ISOlASI FlAVONOID FRAkSI ETIlASETAT DAuN BERINGIN (Ficus benyamina l.) Isolation of flavonoid from ethyl acetate fraction of Beringin leaves (Ficus be- nyamina l.)

  

ISOlASI FlAVONOID FRAkSI ETIlASETAT DAuN BERINGIN

(Ficus benyamina l.)

Isolation of flavonoid from ethyl acetate fraction of Beringin leaves (Ficus be-

nyamina l.)

  

Julia Ratnawati*, Clara Sunardi**, Rani*

• Farmasi FMIPA UNJANI, Cimahi, Jl. Terusan Jendral Sudirman PO Box 148, Cimahi, Jawa Barat **STFI, Bandung Jl. Soekarno Hatta No. 354 (Parakan Resik) Bandung e-mail: juliaratnawati@yahoo.com

  

ABSTRAk

Telah dilakukan isolasi golongan senyawa flavonoid fraksi etil asetat daun beringin (Ficus benyamina L.) yang

diperoleh dari Cimahi Jawa Barat. Flavonoid merupakan salah satu metabolit sekunder yang mempunyai ba-

nyak aktivitas biologi diantaranya aktivitas anti mikroba. Ekstraksi dilakukan dengan cara maserasi meng-

gunakan pelarut metanol, dilanjutkan dengan ekstraksi cair-cair dengan pelarut n-heksana, etil asetat, air.

  

Fraksi etil asetat dipisahkan dengan kromatografi kolom menggunakan eluen campuran n-heksana dan etila-

setat secara gradien dihasilkan empat fraksi gabungan F-I, F-II,F-III, F-IV. Fraksi-II (41-54) dipisahkan lanjut

dengan kromatografi lapis tipis preparatif, pengembang n-heksana: etil asetat (3:5) diperoleh isolat dengan

fluoresensi biru. Data karakterisasi isolat dengan spektrofotometri UV-Vis memberikan panjang gelombang

maksimum 272,8 nm pada pita II dan 343,2 nm pada pita I yang merupakan golongan flavon dan dan dari hasil

spektrofotometri infra merah menunjukkan adanya ikatan O-H, C-H, C=O dan C=C. kata kunci: flavonoid, Ficus benyamina L., fraksi etil asetat

  

ABSTRACT

The isolation of flavonoid compound from ethyl acetate fraction of beringin leaves (Ficus benyamina L.) have

been done. The extraction was prepared with maseration method using methanol solvent, and then followed by

fractination with liquid-liquid extraction using water, ethyl acetate, and n-hexane. Separation method was con-

ducted by column chromatography using eluent gradation with blend of n-hexane and ethyl acetate, and then

continued by preparative thin layer chromatography until the isolate obtained. The purity of isolate was tested

with two dimensional thin layer chromatography and showed one spot which indicated that isolate was pure. The

characterization of isolate was investigated with ultraviolet-visible spectrophotometry and infrared spectropho-

tometry. Ultraviolet-visible spectrophotometry resulted maximum wavelength 272,80 nm (band II) and 343,20

(band I) that included of flavon compound, and infrared spectrophotometry was proved bond of O-H (3405,67

_{-1 -1 -1 -1 -1} cm ), C-H (2919,7 cm ), C=O (1639,2 cm ), C=C (1461,78 cm ), C-O (1103,08 cm ).

  Key words: flavonoid, Ficus benyamina L., ethyl acetate fraction

  Julia Ratnawati*, Clara Sunardi**, Rani* PENDAHuluAN

  Beringin (Ficus benyamina L.) salah satu jenis tanaman dari suku Moraceaae yang terdiri dari 60 marga dan 1.400 jenis (Van Steenis et al., 2008), dimana suku ini berpotensi sebagai sum- ber bahan kimia bioaktif. Beringin berupa pohon besar rimbun banyak ditemukan di Indonesia dan telah banyak dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai pengobatan tadisional. Daunnya biasa digunakan sebagai obat influenza, radang salu- ran nafas, batuk rejan, malaria, radang usus, di- sentri (Fransworth, 1966). Hasil penelitian fraksi etil asetat menunjukkan adanya aktivitas anti- mikroba terhadap mikroba penyebab disentri (Kalvika, 2009). Salah satu kandungan metabolit sekunder pada fraksi etil asetat adalah flavonoid dan golongan ini memiliki banyak aktivitas far- makologi diantaranya sebagai antiinflamasi, an- tioksidan, antimikroba, sehingga perlu dilakukan isolasi terhadap golongan flavonoid tersebut. Fraksi etilasetat diperoleh dari hasil fraksinasi ekstrak metanol dan dari hasil pemisahan lanjut dengan kromatografi kolom dihasilkan isolat yang menunjukkan flavonoid golongan flavon berdasarkan data spektrofotometri UV-Vis

  METODE PENElITIAN Bahan

  Bahan penelitian antara lain daun be- ringin yang diambil secara acak sebagai sampel uji dikumpulkan dari daerah Cimahi dengan usia tanaman 4-7 tahun, metanol, pereaksi AlCl3, uap amonia, serbuk Mg, amil alkohol, kertas saring, pelat pra lapis silica gel GF ₂₅₄ , n-heksana, etil ase- tat, air suling, kloroform, natrium hidroksida 2

  M, asam klorida, natrium asetat, asam borat, si- lica gel 60.

