Penentuan aktivitas antioksidan ekstrak mahkota dewa, temu putih, sambiloto dan keladi tikus secara in vitro

PENENTUAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
MAHKOTA DEWA, TEMU PUTIH, SAMBILOTO, DAN
KELADI TIKUS SECARA IN VITRO

DEDY IRAWAN

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2006

ABSTRAK
DEDY IRAWAN. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Mahkota Dewa, Temu Putih,
Sambiloto, dan Keladi Tikus Secara In Vitro. Dibimbing oleh GUSTINI SYAHBIRIN
dan DYAH ISWANTINI PRADONO.
Buah mahkota dewa (Phaleria macrocarpa, Boerl), temu putih (Curcuma zeodaria),
sambiloto (Andrographis paniculata, Nees), dan keladi tikus (Typhonium flagelliforme)
berkhasiat sebagai tanaman obat. Tanaman tersebut berpotensi untuk mengobati kanker
dan kandungan senyawa di dalamnya diduga berperan sebagai antioksidan.Penelitian ini
bertujuan menentukan daya antioksidan dari tanaman mahkota dewa, temu putih,

sambiloto, dan keladi tikus dengan menggunakan metode asam tiobarbiturat. Pada
metode ini, asam linoleat dioksidasi dengan udara pada suhu 40 oC selama 8 hari,
sehingga membentuk produk malondialdehida. Malondialdehida yang terbentuk akan
bereaksi dengan asam tiobarbiturat membentuk produk berwarna merah yang serapannya
dapat diukur pada panjang gelombang 532 nm. Potensi antioksidan dari keempat ekstrak
tanaman tersebut dilihat dari kemampuannya dalam menghambat proses oksidasi. Daya
hambat masing-masing tanaman pada konsentrasi 200 ppm untuk ekstrak akuademineral,
air panas, dan etanol secara berturut-berturut sebesar 83,44%, 70,86%, 81,84% (mahkota
dewa), 60,21%, 82,74%, 69,28% (temu putih), 81,45%, 81,45%, 67,96% (sambiloto),
68,60%, 63,53 %, 72,17% (keladi tikus), dan 87,01% (vitamin E).Berdasarkan uji statistik
Anova dan Duncan potensi antioksidan masing-masing tanaman pada konsentrasi 200
ppm jika dibandingkan dengan vitamin E berbeda nyata pada selang kepercayaan 95%.

ABSTRACT
DEDY IRAWAN. In Vitro Determination of Antioxidant Activity of Mahkota Dewa
Extract, Temu Putih, Sambiloto and Keladi Tikus Supervised by GUSTINI SYAHBIRIN
dan DYAH ISWANTINI PRADONO.
Mahkota dewa (Phaleria macrocarpa, Boerl), temu putih (Curcuma zeodaria),
sambiloto (Andrographis paniculata, Nees), and keladi tikus (Typhonium flagelliforme)
are medicinal plants that have potency to cure cancer and compound contained by those

plants were presumed to act as antioxidant. The objective of this study was to determine
the antioxidant capability of mahkota dewa, temu putih, sambiloto, and keladi tikus via
tiobarbituric acid method. In this method, linoleic acid was oxidized with air on 40 oC for
8 days, thus it produced malondialdehyde. The corresponding malondialdehyde would
react with tiobarbituric acid and produced red product for which the absorbance was
measured on wavelength of 532 nm. The antioxidant potency of all plant extracts was
monitored through its capability on inhibiting oxidation. Inhibition capability of the
respective plants on concentration of 200 ppm for aquademineralized, hot water, and
ethanol extract were 83.44, 70.86, and 81.84% (mahkota dewa), 60.21, 82.74, and
69.28% (temu putih), 81.45, 81.45, and 67.96% (sambiloto), 68.60, 63.53, and 72.17%
(keladi tikus), plus 87.01% (vitamin E), respectively. Based on analysis of variance and
Duncan’s test, antioxidant potency of the respective plants on concentration of 200 ppm,
if compared with vitamin E, were significantly different on confidence level of 95%.

PENENTUAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
MAHKOTA DEWA, TEMU PUTIH, SAMBILOTO, DAN
KELADI TIKUS SECARA IN VITRO

DEDY IRAWAN

Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Sains pada
Departemen Kimia

DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2006

Judul

: Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Mahkota Dewa, Temu Putih,
Sambiloto, dan Keladi Tikus Secara In Vitro.
Nama : Dedy Irawan
NIM : G44201030

Disetujui:

Pembimbing I,

Pembimbing II,

Dra. Gustini Syahbirin, M.S.
NIP 131 842 414

Dr. Dyah Iswantini Pradono, M.Agr.
NIP 131 956 706

Diketahui
Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuann Alam
Institut Pertanian Bogor

Dr.Ir. Yonny Koesmaryono, MS
NIP 131 473 999

Tanggal lulus :

PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Judul penelitian ini ialah Penentuan
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Mahkota Dewa, Temu Putih, Sambiloto, dan Keladi Tikus
Secara In Vitro.
Dalam penyusunan karya ilmiah ini penulis banyak mendapatkan bantuan,
bimbingan dan arahan. Oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada Dra.
Gustini Syahbirin MS dan Dr. Dyah Iswantini Pradono, M.Agr. yang telah memberikan
bimbingan dan pengarahan dalam penyusunan karya tulis ini. Ungkapan terima kasih juga
kepada keluarga-keluarga terdekat atas segala dukungan dan doanya. Penghargaan
penulis sampaikan kepada Mas Hery, Pak Sabur, dan Staf-staf Laboratorium Kimia
Organik atas bantuannya hingga penelitian penulis dapat terlaksana. Selain itu, ucapan
terima kasih kepada sahabat-sahabatku Jefri, Ardy, Eng, Joe, Aldi, Marudut, Agung,
Riki, Ara, Stev, Dwi capello, Peris sitanggang, dan Iyan.
Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.

Bogor, April 2006

Dedy Irawan

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Sei-Gerong pada tanggal 30 Desember 1982 dari ayah Timuk
dan Ibu Aminah. Penulis merupakan putra ke-tiga dari empat bersaudara. Tahun 2001
penulis lulus dari SMU YKPP I Plaju dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk IPB
melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI). Penulis memilih Program Studi
Kimia, Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan. Pada tahun 2004
penulis melaksanakan Praktik Kerja Lapangan di PT Biofarma, Bandung.

DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR TABEL........................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................................... vii
DAFTAR LAMPIRAN...................................................................................................viii
PENDAHULUAN ........................................................................................................

1

TINJAUAN PUSTAKA
Temu Putih (Curcuma zeoderia) ...................................................................... 1
Sambiloto (Andrographis paniculata Nees) ............................................................ 2
Mahkota Dewa (Phaleria Macrocarpa, Boerl) ........................................................ 2

Keladi Tikus (Typhonium flagelliforme) ................................................................. 3
Kanker, Radikal Bebas, dan Lipid Peroksida .................................................... 3
Antioksidan........................................................................................................ 4
Asam Tiobarbiturat (TBA) ................................................................................ 5
BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat...................................................................................................
Metode Penelitian ..............................................................................................

5
5

HASIL DAN PEMBAHASAN
Oksidasi Asam Linoleat.....................................................................................
Analisis Potensi Antioksidan ...........................................................................
Potensi antioksidan ekstrak mahkota dewa......................................................
Potensi antioksidan ekstrak temu putih............................................................
Potensi antioksidan ekstrak sambiloto .............................................................
Potensi antioksidan ekstrak keladi tikus ..........................................................
Uji statistik ANOVA dan DUNCAN...............................................................

