UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN KELADI TIKUS (Typhonium flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus (Typhonium Flagelliforme L), Kemangi (Ocimum Sanctum L) Dan Pepaya (Carica Papaya L) Terhadap Sel Hela.
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN KELADI
TIKUS (Typhonium flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum
sanctum L) DAN PEPAYA (Carica papaya L)
TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Oleh:
DHINAR ASTI PRADANA PUTRI
K100130182
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN KELADI
TIKUS (Typhonium flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum
sanctum L) DAN PEPAYA (Carica papaya L)
TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
Dhinar Asti Pradana Putri
K100130182
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr.wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian skripsi dengan judul “UJI
SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN KELADI TIKUS (Typhonium
flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum sanctum L), DAN PEPAYA (Carica
papaya L) TERHADAP SEL HELA” secara baik sebagai syarat untuk
memperoleh gelar sarjana farmasi. Penulis mengucapkan terimakasih kepada
pihak-pihak yang membantu dalam penulisan skripsi ini:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt selaku pembimbing utama skripsi.
4. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt selaku penguji pertama.
5. Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt selaku penguji kedua.
6. Kedua orangtua dan adik yang selalu memberikan doa dan semangat
sehingga pengerjaan skripsi ini dapat selesai dengan baik.
7. Segenap rekan-rekan dalam penelitian ini serta pihak-pihak yang
telah membantu atas terselesaikannya skripsi ini yang tidak dapat
disebutkan satu persatu.
Akhir kata, penulis menyadari bahwa dalam penulisan dan penyusunan
skripsi ini masih memiliki kekurangan dan jauh dari sempurna, oleh karena itu
semoga skripsi ini bisa memunculkan kritik, saran, serta penelitian selanjutnya
bagi pembacanya guna memperkaya khasanah dalam dunia penelitian farmasi
kedepannya.
Wassalamu’alaikum wr.wb
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN .................................................................................. i
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ........................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................ x
ABSTRAK ............................................................................................................. xi
ABSTRACS .......................................................................................................... xii
BAB I. PENDAHULUAN ..................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ............................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ........................................................................................ 2
C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 3
E. Landasan Teori ........................................................................................... 11
F.
Hipotesis ..................................................................................................... 12
BAB II. METODE PENELITIAN ....................................................................... 13
A. Kategori dan Rancangan Penelitian ........................................................... 13
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasionalnya ...................................... 13
C. Alat dan Bahan ........................................................................................... 14
D. Tempat Penelitian....................................................................................... 15
E. Jalannya Penelitian ..................................................................................... 15
F.
Analisis Data .............................................................................................. 18
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................. 19
A. Determinasi Tanaman ................................................................................ 19
B. Pengumpulan Bahan dan Ekstraksi ............................................................ 19
v
C. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ............................................................. 20
D. Uji Sitotoksik Terhadap Sel heLa .............................................................. 25
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................ 33
A. Kesimpulan ................................................................................................ 33
B. Saran........................................................................................................... 33
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 34
LAMPIRAN...........................................................................................................39
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Kromatogram Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus ............ 21
Gambar 2. Kromatogram Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Kemangi .................. 21
Gambar 3. Kromatogram Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Pepaya ..................... 22
