Efek Antivirus Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap Virus Dengue In Vitro.

ii

iii

ABSTRAK

Natasha Ninda Pramalista, G0013172, 2017. Efek Antivirus Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap Virus Dengue In Vitro.
Latar Belakang: Virus Dengue adalah virus yang dapat mengakibatkan infeksi
asimtomatik, sampai dengan manifestasi yang berbahaya seperti Dengue
Hemorrhagic Fever (DHF) dan Dengue Shock Syndrome (DSS). Hingga saat ini
penanganan kasus DHF hanya sebatas pada terapi simptomatis dan suportif. Oleh
karena itu, perlu dikembangkan strategi untuk mengatasinya, salah satunya dengan
bahan alam yang berpotensi sebagai antivirus. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui efek antivirus ekstrak etanol rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale
Linn var. rubrum) terhadap virus Dengue secara in vitro.
Metode Penelitian: Subjek dari penelitian ini adalah virus Dengue serotipe 2 strain
New Guinea C (DENV2 NGC) yang diinfeksikan ke dalam cell line Huh-7. Penelitian
dibagi dalam 2 uji, yaitu uji daya hambat ekstrak terhadap DENV-2 yang ditentukan
melalui nilai Inhibitory Concentration 50 (IC50) dengan metode Focus Forming
Unit assay dan uji toksisitas ekstrak terhadap sel Huh-7 yang ditentukan melalui nilai

Cytotoxic Concentration 50 (CC50) dengan metode MTT assay.
Hasil Penelitian: Ekstrak etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var.
rubrum) memiliki nilai IC50 sebesar 16 .08 μg/ml, CC50 sebesar 345.39 μg/ml dan
Selectivity Index ekstrak adalah 21.48.
Simpulan Penelitian: Ekstrak etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn
var. rubrum) diduga dapat menghambat replikasi DENV-2 dan tidak toksik terhadap
sel Huh-7 dengan nilai IC50, CC50 dan indeks selektivitas masing-masing sebesar
16.08 μg/ml, 345.39 μg/ml dan 21.48.

Kata Kunci: Zingiber officinale Linn var. rubrum, virus Dengue, DENV-2, sel
Huh-7.

iv

ABSTRACT

Natasha Ninda Pramalista, G0013172, 2017. Antivirus Effect Ethanol Extracts of Red
Ginger Rhizome (Zingiber officinale Linn var. rubrum) against Dengue Virus In
Vitro.
Background: Dengue virus is a type of virus that causes various reactions, from

asymptomatic infection to harmful manifestations, such as dengue hemorrhagic fever
(DHF) and dengue shock syndrome (DSS). To this day, the treatments of DHF cases
have been limited to symptomatic and supportive therapies only. Therefore, it is
necessary to determine new strategies in facing these cases. One of them is by using
natural ingredients with antiviral potential. The aim of this study is to understand the
antiviral effects of the ethanol extract of red ginger rhizome (Zingiber officinale Linn
var. rubrum) against dengue virus in vitro.
Methods : Subject of this research was Dengue virus serotype 2 strain New guinea C
(DENV2 NGC) which was infected into Huh-7. This research conducted in 2 parts.
First, inhibition test of the extract against DENV-2 assessed by Inhibitory
Concentration 50 (IC50) value with Focus Forming Unit assay method. Second,
toxicity test of the extracts in Huh – 7 cells was assessed by Cytotoxic Concentration
50 (CC50) value by MTT assay method.
Results: Ethanol extract of Red Ginger rhizome (Zingiber officinale Linn var.
Rubrum) had IC50 value about 16.08 μg/ml, CC50 value about 345.39 μg/ml and
Selectivity Index extract is 21.48.
Conclusions: Ethanol extract of Red Ginger rhizome (Zingiber officinale Linn var.
Rubrum) is considered capable of inhibiting DENV-2 replication and is not toxic to
Huh-7 cell line with IC50 score, CC50 score and Selectivity index are each 16.08


μg/ml, 345.39 μg/ml and 21.48 respectively.

Key Words: Zingiber officinale Linn var. rubrum, Dengue virus, DENV-2, Huh-7
cell line.