6
7
7
8
8
8
9

SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan ............................................................................................................ 10
Saran .................................................................................................................. 10
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................................... 10
LAMPIRAN.................................................................................................................... 12

DAFTAR TABEL
Halaman
1

Hasil analisis hidroperoksida .................................................................................... 6

2

Persen inhibisi berbagai ekstrak tanaman ................................................................. 7

DAFTAR GAMBAR
Halaman
1

Profil rimpang temu putih (Curcuma Zeodaria) ..........................................................

2

2

Profil sambiloto (Andrographis paniculata, Nees) ........................................................

2

3

Profil mahkota dewa (Phaleria Macrocarpa, Boerl) ....................................................

2

4

Reaksi peroksida lipid...............................................................................................

4

5

Reaksi antara malondialdehida dengan asam tiobarbiturat.......................................

4

6

Potensi antioksidan daging buah mahkota dewa ......................................................

7

7

Potensi antioksidan temu putih ................................................................................

8

8

Potensi antioksidan sambiloto ..................................................................................

8

9 Potensi antioksidan keladi tikus.................................................................................

8

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1

Diagram alir penelitian ............................................................................................ 13

2

Diagram analisis hidroperoksida dari asam linoleat dengan metode tiosianat........ 14

3

Pembuatan kurva standar .......................................................................................... 14

4

Pengukuran kadar malondialdehida sampel.............................................................. 15

5

Struktur asam linoleat ............................................................................................... 15

6

Struktur vitamin E..................................................................................................... 15

7

Hasil uji potensi antioksidan vitamin E dan kontrol negatif ..................................... 15

8

Absorbansi standar TMP........................................................................................... 16

9

Hasil uji potensi antioksidan dengan metode TBA mahkota dewa........................... 17

10

Hasil uji potensi antioksidan dengan metode TBA temu putih............................... 18

11 Hasil uji potensi antioksidan dengan metode TBA sambiloto ................................. 19
12 Hasil uji potensi antioksidan dengan metode TBA keladi tikus .............................. 20
13 Analisis statistik ekstrak mahkota dewa .................................................................. 21
14 Analisis statistik ekstrak temu putih ........................................................................ 22
15 Analisis statistik ekstrak sambiloto.......................................................................... 22
16 Analisis statistik ekstrak keladi tikus ....................................................................... 23

PENDAHULUAN
Penyakit kanker telah dikenal sebagai
suatu penyakit yang mematikan oleh
kebanyakan masyarakat di Indonesia.
Penyakit ini menyerang manusia tanpa
memandang usia mulai dari anak-anak sampai
dewasa. Selain itu kanker menyerang berbagai
organ tubuh yang tersusun atas sel-sel somatis
yang sering mengalami pergantian sel
(Zakaria 2001). Jenis kanker dapat
digolongkan berdasarkan organ tubuh yang
diserang. Upaya pencegahan maupun
pengobatan penyakit kanker tersebut harus
semakin diperhatikan.
Upaya pencegahan kanker dapat dilakukan
dengan menerapkan gaya hidup sehat melalui
pengaturan pola makan. Cara ini ditempuh
dengan mengurangi makanan yang berlemak
tinggi, menghindari makan instan yang
mengandung bahan pewarna, dan pengawet,
serta memperbanyak mengkonsumsi sayursayuran atau buah-buahan. Sedangkan upaya
pengobatan dapat dilakukan mulai dari
operasi, radioterapi, imunoterapi, dan
kemoterapi yang memerlukan biaya yang
cukup mahal sampai obat alternatif yang dapat
dijangkau oleh masyarakat dan memiliki efek
samping yang kecil.
Umumnya penyakit kanker ditimbulkan
oleh adanya pengaruh radikal bebas yang
menyerang berbagai komponen sel dalam
tubuh, salah satunya adalah nukleotida.
Radikal bebas yang menyerang nukleotida
(DNA/RNA) akan mengubah struktur
nukleotida tersebut yang menyebabkan mutasi
dalam sel (Zakaria 2001).
Salah satu mekanisme untuk mengatasi
radikal bebas ialah melalui antioksidasi.
Untuk menjalankan mekanisme tersebut
diperlukan antioksidan. Antioksidan alami
dapat diperoleh dari berbagai jenis tumbuhtumbuhan. Antioksidan merupakan senyawa
yang dapat melawan radikal bebas dengan
cara peroksidasi. Antioksidan ini dapat
diperoleh dari sayuran misalnya timun yang
mengandung senyawa likopen (Widowati
2004). Menurut penelitian Ernawati (2001),
ekstrak daun sicerek (Clausena excavata
Burm)
mengandung senyawa alkaloid,
steroid, terpenoid, dan flavonoid. Senyawa
tersebut berperan sebagai antioksidan dengan
cara menghambat peroksida lipid sehingga
dapat melindungi tubuh dari penyakit kanker.
Terdapat beberapa contoh tanaman yang
diduga memiliki potensi sebagai antioksidan
diantaranya
mahkota
dewa
(Phaleria
Macrocarpa, Boerl), temu putih (Curcuma

Zeodaria),
sambiloto
(Andrographis
paniculata, Nees), dan
keladi tikus
(Typhonium flagelliforme) (Wijayakusuma
1994). Pendugaan tersebut didasarkan atas
kandungan senyawa aktif yang terdapat pada
keempat jenis tanaman tersebut. Menurut
berbagai hasil penelitian daging buah mahkota
dewa mengandung flavonoid, alkaloid,
terpenoid, saponin, dan senyawa resin
(Harmanto 2002; Winarto 2003).
Pemanfaatan tanaman-tanaman di atas
kebanyakan
masih
merupakan
suatu
pembuktian empiris berdasarkan pengalaman
para pengguna dan masih sedikit pembuktian
secara ilmiah. Oleh karena itu, penelitian
secara ilmiah khususnya mengenai potensi
antioksidan penting dilakukan.
Penelitian ini bertujuan menentukan aktivitas antikosidan mahkota dewa, temu putih,
sambiloto, dan keladi tikus secara in vitro
dengan metode asam tiobarbiturat (TBA).
Analisis ini diharapkan dapat memberikan
informasi ilmiah dari keempat jenis tanaman
tersebut yang diduga memiliki potensi sebagai
antioksidan.

TINJAUAN PUSTAKA
Temu Putih
(Curcuma zeodaria)
Temu putih dengan nama ilmiah Curcuma
zerumbet diklasifikasikan ke dalam dunia
Spermatophyta, filum Angiospermae, kelas
Monocotyledoneae, bangsa Zingiberales, suku
Zingiberaceae, dan marga Curcuma. Jenis
Curcuma zeodaria dapat dilihat pada Gambar
1.
Di Indonesia, temu putih banyak
ditemukan sebagai tumbuhan liar di kawasan
Jawa Barat dan Jawa Tengah, terutama di
lahan yang kurang subur pada daerah dengan
ketinggian 1000 meter di atas permukaan laut.
Zeodary adalah nama asing dari temu putih,
sedangkan nama obat patennya adalah
Leilipen dan Pao Kwun Tan (Flach &
Rumawas 1996).
Rimpang temu putih mengandung
beberapa senyawa kimia, di antaranya minyak
atsiri zingiberin, sineol, prokurkumenol,
kurkumenol, kurkumol, epikurmenol, kurkumadiol, isofuranogermakrena, zederona, zat
pati, minyak lemak, hars, dan lender
(Wijayakusuma 1997). Senyawa yang terkandung dalam temu putih merupakan
turunan (eleman, kadinan, eudesman), dan
tipe rangka lain (Tang & Eisenbrand 1992).