  Alat

  Alat yang digunakan antara lain spektro- fotometer UV-Vis (Shimadzu UV-1700 Pharma- spec), lampu UV 254 nm dan 366 nm, spektrofo- tometer infra merah (Jasco).

  Cara kerja

  Cara kerja dalam penelitian ini terdiri dari beberapa tahapan, yaitu: Penyiapan simplisia dimulai dari pengum- 1. pulan bahan, determinasi, pengolahan ba- han sampai diperoleh serbuk simplisia. Penapisan fitokimia golongan flavonoid 2. Ekstraksi dengan pelarut metanol dan 3. fraksinasi secara ECC dengan pelarut n- heksan, etil asetat, air. Fraksi etil asetat di kromatografi kolom 4. dengan eluen n-heksan, etil asetat secara gradient Pengumpulan fraksi hasil koromatografi 5. kolom yang menunjukkan pola kromato- grafi sama dan dilanjutkan dengan kro- matografi lapis tipis preparatif. Deteksi flavonoid dengan penampak bercak uap amonia, AlCl3 dan lampu UV 366 nm Hasil KLTP dilanjutkan dengan KLT 2 di- 6. mensi Karakterisasi isolat dengan spektrofoto- 7. metri UV-Vis menggunakan beberapa pe- reaksi geser

  HASIl DAN PEMBAHASAN

  Determinasi dilakukan di Herbarium Bandungense, Sekolah Ilmu dan Teknologi Haya- ti ITB dengan sistematika sebagai berikut. Divisi: Spermatophyta, Sub Divisi: Angiospermae, Kelas: ISOLASI FLAVONOID FRAKSI ETILASETAT DAUN BERINGIN (Ficus benyamina L.) Isolation of flavonoid from ethyl acetate fraction of Beringin leaves (Ficus benyamina L.)

  Dicotyledoneae, Bangsa: Urticales, Suku: Mora- niannya melalui KLT 2 dimensi dengan campuran ceae, Marga: Ficus, Jenis: Ficus benjamina L. pengembang yang berbeda kepolarannya, nam- Serbuk simplisia dimaserasi dengan me- pak bercak fluoresensi biru dan tidak menunjuk- tanol hingga dihasilkan ekstrak kental dan sela- kan adanya bercak lain. njutnya di fraksinasi dengan ekstraksi cair-cair Pengembang 1: n-heksan:EtOAc (3:5) Peng- menggunakan pelarut n-heksan, etil asetat, air embang 2: CHCl3 : CH3OH (15:1) Deteksi UV 366 yang berbeda kepolarannya, sehingga dihasilkan nm (Gambar 3). fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi air yang selanjutnya dipantau dengan KLT. Fraksi etil asetat memberikan pemisahan terbaik dengan bercak fluoresensi biru, deteksi sinar UV 366 nm penampak bercak AlCl3 menunjukkan golongan flavonoid (Gambar 1).

  Gambar 2: Bagan isolasi fraksi etil asetat Gambar 1. Kromatogram KLT fraksi etil asetat (Pengembang= n-heksan : EtOAc (3:5))

  Keterangan :

  A. UV 366 nm

  B. Penampak bercak AlCl3

  Pemisahan lanjut fraksi etil asetat dengan kromatografi kolom dilakukan untuk mengha- silkan fraksi yang semi murni dengan eluen n- heksan etil asetat secara gradien. Diperoleh 64

  Gambar 3: KLT 2 dimensi isolat

  fraksi yang dapat dikelompokkan menjadi FI (25- 41) FII(41-54) dan FIII(55-64) setelah dipantau

  Karakterisasai isolat dilakukan dengan dengan KLT. Bagan isolasi fraksi etil asetat (Gam- menggunakan spektrofotometri UV-Vis. Peme- bar 2) FII dipisahkan lanjut dengan KLTP untuk riksaan dengan spektrofotometri UV-Vis dilaku- menghasilkan komponen murni. Hasil KLTP dip- kan pada rentang panjang gelombang 200-550 eroleh isolat yang selanjutnya ditentukan kemur- nm. Spektrum isolat ini ditentukan dalam laru- Julia Ratnawati*, Clara Sunardi**, Rani*

  tan dengan pelarut metanol. Spektrum khas ini berikan informasi yang berarti untuk penafsiran terdiri atas dua panjang gelombang maksimal spektrum serapan. pada rentang 240-285 nm (pita II) dan 300-550 Penambahan pereaksi geser NaOAc meny- (pita I) (Markham, 1988). ebabkan pergeseran -10,3 nm (pita II) dan per-