v

PRAKATA
Puji syukur penulis kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan penyertaanNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Antivirus
Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) terhadap
Virus Dengue In Vitro ”. Penyusunan skripsi ini tidak dapat terselesaikan tanpa
pengarahan, bimbingan, dan dukungan dari berbagai pihak. Untuk itu, penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Prof. Dr. Hartono, dr. M.Si, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas
Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan ijin pelaksanaan penelitian
dalam penyusunan skripsi.
2. Kusmadewi Eka Damayanti, dr., M.Gizi, selaku Ketua Tim Skripsi beserta
Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta yang
telah memberikan ijin pelaksanaan penelitian dalam penyusunan skripsi.
3. Afiono Agung Prasetyo, dr., Ph.D., selaku Pembimbing Utama yang telah

memberikan waktu, bimbingan, dan motivasi kepada penulis.
4. Ratih Dewi Yudhani, dr., M.Sc., selaku Pembimbing Pendamping yang telah
memberikan waktu, bimbingan, dan motivasi kepada penulis.
5. Leli Saptawati, dr., Sp.MK., selaku Penguji Utama yang telah berkenan untuk
menguji dan memberikan kritik serta saran bagi penyusunan skripsi ini.
6. Beti Ernawati D, S.si., Ph.D. dan Hidayati Desti yang telah memberikan
kesempatan untuk melakukan penelitian kolaborasi uji antivirus Dengue in
vitro di Departemen Mikrobiologi FK UI.
7. Keluarga. Papa, Drs. Joko Pramono dan Mama, Dra. Lilis Sugiarti serta Icha
dan Celline atas segala doa dan dukungan yang selalu diberikan setiap waktu.
8. Anindya Tama Teja Diputri, teman seperjuangan satu tim skripsi yang selalu
memberikan motivasi dan dukungan dalam menghadapi segala kendala
sehingga dapat menyusun skripsi ini dengan baik.
9. Dwitia Ayu Iswari dan Yani Dwi Pratiwi, teman satu tim skripsi dan asisten
mikrobiologi yang luar biasa.
10. Yudhistira, yang selalu menemani disaat suka dan duka serta selalu
memberikan doa dan dukungan dalam penyusunan skripsi ini.
11. Laila Ninda, Oktania Imas, Novi Arizha, Gloria Permata dan Claudia Gita
atas dukungan dan doa selama penyusunan skripsi.
Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam skripsi ini, oleh karena itu

kritik dan saran sangat penulis harapkan dalam penyempurnaan skripsi ini. Akhir kata
penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi pembaca serta
menjadi sumbangan bagi ilmu kedokteran selanjutnya
Surakarta, Januari 2017

Natasha Ninda Pramalista

vi

DAFTAR ISI

DAFTAR ISI ...................................................................................................

vii

DAFTAR TABEL ...........................................................................................

xi

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................


xii

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................

xiii

BAB I PENDAHULUAN ...............................................................................

1

A. Latar Belakang Masalah ......................................................................

1

B. Rumusan Masalah ...............................................................................

2

C. Tujuan Penelitian ................................................................................


2

D. Manfaat Penelitian ..............................................................................

3

BAB II LANDASAN TEORI .........................................................................

4

A. Tinjauan Pustaka .................................................................................

4

1. Virus Dengue ................................................................................

4

2. Patogenesis ....................................................................................


5

3. Dengue Hemorrhagic Fever ..........................................................

7

a. Definisi ....................................................................................

7

b. Manifestasi Klinis ...................................................................

7

4. Jahe Merah (Zingiber officinale Linn var. rubrum) ......................

10

a. Taksonomi ...............................................................................


10

b. Habitat Jahe Merah .................................................................

11

c. Morfologi Rimpang Jahe Merah .............................................

11

vii

d. Kandungan Kimia dan Efek Farmakologis Rimpang Jahe Merah 11
e. Ekstraksi Bahan Alam dengan Pelarut Etanol ........................

12

f. Kultur Virus Dengue ...............................................................


13

B. Kerangka Pemikiran ............................................................................

15

BAB III METODE PENELITIAN..................................................................

16

A. Jenis Penelitian ....................................................................................

16

B. Lokasi Penelitian dan Waktu Penelitian .............................................

16

C. Subjek Penelitian.................................................................................


16

D. Identifikasi Variabel Penelitian ...........................................................

17

1. Variabel Bebas ..............................................................................

17

2. Variabel Terikat ............................................................................

17

3. Variabel Luar Terkendali ..............................................................

17

4. Variabel Luar Tidak Terkendali ....................................................

17

E. Definisi Operasional Variabel Penelitian ............................................

17

1. Variabel Bebas ..............................................................................

17

2. Variabel Terikat ............................................................................

18

a. Daya Hambat Ekstrak Herbal terhadap Replikasi Virus Dengue 18
b. Daya Toksik Ekstrak Herbal terhadap Sel Huh-7 ...................

19

3. Variabel Luar Terkendali ..............................................................

21

4. Variabel Luar Tidak Terkendali ....................................................

21

F. Rancangan Penelitian ..........................................................................

22

1. Percent Infectivity .........................................................................

22

viii

2. Mapping 96 Well Flat Bottom Plate – Uji Fokus .........................

24

3. Percent Viability............................................................................

25

4. Mapping 48 Well Flat Bottom Plate-Uji MTT .............................

27

G. Alat dan Bahan ....................................................................................

28

H. Prosedur Penelitian..............................................................................

30

1. Tahap Persiapan DENV ................................................................

30

a. Isolasi Virus Dengue ...............................................................