Gambar 4. Reaksi Alkaloid dengan Reagen Dragendorff ..................................... 24
Gambar 5. Reaksi Fenol dengan Reagen FeCl3 ................................................... 24
Gambar 6. Reaksi Flavonoid dengan Reagen Sitroborat ...................................... 25
Gambar 7. Reaksi reduksi MTT menjadi kristal formazan ................................... 26
Gambar 8. Morfologi sel HeLa ............................................................................. 28
Gambar 9. Grafik Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak dengan Rata-Rata % Sel
Hidup pada Sel HeLa. ................................................................................... 29
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen deteksi senyawa.......................................................................... 16
Tabel 2. Tabel Hasil Ekstraksi Keladi Tikus, Kemangi dan Pepaya. ................... 19
Tabel 3. Identifikasi Kandungan Senyawa dengan Beberapa Pereaksi Semprot .. 23
Tabel 4. Hasil Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus terhadap sel HeLa . 28
Tabel 5. Hasil Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Kemangi terhadap sel HeLa ....... 29
Tabel 6. Hasil Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Pepaya terhadap sel HeLa .......... 29
Tabel 7. IC50 Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus, Kemangi dan Pepaya .............. 30
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman ............................................................. 39
Lampiran 2. Gambar Tanaman Keladi Tikus, Kemangi dan Pepaya. ................... 42
Lampiran 3. Perhitungan Rendemen ..................................................................... 43
Lampiran 4. Perhitungan Seri Konsentrasi ........................................................... 44
Lampiran 5. Perhitungan Kepadatan Sel HeLa Pada Uji Sitotoksik ..................... 46
Lampiran 6. Perhitungan Presentase Sel Hidup .................................................... 47
Lampiran 7. Perhitungan Nilai IC50 ...................................................................... 52
ix
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimetil sulfoksida
ELISA
: Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay
E6-AP
: E6-associated protein
FBS
: Fetal Bovine Serum
hTERT
: Human Telomerase Reverse Transcriptase
HPV
: Human Papillomavirus
IC50
: Inhibitory Concentration 50%
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
MCF-7
: Human Breast Carcinoma
MTT
: 3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid
NCl-H23
: Human Lung Carcinoma
NF‐κB
: Nuclear Factor‐kappab
PBS
: Phosphat Buffered Saline
Rf
: Retardation fact
RIP
: Ribosome Inactivating Protein
RPMI 1640
: Roswell Park Memorial Institute
SDS
: Sodium Dedocyl Sulfate
UV
: Ultraviolet
WiDr
: Human Colon Cancer
x
ABSTRAK
Kanker leher rahim merupakan kanker yang banyak diderita wanita
diseluruh dunia, termasuk di Indonesia. Beberapa pengobatan antikanker yang ada
belum memberikan efek yang memuaskan sehingga penelitian ini dilakukan untuk
mendapatkan obat antikanker menggunakan bahan alam. Penelitian ini bertujuan
untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol daun keladi tikus ( Typhonium
flagelliforme L), kemangi (Ocimum sanctum L) dan pepaya (Carica papaya L)
terhadap sel HeLa.
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut
etanol 96%. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT assay untuk
mendapatkan nilai IC50. Identifikasi golongan senyawa dalam ekstrak dilakukan
dengan menggunakan kromatografi lapis tipis dengan berbagai reagen semprot.
Pada penelitian dapat disimpulkan IC50 ekstrak etanol daun keladi tikus,
kemangi dan pepaya secara berturut-turut yaitu 404,5 µg/mL, 373,8 µg/mL, dan
>500 µg/mL. Ketiga ekstrak tanaman tidak memiliki efek sitotoksik terhadap sel
HeLa. Uji kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun keladi
tikus, kemangi dan pepaya mengandung senyawa alkaloid, fenolik, flavonoid,
saponin dan terpenoid.
Kata kunci: Typhonium flagelliforme , Ocimum sanctum, Carica papaya ,
sitotoksik, sel HeLa.
xi
ABSTRACS
Cervix cancer is the most cancer that suffered by woman in the world
include in Indonesia. Some existing anticancer treatment have not satisfying , so
this experiment is to explore the Indonesian plan to find new anticancer agents.
This experiment aimed to determine the cytotoxic effects of extract ethanol leaf
rodent tuber (Typhonium flagelliforme L), basil (Ocimum sanctum L), and papaya
(Carica papaya L) to HeLa cells.
Extraction was conducted by maceration method using ethanol extract
96%. Cytotoxic test performed by using MMT assay method to obtain IC50
values. The content of the compunds in the extract were identified using Thin
Layer Chromatography (TLC) with various spray reagent.
This experiment conclude IC50 of extract ethanol leaf rodent tuber, basil
and papaya were 404,5 µ g/mL, 373,8 µ g/mL, and more than 500 µ g/mL
respectively. Extract ethanol of rodent tuber, basil and papaya has no cytotoxic
effect. Thin layer chromatography result that extract ethanol of rodent tuber leaf,
basil and papaya contain alkaloids, phenolic, flavonoids, saponins and
terpenoids.
