EFEK DIURESIS EKSTRAK PROPOLIS PADA TIKUS PUTIH JANTAN (RATTUS NORVEGICUS)

  EFEK DIURESIS EKSTRAK PROPOLIS PADA TIKUS PUTIH JANTAN (RATTUS NORVEGICUS) SKRIPSI Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran FADITYO G.0009074 FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET Surakarta 2012

  

ABSTRAK

Fadityo, G0009074, 2012. Efek Diuresis Ekstrak Propolis pada Tikus Putih Jantan

  (Rattus norvegicus). Skripsi. Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

  

Tujuan Penelitian : Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek diuresis ekstrak

propolis pada tikus putih jantan (Rattus norvegicus).

Metode Penelitian : Penelitian ini bersifat analitik eksperimental laboratorium

  dengan metode randomized controlled trial, dilakukan di Laboratorium Universitas Setia Budi Surakarta pada bulan Juni 2012. Subjek tikus putih jantan Strain Wistar sejumlah 35 ekor. Subjek penelitian dibagi menjadi 5 kelompok, masing-masing kelompok perlakuan terdiri dari 7 ekor tikus. Teknis sampling yang digunakan adalah

  

Simple Random Sampling . Sebelum perlakuan tikus diadaptasikan selama 7 hari

  kemudian dipuasakan selama 48 jam dengan tetap diberikan air minum. Pemberian ekstrak propolis diberikan secara per oral. Kelompok I sebagai kontrol negatif diberi aquadest 2,5 ml, kelompok II sebagai kontrol positif diberi hidroklorotiazid 0,3 mg/2,5 ml, kelompok III sebagai dosis I diberi ekstrak propolis 30 mg/2,5 ml, kelompok IV sebagai dosis II diberi ekstrak propolis 60 mg/2,5 ml, dan kelompok V sebagai dosis III diberi ekstrak propolis 120 mg/2,5 ml. Pengukuran volume urin dilakukan setiap 6 jam selama 24 jam.

  

Hasil Penelitian : Hasil perhitungan statistik uji Anova dengan p < 0.05

  menunjukkan adanya perbedaan signifikan pada jumlah volume urin antara kelompok I, II, III, IV, dan V. Hasil uji Post-Hoc antara kelompok I dengan kelompok yang lain menunjukkan perbedaan signifikan.

  

Simpulan Penelitian : Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak

propolis memiliki efek diuresis pada tikus putih jantan.

  Kata kunci : Ekstrak propolis, efek diuresis, hidroklorotiazid

  

ABSTRACT

Fadityo, G.0009074, 2012. The Diuretic Effect of Propolis in White Male Rats

  (Rattus norvegicus). Mini Thesis, Faculty of Medicine, Sebelas Maret University Surakarta.

  

Objectives : This research aims at finding out the diuretic effect of propolis extract

with in the male white rats (Rattus norvegicus).

Methods : The research is a laboratory experimental analytic study using randomized

controlled trial done at Laboratory of Setia Budi University Surakarta in June 2012.

  The research subject is a number of 35 male white rats of Wistar Strain. They were divided into five treatment groups, each group consists of seven rats. A simple random sampling is used for sampling technique. Before the treatment, rats were adapted for 7 days and fasted for 48 hours but still provided with drinking water. Propolis was given orally. Group I was given aquadest 2.5 ml as negative control, group II was given hydrochlorothiazide 0.3 mg/2.5 ml as positive control, group III was given propolis extract at dose 30 mg/2.5 ml as dose I, group IV was given propolis extract at dose 60 mg/2.5 ml as dose II, and group V was given propolis extract at dose 120 mg/2.5 ml as dose III. Rats urine volume was measured every 6 hours for 24 hours.

  

Result: : Result of statistic calculation using Anova test with p < 0.05 shows that

  there is significant difference in total rats urine volume between group I, II, III, IV, and V. The Post-Hoc test result between group I compared with the others group was significant difference.

  

Conclusion Through observing amount of urine volume and statistic calculation, it

can be concluded that propolis extract has diuretic effect in the male white rats.

  Keywords: Propolis extract, diuretic effect, hydrochlorotiazide

  

PRAKATA

  Segala puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala berkah dan karunia- Nya dalam menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Diuresis Ekstrak

  Propolispada Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus) ”.

  Skripsiini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana di Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Penulis menyadari bahwa skripsi ini tidak lepas dari kerjasama, bantuandandukungan dari berbagai pihak. Untuk itu, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada : 1.

  Prof. Dr.ZainalArifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM, selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.

  2. Muthmainah, dr., M.Kes, selaku Ketua Tim Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.

  3. Prof. Muchsin Doewes, dr., PFarmK, selaku pembimbing utama yang telah berkenan meluangkan waktu memberikan bimbingan, saran, dan motivasi.

  4. Kisrini, Dra., Apt., M.Si, selaku pembimbing pendamping atas segala bimbingan, arahan, dan waktu yang telah beliau luangkan bagi penulis.

  5. Endang Sri Hardjanti, dr., P.Fark, M.Or, selaku penguji utama yang telah berkenan menguji serta memberikan saran danmasukandalam penulisan skripsi ini.

  6. YulMariyah, Dra., Apt., M.Si,selakuanggotapenguji yang telahmemberikan saran dannasihatdalamperbaikanpenulisanskripsiini.

  7. P., ibunda Sofia H.

  A. AyahandaTotok danFayadivasertaseluruhkeluargabesarpenulis yang telahmendukung, mendoakan, memfasilitasidanmemotivasiselamapenulisanskripsiini.

  8. Annisa Marsha, AriantoAdi W, danIntanSavira yang berjuangbersama- samadalamsukadanduka.

  9. Nadim M,Zaky H, Fitrah P, M Abdul Basith, Maria DewiCaetline, M Iqbal Satasbantuan, saran danmotivasidalampenulisanskripsiini.

