DAFTAR ISI UJI AKTIVITAS ANTIRADIKAL EKSTRAK ETANOL 70% BUNGA SELASIH (Ocimum sanctum L.) DAN PENENTUAN KANDUNGAN POLIFENOL.
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL...........................................................................................ii
HALAMAN PENGESAHAN............................................................................iii
MOTTO..............................................................................................................iv
PERSEMBAHAN ..............................................................................................v
DEKLARASI .....................................................................................................vi
KATA PENGANTAR .......................................................................................vii
DAFTAR ISI......................................................................................................x
DAFTAR TABEL..............................................................................................xii
DAFTAR GAMBAR .........................................................................................xv
DAFTAR LAMPIRAN......................................................................................xvii
INTISARI...........................................................................................................xviii
BAB I
PENDAHULUAN .......................................................................1
A. Latar Belakang .................................................................................1
B. Perumusan Masalah .........................................................................4
C. Tujuan Penelitian .............................................................................4
D. Tinjauan Pustaka ..............................................................................4
1. Tanaman Selasih ..................................................................4
a. Morfologi Tanaman .................................................4
b. Kedudukan Taksatanaman Selasih Dalam
Sisitematika Tumbuhan...........................................5
c. Kandungan Kimia ....................................................5
2. Metode Penyarian..................................................................5
x
a. Maserasi..................................................................6
b. Perkolasi ...................................................................7
c. Penyari berkesinambungan....................................8
3. Radikal Bebas.......................................................................10
4. Antiradikal................ ..........................................................11 ]
5. Metode Pengukuran ..........................................................14
6. Senyawa fenol dan Polifenol ...............................................17
7. Spektrofotometer .................................................................19
E. Hipotesa…………………………….. .............................................22
BAB II
METODE PENELITIAN..............................................................23
A. Jenis Penelitian…………………….................................................23
B. Definisi Operasional Penelitian……………… ..............................23
C. Alat dan Bahan………………………............................................24
D. Jalan Penelitian………………………............................................25
E. Cara Analisis…………………………. ..........................................30
BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN....................................................31
A. Determinasi Tanaman…………………….. ...................................31
B. Pembuatan Serbuk Simplisia…………...........................................31
C. Ekstraksi……………………………..............................................31
D. Uji Aktivitas Antiradikal dengan DPPH .........................................32
E.
Penetapan waktu untuk mencapai IC50 (TIC50) ...............................43
F.
Penetapan Kadar Fenol Total................. ........................................52
BAB IV
KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................58
A. Kesimpulan .........................................................................................58
xi
B. Saran ...................................................................................................58
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................59
DAFTAR LAMPIRAN......................................................................................63
xii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Warna dan warna komplementer dalam spektrum cahaya tampak /
terlihat ....................................................................................................... 20
Tabel 2.
Aktivitas antiradikal ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (replikasi I) ......................................... 35
Tabel 3.
Aktivitas antiradikal ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan DPPH (replikasi II).................................................... 36
Tabel 4.
Aktivitas antiradikal ekstrak etanol 70 % bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan DPPH (replikasi III) ................................................. 37
Tabel 5.