2

Khasiat lain dari tanaman temu putih, yaitu
sebagai antiflogostik, kholeretik, stomakik,
dan antipiretik (Soedibyo et al. 1998).

sebagai tanaman obat. Bentuk biji sambiloto
gepeng kecil dan berwarna coklat, selain itu
tananaman ini mudah diperbanyak dengan biji
(Wijayakusuma et al. 1994).
Senyawa golongan flavonoid telah
diisolasi dari akarnya, yaitu dari senyawa
polimetoksiflavon, andrograpin, panikolin,
dan apipgenin-7,4-dimetil eter (Wijayakusuma et al., 1994). Tanaman ini
mengandung alkaloid dan saponin, di samping
itu daunnya juga mengandung polifenol dan
kulit buahnya mengandung flavonoid.

Gambar 1 Temu putih.

Mahkota Dewa
(Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.)

Secara empiris, rimpang temu putih
digunakan sebagai antiinflamasi (Utami
2000), antioksidan, antikanker, melancarkan
sirkulasi darah, bersifat fibrinolitik, dan
antineoplastik. Ekstrak kasar Curcuma
zeodaria mampu menginhibisi enzim HMG
Co-A
reduktase.
Temu
putih
yang
mengandung
terpenoid,
alkaloid,
dan
flavonoid mempunyai potensi tinggi sebagai
antikanker.
Sambiloto
(Andrographis paniculata Nees)
Tumbuhan dari suku Acanthacea yang
lebih dikenal dengan nama sambiloto, bidoro,
sadiloto, takilo (Jawa), ki oray, ki peurat,
takilo (Sunda), papaitan (Melayu) merupakan
tumbuhan yang menjanjikan khasiat sebagai
obat berbagai penyakit, termasuk AIDS dan
simptom-simptom kelainan sistem kekebalan
tubuh.
Klasifikasi sambiloto termasuk dalam
dunia Spermatophyta, filum Angiospermae,
kelas Dicotyledoneae, bangsa Solanales, suku
Acanthaceae, marga Andrographis, jenis
Andrographis paniculata Nees (Gambar 2).

Mahkota dewa merupakan tanaman yang
berasal dari Papua. Tanaman ini digolongkan dalam dunia Spermatofita, filum
Angiosprmae, kelas Dycotyledoneae, suku
Thymelaeales, marga Thymelaeaceae, dengan
genus Phaleria dan nama spesies Phaleria
macrocarpa (Scheff) Boerl (Gambar 3).
Tanaman ini dikenal juga dengan nama;
mahkota ratu, pusaka dewa, mahkota raja,
trimahkota, buah simalakama, raja obat, pau
(Cina), dan the crown of god (Inggris)
(Harmanto 2001).
Tanaman ini berupa pohon perdu dengan
tajuk pohon bercabang-cabang. Ketinggiannya
sekitar 1,5-2,5 meter, namun jika dibiarkan
bisa mencapai lima meter.

Gambar 3 Buah mahkota dewa.

Gambar 2 Sambiloto.
Sambiloto merupakan tanaman musiman
yang masih suku jeruju-jerujuan, tumbuh liar
di tempat-tempat terbuka seperti di pinggir
jalan, di ladang, tanah kosong yang tanahnya
agak lembab, atau di tanam di pekarangan

Secara empiris tanaman ini dilaporkan
berkhasiat untuk menyembuhkan berbagai
penyakit antara lain: kanker, penyakit hati,
ginjal, diabetes, asam urat, rematik, darah
tinggi, penyakit jantung, lemah syahwat,
sirosis hati, paru-paru, disentri, alergi, flu,
serta berbagai penyakit kulit (Taryono 2002).
Buah mahkota dewa memiliki kandungan
senyawa-senyawa golongan alkaloid dan
saponin terutama pada bagian buah yang
menyebabkan buah makota dewa bersifat
racun (Winarto 2003). Selain itu, mahkota
dewa memiliki kandungan polifenol dan
flavonoid (Harmanto 2002).

3

Keladi Tikus
(Thyponium flageliforme)
Keladi tikus dengan nama lain T.
divaricatum, famili Araceae merupakan salah
satu jenis tumbuhan liar yang berpotensi dapat
mengobati penyakit kanker. Tumbuhan ini
dikenal dengan nama daerah bira kecil, daun
panta susu, kalamoyang, ileus, ki babi dan
trenggiling mentik. Penderita kanker mendapatkan manfaat baik setelah mengonsumsi
sari (juice) keladi tikus tersebut.
Penggunaan keladi tikus sebagai obat
kanker alternatif cukup dikenal masyarakat
sehingga penelitian intensif tentang keladi
tikus ini dari berbagai segi perlu terus
dilakukan. Berkaitan dengan hal tersebut,
maka salah satu aspek yang harus
diperhatikan adalah ketersediaan bahan
tumbuhan ini sebagai obat maupun bahan
kegiatan penelitian. Tanaman keladi tikus
dapat membunuh berbagai jenis sel kanker
dalam waktu yang relatif singkat. Kandungan
kimia yang terdapat dalam keladi tikus belum
banyak diketahui. Sari tanaman keladi tikus
dapat
menghambat
pertumbuhan
dan
menghancurkan
sel
kanker,
serta
menghilangkan efek buruk kemoterapi.
Kanker, Radikal
peroksida

bebas,

dan

Lipid

Kanker merupakan penyakit yang
disebabkan oleh pertumbuhan sel pada
jaringan tubuh secara tidak normal.
Ketidaknormalan tersebut dikarenakan sel
telah termutasi atau telah terjadi perubahan
struktur DNA. Menurut Zakaria (2001), satu
sel saja yang mengalami kerusakan genetik
atau telah terjadi 5-10 mutasi DNA sudah
cukup untuk menghasilkan jaringan kanker.
Pada umumnya, sel baru akan membelah
apabila ada sel yang mati atau rusak sehingga
memerlukan pergantian sel. Pada penyakit
kanker terjadi penurunan atau hilangnya
kontrol terhadap pertumbuhan sel sehingga sel
akan berkembang dengan cepat dan tidak
terkendali.
Perubahan struktur DNA dapat terjadi
melalui berbagai mekanisme. Secara umum
mekanisme tersebut terbagi menjadi tiga.
Pertama, perubahan struktur DNA disebabkan
oleh kesalahan replikasi yang terjadi pada selsel yang rusak digantikan oleh sel-sel yang
baru. Kesalahan replikasi meskipun dengan
sistem perbaikan yang sangat efisien masih
memungkinkan adanya mutasi yang lolos dari
sistem perbaikan (Murray 1999). Sel-sel yang

