkohol untuk mencegah adanya
virus atau bakteri dan jamur yang dapat menyebabkan kontaminasi. Setiap melakukan
pengamatan rak kultur harus disemprot terlebih dahulu dengan alkohol.
7. Induksi Akar dan Perpanjangan Tunas
Setelah pucuk gaharu menghasilkan tunas dari media dengan ZPT BAP yang
terbaik maka dilakukan lagi pengambilan sampel dari lapangan. Tunas disterilkan seperti
perlakuan diatas. Kemudian tunas yang sudah steril ditanam pada media MS dengan
BAP terbaik hingga diperoleh jumlah tunas yang cukup untuk percobaan kedua. Tunas
yang telah tumbuh kemudian ditanam kembali pada media ½ MS + GA dan IAA dengan
konsentrasi masing-masing adalah 0 ppm, 0,5 ppm dan 1 ppm. Botol kultur tersebut
disusun pada rak kultur. Dan diamati hingga terlihat adanya pertumbuhan tunas dan
pembentukan akar.

Universitas Sumatera Utara

8. Parameter Pengamatan
Parameter yang akan diamati dalam penelitian ini adalah :
1. Konsentrasi BAP berpengaruh terhadap pembentukan tunas A. Malaccensis (hari)
2. Panjang tunas (mm) pengukuran dilakukan dari pangkal tunas hingga ujung tunas
dengan menggunakan kertas milimeter pada pengamatan terakhir
3. Konsentrasi IAA dan GA berpengaruh terhadap perpanjangan tunas A.
Malaccensis (hari) dan induksi akar (hari).

Universitas Sumatera Utara

HASIL DAN PEMBAHASAN
.
Pada penelitian ini eksplan yang digunakan adalah pucuk anakan gaharu berumur
2 bulan yang sehat dan bebas dari serangan hama dan penyakit. Pucuk yang digunakan
adalah berukuran seragam yaitu 1 cm untuk masing-masing perlakuan. Sebelumnya
pucuk yang diunakan telah mengalami proses sterilisasi terlebih dahulu. Untuk eksplan
yang digunakan kondisi sumber eksplan dialam juga berpengaruh terhadap tingkat
keberhasilan kultur jaringan yang kita lakukan.
Tanaman A. malaccensis merupakan tanaman tahunan berkayu yang memiliki
daya multiplikasi relatif lambat (rendah). Ini bukan hanya terjadi pada gaharu saja akan
tetapi terjadi juga pada tanaman berkayu lainnya, seperti manggis, cendana, ramin dll.Hal
ini terlihat pula dari data yang telah diperoleh dimana gaharu yang ditanam dari pucuk
memiliki masa inisiasi tunas yang lambat. Umumnya tanaman tahunan terinduksi kepada
perpanjangan tunas, tidak seperti tanaman semusim yang memiliki daya multiplikasi
yang lebih cepat.

Induksi Tunas
Pucuk A. malaccensis yang ditumbuhkan secara aseptik pada ketiga media yang
diberi perlakuan memiliki waktu bertunas yang sama yaitu 14 hari setelah tanam (hst).
Namun hal ini tidak mempengaruhi terhadap pertumbuhan tunas yang terbentuk. Dimana
dari pengamatan yang telah dilaksanakan kurang lebih 1 bulan diketahui masing-masing
media bahwa persen hidup tunas terbesar terdapat pada media dengan BAP 1 ppm
dengan nilai 80% dari jumlah eksplan yang digunakan. Sedangkan untuk persen mati
terbesar terdapat pada media dengan BAP 2 dan 3 ppm dengan nilai 10%,