Rerata IC50 dari ketiga replikasi aktivitas antiradikal ekstrak etanol
0% bunga selasih (Ocimum sanctum L) dengan DPPH ........................... 38
Tabel 6. Aktivitas antiradikal vitamin E dengan DPPH (replikasi I)....................... 39
Tabel 7. Aktivitas antiradikal vitamin E dengan DPPH (replikasi II) ...................... 40
Tabel 8. Aktivitas antiradikal vitamin E dengan DPPH (replikasi III) ..................... 41
Tabel 9. Rerata IC50 dari ketiga replikasi aktivitas antiradikal vitamin E
dengan DPPH.............................................................................................. 42
Tabel 10. Penetapan TIC50 ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L)
pada konsentrasi 143,10 µg/ml (Replikasi I) .............................................. 43
Tabel 11. Penetapan TIC50 ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L)
pada konsentrasi 148,03 µg/ml (Replikasi II) ............................................. 44
Tabel 12. Penetapan TIC50 ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L)
pada konsentrasi 151,67 µg/ml (Replikasi III)............................................ 45
Tabel 13. Rerata T IC50 ekstrak bunga selasih ............................................................. 47
xiii
Tabel 14. Penetapan TIC50 vitamin E pada konsentrasi 5,67 µg/ml (Replikasi I) ....... 48
Tabel 15. Penetapan TIC50 vitamin E pada konsentrasi 5,58 µg/ml (Replikasi II) ...... 49
Tabel 16. Penetapan TIC50 vitamin E pada konsentrasi 5,49 µg/ml (Replikasi III)..... 50
Tabel 17. Rerata TIC50 vitamin E ................................................................................. 51
Tabel 18. Nilai AE ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L) dengan
pembanding vitamin E ................................................................................ 52
Tabel 19. Profil kurva baku asam galat....................................................................... 55
Tabel 20. Penetapan kadar fenolik total ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L)................................................................................... 55
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Reaksi DPPH dan Antioksidan............................................................ 16
Gambar 2. Stuktur Kimia Asam Galat ................................................................... 18
Gambar 3. Instrumentasi spektrofotometer............................................................ 20
Gambar 4. Profil antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (Replikasi I) ..............................36
Gambar 5. Profil antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (Replikasi II)................................. 37
Gambar 6. Profil antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (Replikasi III) .............................. 38
Gambar 7. Profil antiradikal oleh vitamin E dengan metode DPPH
(Replikasi I)........................................................................................... 39
Gambar 8. Profil antiradikal oleh vitamin E dengan metode DPPH
(Replikasi II). ....................................................................................... 40
Gambar 9. Profil antiradikal oleh vitamin E dengan metode DPPH
(Replikasi III) ....................................................................................... 41
Gambar 10. Mekanisme antiradikal oleh vitamin E................................................. 42
Gambar 11. Bentuk resonansi vitamin E.................................................................. 43
Gambar 12. Profil waktu antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L) (replikasi I) ............................................ 47
Gambar 13. Profil waktu antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L) (replikasi II)........................................... 47
xv
Gambar 14. Profil waktu antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L) (replikasi III)......................................... 47
Gambar 15. Profil waktu antiradikal oleh vitamin E (replikasi I)........................... 49
Gambar 16. Profil waktu antiradikal oleh vitamin E (replikasi II) ......................... 50
Gambar 17. Profil waktu antiradikal oleh vitamin E (replikasi III) ........................ 51
Gambar 18. Profil kurva baku asam galat............................................................... 55
Gambar 19. Nilai rata-rata GAE ekstrak etanol 70% tanaman selasih (Ocimum
sanctum L.) dengan IC50....................................................................... 57
Gambar 20. Mekanisme polifenol sebagai antioksidan .......................................... 57
Gambar 21. Resonansi radikal bebas oleh gugus fenolik........................................ 58
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan determinasi tanaman selasih (Ocimum
sanctum L)............................................................................................ 63
Lampiran 2. Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH .............................. 65
Lampiran 3. Data penimbangan ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L.) dan vitamin E. ................................................................ 66
Lampiran 4. Pembuatan larutan stok dan seri konsentrasi ekstrak etanol 70%
bunga selasih (Ocimum sanctum L.) .................................................... 67
Lampiran 5. Contoh perhitungan IC50 ekstrak etanol bunga selasih (Ocimum
sanctum L.)......................................................................................... 69
Lampiran 6. Contoh perhitungan nilai AE ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L.) dengan pembandingvitamin E ......................... 70
Lampiran 7. Penentuan operating time (OT) asam galat ......................................... 71
Lampiran 8. Penentuan panjang gelombang maksimum asam galat ....................... 72
Lampiran 9. Contoh perhitungan kadar fenol total ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L.)................................................................ 73
Lampiran 10. Skema kerja praktis pembuatan ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L.)........................................................................... 74
Lampiran 11. Gambar spektrofotometer .................................................................... 75
Lampiran 12. Gambar tanaman selasih...................................................................... 76
xvii
INTISARI
Indonesia kaya akan keanekaragaman hayati yang memberikan peluang untuk
dilakukan eksploitasi dalam rangka meneliti dan mendapatkan tanaman dengan
kandungan bahan alami yang mana memiliki aktivitas antioksidan serta aman bagi
kesehatan. Bunga selasih ( Ocimum sanctum L.) memiliki kandungan senyawa fenol
dan polifenol (flavonoid). Flavonoid dalam bunga berupa antosinin. Adapun Senyawa
fenolik dalam bunga berupa eugenol, metil eugenol, geraniol dan champor. Flavonoid
dan senyawa fenolik merupakan komponen dalam tumbuhan yang dapat berfungsi
sebagai antioksidan alami. Salah satu mekanisme antioksidan adalah antiradikal. Oleh
karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antiradikal ekstrak
etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) dengan metode DPPH (2,2-diphenil1-pikrilhidrazil) dan dibandingkan dengan vitamin E.
Ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) diperoleh dengan
remaserasi. Pada penetapan aktivitas antiradikal diambil 50 µl dari berbagai seri
konsentrasi ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) ditambah DPPH,
diinkubasi selama satu jam dan dibaca absorbansinya pada λ 516 nm kemudian
dihitung parameter IC50, TIC50 dan AE. IC50 merupakan konsentrasi yang
menunjukkan aktivitas antiradikal sebesar 50%. TIC50 adalah waktu yang diperlukan
untuk menghambat aktivitas antiradikal sebesar 50%. AE (Antioxidant Efficiency)
merupakan parameter gabungan dari IC50 dan TIC50. Pada penetapan kadar fenol total
dilakukan dengan mengunakan reagen Folin-Ciocalteu.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L.) mempunyai aktivitas antiradikal ditunjukkan dengan IC50
147,60 µg/ml sedangkan vitamin E 5,58 µg/ml. TIC50 ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L.)15,53 menit sedangkan vitamin E 3,91 menit. AE
ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) adalah 4,36.10-4 ml/µg menit
sedangkan AE vitamin E 458,34.10-4 ml/µg menit. Kadar fenol total dalam ekstrak
etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) ditunjukkan dengan GAE (miligram
asam galat per ekstrak) sebesar 21,30 mg/g.
Kata Kunci: antiradikal, DPPH (2,2-diphenil-1-pikrilhidrazil), ekstrak etanol 70%
bunga selasih (Ocimum sanctum L.)
xviii
HALAMAN JUDUL...........................................................................................ii
HALAMAN PENGESAHAN............................................................................iii
MOTTO..............................................................................................................iv
PERSEMBAHAN ..............................................................................................v
DEKLARASI .....................................................................................................vi
KATA PENGANTAR .......................................................................................vii
DAFTAR ISI......................................................................................................x
DAFTAR TABEL..............................................................................................xii
DAFTAR GAMBAR .........................................................................................xv
DAFTAR LAMPIRAN......................................................................................xvii
INTISARI...........................................................................................................xviii
BAB I
PENDAHULUAN .......................................................................1
A. Latar Belakang .................................................................................1
B. Perumusan Masalah .........................................................................4
C. Tujuan Penelitian .............................................................................4
D. Tinjauan Pustaka ..............................................................................4
1. Tanaman Selasih ..................................................................4
a. Morfologi Tanaman .................................................4
b. Kedudukan Taksatanaman Selasih Dalam
Sisitematika Tumbuhan...........................................5
c. Kandungan Kimia ....................................................5
2. Metode Penyarian..................................................................5
x
a. Maserasi..................................................................6
b. Perkolasi ...................................................................7
c. Penyari berkesinambungan....................................8
3. Radikal Bebas.......................................................................10
4. Antiradikal................ ..........................................................11 ]
5. Metode Pengukuran ..........................................................14
6. Senyawa fenol dan Polifenol ...............................................17
7. Spektrofotometer .................................................................19
E. Hipotesa…………………………….. .............................................22
BAB II
METODE PENELITIAN..............................................................23
A. Jenis Penelitian…………………….................................................23
B. Definisi Operasional Penelitian……………… ..............................23
C. Alat dan Bahan………………………............................................24
D. Jalan Penelitian………………………............................................25
E. Cara Analisis…………………………. ..........................................30
BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN....................................................31
A. Determinasi Tanaman…………………….. ...................................31
B. Pembuatan Serbuk Simplisia…………...........................................31
C. Ekstraksi……………………………..............................................31
D. Uji Aktivitas Antiradikal dengan DPPH .........................................32
E.
Penetapan waktu untuk mencapai IC50 (TIC50) ...............................43
F.