Keywords: Typhonium flagelliforme, Ocimum sanctum, Carica papaya,
cytotoxic, HeLa cells.
xii
TIKUS (Typhonium flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum
sanctum L) DAN PEPAYA (Carica papaya L)
TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Oleh:
DHINAR ASTI PRADANA PUTRI
K100130182
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN KELADI
TIKUS (Typhonium flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum
sanctum L) DAN PEPAYA (Carica papaya L)
TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
Dhinar Asti Pradana Putri
K100130182
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr.wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia-Nya
sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian skripsi dengan judul “UJI
SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN KELADI TIKUS (Typhonium
flagelliforme L), KEMANGI (Ocimum sanctum L), DAN PEPAYA (Carica
papaya L) TERHADAP SEL HELA” secara baik sebagai syarat untuk
memperoleh gelar sarjana farmasi. Penulis mengucapkan terimakasih kepada
pihak-pihak yang membantu dalam penulisan skripsi ini:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt selaku pembimbing utama skripsi.
4. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt selaku penguji pertama.
5. Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt selaku penguji kedua.
6. Kedua orangtua dan adik yang selalu memberikan doa dan semangat
sehingga pengerjaan skripsi ini dapat selesai dengan baik.
7. Segenap rekan-rekan dalam penelitian ini serta pihak-pihak yang
telah membantu atas terselesaikannya skripsi ini yang tidak dapat
disebutkan satu persatu.
Akhir kata, penulis menyadari bahwa dalam penulisan dan penyusunan
skripsi ini masih memiliki kekurangan dan jauh dari sempurna, oleh karena itu
semoga skripsi ini bisa memunculkan kritik, saran, serta penelitian selanjutnya
bagi pembacanya guna memperkaya khasanah dalam dunia penelitian farmasi
kedepannya.
Wassalamu’alaikum wr.wb
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN .................................................................................. i
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ........................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................ x
ABSTRAK ............................................................................................................. xi
ABSTRACS .......................................................................................................... xii
BAB I. PENDAHULUAN ..................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ............................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ........................................................................................ 2
C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka .......................................................................................... 3
E. Landasan Teori ........................................................................................... 11
F.
Hipotesis ..................................................................................................... 12
BAB II. METODE PENELITIAN ....................................................................... 13
A. Kategori dan Rancangan Penelitian ........................................................... 13
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasionalnya ...................................... 13
C. Alat dan Bahan ........................................................................................... 14
D. Tempat Penelitian....................................................................................... 15
E. Jalannya Penelitian ..................................................................................... 15
F.
Analisis Data .............................................................................................. 18
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................. 19
A. Determinasi Tanaman ................................................................................ 19
B. Pengumpulan Bahan dan Ekstraksi ............................................................ 19
v
C. Analisis Kromatografi Lapis Tipis ............................................................. 20
D. Uji Sitotoksik Terhadap Sel heLa .............................................................. 25
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................ 33
A. Kesimpulan ................................................................................................ 33
B. Saran........................................................................................................... 33
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 34
LAMPIRAN...........................................................................................................39
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Kromatogram Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus ............ 21
Gambar 2. Kromatogram Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Kemangi .................. 21
Gambar 3. Kromatogram Hasil KLT Ekstrak Etanol Daun Pepaya ..................... 22