membelah dengan perlahan, karena sedikitnya
kesempatan hidup untuk memperbaiki DNA
sebelum pembelahan sel. Oleh karena itu
kanker banyak ditemui pada sel-sel somatik
organ yang sering mengalami pergantian sel
(Zakaria 2001).
Kedua, DNA akan mengalami mutasi yang
disebabkan oleh radikal bebas. Pada saat
radikal bebas dalam tubuh berikatan dengan
DNA, maka DNA mengalami perubahan
struktur dan memasuki tahap awal untuk
terjadinya kanker. Selain itu radikal bebas
dapat berikatan dengan sistem perbaikan
DNA sehingga aktivitas dan fungsinya
terganggu. Dengan kata lain proses perbaikan
mutasi DNA tidak dapat berjalan (Zakaria
2001).
Ketiga, perubahan strutur DNA dapat
disebabkan oleh faktor eksternal seperti: virus,
polusi udara, radiasi dan bahan-bahan kimia
yang bersifat karsinogen. Faktor eksternal
tersebut juga dapat membentuk radikal bebas
Sebagai contoh radiasi dari sinar ultraviolet,
sinar X, dan sinar gamma. Selain mengakibatkan mutasi, radiasi tersebut juga dapat pula
membentuk radikal bebas. Bahan kimia yang
bersifat karsinogen pada proses metabolisme
dalam tubuh juga membentuk radikal bebas
(Murray 1999).
Menurut The World Cancer Research
Fund (WCRF) dan The American Institute of
Cancer Reasearch (AICR), penyebab kanker
80-85% berasal dari faktor eksternal dan 1015% karena kesalahan replikasi dan kesalahan
genetik yang diturunkan dari orang tua
(Mangan 2003). Berdasarkan data dari WCRF
dan AICR, kanker dapat dicegah dengan
menangkal faktor eksternal yang dapat
menimbulkan radikal bebas melalui antioksidan yang merupakan benteng strategis
dalam melawan kanker.
Radikal bebas ialah sebuah atom, gugus
atom, atau molekul yang memiliki satu atau
lebih elektron yang tidak berpasangan. Reaksi
radikal bebas sering kali ditandai oleh aneka
ragamnya produk, misalnya klorinasi metana
dapat menghasilkan empat produk. Hal ini
disebabkan oleh tingginya energi radikal
bebas klor sehingga klor ini tidak sangat
reaktif mengenai hidrogen yang akan
diikatnya. Radikal bebas meliputi atom
hidrogen, logam-logam transisi, dan molekul
oksigen (Halliwel 1984). Radikal bebas dapat
terbentuk dari proses metabolisme normal
dalam tubuh. Salah satu contohnya yaitu pada
proses reduksi molekul oksigen dalam
rangkaian transport elektron. Reaksi reduksi

4

molekul oksigen sebagai berikut (Siregar
1992):

R

R.

R

H
Pengaturan ulang

O2 + e¯
O2¯ · + e¯ + 2H+
H2O2 + e¯
OH· + e¯ + H+
OH¯ + H+

O2¯ ·
H2O2
OH· + OH¯
H2O
H2O

O2 + 4e¯ + 4H+

2H2O

H

1. H2O2 + Fe2+
2. H2O2 + Cu+
3. OH· + RH

Fe3+ + OH¯ + OH·
Cu2+ + OH¯ + OH·
H2O + R·

Selain itu, proses fagositosis oleh sel
fagositosik termasuk neutrofil, monosit,
makrofag,
dan
eosinofil
juga
akan
menghasilkan radikal bebas superoksida
(Gitawati 1995). Radikal bebas yang bersifat
tidak stabil dan sangat reaktif dapat
menimbulkan kerusakan berbagai komponen
sel hidup seperti: DNA/RNA, lipid, protein,
karbohidrat, dan gugus tiol non protein.
Radikal bebas juga dapat mengakibatkan
peroksidasi lipid. Peroksidasi lipid merupakan
reaksi yang terjadi antara asam lemak tak
jenuh ganda yang menyusun membran sel
(linoleat, linolenat, dan arakidonat) sehingga
terbentuk radikal lipid peroksida. Hal ini
terjadi karena lipid merupakan molekul yang
paling sensitif terhadap serangan radikal
bebas (Gambar 4).
Reaksi ini terjadi secara berantai dan terus
menerus sampai ada molekul yang
memberikan elektron yang dibutuhkan radikal
bebas atau baru dapat berakhir bila dua buah
gugus radikal bebas saling berinteraksi
membentuk ikatan non radikal. Reaksinya
sebagai berikut: (Murray 1999)
1.
2.

3.

Inisiasi
RH + OH·
Propagasi
R· + O2
ROO· + RH
Terminasi
ROO· + ROO·
ROO· + R·
R· + R·

R· + H2O
ROO·
ROOH + R·
ROOR
ROOR
RR

Diena terkonjugasi

H

o2

PUFA

ROO.

O

H

O.

Radikal
Peroksil
RH
O

Radikal bebas juga dapat dihasilkan dari
berbagai proses kimia atau enzimatik selama
proses metabolisme tubuh yang melibatkan
senyawa organik maupun anorganik:

H
..

H+

O O

O

H

OOH

.
H

R.

H

Endoperoksida

MDA

Hiperperoksida
(ROOH)

Gambar 4 Reaksi peroksida lipid.
Reaksi peroksida lipid akan menghasilkan
produk akhir malondialdehida (MDA) yang
merupakan senyawa dialdehida berkarbon tiga
yang reaktif. Menurut Yagi (1994),
konsentrasi MDA yang dihasilkan dapat
diukur dengan metode TBA, karena MDA
dapat bereaksi dengan asam tiobarbiturat
membentuk produk berwarna merah yang
dapat diukur pada panjang gelombang 532 nm
(Gambar 5).
HS

N

2

OH

CHO
CH2

N

S

N

N

CH

CHO
OH

TBA

OH

OH

C
H

SH

N

CH

2H2O

OH

OH

MDA

N

PRODUK

AIR

Gambar 5 Reaksi antara malondialdehida
dengan asam tiobarbiturat.
Antioksidan
Radikal bebas secara kontinu dibentuk
oleh tubuh. Di samping itu, tubuh memiliki
sistem antioksidan yang dapat menangkal
radikal bebas baik melalui proses enzimatis
atau non-enzimatis. Antioksidan dapat
diartikan sebagai senyawa pemberi elektron
yang diperlukan oleh radikal bebas dalam
rangka menstabilkan dirinya. Dengan
demikian antioksidan dapat menghentikan
pembentukan radikal bebas, mengurangi
radikal bebas, dan memperbaiki kerusakan
yang ditimbulkannya (Atmosukarto 2003).
Antioksidan dapat juga diartikan sebagai
enzim yang dapat menetralkan senyawasenyawa oksigen aktif.

5

Berdasarkan
mekanisme
kerjanya
antioksidan terbagi menjadi tiga, yaitu
antioksidan primer, sekunder, dan tersier.
Antioksidan
primer
berperan
untuk
mengurangi pembentukan radikal bebas baru
dengan memutus reaksi berantai dan
mengubahnya menjadi produk yang lebih
stabil. Antioksidan primer terdiri atas
superoksida dismutase (SOD), katalase, dan
glutation peroksidase. Ketiga antioksidan ini
dapat mengubah radikal superoksida menjadi
air. Antioksidan sekunder berperan mengikat
radikal bebas dan mencegah amplifikasi
radikal. Antioksidan sekunder terdiri atas
vitamin C, vitamin B, vitamin E, β-karoten,
dan lain-lain. Antioksidan tersier terdiri atas
enzim perbaikan DNA, metionin sulfoksida
reduktase dan lain-lain (Kartikawati 1999)
yang berperan sebagai mekanisme biomolekuler.
Antioksidan alami dapat ditemukan dalam
berbagai tumbuh-tumbuhan. Baik berupa
tanaman berkayu, sayur-sayuran, atau buahbuahan. Pada tumbuhan berkayu diketahui
banyak senyawa yang berfungsi sebagai
antioksidan seperti: flavonoid, alkaloid,
senyawa fenol, terpenoid, dan masih banyak
lagi lainnya. Sedangkan pada sayuran atau
buah-buahan diketahui banyak mengandung
vitamin A, vitamin B, vitamin C, vitamin E,
dan karotenoid (β-karoten). Vitamin-vitamin
tersebut diyakini dapat berperan sebagai
antioksidan, sehingga mampu melindungi
tubuh dari penyakit kanker (Atmosukarto
2003).

asam linoleat dengan metode tiosianat.
Pengukuran hidroperoksida dilakukan untuk
menentukan waktu inkubasi asam linoleat.
Menurut Kikuzaki dan Nakatani (1993)
pengukuran potensi antioksidan dengan
metode TBA sebaiknya dilakukan setelah satu
atau beberapa hari dari puncak absorbansi
asam linoleat. Hal ini karena peroksida akan
mengalami dekomposisi membentuk malondialdehida.

BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat
Bahan baku yang digunakan diperoleh dari
peneliti sebelumnya, yaitu temu putih (Pratiwi
2006), sambiloto (Puspitasari 2006), keladi
tikus (Affandi 2006), dan daging buah
mahkota dewa (Salim 2006). Bahan kimia
yang digunakan adalah etanol 75%, amonium
tiosianat 30%, FeCl2 0,02 M dalam HCl 3,5%,
air
bebas
ion,
pereaksi
1,1,3,3tetrametoksipropana (TMP), TBA 1% (b/v)
dalam asam asetat 50%, asam trikloroasetat
(TCA) 20%, asam linoleat 50 mM dalam
etanol 99,8%, bufer fosfat 0,1 M pH 7. Alat
yang digunakan adalah alat-alat kaca, water
bath,
spektrofotometer
spektronik-20,
sentrifus, pipet, tabung reaksi, dan
termometer.

Metode Penelitian

Asam Tiobarbiturat (TBA)

Analisis hidroperoksida dari asam Linoleat
dengan metode Tiosianat (Chen et al. 1996)

Pada penelitian ini digunakan metode
TBA untuk mengukur produk oksidasi asam
linoleat yang bereaksi dengan asam
tiobarbiturat menghasilkan produk berwarna
merah yang diukur pada panjang gelombang
532 nm (Santoso 2001). Uji potensi
antioksidan diukur melalui metode TBA.
Alasan pemilihan metode TBA: 1) metode
TBA merupakan cara yang paling sering
digunakan untuk mengukur peroksidasi asam
lemak pada membran sel dan makanan,. 2)
reaksi TBA diketahui bersifat sensitif
terhadap peroksida lipid, dan 3) reaksi antara
malondialdehida dengan asam tiobarbiturat
akan menghasilkan produk yang sama dengan
reaksi yang terjadi antara lipid peroksida
dengan asam tiobarbiturat (Yagi 1994).
Sebelum diuji potensi antioksidan, terlebih
dahulu dilakukan pengukuran hidroperoksida
yang merupakan produk primer dari oksidasi

Diagram alir penelitian ini dapat dilihat
pada Lampiran 1. Sebelum pengukuran
potensi antioksidan dari masing-masing
ekstrak, dilakukan pengukuran hidroperoksida
sebagai produk primer asam linoleat yang
teroksidasi
dengan
metode
tiosianat
(Lampiran 2). Metode tiosianat mengukur
peroksida
melalui
kompleks
warna
Fe[Fe(SCN)6].
Sebanyak 2 ml bufer fosfat 0,1 M pH 7, 2
ml asam linoleat 50 mM dalam etanol 99,8%,
dan 1 ml air bebas ion diletakkan pada botol
gelap, kemudian campuran diinkubasi pada
suhu 40ºC. Lama inkubasinya sampai tercapai
absorban maksimum.
Setelah tercapai absorbansi maksimum,
selanjutnya ke dalam 50µl campuran yang
telah diinkubasi ditambahkan 6 ml etanol
75%, 50µl amonium tiosianat 30%, dan 50µl
FeCI2 0,02 M dalam HCl 3,5%. Setelah

6

didiamkan 3 menit, absorbansi diukur pada
panjang gelombang 482 nm. Analisis
hidroperoksida diukur setiap hari sampai
tercapai absorbansi maksimum.

Analisis potensi antioksidan dari masingmasing ekstrak dilakukan dengan berbagai
seri konsentrasi larutan uji, yaitu 50, 200, dan
1000 ppm. Uji Potensi antioksidan dilakukan
dengan metode TBA.
Larutan standar 1,1,3,3-tetra metoksi
propana (TMP) konsentrasi 6 M diencerkan
menjadi 0.15, 0.3, 0.6, 0.75, 1.5, dan 3.0 µM
(Lampiran 3). Masing-masing konsentrasi
dipipet sebanyak 1 ml, selanjutnya
ditambahkan 2 ml TCA 20% dan 2 ml TBA
1% (b/v) dalam pelarut asetat 50% (v/v).
Selanjutnya semua tabung diinkubasi pada
suhu 100ºC selama 10 menit dan didinginkan
pada suhu kamar. Setelah dingin, campuran di
atas disentrifugasi pada kecepatan 3000 rpm,
kemudian
absorbansinya
menggunakan
spektrofotometer pada panjang gelombang
532 nm (Yagi 1968).
Sampel dibuat dengan campuran yang
terdiri atas 2 ml bufer fosfat 0,1 M pH 7, 2 ml
asam linoleat 50 mM dalam etanol 99,8%, dan
1 ml larutan uji. Sebagai kontrol negatif
dibuat campuran yang sama seperti di atas,
tetapi 1 ml larutan uji diganti dengan 1 ml air
bebas ion. Sedangkan sebagai pembanding
dibuat campuran yang terdiri atas 2 ml bufer
fosfat 0,1 M pH 7, 2 ml asam linoleat 50 mM
dalam etanol 99,8% yang mengandung tokoferol (vitamin E 200 ppm), dan 1 ml air
bebas ion.
Semua
campuran
reaksi
tersebut
diinkubasi dalam penangas air yang bersuhu
40ºC dengan lama inkubasi berdasarkan hasil
pengukuran hidroperoksida dari asam linoleat.
Campuran
reaksi
itu
diuji
potensi
antioksidannya setelah 1 atau beberapa hari
dari puncak absorban asan linoleat. Masingmasing campuran reaksi diambil 1 ml
kemudian ditambahkan 2 ml TCA 20%, dan 2
ml larutan TBA 1% dalam pelarut asam asetat
50%. Lalu campuran reaksi tersebut
ditempatkan pada penangas air yang bersuhu
100ºC selama 10 menit. Setelah dingin
dilakukan sentrifugasi pada 3000 rpm selama
15 menit, selanjutnya diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 532 nm
(Lampiran 4).