  10. Teman-teman FK UNS angkatan 2009 yang selalu mendukung dan berjuang bersama penulis.

  11. Tim Skripsi dan Perpustakaan FK UNS yang banyak membantu dalam penyelesaian skripsi dan sebagai salah satu tempat mencari referensi.

  12. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu, yang turut membantu penyelesaian skripsi ini.

  Penulis menyadari masih banyak kekurangan dalam penelitian dan penyusunan skripsi ini. Kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi perbaikan selanjutnya.Akhir kata, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi seluruh pembaca.

  Surakarta,November 2012 Fadityo

  

DAFTAR ISI

  PRAKATA ........... .......................................................................................................vi DAFTAR ISI ........... ...................................................................................................vii DAFTAR TABEL ........................................................................................................ xi DAFTAR GAMBAR .................................................................................................. xii DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................................. xiii

  BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah ............................................................................... 1 B. Perumusan Masalah ...................................................................................... 3 C. Tujuan Penelitian ........................................................................ ................ 3 D. Manfaat Penelitian ...................................................................................... 3 BAB II. LANDASAN TEORI A. Tinjauan Pustaka ......................................................................... ............... 4

  1. Propolis .................................................................................................. 4

  a. Deskripsi ........................................................................................... 4

  b. Kandungan Senyawa Kimia ............................................................. 5

  2. Ginjal ...................................................................................................... 7

  a. Anatomi Ginjal .................................................................................. 7

  b. Fisiologi Ginjal ................................................................................. 9

  c. Nefron ...........................................................................................11

  d. Pembentukan Urin ..........................................................................14

  5. Hidroklorotiazid .................................................................................. 17

  a. Farmakokinetika ............................................................................. 18

  b. Farmakodinamika ........................................................................... 18

  c. Indikasi ........................................................................................... 19

  B. Kerangka Pemikiran ........................................................................ ......... 20

  C. Hipotesis ..................................................................................... ............... 20

  BAB III. METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian ......................................................................................... 21 B. Lokasi Penelitian ...................................................................................... 21 C. Subjek Penelitian ...........................................................................

  ……... 21 D. Teknik Sampling ................................................................. ............

  ……. 22

  E. Besar Sampel ……………………………………………………………. 22

  F. Identifikasi Variabel Penelitian .................................................................. 23

  G. Definisi Operasional Variabel Penelitian.................................................... 23

  H. Rancangan Penelitian ................................................. ............................... 26

  I. Intrumen Penelitan ......................................................................... ............ 27 J. Bahan Penelitian ........................................................................................ 27 K. Cara Kerja

  ...…………………………………………………………..… 27 L. Teknik Analisis Data ……………………………………………………. 31

  BAB IV. HASIL PENELITIAN A. Data Hasil Penelitian ................................................................. ............... 32 B. Analisis Data ................................................................................... ......... 34 BAB V. PEMBAHASAN ......................................................................... ............... 38

  BAB VI. PENUTUP A. Simpulan ......................................................................................... ......... 41 B. Saran .......................................................................................... ............... 41 DAFTAR PUSTAKA................................................................................................. 42 LAMPIRAN

BAB I PENDAHULUAN A. LatarBelakangnMasalah Diuretikadalahobat

  yang dapatmeningkatkankecepatanpembentukanurin.Biasanyadiuretikdiindikasikan padapasiendengan edema danhipertensi (Gunawan, et al, 2007).Salah satudiuretik yang seringdigunakanadalahhidroklorotiazid yang biasanyadiberikanpadapasiendenganhipertensisedangsampaidenganringan (Joint National Comitte, 2003).Padaumumnya, terapipadapasiendenganhipertensiadalahmodifikasigayahidupdanpemberianob atdiuretikterutamagolongantiazid (Joint National Comitte, 2003). Hidroklorotiaziddigunakansebagaifarmakoterapipertamadarihipertensikarenas elainmemilikiefek diuresis, hidroklorotiazidjugamemilikiefek vasodilator padaarteriolsehinggaterjadipenurunantekanandarah (Gunawan, et al, 2007).Menurut data dariRisetKesehatanDasar (Riskesdas) Balitbangkestahun 2007, prevalensihipertensi di Indonesia secaranasionalmencapai 31,7%.

  Hipertensijugamerupakanpenyebabkematiantertinggiketiga di Indonesia setelah stroke dantuberkolosis (Depkes, 2010).Dari data tersebutdapatdisimpulkanbahwaobatdiuretikcukupbanyakdigunakan di Indonesia.

  Indonesia adalahsalahsatunegara yang banyakmenggunakanbahan-bahan yang terdapat di alamsebagaisalahsatucarauntukmenjagakesehatanmaupununtukmenyembuhka npenyakit. Cara inidigunakansecaraturun-temurun, danbeberapasudahterbuktikhasiatnyadalammenjagakesehatanmaupunmenyem buhkanpenyakit.Salah satukeunggulandaripengobataniniadalahmemilikiefeksamping yang cenderungkecildibandingkandenganpengobatankonvensional.Namun, di samping kelebihannya, tanaman obat memiliki beberapa kelemahan, antara lain sebagian besar efek farmakologisnya yang lemah, bahan baku belum terstandar, belum dilakukan uji klinik, dan mudah tercemar berbagai jenis mikroorganisme (Katno, 2004).

  Salah satubahanalami yang banyakdigunakansebagaipengobatanadalahpropolis.Propolistelahdigunakanol ehmanusiasejakratusantahun yang lalu (Alex, 2011).Propolismemilikibanyakkandunganbiologisdanfarmakologi yang mekanismekerjanyabanyakditelitibelakanganini.Salah satukandungan yang banyakterdapatdalampropolisadalah flavonoid.Flavonoid adalah salah satu zat dari sekian banyak zat kimia lainnya yang terdapat dipropolis yang telah terbukti secara eksperimental dapat berfungsi sebagai diuretik alami (Xiao et al., 2005).