  Didapatkan hasil spektrum ‘MeOH’ dengan geseran +2,9 nm (pita I) dengan kekuatan yang panjang gelombang maksimal pada pita II adalah meningkat pada pita II dan kekuatan yang menu- 272,80 nm (A=0,370) dan pita I adalah 343,20 run pada pita I (perubahan absorbansi pita II= nm (A=0,271). Hal ini menunjukkan bahwa spek- +0,202 dan pita I= -0,025). Kemudian setelah penambahan pereaksi geser H3BO3 menyebab- trum tersebut termasuk dalam rentang flavonoid. Penafsiran lebih lanjut menurut Tabel 1 rentang kan pergeseran -9,8 nm (pita II) dan pergeseran

• 2,1 nm (pita I) dengan kekuatan yang meningkat serapan tersebut masuk dalam jenis flavon atau pada masing-masing pita (perubahan absorbansi flavonol. Sedangkan penafsiran menurut Gambar 4 spektrum khas kedua pita tersebut menunjuk- pita II= +0,286 dan pita I= +0,014). Hal ini tidak memberikan informasi yang berarti untuk penaf- kan flavonoid jenis flavon.

  Penambahan pereaksi geser NaOH 2M dida- siran spektrum serapan. patkan panjang gelombang maksimal pada pita

  II adalah 386,60 nm (A=0,463) dan pita I adalah 388,50 nm (A=0,464). Kedua pita ini menunjuk- kan pergeseran batokromik +113,8 nm (pita II) dan +45,3 nm (pita I), dengan kekuatan yang tidak menurun (perubahan absorbansi pita II=

• 0,093 dan pita I= +0,193). Penafsiran spektrum ‘NaOH’ berdasarkan pustaka menunjukkan ada- nya gugus OH pada atom C nomor 4’ (Markham,

  Gambar 4. Spektrum UV Vis menggunakan pelarut 1988). MeOH dan MeOH/NaOH 2M

  Penambahan pereaksi geser AlCl3 meny-

  Keterangan : = spektrum ‘MeOH’

  ebabkan pergeseran +61,6 nm (pita II) dan per-

  = spektrum ‘NaOH’

  geseran -4 nm (pita I) dengan kekuatan yang

  = spektrum ‘NaOH’ setelah 5 me-

  menurun pada pita II dan kekuatan yang me- nit ningkat pada pita I (perubahan absorbansi pita

  Tabel 1. Rentang Serapan Spektrum UV-Sinar Tampak

  II= -0,067 dan pita I= +0,027). Kemudian setelah

  Flavonoid (Markham, K.R., 1988)

  penambahan pereaksi geser HCl menyebabkan pergeseran +56,8 nm (pita II) dan pergeseran

• 8 nm (pita I) dengan kekuatan yang meningkat pada kedua pita (perubahan absorbansi pita II=
• 0,157 dan pita I= +0,247). Hal ini tidak mem-

  ISOLASI FLAVONOID FRAKSI ETILASETAT DAUN BERINGIN (Ficus benyamina L.) Isolation of flavonoid from ethyl acetate fraction of Beringin leaves (Ficus benyamina L.)

Tabel 2. Pengukuran Spektrum Serapan Isolat Dengan Penambahan Pereaksi Geser NaOH 2M

  

Tabel 3. Penafsiran Spektrum Dengan Penambahan Pereaksi Geser NaOH (Markham, K.R., 1988)

Tabel 4. Pengukuran Spektrum Serapan Isolat Dengan Penambahan Pereaksi Geser AlCl3 dan HCl

  Gambar 5. Spektrum UV- Vis menggunakan pelarut MeOH, MeOH/AlCl3 dan AlCl3/HCl Keterangan: = spektrum ‘MeOH’

  = spektrum ‘AlCl3’ = spektrum ‘AlCl3/HCl’ Julia Ratnawati*, Clara Sunardi**, Rani* Gambar 6: Spektrum UV Vis menggunakan pelarut MeOH, NaOAc dan NaOAc /H3BO3

  Keterangan : = spektrum ‘MeOH’ = spektrum ‘NaOAc’ = spektrum ‘NaOAc’ setelah 5 menit = spektrum ‘NaOAc /H3BO3’ Tabel 5. Pengukuran Spektrum Serapan Isolat Dengan Penambahan Pereaksi Geser NaOAc dan H3BO3

  Van Steenis, CGGJ. 2008. Flora. Pradnya Paramita.

  kESIMPulAN

  Jakarta. 163-167 Fraksi etil asetat daun beringin (Ficus ben-

  jamina

  L.) mengandung flavonoid golongan fla- von.

  DAFTAR PuSTAkA

  Fransworth. 1966. Biological and Phytochemical Screening of Plants, Journal of Pharmaceu-

  tical Sciences, vol. 55, 243-269

  Kalvika. 2009. Pengujian Aktivitas Ekstrak Meta-

  nol dan Fraksi Daun Beringin (Ficus benya- mina L.) terhadap Escherichia coli, Salmo- nella typhi, Shigella dysentriae. Tugas Akhir

  Sarjana Jur Farmasi, FMIPA Unjani, 1-48,

  56 Markham KR. 1988. Cara Mengidentifikasi Fla-

  vonoid, terjemahan Kosasih Padmawinata,

  ITB. Bandung. 208