Oksidasi Asam Linoleat
Pengujian aktivitas antioksidan dengan
metode TBA didasarkan pada pengukuran
kadar
malondialdehida
(MDA)
yang
merupakan produk akhir dari reaksi lipid
peroksida (Gambar 5). MDA merupakan
senyawa dialdehida berkarbon tiga yang
reaktif. MDA yang dihasilkan dapat diukur
dengan uji TBA. MDA dapat bereaksi dengan
TBA membentuk produk yang berfluoresensi
dan dapat diukur pada panjang gelombang
532 nm. Sebagai standar digunakan 1,1,3,3tetrametoksipropana (TMP) sehingga dapat
diukur kadar MDA yang terbentuk. TMP
merupakan senyawa turunan MDA yang
cukup stabil. Pengukuran aktivitas antioksidan
dengan metode TBA ini dilakukan setelah
terjadi tingkat oksidasi asam linoleat
maksimum karena pada saat itu juga terbentuk
MDA maksimum yang dihasilkan dari reaksi
oksidasi lipid.
Potensi antioksidan dari tanaman mahkota
dewa, temu putih, sambiloto, dan keladi tikus
dapat
dilihat
dari
kemampuannya
menghambat oksidasi asam linoleat. Struktur
asam linoleat dapat dilihat pada Lampiran 5.
Adanya senyawa metabolit sekunder seperti
alkaloid, flavonoid, tanin, dan saponin diduga
dapat menghambat reaksi oksidasi asam
linoleat.
Hasil pengukuran hidroperoksida
yang merupakan hasil reaksi oksidasi asam
linoleat menunjukkan puncak serapannya
pada hari ke-6 (Tabel 1).
Asam linoleat yang teroksidasi oleh
oksigen pada tahap awal akan membentuk
hidroperoksida. Kadar hidroperoksida ini akan
semakin meningkat dan setelah mencapai
kadar maksimum, hidroperoksida akan
mengalami
dekomposisi
membentuk
malondialdehida yang merupakan produk
akhir
dari
reaksi
peroksida
lipid.
Terbentuknya malondialdehida ini terjadi
pada hari ke-7.
Nilai absorbansi hidroperoksida dari asam linoleat

Absorbansi 482 nm

Analisis Potensi Antioksidan dengan
Metode TBA (Kikuzaki & Nakatani1993)

HASIL DAN PEMBAHASAN

1.6
1.4
1.2
1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
1

2

3

4

5

6

7

Hari ke-

Gambar 11 Nilai absorbansi hidroperoksida
dari asam linoleat.

7

Analisis Potensi Antioksidan

Potensi antioksidan ekstrak mahkota dewa

Pengukuran potensi antioksidan dilakukan
pada hari ke-8 dengan harapan semua
hidroperoksida yang terbentuk dari hasil
oksidasi asam linoleat telah mengalami
dekomposisi
menjadi
malondialdehida
(MDA). Berdasarkan penelitian Salim (2006)
diperoleh 3 ekstrak mahkota dewa, yaitu
ekstrak dengan pelarut akuademineral, air
panas, dan etanol. Setelah itu, ketiga ekstrak
tersebut diuji aktivitas antioksidannya.
Potensi antioksidan dari semua jenis
tanaman dapat diketahui melalui perbandingan nilai absorbansi yang menggambarkan konsentrasi MDA. Nilai absorbansi
berbanding lurus dengan konsentrasi MDA
dan berbanding terbalik dengan potensi
antioksidan. Nilai absorbansi yang rendah
menunjukkan bahwa tanaman memiliki
potensi antioksidan yang tinggi. Hal ini
menunjukkan bahwa sampel dapat menghambat proses oksidasi (Artinya dapat
mengurangi jumlah MDA yang bereaksi
dengan asam tiobarbiturat yang membentuk
produk berwarna merah).
Penelitian ini menggunakan vitamin E
sebagai standar dengan konsentrasi 200 ppm.
Struktur vitamin E dapat dilihat pada
Lampiran 6. Alasan pemilihan vitamin E
sebagai standar adalah pada konsentrasi 200
ppm persen inhibisinya sudah mendekati
100%. Hasil penelitian Satria (2005) daya
hambat vitamin E (200 ppm) dengan metode
TBA sebesar 93,0%, sedangkan hasil
penelitian
Indariani
92005)
potensi
antioksidan vitamin E (200 ppm) dalam
menghambat reaksi oksidasi lipid sampai
92,11%. Pada penelitian ini, vitamin E dengan
konsentrasi 200 ppm memiliki daya hambat
sebesar 87,01%. Nilai daya hambat tersebut
lebih besar daripada ekstraksi akuademineral,
air panas, dan etanol. Hal ini disebabkan
karena kandungan senyawa antioksidan di
dalam vitamin E lebih murni.
Data hasil uji potensi antioksidan vitamin
E dan kontrol negatif dapat dilihat pada
Lampiran 7. Dari hasil pengukuran standar
1,1,3,3-tetrametoksi propana (TMP) diperoleh
regresi linier y = 0,0240X + 0,0269, R=
99,82%. Persamaan regresi tersebut digunakan untuk menghitung kadar MDA dari hasil
pengujian TBA untuk masing-masing ekstrak
(Lampiran 8).

Daya hambat ekstrak tanaman yang diuji,
menggunakan pelarut akuademineral, air
panas dan etanol pada konsentrasi 50, 200,
dan 1000 ppm dapat dilihat pada Tabel 2.

Kontrol Negatif

Gambar 7 Potensi antioksidan daging buah
mahkota dewa.
Daya hambat ekstrak mahkota dewa pada
konsentrasi 50 ppm untuk ketiga jenis pelarut
tergolong cukup besar (lebih dari 50%) dalam
menghambat proses pembentukan MDA.
Konsentrasi MDA pada ekstrak mahkota
dewa dapat dilihat pada Gambar 7.
Hampir semua senyawa metabolit
sekunder bersifat polar. Akuademineral
memiliki tingkat kepolaran lebih tinggi dari
etanol. Ekstraksi akuademineral (50 dan 200
ppm) pada tanaman mahkota dewa memiliki
potensi antioksidan lebih tinggi daripada
ekstrak air panas dan etanol. Hal ini
disebabkan kemampuan ekstraksi pelarut
berbanding lurus dengan tingkat kemurnian
pelarut tersebut. Dalam hal ini akuademineral
lebih murni dari air panas. Sedangkan
ekstraksi etanol (1000 ppm) lebih tinggi
potensinya dibandingkan dengan ekstraksi
akuademineral dan air panas. Hal ini
disebabkan konsentrasi pelarut
sudah
melewati batas maksimum konsentrasi
pembanding (vitamin E 200 ppm), sehingga
diduga ada senyawa lain yang terekstrak.
Hasil uji potensi antioksidan ekstrak mahkota
dewa dapat dilihat pada Lampiran 9.
Ekstraksi akuademineral mahkota dewa
memiliki potensi antioksidan yang cukup baik
pada konsentrasi 200 ppm karena sudah cukup
mendekati nilai daya hambat dari vitamin E
sebagai kontrol positif. Berdasarkan penelitian
Salim (2006), pada uji fitokimia alkaloid,
flavonoid, tanin, dan saponin menunjukkan
hasil uji positif. Senyawa-senyawa tersebut
sangat berperan sebagai zat yang yang mampu
menghambat reaksi oksidasi lipid.
Pada
Gambar 7 terlihat bahwa kontrol negatif /

8

Tabel 2 Persen inhibisi yang diperoleh dari ekstrak tanaman untuk berbagai jenis pelarut

Mahkota dewa
Temu putih
Sambiloto
Keladi tikus

Akuademineral (ppm)
50
200
1000
69,70
83,44
84,34
44,75
60,21
72,24
74,56
81,45
86,17
64,05
68,60
78,66

perlakuan yang tidak diberi ekstrak (tanpa
antioksidan) memiliki konsentrasi MDA yang
tinggi, yaitu 27,2958 µM. Hal ini disebabkan
Tidak adanya senyawa yang mampu
menghambat proses oksidasi.
Potensi antioksidan ekstrak temu putih
Potensi antioksidan ekstrak temu putih juga
menunjukkan nilai daya hambat yang cukup
tinggi pula (Gambar 8). Hasil uji potensi
antioksidan ekstrak temu putih dapat dilihat