  Padaumumnyapropolisdigunakandalambentukekstrak, baikituekstrakcairmaupunekstrakdalambentukbubuk yang dimasukankedalamkapsul.Masyarakat Indonesia menggunakanpropolissebagaisuplemenuntukmenjagakesehatanmaupununtuk memnyembuhkanpenyakit.

  B. RumusanMasalah

  Apakahekstrakpropolismemilikiefek diuresis padatikusputihjantan? C.

   TujuanPenelitian

  Penelitianinibertujuanuntukmengetahuiefek diuresis dariekstrakpropolispadatikusputihjantan (RattusNorvegicus)

  D. ManfaatPenelitian 1.

  ManfaatTeoritis Penelitianinidapatmemberikaninformasiilmiahmengenaiefek diuresis ekstrakpropolis.

2. ManfaatAplikatif

  Penelitianinidapatdilanjutkanpadahewan yang tingkatnyalebihtinggilagidengandosis yang lebihbesar, sampellebihbaikdanmetode yang lebihakurat.

BAB II LANDASAN TEORI A. Tinjauan Pustaka 1. Propolis a. Deskripsi Propolis merupakan zat yang diproduksi oleh lebah yang berguna

  untuk melindungi sarangnya dari berbagai macam ancaman, baik berupa ancaman lingkungan maupun serangan dari organisme lainnya (Siregar et al., 2011). Kata propolisberasal dari bahasa Yunani, yakni pro bermakna sebelum dan polis berartikota.Secara umum propolis dapat diartikan sebelum sampai kota. Kota dalam kehidupan lebah madu adalah sarang (Hoesada et al., 2007).

  Gambar

  2.1 Lebah mengunakan propolis

  sebagaiPertahanan (Krell, 1996) Propolis digunakan untuk menambal celah kecil dalam sarang lebah, sedangkan untuk ruang yang lebih besar lebah akan menggunakan lilin. Propolis dibentuk dari resin berbagai tanaman yang dikumpulkan oleh lebah, terutama bunga dan pucuk tanaman.

  (Siregar et al., 2011).

  Propolis telah digunakan sejak jaman sebelum masehi.Dimasa lalu, Bangsa Inca telah menggunakannya sebagai obat anti piretik (Sforcin dan Bankoa, 2010).Propolis juga diketahui memiliki efek anti bakteri, antiviral, dan anti inflamasi (Chang et al., 2002). Pada penelitian yang dilakukan pada tahun 2009, didapatkan bahwa propolis dapat mencegah terjadinya nefropati diabetik pada tikus putih model diabetes (Abo-Salem et al., 2009) b.

  Kandungan Senyawa Kimia Kandungan komposisi dari propolis berbeda-beda pada setiap daerahnya,bergantung dari resin tumbuhan yang dihisap oleh lebah.Hal ini menyebabkan keanekaragaman kandungan kimia dari propolis (Bankova, 2005).Terdapat lebih dari 150 zat yang terkandung dalam propolis yang berhubungan dengan aktivitas biologis dari propolis (Fu et al., 2005).Secara garis besar kandungan utama dari propolis adalah beewax, resin dan volatil (Salatino et al., 2005).

Tabel 2.1 di bawah ini menjelaskan mengenai kandungan kimia yang terdapat di dalam propolis.Tabel 2.1 Kandungan Kimia Propolis

  Kelas Komponen Jumlah Grup Komponen

Resin 45-55% Flavonoid, asam fenolat

(kafeik, asam ferulik), dan esternya

Lilin dan asam 25-53% Sebagian besar dari lilin

lemak lebah namun bisa juga dari tanaman Minyak essensial 10% Senyawa volatil

Protein 5% Protein kemungkinan

berasal dari pollen dan asam amino bebas

  

Senyawa organik 5% Terdapat 14 macam mineral

lain dan mineral yang terdeteksi,yang paling

banyak adalah Fe dan Zn, sisanya Au, Ag, Cs, Hg, La dan Sb. Senyawa organik lain seperti: keton, laktan, kuinon, asam benzoat dan esternya, vitamin, dan gula

  (Krell, 1996) Pada tabel di atas dapat dilihat bahwa propolis memiliki kandungan flavonoid yang cukup besar.Flavonoid adalah senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman hijau, kecuali alga.Propolis juga mengandung berbagai macam jenis flavonoid, seperti chrysin, apigenin, luteolin, rutin, quercetin, myricetin, kaempferol, quercitrin, galangin, naringin, hesperetin, daidzein, dan genistein (Chang et al., 2002). Pada percobaan efek diuresis dari bahwa flavonoid memiliki peran pada peningkatan volume urin tikus putih (Suresh A et al., 2010). Selain flavonoid, senyawa lain yang dapat berperan dalam meningkatkan volume urin adalah gula. Pada

tabel 2.1 dapat dilihat bahwa propolis memiliki kandungan gula walaupun hanya sedikit.Gula dapat berperan meningkatkan volume

  urin dengan perbedaan osmolaritas pada tubulus yang mengakibatkan air berdifusi ke tubulus.Walaupun memiliki efek diuresis, diperlukan gula dalam jumlah besar untuk menimbulkan efek diuresis.

2. Ginjal

  Ginjal adalah organ vital didalam tubuh yang memiliki fungsi mempertahankan kestabilan lingkungan di dalam tubuh.Fungsi vital ini dijalankan dengan mengatur volume dan komposisi kimia darah dengan mengekskresikan zat terlarut dan air secara selektif. Ginjal akan memfiltrasi plasma darah melalui glomerulus diikuti dengan reabsorpsi sejumlah zat terlarut dan air di sepanjang tubulus ginjal sesuai dengan kebutuhan tubuh. Kelebihan zat terlarut dan air tersebut akan diekskresikan oleh ginjal melalui sistem pengumpul urin (Price dan Wilson, 2006).

  a.