Penetapan Kadar Fenol Total................. ........................................52
BAB IV
KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................58
A. Kesimpulan .........................................................................................58
xi
B. Saran ...................................................................................................58
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................59
DAFTAR LAMPIRAN......................................................................................63
xii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Warna dan warna komplementer dalam spektrum cahaya tampak /
terlihat ....................................................................................................... 20
Tabel 2.
Aktivitas antiradikal ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (replikasi I) ......................................... 35
Tabel 3.
Aktivitas antiradikal ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan DPPH (replikasi II).................................................... 36
Tabel 4.
Aktivitas antiradikal ekstrak etanol 70 % bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan DPPH (replikasi III) ................................................. 37
Tabel 5.
Rerata IC50 dari ketiga replikasi aktivitas antiradikal ekstrak etanol
0% bunga selasih (Ocimum sanctum L) dengan DPPH ........................... 38
Tabel 6. Aktivitas antiradikal vitamin E dengan DPPH (replikasi I)....................... 39
Tabel 7. Aktivitas antiradikal vitamin E dengan DPPH (replikasi II) ...................... 40
Tabel 8. Aktivitas antiradikal vitamin E dengan DPPH (replikasi III) ..................... 41
Tabel 9. Rerata IC50 dari ketiga replikasi aktivitas antiradikal vitamin E
dengan DPPH.............................................................................................. 42
Tabel 10. Penetapan TIC50 ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L)
pada konsentrasi 143,10 µg/ml (Replikasi I) .............................................. 43
Tabel 11. Penetapan TIC50 ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L)
pada konsentrasi 148,03 µg/ml (Replikasi II) ............................................. 44
Tabel 12. Penetapan TIC50 ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L)
pada konsentrasi 151,67 µg/ml (Replikasi III)............................................ 45
Tabel 13. Rerata T IC50 ekstrak bunga selasih ............................................................. 47
xiii
Tabel 14. Penetapan TIC50 vitamin E pada konsentrasi 5,67 µg/ml (Replikasi I) ....... 48
Tabel 15. Penetapan TIC50 vitamin E pada konsentrasi 5,58 µg/ml (Replikasi II) ...... 49
Tabel 16. Penetapan TIC50 vitamin E pada konsentrasi 5,49 µg/ml (Replikasi III)..... 50
Tabel 17. Rerata TIC50 vitamin E ................................................................................. 51
Tabel 18. Nilai AE ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L) dengan
pembanding vitamin E ................................................................................ 52
Tabel 19. Profil kurva baku asam galat....................................................................... 55
Tabel 20. Penetapan kadar fenolik total ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L)................................................................................... 55
xiv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Reaksi DPPH dan Antioksidan............................................................ 16
Gambar 2. Stuktur Kimia Asam Galat ................................................................... 18
Gambar 3. Instrumentasi spektrofotometer............................................................ 20
Gambar 4. Profil antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (Replikasi I) ..............................36
Gambar 5. Profil antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (Replikasi II)................................. 37
Gambar 6. Profil antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L) dengan metode DPPH (Replikasi III) .............................. 38
Gambar 7. Profil antiradikal oleh vitamin E dengan metode DPPH
(Replikasi I)........................................................................................... 39
Gambar 8. Profil antiradikal oleh vitamin E dengan metode DPPH
(Replikasi II). ....................................................................................... 40
Gambar 9. Profil antiradikal oleh vitamin E dengan metode DPPH
(Replikasi III) ....................................................................................... 41
Gambar 10. Mekanisme antiradikal oleh vitamin E................................................. 42
Gambar 11. Bentuk resonansi vitamin E.................................................................. 43
Gambar 12. Profil waktu antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L) (replikasi I) ............................................ 47