50
61,09
71,74
69,46
24,32

Air panas (ppm)
200
70,80
82,74
81,45
63,53

1000
76,24
86,27
76,91
78,66

50
69,28
54,33
54,50
47,72

Etanol (ppm)
200
81,73
69,28
67,96
72,17

1000
86,05
79,44
74,05
75,99

ppm) memiliki daya hambat paling besar jika
dibandingkan dengan ekstrak air panas dan
etanol (Gambar 9). Diduga kandungan
senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid,
tanin, saponin, dan flavonoid yang terdapat
pada ekstraksi akuademineral cukup besar.
Berdasarkan penelitian Puspitasari (2006),
pada uji fitokimia alkaloid dan terpenoid
menunjukkan hasil positif untuk ketiga jenis
pelarut. Sedangkan flavonoid menunjukkan
hasil negatif hanya pada pelarut etanol dan
tanin hanya pada pelarut akuademineral.Daya
hambat pada konsentrasi 200 ppm untuk
pelarut akuademineral dan air panas memiliki
nilai yang sama. Hal ini menunjukkan
akuademineral dan air panas memiliki
kemampuan daya hambat yang sama
meskipun tingkat kemurniannya berbeda.
Hasil uji potensi antioksidan ekstrak
sambiloto dapat dilihat pada Lampiran 11.

Kontrol Negatif

Gambar 8 Potensi antioksidan temu putih.
pada Lampiran 10. Air panas memiliki tingkat
kepolaran yang lebih tinggi dari pada etanol
sehingga diduga banyak terdapat senyawa
metabolit sekunder yang terekstrak. Senyawa
yang memiliki tingkat kepolaran yang tinggi
akan terdistribusi lebih banyak di dalam air
panas. Di samping itu mungkin juga
disebabkan oleh pengaruh suhu dan
kandungan senyawa yang berbeda pada
masing-masing ekstrak yang diuji. Faktor
tersebut menyebabkan jenis pelarut yang
mampu mengekstrak secara maksimal tidak
sama untuk masing-masing jenis ekstrak
tanaman yang diuji, sehingga hasil daya
hambat ekstrak temu putih berbeda dengan
ekstrak mahkota dewa. Berdasarkan penelitian
Pratiwi (2006), pada uji fitokimia alkaloid dan
flavonoid menunjukkan hasil uji positif.
Senyawa-senyawa ini diduga berperan sebagai
antioksidan untuk menghambat reaksi
peroksida lipid.

Potensi antioksidan dari masing-masing
ekstrak ini pada konsentrasi 200 ppm jika
dibandingkan dengan vitamin E (200 ppm)
masih terlihat lebih rendah (Gambar 7).
Meskipun demikian perbedaan potensi
antioksidan antara masing-masing ekstrak
pada konsentrasi 50, 200, dan 1000 ppm tidak
begitu terlihat. Hal ini disebabkan karena
konsentrasi ekstrak terlalu besar dan tidak
sebanding dengan konsentrasi subtrat asam
linoleat.

Potensi antioksidan ekstrak sambiloto
Ekstraksi akuademineral pada ekstrak
sambiloto (konsentrasi 50, 200 dan 1000

Potensi antioksidan ektrak keladi tikus
Ekstraksi akuademineral (50 ppm) ekstrak
keladi tikus memiliki potensi antioksidan

Kontrol Negatif

Gambar 9 Potensi antioksidan sambiloto.

9

lebih tinggi dari pada ekstrak air panas dan
etanol (Gambar 10). Hal ini disebabkan
karena akuademineral memiliki tingkat
kepolaran yang tinggi dibandingkan etanol

Kontrol Negatif

Gambar 10 Potensi antioksidan keladi tikus.
dan lebih murni dari pada air panas, sehingga
diduga banyak senyawa metabolit sekunder
seperti alkaloid dan flavonoid yang memiliki
tingkat kepolaran yang tinggi juga
terdistribusi di dalamnya. Berdasarkan
penelitian Affandi (2006), pada uji fitokimia
Alkaloid, flavonoid, dan tanin menunjukkan
hasil positif. Senyawa-senyawa ini merupakan
senyawa penangkal radikal bebas yang
mampu menghambat reaksi oksidasi.
Pada konsentrasi 200 ppm ekstraksi etanol
memiliki daya hambat yang lebih tinggi Hal
ini disebabkan senyawa yang terkandung pada
ekstrak keladi tikus lebih banyak terdistribusi
pada etanol, meskipun tingkat kepolarannya
lebih rendah dari akuademineral dan air
panas. Berdasarkan hasil tersebut dapat
disimpulkan bahwa daya hambat antioksidan
tidak selamanya berbanding lurus dengan
tingkat kemurnian dan kepolaran dari pelarut
yang digunakan.
Sementara itu, pada konsentrasi 1000 ppm
daya hambat akuademineral dan air panas
memiliki nilai yang sama tetapi lebih tinggi
dari etanol. Hal ini disebabkan, pada
konsentrasi diatas batas maksimal (200 ppm)
memiliki perbedaan potensi antioksidan yang
tidak begitu terlihat, sehingga sulit dibedakan
pengaruh tingkat kemurnian dan kepolaran
suatu pelarut. Hasil uji potensi antioksidan
ekstrak keladi tikus dapat dilihat pada
Lampiran 12.
Berdasarkan hasil penelitian
yang
diperoleh disimpulkan bahwa buah mahkota
dewa, temu putih, sambiloto dan keladi tikus
dengan tiga macam jenis ekstrak, yaitu
akuademineral, air panas dan etanol sangat
berpotensi sebagai antioksidan. Hal ini dapat
dilihat pada konsentrasi 200 ppm nilai daya

hambat masing- masing ekstrak tersebut
mendekati nilai daya hambat vitamin E.
Alkaloid dan flavonoid memberikan hasil
positif pada semua jenis tanaman yang diuji
(Salim 2006). Flavonoid dan alkaloid
merupakan senyawa pereduksi yang baik.
Flavonoid bertindak langsung sebagai
penampung yang baik untuk radikal bebas
hidroksil dan superoksida (Robinson 1995).
Menurut Mangan (2003), zat flavonoid
berfungsi sebagai penangkal radikal bebas
yang
dapat
mengacaukan
sistem
keseimbangan tubuh dan dapat memicu
timbulnya kanker.
Tanin merupakan senyawa yang banyak
dalam tanaman teh. Berdasarkan hasil penelitian Yen (1995) dilaporkan bahwa berbagai
jenis teh memilki aktivitas antioksidan.
Berdasarkan hasil penelitian itu juga tanin
dapat menghambat proses mutasi dan kanker.
Radikal bebas dan menginduksi enzim yang
bersifat sebagai antioksidan.
Saponin di dalam tumbuhan diketahui
telah dapat dimanfaatkan untuk pengobatan.
Saponin yang terkandung dalam tanaman
cuplikan (Physalis angulota Linn.) berkhasiat
sebagai
antitumor
dan
menghambat
pertumbuhan kanker terutama kanker usus
besar (Mangan 2003). Selain itu saponin yang
terdapat dalam tanaman kunyit, tapak dara,
sabung
nyawa, mengkudu, kitolod dan
pegagan memilki khasiat sebagai antikanker.
Uji Statistik ANOVA dan DUNCAN
Uji statistik yang digunakan untuk potensi
antioksidan yaitu dengan ANOVA dan
DUNCAN. Uji ini hanya dilakukan pada
konsentrasi 200 ppm untuk masing-masing
tanaman pada ekstraksi akuademineral, air
panas, dan etanol yang langsung dibandingkan
dengan vitamin E (200 ppm).
Uji statistik ANOVA ekstrak mahkota
dewa, temu putih, sambiloto, dan keladi tikus
menunjukkan hasil yang berbeda nyata. Hal
ini dapat dilihat dari nilai F hitung yang lebih
besar dari F tabel (Lampiran 13). Oleh karena
itu perlu dilakukan uji lanjut dengan
menggunakan uji DUNCAN untuk melihat
apakah ada perbedaan potensi antioksidan
pada ekstraksi akuademineral, air panas,
etanol dan vitamin E pada masing-masing
tanaman. Uji DUNCAN menunjukkan hasil
yang berbeda dari masing-masing ekstrak
tanaman. Hal ini disebabkan karena
kandungan senyawa metabolit sekunder yang
terdapat di dalam ekstrak berbeda sehingga