  Anatomi Ginjal Ginjal adalah organ yang berbentuk seperti kacang yang letaknya berada di kedua sisi kolumna vertebralis (Price dan Wilson, rongga peritenium (Guyton dan Hall, 2006).Ginjal kanan terletak lebih rendah dibandingkan dengan ginjal kiri karena adanya lobus hepatis dexter (Snell. 2006).Pada orang dewasa, ginjal memiliki berat kira- kira 150 gram.Sisi medial dari setiap ginjal adalah daerah lekukan yang disebut hilum yang dilewati oleh arteri dan vena renalis, cairan limfatik, suplai saraf dan ureter (Guyton dan Hall, 2006).

  Jika ginjal dibagi dua dari atas ke bawah, dua daerah utama yang dapat terlihat adalah korteks di bagian luar dan medula di bagian dalam (Guyton dan Hall, 2006).Setiap ginjal memiliki korteks renalis yang berwarna coklat gelap di bagian luar dan medulla renalis yang berwarna coklat terang dibagian dalam.Medula renalis terdiri dari sekitar dua belas piramida renalis. Setiap piramida renalis memiliki basis yang menghadap ke korteks renalis dan apex yang disebut papilla renalis. Bagian korteks yang menonjol ke medulla di antara piramida renalis yang saling berdekatan disebut kolumna renalis bagian bergaris-garis yang membentang dari basis piramida renalis hingga ke korteks disebut radii medularis (Snell, 2006).Dasar dari setiap piramida yang berasal pada perbatasan antara korteks dan medula dan berakhir di papila, yang menonjol ke dalam ruang pelvis ginjal, yaitu sambungan dari ujung ureter bagian atas yang berbentuk corong. Batas luar pelvis terbagi menjadi kantong-kantong dengan dan terbagi menjadi kalises minor, yang mengumpulkan urin dari tubulus setiap papila. Dinding kalises, pelvis, dan ureter terdiri dari elemen- elemen kontraktil yang mendorong urin menuju kandung kemih, tempat urin disimpan sampai dikeluarkan melalui mikturisi (Guyton dan Hall, 2006).

  b.

  Fisiologi Ginjal Fungsi utama ginjal adalah mempertahankan volume dan komposisi cairan ekstrasel dalam batas-batas normal.Komposisi dan volume dari cairan ekstrasel ini dikontrol oleh filtrasi glomerulus, reabsorpsi dan sekresi tubulus (Price dan Wilson,2006).Ginjal mampu menyesuaikan jumlah air dan berbagai konstituen plasma yang dipertahankan di tubuh atau dikeluarkan di urin. Ginjal dapat mempertahankan kesimbangan air dan elektrolit di dalam tubuh dalam kisaran yang sangat sempit walaupun pengeluaran air dan elektrolit melalui saluran lain sangat bervariasi (Sherwood, 2009).

  Disamping itu ginjal memiliki fungsi sebagai berikut: 1)

  Pengaturan keseimbangan air dan elektrolit Untuk menjaga keseimbangan homeostasis, eksresi dari air dan elektrolit haruslah seimbang dengan jumlah air dan elektrolit kebiasaan makan seseorang, sehingga ginjal harus bisa menyesuaikan tingkat ekskresi dengan asupan yang didapat tubuh. 2)

  Pengaturan keseimbangan asam dan basa Ginjal mengatur keseimbangan asam dan basa bersama-sama dengan paru-paru dan cairan tubuh dengan ekskresi asam dan mengatur penyimpanan cairan tubuh. 3)

  Mengatur pembentukan eritrosit Ginjal mengsekresikan enzim eritropoietin yang menstimulasi produksi sel darah merah.Pada kondisi normal ginjal mengsekresi hampir seluruh eritropoietin yang bersikulasi di seluruh tubuh.

  4) Pengaturan produksi 1,25-Dihidroksi Vitamin D3

  Ginjal menghasilkan bentuk aktif dari Vitamin D, 1,25- Dihidroksi Vitamin D3.

  5) Sintesis glukosa

  Ginjal mensintesis glukosa dari asam amino dan perkursor lainnya dalam proses yang disebut glukoneogenesis yang dilakukan selama masa puasa panjang.

  6) Pengaturan tekanan arteri

  Ginjal mengatur tekanan arteri dengan ekskresi sodium dan air.Ginjal juga berperan dalam pengaturan tekanan arteri dalam jangka pendek dengan mengsekresikan faktor vasoaktif. 7)

  Ekskresi hasil buangan metabolik, zat kimia asing, obat dan hormon metabolisme Ginjal adalah organ utama dalam mengeliminasi sisa produk metabolisme yang tidak dibutuhkan lagi oleh tubuh.Sisa produk tersebut harus dielimanasi secepat produk itu diproduksi dari tubuh.

  (Guyton dan Hall, 2006) c. Nefron

  Ginjal memiliki sekitar satu juta unit fungsional mikroskopik yang disatukan oleh jaringan ikat dan disebut nefron.Nefron adalah unit terkecil yang mampu membentuk urin sebagai bagian dari fungsi utama ginjal dalam menghasilkan urin dalam mempertahankan stabilitas komposisi cairan ekstra seluler (Sherwood, 2009). Ginjal tidak dapat meregenerasi nefron baru, oleh karena itu pada kerusakan pada ginjal dan penuaan akan terjadi penurunan jumlah nefron (Guyton dan Hall, 2006). Nefron terdiri dari dua komponen, yaitu komponen vaskular dan komponen tubular.