Gambar 4. Reaksi Alkaloid dengan Reagen Dragendorff ..................................... 24
Gambar 5. Reaksi Fenol dengan Reagen FeCl3 ................................................... 24
Gambar 6. Reaksi Flavonoid dengan Reagen Sitroborat ...................................... 25
Gambar 7. Reaksi reduksi MTT menjadi kristal formazan ................................... 26
Gambar 8. Morfologi sel HeLa ............................................................................. 28
Gambar 9. Grafik Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak dengan Rata-Rata % Sel
Hidup pada Sel HeLa. ................................................................................... 29
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen deteksi senyawa.......................................................................... 16
Tabel 2. Tabel Hasil Ekstraksi Keladi Tikus, Kemangi dan Pepaya. ................... 19
Tabel 3. Identifikasi Kandungan Senyawa dengan Beberapa Pereaksi Semprot .. 23
Tabel 4. Hasil Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus terhadap sel HeLa . 28
Tabel 5. Hasil Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Kemangi terhadap sel HeLa ....... 29
Tabel 6. Hasil Perlakuan Ekstrak Etanol Daun Pepaya terhadap sel HeLa .......... 29
Tabel 7. IC50 Ekstrak Etanol Daun Keladi Tikus, Kemangi dan Pepaya .............. 30
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman ............................................................. 39
Lampiran 2. Gambar Tanaman Keladi Tikus, Kemangi dan Pepaya. ................... 42
Lampiran 3. Perhitungan Rendemen ..................................................................... 43
Lampiran 4. Perhitungan Seri Konsentrasi ........................................................... 44
Lampiran 5. Perhitungan Kepadatan Sel HeLa Pada Uji Sitotoksik ..................... 46
Lampiran 6. Perhitungan Presentase Sel Hidup .................................................... 47
Lampiran 7. Perhitungan Nilai IC50 ...................................................................... 52
ix
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimetil sulfoksida
ELISA
: Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay
E6-AP
: E6-associated protein
FBS
: Fetal Bovine Serum
hTERT
: Human Telomerase Reverse Transcriptase
HPV
: Human Papillomavirus
IC50
: Inhibitory Concentration 50%
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
MCF-7
: Human Breast Carcinoma
MTT
: 3-(4,5- dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid
NCl-H23
: Human Lung Carcinoma
NF‐κB
: Nuclear Factor‐kappab
PBS
: Phosphat Buffered Saline
Rf
: Retardation fact
RIP
: Ribosome Inactivating Protein
RPMI 1640
: Roswell Park Memorial Institute
SDS
: Sodium Dedocyl Sulfate
UV
: Ultraviolet
WiDr
: Human Colon Cancer
x
ABSTRAK
Kanker leher rahim merupakan kanker yang banyak diderita wanita
diseluruh dunia, termasuk di Indonesia. Beberapa pengobatan antikanker yang ada
belum memberikan efek yang memuaskan sehingga penelitian ini dilakukan untuk
mendapatkan obat antikanker menggunakan bahan alam. Penelitian ini bertujuan
untuk mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol daun keladi tikus ( Typhonium
flagelliforme L), kemangi (Ocimum sanctum L) dan pepaya (Carica papaya L)
terhadap sel HeLa.
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut
etanol 96%. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT assay untuk
mendapatkan nilai IC50. Identifikasi golongan senyawa dalam ekstrak dilakukan
dengan menggunakan kromatografi lapis tipis dengan berbagai reagen semprot.
Pada penelitian dapat disimpulkan IC50 ekstrak etanol daun keladi tikus,
kemangi dan pepaya secara berturut-turut yaitu 404,5 µg/mL, 373,8 µg/mL, dan
>500 µg/mL. Ketiga ekstrak tanaman tidak memiliki efek sitotoksik terhadap sel
HeLa. Uji kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun keladi
tikus, kemangi dan pepaya mengandung senyawa alkaloid, fenolik, flavonoid,
saponin dan terpenoid.
Kata kunci: Typhonium flagelliforme , Ocimum sanctum, Carica papaya ,
sitotoksik, sel HeLa.
xi
ABSTRACS
Cervix cancer is the most cancer that suffered by woman in the world
include in Indonesia. Some existing anticancer treatment have not satisfying , so
this experiment is to explore the Indonesian plan to find new anticancer agents.
This experiment aimed to determine the cytotoxic effects of extract ethanol leaf
rodent tuber (Typhonium flagelliforme L), basil (Ocimum sanctum L), and papaya
(Carica papaya L) to HeLa cells.
Extraction was conducted by maceration method using ethanol extract
96%. Cytotoxic test performed by using MMT assay method to obtain IC50
values. The content of the compunds in the extract were identified using Thin
Layer Chromatography (TLC) with various spray reagent.
This experiment conclude IC50 of extract ethanol leaf rodent tuber, basil
and papaya were 404,5 µ g/mL, 373,8 µ g/mL, and more than 500 µ g/mL
respectively. Extract ethanol of rodent tuber, basil and papaya has no cytotoxic
effect. Thin layer chromatography result that extract ethanol of rodent tuber leaf,
basil and papaya contain alkaloids, phenolic, flavonoids, saponins and
terpenoids.
Keywords: Typhonium flagelliforme, Ocimum sanctum, Carica papaya,
cytotoxic, HeLa cells.
xii