Penapisan Bakteri Kitinolitik dari Sumber Air Panas Penen, Kecamatan Sibiru-biru, Kabupaten Deli Serdang dan Karakterisasi Kitinasenya
PENAPISAN BAKTERI KITINOLITIK DARI SUMBER AIR PANAS PENEN,
KECAMATAN SIBIRU-BIRU, KABUPATEN DELI SERDANG DAN
KARAKTERISASI KITINASENYA
ABSTRAK
Penelitian tentang penapisan bakteri kitinolitik dari sumber air panas Penen dan karakterisasi
kitinasenya telah dilakukan. Isolasi dilakukan menggunakan medium agar garam minimum
dengan kolidal kitin sebagai satu-satunya sumber karbon yang diinkubasi pada suhu 53 C
selama 7 hari. Uji indeks kitinase dilakukan pada media yang sama, dengan melihat zona
bening terbesar yang dihasilkan oleh masing-masing isolat. Presipitasi enzim kasar dilakukan
dengan kadar amonium sulfat yang berbeda. Karakter kitinase yang dipelajari mencakup pH,
suhu, dan nilai Km dan Vmaks. Sepuluh isolat kitinolitik diperoleh dari hasil isolasi. Isolat JP2
memiliki indeks kitinolitik tertinggi yakni 1,65. Produksi kitinase tertinggi isolat JP2
diperoleh pada hari ke-4 dengan aktivitas kitinase 0,0063 U/ml. Aktivitas tertinggi diperoleh
pada konsentrasi ammonium sulfat 50% yakni sebesar 0,0087 U/ml dengan aktivitas spesifik
sebesar 0,046 U/mg. Aktivitas kitinase meningkat secara signifikan pada pH optimum 6 dan
suhu optimum 60 °C yakni 0,05066 U/ml (3,8113 U/mg) setelah dialisis. Nilai Km dan Vmaks
adalah masing-masing 0,321 µg/ml dan 71,429 µg. Berdasarkan identifikasi gen 16S rRNA,
menunjukkan bahwa isolat JP2 tergolong ke dalam Bacillus licheniformis.
Kata kunci: Bacillus licheniformis, kitinase, termofilik
SCREENING OF CHITINOLITIC BACTERIA FROM PENEN HOT SPRING,
SIBIRU-BIRU SUBDISTRICT, DELI SERDANG DISTRICT AND
CHARACTERIZATION OF ITS CHITINASE
ABSTRACT
A study of chitinolytic bacteria from hot springs and characterization of its chitinase has been
done. Isolation was done using minimum salt agar with colloidal chitin as the sole carbon
source incubated at 53 °C for 7 days. Examination of chitinase was performed on the same
medium. Precipitation of crude chitinase was performed with different levels of ammonium
sulphate. Characterization of chitinase including pH, temperature and Km dan Vmax was
carried out. Ten chitinolytic isolates were isolated from hot springs. JP2 showed more to
utilize chitin with chitinase index of 1.65. The maximum activity of chitinase was produced 4
days after incubation with chitinase activity of 0.0063 U/ml. The maximum activity was
0.0087 U/ml at 50% of ammonium sulphate with specific activity of 0.046 U/mg. Chitinase
activity increased at pH 6 and at 60 ᴼC by 0.05066 U/ml with specific activity 3.8113 U/mg
after dialysis. Km and Vmax values were 0.321 mg/ml and 71.429 µg, respectively. Based on
16S rRNA gene identification, JP2 showed that isolate was Bacillus licheniformis.
Keywords: Bacillus licheniformis, chitinase, thermophilic
KECAMATAN SIBIRU-BIRU, KABUPATEN DELI SERDANG DAN
KARAKTERISASI KITINASENYA
ABSTRAK
Penelitian tentang penapisan bakteri kitinolitik dari sumber air panas Penen dan karakterisasi
kitinasenya telah dilakukan. Isolasi dilakukan menggunakan medium agar garam minimum
dengan kolidal kitin sebagai satu-satunya sumber karbon yang diinkubasi pada suhu 53 C
selama 7 hari. Uji indeks kitinase dilakukan pada media yang sama, dengan melihat zona
bening terbesar yang dihasilkan oleh masing-masing isolat. Presipitasi enzim kasar dilakukan
dengan kadar amonium sulfat yang berbeda. Karakter kitinase yang dipelajari mencakup pH,
suhu, dan nilai Km dan Vmaks. Sepuluh isolat kitinolitik diperoleh dari hasil isolasi. Isolat JP2
memiliki indeks kitinolitik tertinggi yakni 1,65. Produksi kitinase tertinggi isolat JP2
diperoleh pada hari ke-4 dengan aktivitas kitinase 0,0063 U/ml. Aktivitas tertinggi diperoleh
pada konsentrasi ammonium sulfat 50% yakni sebesar 0,0087 U/ml dengan aktivitas spesifik
sebesar 0,046 U/mg. Aktivitas kitinase meningkat secara signifikan pada pH optimum 6 dan
suhu optimum 60 °C yakni 0,05066 U/ml (3,8113 U/mg) setelah dialisis. Nilai Km dan Vmaks
adalah masing-masing 0,321 µg/ml dan 71,429 µg. Berdasarkan identifikasi gen 16S rRNA,
menunjukkan bahwa isolat JP2 tergolong ke dalam Bacillus licheniformis.
Kata kunci: Bacillus licheniformis, kitinase, termofilik
SCREENING OF CHITINOLITIC BACTERIA FROM PENEN HOT SPRING,
SIBIRU-BIRU SUBDISTRICT, DELI SERDANG DISTRICT AND
CHARACTERIZATION OF ITS CHITINASE
ABSTRACT
A study of chitinolytic bacteria from hot springs and characterization of its chitinase has been
done. Isolation was done using minimum salt agar with colloidal chitin as the sole carbon
source incubated at 53 °C for 7 days. Examination of chitinase was performed on the same
medium. Precipitation of crude chitinase was performed with different levels of ammonium
sulphate. Characterization of chitinase including pH, temperature and Km dan Vmax was
carried out. Ten chitinolytic isolates were isolated from hot springs. JP2 showed more to
utilize chitin with chitinase index of 1.65. The maximum activity of chitinase was produced 4
days after incubation with chitinase activity of 0.0063 U/ml. The maximum activity was
0.0087 U/ml at 50% of ammonium sulphate with specific activity of 0.046 U/mg. Chitinase
activity increased at pH 6 and at 60 ᴼC by 0.05066 U/ml with specific activity 3.8113 U/mg
after dialysis. Km and Vmax values were 0.321 mg/ml and 71.429 µg, respectively. Based on
16S rRNA gene identification, JP2 showed that isolate was Bacillus licheniformis.
Keywords: Bacillus licheniformis, chitinase, thermophilic