  1) Komponen Vaskular

  Bagian dominan dari komponen vaskular nefron adalah glomerulus.Glomerulus adalah suatu kuntum kapiler berbentuk bola tempat filtrasi sebagian air dan zat terlarut dari darah yang melewatinya. Cairan yang telah disaring ini dan komposisinya hampir sama dengan plasma, kemudian mengalir melewati komponen tubular nefron, tempat berbagai proses transport mengubahnya menjadi urin.

  Ketika masuk ke ginjal arteri renalis bercabang-cabang hingga akhirnya membentuk banyak pembuluh halus yang disebut arteriol aferen. Setiap nefron akan mendapatkan satu arteriol aferen. Arteriol aferen mengalirkan darah ke glomerulus. Kapiler-kapiler glomerulus akan kembali menyatu untuk membentuk arteriol eferen yang dilalui oleh darah yang tidak terfiltrasi. Arteriol eferen akan bercabang menjadi kapiler kedua, kapiler peritubulus, yang memasok darah ke jaringan ginjal dan penting dalam pertukaran antara sistem tubulus dan darah sewaktu perubahan cairan filtrasi menjadi urin. Kapiler- kapiler ini menyatu membentuk venula yang akhirnya mengalirkan isinya ke vena renalis, yaitu saluran bagi darah untuk meninggalkan ginjal.

  2) Komponen Tubular

  Komponen tubular nefron adalah suatu tabung berongga berisi cairan yang dibentuk oleh satu lapisan sel epitel.Komponen ini terbagi dalam beberapa segmen berdasarkan perbedaan struktur dan fungsinya.

  Komponen tubulus berasal dari kapsul Bowman, suatu invaginasi berdinding rangkap yang melingkupi glomerulus untuk mengumpulkan cairan dari kapiler glomerulus.Dari kapsula Bowman, cairan yang difiltrasi mengalir ke tubulus proksimal yang terletak di dalam korteks dan membentuk gulungan- gulungan rapat.Bagian selanjutnya adalah ansa henle, membentuk lengkung dengan bentuk U tajam atau hair

  pin yang masuk ke dalam medulla ginjal.Pars desendens dari

  ansa henle masuk dari korteks ke medula. Pars asendens berjalan kembali ke korteks.Pars asendens kembali ke region glomerulus nefronnya sendiri, tempat saluran ini berjalan melewati garpu yang dibentuk oleh arteriol aferen dan eferen.

  Di sini akan terjadi spesialisasi membentuk apparatus jukstaglomelurus yang berperan dalam mengatur fungsi ginjal.

  Setelah apparatus jukstaglomerulus, tubulus kembali membentuk kumparan erat dan menjadi tubulus distal yang dalam duktus atau tubulus koligentes, dengan masing-masing duktus menerima cairan dari delapan nefron berbeda. Duktus koligentes berjalan ke dalam medulla untuk mengosongkan cauran isinya (yang berubah menjadi urin) ke dalam pelvis ginjal (Sherwood, 2009) d. Pembentukan urin

  Terdapat tiga proses dasar dalam pembentukan urin, yaitu filtrasi glomerulus, reabsorpsi tubulus, dan sekresi tubulus (Sherwood, 2009) 1)

  Filtrasi Glomerulus Pembentukan urin dimulai ketika sejumlah besar cairan yang bebas dari protein disaring dari pembuluh kapiler glomerulus menuju ke kapsula Bowman. Semua kandungan yang terkandung didalam plasma, kecuali protein, tidak tersaring sehingga kandungannya di dalam plasma dan di dalam filtrat glomerulus hampir sama(Guyton dan Hall, 2006). Cairan yang difiltrasi dari glomerulus ke dalam kapsula Bowman harus melewati dinding kapiler glomerulus, membran basal dan lapisan dalam kapsul Bowman yang membentuk membran glomerulus.Lapisan-lapisan tersebut berfungsi sebagai saringan halus yang menahan sel darah dan protein plasma tetapi meloloskan H O dan zat terlarut dengan

  2 ukuran molekul yang lebih kecil lewat (Sherwood, 2009).

  2) Reabsorpsi Tubulus dan Sekresi tubulus

  Sebelum dikeluarkan sebagai urin, filtrate glomerulus mengalir ke dalam tubulus ginjal, dimulai dari tubulus proksimal, lengkung henle, kemudian tubulus distal, tubulus kolektivus dan akhirnya menuju ke kantung kemih (Guyton dan Hall, 2006).Sebagian besar zat yang difiltrasi direabsorpsi kembali di dalam tubulus sehingga zat tersebut kembali ke dalam kapiler peritubulus yang mengelilingi tubulus. Di sisi lain, beberapa zat disekresikan dari pembuluh darah peritubulus ke dalam tubulus.

  Glukosa dan asam amino direabsorpsi di sepanjang tubulus proksimal melalui transpor aktif.Sedangkan kalium dan asam urat sebagian besar direabsorpsi dan disekresikan di tubulus proksimal.Natrium direabsorpsi secara aktif di tubulus proksimal sejumlah dua pertiga dari natrium yang difiltrasi. Reabsorpsi natrium akan berlanjut di lengkung henle, tubulus distal dan

  2+ 2-

  tubulus kolektivus. Sebagian besar Ca dan HPO

  4 direabsorpsi

  dengan cara transpor aktif di tubulus proksimal. Sedangkan air, klorida dan uurea direbasorpsi secara transpor pasif di tubulus proksimal (Price dan Wilson, 2006).