10

daya hambatnya terhadap pembentukan MDA
berbeda pula.
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Ekstrak mahkota dewa, temu putih,
sambiloto, dan keladi tikus memiliki potensi
sebagai antioksidan berdasarkan kemampuannya dalam menghambat pembentukan
MDA. Data hasil penelitian menunjukkan
bahwa daya hambat terkecil terdapat pada
ekstrak keladi tikus sebesar 24,32% pada
konsentrasi 50 ppm dengan pelarut air panas.
Sedangkan daya hambat terbesar terdapat
pada ekstrak temu putih pada konsentrasi
1000 ppm se-besar 86,27% dengan pelarut
yang sama.
Uji statistik ANOVA masing-masing
tanaman pada konsentrasi 200 ppm untuk
ekstrak akuademineral, air panas, etanol, dan
vitamin E menunjukkan hasil yang berbeda
nyata. Uji statistik DUNCAN menunjukkan
bahwa potensi antioksidannya berbeda.
Saran
Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan
metode yang berbeda untuk menguji aktivitas
antioksidan beberapa tanaman obat. Selain itu
perlu dilakukan uji aktivitas antioksidan tanaman mahkota dewa, temu putih, sambiloto,
dan keladi tikus sebagai antikanker secara in
vivo.

Burm.F). [Skripsi]. Jambi:
Jambi.

Universitas

Flack M, Rumawas F. 1996. Plant Resources
of South East Asia: Plants Yielding Nonseed Carbohydrates. V.9. Bogor: Prosea.
Gitawati R. 1995. Radikal bebas-sifat dan
peran
dalam
menimbulkan
kerusakan/kematian sel. Cermin dunia
kedokteran 102: 33-36.
Halliwel B. 1995. Oxygen radicals. A
commonsense look at their nature and
medical importance. Medical Biology
62:71-77
Harmanto N. 2002 Mahkota Dewa Obat
Pusaka Para Dewa. Jakarta: Agromedia
Pustaka.
Indariani S. 2005. Uji aktivitas antioksidan
ekstrak daun jambu biji (psidium guajava
L.). Pusat studi Biofar-maka,LPPM-IPB.
Kartikawati D. 1999. Studi efek protektif
vitamin C dan E terhadap respon imun
dan enzim antioksidan pada mencit yang
dipapar paraquat [tesis] Bogor: Program
pascasarjana, Institut pertanian Bogor.
Kikuzaki H & Nakatani N. 1993. Antioxidant
effect of some ginger constituents.
Journal of Food Science 58(6);14071410.
Mangan. 2003. Cara bijak Menaklukan
Kanker. Jakarta:Agromedia pustaka.

DAFTAR PUSTAKA
Affandi Y. 2006. Daya hambat ekstrak air dan
etanol
keladi
tikus
(Typhonium
flagelliforme) terhadap enzim tirosin
kinase secara in vitro. [Skripsi]. Bogor:
fakultas matematika dan ilmu pengetahuan
alam, Institut Pertanian Bogor.
Atmosukarto K. 2003. Mencegah penyakit
degeneratif dengan makanan. Cermin
dunia kedokteran 140: 41-49.
Chen J et al. 1996. The Protective effect of tea
on cancer: Human Evidance. Di dalam
Phytochemicals As Bioactive Agents.
Basel: Technomic Publishing Co., inc.
Ernawati MDW. 2001. Aktivitas antioksidan
ekstrak daun sicerek (Clausena eccavata

Murray RK. 1999. Biokimia harper. Hartono
A, penerjemah; Santoso AH,editor.Jakarta:
Penerbit
Buku
Kedokteran
EGC.
Terjemahan dari: Harper’s Biochemistry.
Pratiwi W. 2006. Penetuan daya inhibisi
ekstrak air dan etanol temu putih
(Curcuma zeodaria) terhadap aktivitas
tirosin kinase secara in vitro. [Skripsi].
Bogor: fakultas matematika dan ilmu
pengetahuan alam, Institut Pertanian
Bogor.
Puspitasari MS. 2006. Inhibisi ekstrak air dan
etanol sambiloto (Curcuma zeodaria)
terhadap aktivitas tirosin kinase secara in
vitro.
[Skripsi].
Bogor:
fakultas
matematika dan ilmu pengetahuan alam,
Institut Pertanian Bogor.

11

Robinson T. 1995. Kandungan Organik
Tumbuhan Tinggi. Bandung: Penerbit ITB.
Salim. 2006. Penentuan daya inhibisi ekstrak
air dan etanol daging buah mahkota dewa
(Phaleria macrocarpa (Scheff.)Boerl.)
Terhadap aktivitas enzim tirosin kinase
secara in vitro. [Skripsi]. Bogor: fakultas
matematika dan ilmu pengetahuan alam,
Institut Pertanian Bogor.
Satria E. 2005. Potensi antioksidan dari
daging buah mahkota dewa (Phaleria
macrocarpa (Scheff.) Boerl.) [Skripsi].
Bogor: fakultas matematika dan ilmu
Pengetahuan Alam, Institut Pertanian
Bogor.
Santoso A. 2001. Isolasi senyawa bioaktif
yang berpotensi antioksidan dari daun
benalu the Scurrula atropurpurea (BL.)
danser
[Skripsi].
Bogor:
Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,
Institut Pertanian Bogor.
Siregar P. 1992. Metabolit oksigen
radikalbebas dan kerusakan jaringan.
Cermin Dunia Kedokteran 80:112-115
Soedibyo M et al. 1998. Inventaris Tanaman
Obat Indonesia (II). Jakarta: Depkes RI.
Syukur C, Hernani. 2001.
Budi Daya
Tanaman Obat Komersial. Bogor: Penebar
Swadaya.
Tang W, Eisenbrand G. 1992. Chinese Drugs
of Plant Origin: Chemistry, Pharmacology,
and Use in Traditional and Modern
Medicine. Berlin: Springer Verlag.
Taryono R. 2002. Mahkota Dewa Si Raja
Obat. Warta Balitro 45: 45-49.
Utami KP. 2000. Temu putih redam kanker
leher rahim. Trubus 31 (366):19-20.
Wijaya H. 2005. Mahkota Dewa Obat Pusaka
Para Dewa. www.bhineka.com [4 Mei