30

b. Perbanyakan Virus Dengue .....................................................

30

c. Focus Forming Unit Assay......................................................

31

2. Tahap Pengujian Toksisitas dan Penghambatan DENV ...............

32

a. Persiapan Sel ...........................................................................

32

b. Persiapan Ekstrak ....................................................................

33

3. Uji Infektivitas dan Toksisitas .....................................................

33

a. Uji FFU (Focus Forming Unit) ...............................................

33

b. Uji MTT ..................................................................................

38

I. Teknik Analisis Data ...........................................................................

39

BAB IV HASIL PENELITIAN ......................................................................

40

A. Penentuan Nilai Inhibitory Concentration 50 Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) ……………….

40

B. Penentuan Nilai Cytotoxic Concentration 50 Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe Merah (Zingiber officinale Linn Var. Rubrum) ……………….

42

C. Selectivity Index (SI) ...........................................................................

44

ix

BAB V PEMBAHASAN ................................................................................

46

A. Inhibitory Concentration 50 (IC50) ....................................................

46

B. Cytotoxic Concentration 50 (CC50) ...................................................

48

C. Selectivity Index (SI) ...........................................................................

50

D. Kelemahan Penelitian..........................................................................

51

BAB VI PENUTUP ........................................................................................

52

A. Simpulan .............................................................................................

52

B. Saran ....................................................................................................

52

x

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1. Persentase Infektivitas Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah
(Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) Terhadap Replikasi
DENV-2 ........................................................................................

41

Tabel 4.2. Persentase Viabilitas Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah
(Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) terhadap Sel Huh-7 ......

xi

43

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Zingiber officinale Linn. var. rubrum....................................

10

Gambar 3.1. Uji Focus Forming Unit (FFU) .............................................

22

Gambar 3.2. Mapping 96 Well Flat Bottom Plate – Uji FFU ....................

24

Gambar 3.3. Uji 3-(4,5-dimetilthiazol-2-il) 2,5-difenil tetrazolium
bromide ..................................................................................

25

Gambar 3.4. Mapping 48 Well Flat Bottom Plate – Uji MTT ...................

27

Gambar 4.1. Rata – Rata Persentase Infektivitas Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) ............

42

Gambar 4.2. Rata – Rata Persentase Viabilitas Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe Merah (Zingiber Officinale Linn Var. Rubrum) terhadap
Sel Huh-7 ...............................................................................

xii

44

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Perhitungan Focus Forming Unit (FFU) .......................

59

Lampiran 2. Hasil Pembacaan Absorbansi pada ELISA Reader ................

60

Lampiran 3. Foto Kegiatan.........................................................................

61

xiii

Dokumen yang terkait

Efek Antiinflamasi Ekstrak Jahe Merah (Zingiber officinalle roscoe) pada Gigi Kelinci (Oryctolagus cuniculus) (Penelitian In Vivo)

4 99 95

Efek Analgesik Ekstrak Jahe Merah (Zingiber officinalle roscoe) Terhadap Inflamasi Pulpa pada Gigi Kelinci (Oryctolagus cuniculus) (Penelitian in vivo)

7 103 91

Uji Antimutagenik Ekstrak Etanol Rimpang Lengkuas Merah (Alpinia purpurata K. Schum) Pada Mencit Jantan Yang Diinduksi Dengan Monosodium Glutamat (MSG)

12 118 94

Formulasi Sediaan Gel dan Krim dari Ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe)”.

24 174 112

Pengaruh Pemberian Ekstrak Metanol Rimpang Jahe (Zingiber officinale Rosc.) Terhadap Kadar Malondialdehid (MDA) Plasma dan Otot Gastroknemius Mencit Sebelum Latihan Fisik Maksimal

1 39 73

Uji Efek Antiinflamasi Dari Kombinasi Ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)Dan Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica Val.) Dalam Sediaan Topikal Pada Mencit Jantan

17 119 74

Ekstrak terstandar anti rematik berbasis jahe merah (zingiber officinale linn var rubrum)

0 3 2

AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Roscoe) DAN JAHE MERAH (Zingiber AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG JAHE (Zingiber officinale Roscoe) DAN JAHE MERAH (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) TERHADAP SEL KANK

1 2 16

Efek Ekstrak Etanol Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) terhadap Aktivitas Motorik Mencit Swiss Webster Jantan.

7 44 17

EFEK ANTELMINTIK EKSTRAK ETANOL RIMPANG JAHE MERAH (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum) TERHADAP CACING Ascaris suum Goeze SECARA IN VITRO.

0 0 11