3. Diuretik

  Diuretik ialah obat yang dapat meningkatkan kecepatan pembentukan penghambat mekanisme transpor elektrolit di dalam tubuli ginjal dan diuretik osmotik (Gunawan et al., 2007). Secara klinis, diuretik juga

• digunakan untuk meningkatkan ekresi dari Na dan anion yang

  mendampinginya, biasanya Cl , atau disebut juga natriuresis. Selain Na , diuretik juga mempengaruhi penanganan asam urea, anion dan kation lainnya oleh ginjal.(Brunton et al., 2006)

  Sebagian besar diuretik menimbulkan efeknya pada membran transpor protein spesifik di permukaan sel epitel luminal tubulus ginjal.Sedangkan diuretik lainnya menimbulkan efek osmotik yang mencegah reabsorpsi air di nefron, menghambat enzim-enzim atau mempengaruhi reseptor hormon di sel epitel ginjal (Katzung, 1995). Tabel .22 akan menjelaskan klasifikasi obat diuretik beserta tempat bekerjanya obat tersebut

  Tabel 2.2Klasifikasi Diuretik dan Tempat Bekerjanya Obat Tempat kerja utama Cara kerja

Diuretik (1) Penghambatan reabsorbsi natrium dan

Tubuli Proksimal osmotik air melalui daya osmotiknya.

  Penghambatan reabsorbsi natrium dan air oleh karena hipertonis daerah (2) Ansa Henle medula menurun. Penghambatan reabsorbsi natrium dan air akibat adanya papillary wash out, kecepatan aliran filtrate yang tinggi, (3)

  Duktus Koligentes atau adanya faktor lain.

Penghambat Tubuli proksimal Penghambatan terhadap reabsorbsi

enzimkarbonik bikarbonat anhidrase

Tiazid Hulu Tubuli Distal Penghambatan terhadap reabsorbsi

natrium klorida

Diuretik Hemat Hilir Tubuli Distal dan Penghambatan reabsorbsi natrium dan

  

Kalium Duktus Koligentes daerah sekresi kalium dengan jalan

korteks antagonisme kompetitif (spironolakton) atau secara langsung (triamteren dan amilorid)

  

Diuretik Kuat Ansa henle bagian asenden Penghambatan terhadap transport

pada bagian dengan epitel elektrolit natrium, Kalium dan Klorida. tebal (Gunawan et al., 2007)

4. Hidroklorotiazid

  HCT adalah derivat thiazid yang telah terbukti lebih populer dibandingkan obat induk (klorotiazid). Hal ini karena kemampuannya untuk menghambat karbonik anhidrase kurang dibandingkan klorotiazid. Obat ini juga lebih kuat, sehingga dosis yang diperlukan kurang dibanding klorotiazid. Selain itu, efektivitasnya sama dengan obat induknya (Mycek et al., 2001). Selain memiliki efek diuresis, hidroklorotiazid juga memiliki efek vasodilator sehingga dapat menurunkan tekanan darah.Pada pasien diabetes insipidus, tiazid justru mengurangi diuresis. Hal ini didugaberdasarkan pengurangan volume plasma yang diikuti penurunan laju filtrasi glomrulus sehingga meningkatkan reabsorpsi Na dan air (Gunawan, et al., 2007) a.

  Farnakokinetika HCT diabsorpsi pada pemberian oral dan disekresi oleh sistem sekretorik asam organik. Diuretik golongan tiazid ini bersaing pada beberapa hal dengan sekresi asam urat oleh sistem tersebut. Sebagai hasilnya, kecepatansekresi asam urat dapat menurun, dengan diikuti penigkatan kadar asam urat dalam serum.

  b.

  Farmakodinamika Diuretik golongan tiazid menghambat reabsorpsi NaCl dari sisi luminal sel epitel dalam tubulus distalis. Diduga terdapat suatu efek ringan pada reabsorpsi NaCl pada bagian akhir tubulus proksimal, tetapi hal tersebut tidak diamati pada tatanan klinik yang umum.

  Relatif hanya sedikit sistem transpor NaCl yang diketahui dapat dihambat oleh thiazid ini. Cara transpor merupakan suatu kotransporter NaCl netral secara elektris yag berbeda dari transporter

  2+

  pada ansa henle. Terdapat pula proses reabsorpsi aktif untuk Ca pada

  Sedangkan di ansa henle biasanya diuretik kuat menghambat

  2+ +

  reabsorbsi Ca2 , tiazid meningkatkan reabsorpsi Ca pada tubulus kontortus distal.Mekanisme terjadinya peningkatan tersebut tidak

• diketahui, tetapi diduga terjadi akibat penurunan Na karena
• penghambatan reabsorbsi Na oleh tiazid. Hal tersebut kemungkinan

  2+ +

  akan meningkatkan pertukaran Na /Ca pada membran basolateral

  2+

  sehingga meningkatkan reabsorbsi Ca . Walaupun terjadi peningkatan

  2+

  reabsorbsi Ca , tiazid jarang menyebabkan hiperkalsemia. Tetapi dapat juga terjadi hiperkalsemia yang disebabkan oleh hal lain seperti hiperparatiroidisme, karsinoma, dan sarkoidosis. Tiazid juga bermanfaat untuk pengobatan batu ginjal yang disebabkan hiperkalsiuria.

  Efek tiazid bergantung pada produksi prostaglandin ginjal dan dapat dihambat oleh obat antiinflamasi nonsteroid pada kondisi tertentu.

  c.

  Indikasi Indikasi utamanya adalah hipertensi, gagal jantung kongestif, nefrolitiasis yang disebabkan hiperkalsiuria idiopatik, dan diabetes insipidus nefrogenik(Katzung, 1995).

B. Kerangka Pemikiran

  Hidroklorotiazid Ekstrak Propolis Diuretik Alami Diuretik Golongan

  Tiazid Flavonoid Stres, Keadaan Ginjal, dehidrasi

  Menghambat Menghambat reabsorpsi air reabsorpsi NaCl dan Natrium pada tubulus pada tubulus

  Nefron Nefron Perbandingan Volume antar Volume Urin

  Volume Urin kelompok Analisis statistik yang diperoleh.