Gambar 13. Profil waktu antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L) (replikasi II)........................................... 47
xv
Gambar 14. Profil waktu antiradikal oleh ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L) (replikasi III)......................................... 47
Gambar 15. Profil waktu antiradikal oleh vitamin E (replikasi I)........................... 49
Gambar 16. Profil waktu antiradikal oleh vitamin E (replikasi II) ......................... 50
Gambar 17. Profil waktu antiradikal oleh vitamin E (replikasi III) ........................ 51
Gambar 18. Profil kurva baku asam galat............................................................... 55
Gambar 19. Nilai rata-rata GAE ekstrak etanol 70% tanaman selasih (Ocimum
sanctum L.) dengan IC50....................................................................... 57
Gambar 20. Mekanisme polifenol sebagai antioksidan .......................................... 57
Gambar 21. Resonansi radikal bebas oleh gugus fenolik........................................ 58
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan determinasi tanaman selasih (Ocimum
sanctum L)............................................................................................ 63
Lampiran 2. Penentuan panjang gelombang maksimum DPPH .............................. 65
Lampiran 3. Data penimbangan ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum
sanctum L.) dan vitamin E. ................................................................ 66
Lampiran 4. Pembuatan larutan stok dan seri konsentrasi ekstrak etanol 70%
bunga selasih (Ocimum sanctum L.) .................................................... 67
Lampiran 5. Contoh perhitungan IC50 ekstrak etanol bunga selasih (Ocimum
sanctum L.)......................................................................................... 69
Lampiran 6. Contoh perhitungan nilai AE ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L.) dengan pembandingvitamin E ......................... 70
Lampiran 7. Penentuan operating time (OT) asam galat ......................................... 71
Lampiran 8. Penentuan panjang gelombang maksimum asam galat ....................... 72
Lampiran 9. Contoh perhitungan kadar fenol total ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L.)................................................................ 73
Lampiran 10. Skema kerja praktis pembuatan ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L.)........................................................................... 74
Lampiran 11. Gambar spektrofotometer .................................................................... 75
Lampiran 12. Gambar tanaman selasih...................................................................... 76
xvii
INTISARI
Indonesia kaya akan keanekaragaman hayati yang memberikan peluang untuk
dilakukan eksploitasi dalam rangka meneliti dan mendapatkan tanaman dengan
kandungan bahan alami yang mana memiliki aktivitas antioksidan serta aman bagi
kesehatan. Bunga selasih ( Ocimum sanctum L.) memiliki kandungan senyawa fenol
dan polifenol (flavonoid). Flavonoid dalam bunga berupa antosinin. Adapun Senyawa
fenolik dalam bunga berupa eugenol, metil eugenol, geraniol dan champor. Flavonoid
dan senyawa fenolik merupakan komponen dalam tumbuhan yang dapat berfungsi
sebagai antioksidan alami. Salah satu mekanisme antioksidan adalah antiradikal. Oleh
karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antiradikal ekstrak
etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) dengan metode DPPH (2,2-diphenil1-pikrilhidrazil) dan dibandingkan dengan vitamin E.
Ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) diperoleh dengan
remaserasi. Pada penetapan aktivitas antiradikal diambil 50 µl dari berbagai seri
konsentrasi ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) ditambah DPPH,
diinkubasi selama satu jam dan dibaca absorbansinya pada λ 516 nm kemudian
dihitung parameter IC50, TIC50 dan AE. IC50 merupakan konsentrasi yang
menunjukkan aktivitas antiradikal sebesar 50%. TIC50 adalah waktu yang diperlukan
untuk menghambat aktivitas antiradikal sebesar 50%. AE (Antioxidant Efficiency)
merupakan parameter gabungan dari IC50 dan TIC50. Pada penetapan kadar fenol total
dilakukan dengan mengunakan reagen Folin-Ciocalteu.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol 70% bunga selasih
(Ocimum sanctum L.) mempunyai aktivitas antiradikal ditunjukkan dengan IC50
147,60 µg/ml sedangkan vitamin E 5,58 µg/ml. TIC50 ekstrak etanol 70% bunga
selasih (Ocimum sanctum L.)15,53 menit sedangkan vitamin E 3,91 menit. AE
ekstrak etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) adalah 4,36.10-4 ml/µg menit
sedangkan AE vitamin E 458,34.10-4 ml/µg menit. Kadar fenol total dalam ekstrak
etanol 70% bunga selasih (Ocimum sanctum L.) ditunjukkan dengan GAE (miligram
asam galat per ekstrak) sebesar 21,30 mg/g.
Kata Kunci: antiradikal, DPPH (2,2-diphenil-1-pikrilhidrazil), ekstrak etanol 70%
bunga selasih (Ocimum sanctum L.)
xviii