  Gambar 2.2Kerangka Pemikiran C. Hipotesis

  Ekstrak Propolis memiliki efek diuresis pada tikus putih jantan (Rattus

  Norvegicus )

BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorium dengan rancangan penelitian the post test only with control group design. B. Lokasi Penelitian Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Universitas Setia Budi Surakarta. C. Subjek Penelitian 1. Populasi :Tikus putih (Rattus novergicus) 2. Sampel :Tikus putih (Rattus novergicus) di Laboratorium Universitas Setia Budi yang memenuhi kriteria inklusi dan ekslusi. Adapun kriteria inklusi dan ekslusi adalah sebagai berikut: a. Kriteria Inklusi

  1) Galur Strain Wistar

  2) Umur ± 3 bulan

  3) Berat badan ± 200 gram

  4) Jenis kelamin jantan b.

  Kriteria Ekslusi 1)

  Tidak cacat fisik 2)

  Tidak stres

D. Teknik Sampling

  Teknik sampling yang digunakan adalah simple random sampling sehingga probabilitas setiap sampel diketahui dan memiliki kesempatan yang sama untuk diambil menjadi sampel (Budiarto, 2002) E.

   Besar Sampel

  Penentuan besar sampel dilakukan dengan menggunakan rumus Federer(Maryanto dan Fatimah, 2004).

  (n-1) x (t-1) > 15

  Rumus Federer : Keterangan: n = besar sampel tiap kelompok t = banyaknya kelompok (n-1) x (5-1) > 15 (n-1) x 4 > 15 n

• – 1 > 3,75 n > 4,75 Dengan demikian, setiap kelompok minimal diperlukan 5 ekor tikus putih.

  Penelitianinimenggunakan 7 ekor tikus putih pada tiap kelompok dengan jumlah kelompok sebanyak 5 kelompok sehingga jumlah seluruh subjek penelitian sebanyak 35 ekor tikus putih.

F. Identifikasi Variabel Penelitian 1.

  Variabel Bebas Variabel bebas pada penelitian ini adalah dosis pemberian ekstrak propolis. Skala pengukurannya adalah skala nominal.

  2. Variabel Terikat Variabel terikat pada penelitian ini adalah volume urin tikus putih (Rattus novergicus). Skala pengukurannya adalah skala rasio.

  3. Variabel Pengganggu a.

  Variabel pengganggu yang terkendali 1)

  Adanya stres terhadap adaptasi lingkungan di tempat percobaan dilakukan.

  2) Umur, jenis kelamin, berat badan dan makanan.

  b.

  Variabel pengganggu yang tidak terkendali 1)

  Variasi kepekaan tikus putih terhadap zat dan obat yang diberikan pada percobaan.

  2) Keadaan ginjal tikus putih.

G. Definisi Operasional Variabel 1.

  Variabel bebas: pemberian ekstrak propolis Ekstrak propolis adalah ekstrak etanol dari propolis. Propolis didapat dari peternak lebah di Sragen yang kemudian diekstrasi di Laboratorium

  Universitas Setiabudi Surakarta.Ekstraksi dilakukan dengan metode dimilikinya, salah satunya hasil ekstraksi berupa bahan aktif yang tinggi. Ekstrak yang diperoleh diperiksa kandungan kimianyadan menunjukkan hasil positif terhadap golongan flavonoid (Suresh A, et al., 2010). Dosis yang digunakan adalah 30mg/200g BB, 60mg/200g BB dan 120mg/200g BB. Skala yang digunakan adalah skala ordinal.

  2. Variabel terikat: volume urin tikus putih Efek diuresis adalah volume urin yang dihitung dari nilai rata-rata pengeluaran urin tikus putih selama 24 jam dimana pengamatan dilakukan setiap 6 jam sampai 4 kali setelah pemberian perlakuan. Penghitungan waktu menggunakan stopwatch dan untuk mengukur volume urin diukur dengan injection spuit. Skala pengukuran yang digunakan adalah skala rasio.

  3. Variabel pengganggu a.

  Variabel pengganggu yang dapat dikendalikan. Variabel ini dikendalikan melalui homogenisasi dan adaptasi terhadap lingkungan.

  1) Stres terhadap lingkungan

  Stres terhadap lingkungan dikendalikan dengan mengadaptasi tikus putih selama satu minggu sebelum pemberian perlakuan.

  2) Variasi Genetik

  Jenis hewan coba yang digunakan adalah tikus putih dengan galur Strain Wistar.

  3) Jenis Kelamin Jenis kelamin yang digunakan adalah jantan.

  4) Umur Tikus putih yang digunakan memiliki umur ± 3 bulan.

  5) Makanan Makanan yang diberikan berupa pelet dan minuman dari air PAM.

  b.

  Variabel pengganggu yang tidak dapat dikendalikan 1)

  Variasi kepekaan tikus terhadap zat dan obat yang diberikan Setiap tikus bisa saja mempunyai tingkat kepekaan yang berbeda terhadap zat dan obat yang diberikan selama penelitian.

  2) Keadaan ginjal tikus

  Pada penelitian tidak dilakukan pemeriksaan ginjal sebelum perlakuan sehingga bisa saja kondisi ginjal tikus sudah tidak baik dari awal penelitian.

H. Rancangan Penelitian

  Tikus Putih Jantan(35 ekor) Diadaptasikan selama 7 hari

  Dipuasakan selama 48 jam, tetap diberikan minum air

Kelompok I Kelompok Kelompok Kelompok Kelompok

(7 Ekor)

  II(7 Ekor)

  III(7Ekor)

  IV(7 Ekor) V(7 Ekor)

• HCT0,3 +Ekstrak +Ekstrak

  Ekstrak mg/200 g Propolis 30 Propolis120 Propolis60

  Aquadest BB tikus mg/200 g BB mg/200g BB mg/200 g BB putih/2,5 ml tikus tikus tikus

  2,5 ml putih/2,5 ml putih/2,5 ml putih/2,5 ml

Penampungan urin selama 6 jam

  

Pengukuran volume urin tiap 6 jam,

selama 24 jam

Analisis data dengan uji statistik Anova dan

dilanjutkan dengan uji post-hoc

  Gambar 3.1Rancangan Penelitian

I. Instrumen Penelitian 1.

  Metabolic cage complete set for rats: Tempat uji diuretik untuk tikus putih.

  2. Kandang tikus: tempat untuk mengadaptasikan tikus putih pada lingkungan tempat percobaan.

  3. Timbangan hewan: timbangan duduk dan timbangan neraca untuk menimbang berat badan tikus putih.

  4. Spuit pencekok: alat untuk memasukkan ekstrak bahan penguji pada tikus putih secara peroral.

  5. Bekker Glass: alat untuk membuat ekstrak propolis 6.

  Stopwatch: alat untuk mengetahui waktu pada saat pengukuran volume urin

  7. Injection spuit: alat untuk mengukur volume urin hasil uji diuretik.

  J. Bahan Penelitian 1.

  Pelet sebagai bahan makanan tikus putih.

  2. Ekstrak Propolis sebagai bahan uji.

  3. Aquadest sebagai kontrol negatif.

  4. Hidroklorotiazid sebagai kontrol positif.

  K. Cara Kerja 1.

  Membuat Ekstrak Propolis Ekstrak pada percobaan ini dibuat di Laboratorium Universitas pelarut etanol 70%. Ekstrakkemudian diencerkan dan diberikan per oral pada tikus.

2. Penentuan Dosis a.

  Dosis Ekstrak Propolis Volume cairan maksimal yang dapat diberikan secara per oral pada tikus adalah 5 ml/100 g (Ngatidjan, 1991). Disarankan takaran dosis tidak sampai melebihi setengah kali volume maksimalnya (Imono dan Nurlila, 1986). Pada percobaan pemberian ekstrak etanol propolis pada tikus putih model diabetes didapatkan bahwa ekstrak etanol propolis pada dosis 300mg/kg BB dapat memberikan efek nephroprotektor (Abo-Salem, 2009). Berdasarkan tabel konversi perhitungan dosis untuk berbagai spesies dan manusia, nilai konversi dosis dari manusia dengan berat badan 70 kg dengan tikus putih 200 gram adalah 0,018(Ngatidjan, 1991). Maka dosis ekstrak propolis yang digunakan adalah: = (300mg x 200/1000 g )/200 g BB tikus putih

  = 60 mg/200 g BB tikus putih Dalam percobaan digunakan dosis ekstrak propolis bertingkat: Kelompok uji I: Dosis rendah/dosis 1 = 0,5 x 60 mg/200g BB = 30 mg/200g BB Kelompok uji II: Dosis sedang/ dosis 2 = 1 x 60 Kelompok uji III: Dosis tinggi/dosis 3= 2 x 60 mg/200g BB = 120 mg/200g BB b.

  Dosis Hidroklorotiazid Berdasarkan tabel konversi perhitungan dosis untuk berbagai spesies dan manusia, konversi dosis manusia dengan berat badan 70 kg pada tikus dengan berat 200 g adalah 0,018. Volume cairan maksimal yang dapat diberikan per oral pada tikus adalah 5 ml/100 g BB (Ngatidjan, 1991). Disarankan takaran dosis tidak sampai melebihi setengah kali volume maksimalnya (Imono dan Nurlaila, 1986). Dosis HCT yang digunakan sebagai diuretik adalah 25 mg/ hari (Gunawan, 2007). Di Indonesia, berat rata-rata manusia adalah 50 kg, maka dosis hidroklorotiazid untuk tikus putih yaitu:

  = (25 mg x 0,018 x 50/70)/200 g BB tikus putih = 0,32 mg/200 g BB tikus putih  0,3 mg/200 g BB tikus putih 3. Langkah Penelitian a.

  Sebelum Perlakuan Sebelum diberikan perlakuan, hewan diadaptasi kurang lebih selama 1 minggu di tempat percobaan dan dipuasakan selama 48 jam sebelum diberi perlakuan. Hewan uji kemudian dibagi secara acak ke dalam 5 kelompok yang terdiri dari 7 ekor tikus putih. Kemudian tikus putih ditimbang dengan timbangan hewan dan kemudian diberi perlakuan.

  b. Pemberian Perlakuan 1)

  Kelompok 1: tikus putih diberi aquadest 2,5 ml sebagai kontrol negatif 2)

  Kelompok 2: tikus putih diberi hidroklorotiazid dosis 0,3mg/200 g BB tikus putih/2,5 ml

  3) Kelompok 3: tikus putih diberi ekstrak propolis 30 mg/200g BB tikus putih/2,5 ml

  4) Kelompok 4: tikus putih diberi ekstrak propolis 60 mg/200g BB tikus putih/2,5 ml

  5) Kelompok 5: tikus putih diberi ekstrak propolis 120 mg/200 g BB tikus putih/2,5 ml c.

  Sesudah Perlakuan Tiap tikus putih langsung dimasukkan ke dalam metabolic cage

  complete set for rats untuk uji diuretik. Pengukuran dilakukan setiap 6 jam selama 24 jam setelah pemberian perlakuan.

  L. Teknik Analisis Data

  Data yang didapat dianalisis secara statistik menggunakan uji one-way ANOVA untuk membandingkan perbedaan rerata lebih dari dua kelompok dengan derajat kemaknaan α = 0,05. Kemudian, data dianalisis dengan uji

  post-hoc untuk mengetahuidi antara kelompok perlakuan yang mempunyai nilai signifikan paling berbeda.