TESIS PERBANDINGAN KADAR IFN-γ DAN IL-10 PADA SERUM MATERNAL ANTARA EARLY-ONSET PREECLAMPSIA DENGAN LATE-ONSET PREECLAMPSIA
TESIS PERBANDINGAN KADAR IFN-γ DAN IL-10 PADA SERUM MATERNAL ANTARA EARLY-ONSET PREECLAMPSIA DENGAN LATE-ONSET PREECLAMPSIA
Siti Nur Khalida
SEKOLAH PASCASARJANA UNIVERSITAS AIRLANGGA SURABAYA 2015
TESIS PERBANDINGAN KADAR IFN-γ DAN IL-10 PADA SERUM MATERNAL ANTARA EARLY-ONSET PREECLAMPSIA DENGAN LATE-ONSET PREECLAMPSIA
Siti Nur Khalida
SEKOLAH PASCASARJANA UNIVERSITAS AIRLANGGA SURABAYA 2015
PERBANDINGAN KADAR IFN-γ DAN IL-10 PADA SERUM MATERNAL ANTARA EARLY-ONSET PREECLAMPSIA DENGAN LATE-ONSET PREECLAMPSIA
TESIS Untuk memperoleh Gelar Magister
Dalam Program Studi Imunologi Sekolah Pascasarjana Universitas Airlangga
Oleh: Siti Nur Khalida
091314353002
PROGRAM PASCASARJANA UNIVERSITAS AIRLANGGA SURABAYA 2015
LEMBAR PENGESAHAN
TESIS INI TELAH DISETUJUI PADA TANGGAL, 28 OKTOBER 2015
Oleh Pembimbing ketua :
Prof. Dr. Jusak Nugraha, dr., MS., SpPK (K)
NIP. 19560214 198502 1 001 Pembimbing :
Dr. Aditiawarman, dr., SpOG (K)
NIP. 19581101 198610 1 002 Mengetahui,
Ketua Program Studi Magister Imunologi Pascasarjana Universitas Airlangga Surabaya
Prof. Dr. I Ketut Sudiana, Drs., M.Si
NIP. 19550705 198003 1 005 Telah diuji pada Tanggal 12 Oktober 2015 PANITIA PENGUJI TESIS Ketua : Prof. Dr. I Ketut Sudiana, Drs., M.Si Anggota : 1. Prof. Dr. Jusak Nugraha, dr., MS., SpPK (K)
2. Dr. Aditiawarman, dr., SpOG (K)
3. Dr. Agus Sulistyono, dr., SpOG (K)
4. Dr. dr. Budiono, M.Kes
RINGKASAN Perbandingan kadar IFN-γ dan IL-10 pada serum maternal antara early- onset preeclampsia dengan late-onset preeclampsia
Preeklampsia merupakan komplikasi kehamilan yang terjadi. pada sekitar 3- 9% dari seluruh kehamilan di seluruh dunia. Preeklampsia dibagi menjadi dua klasifikasi berdasarkan patogenesis yang berbeda yaitu early-onset preeclampsia, yang muncul sebelum usia kehamilan 34 minggu dan late-onset preeclampsia, yang muncul saat atau setelah usia kehamilan 34 minggu
Pada early-onset preeclampsia, diyakini terjadi kegagalan invasi trofoblas yang disebabkan oleh imunitas maternal tidak tolerans terhadap antigen fetal. Sedangkan pada late-onset preeclampsia, terjadi peningkatan kerentanan vaskular maternal terhadap kondisi inflamasi normal yang terjadi selama kehamilan atau aterosis pada plasenta yang normalnya terjadi pada akhir kehamilan. Kedua patogenesis tersebut masih belum jelas namun keduanya dapat dikaitkan dengan respon imun maternal, salah satunya ketidakseimbangan produksi IFN-γ dan IL- 10.
Banyak penelitian yang telah dilakukan untuk membandingkan kadar IFN-γ dan IL-10 pada preeklampsia dan hamil normal, namun hasil yang didapatkan masih menunjukkan kontroversi, sehingga peneliti ingin tahu perbandingan kadar
IFN-γ dan IL-10 pada serum maternal yang mengalami early-onset preeclampsia dan late-onset preeclampsia.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membandingkan kadar IFN-γ dan IL- 10 pada serum maternal antara early-onset preeclampsia dengan late-onset
preeclampsia.
Penelitian ini menggunakan rancangan cross-sectional dan dilakukan di RSUD dr.Mohammad Soewandhie Surabaya sejak bulan Juni – Agustus 2015. Selama penelitian didapatkan 13 sampel early-onset preeclampsia, 13 sampel
late-onset preeclampsia, 13 sampel hamil normal <34 minggu (kontrol early) dan
13 sampel hamil normal ≥34 minggu (kontrol late). Dilakukan matching kelompok kontrol. Kemudian, dilakukan pemeriksaan kadar IFN-γ dan IL-10 dari semua sampel serum menggunakan metode ELISA. Kemudian dilakukan analisis statistik.
Berdasarkan hasil analisis statistik, didapatkan didapatkan nilai median kadar
IFN-γ pada early-onset preeclampsia 0 pg/ml (0-149,1 pg/ml), pada late-onset
preeclampsia 0 pg/ml, pada kelompok kontrol early 0 pg/ml (0-56,6 pg/ml), dan
pada kelompok kontrol late 0 pg/ml (0-92,7 pg/ml). Hal ini kemungkinan terjadi karena kadar IFN-γ pada sampel lebih rendah dari ambang batas terendah deteksi kit ELISA IFN-γ human (R&D system inc). Sementara itu, nilai median kadar IL- 10 pada early-onset preeclampsia adalah 91 pg/ml (6,2-163,90 pg/ml), pada late-
onset preeclampsia 12,9 pg/ml (3,5 – 110,70 pg/ml), pada kontrol early 8,9 pg/ml
(0-36,5 pg/ml) dan pada kontrol late 4,8 pg/ml (0-38,8 pg/ml) Secara statistik, tidak terdapat perbedaan bermakna kadar IFN-γ antara early-onset preeclampsia dengan late-onset preeclampsia, begitu pula dengan kelompok kontrol (harga p = 0,073). Sedangkan, menurut statistik didapatkan perbedaan bermakna kadar IL-10 antara early-onset preeclampsia dengan late-onset preeclampsia, begitu pula dengan kelompok kontrol (harga p <0,0001).
Kesimpulan, tidak terdapat perbedaan bermakna kadar IFN-γ pada serum maternal baik pada kelompok early-onset preeclampsia maupun late-onset
preeclampsia, sedangkan kadar IL-10 pada serum maternal dengan early-onset preeclampsia lebih tinggi dibandingkan late-onset preeclampsia, begitu pula
kadar IL-10 pada serum maternal dengan preeklampsia lebih tinggi dibandingkan hamil normal.
Oleh karena kadar IFN-γ pada serum sampel terlalu rendah, sehingga tidak terdeteksi oleh kit ELISA IFN-γ human (R&D system Inc) yang digunakan. Oleh karena itu kami menyarankan untuk penelitian selanjutnya dapat menggunakan kit
ELISA IFN-γ human yang memiliki ambang batas deteksi kadar IFN-γ lebih rendah.
SUMMARY
IFN-γ and IL-10 levels in maternal serum between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia
Preeclampsia is a pregnancy complication that affect about 3 – 9% of all pregnancies worldwide. Nowadays, preeclampsia was divided into early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia classification based on the pathogenesis of the disease. Early-onset preeclampsia happen before 34 weeks of pregnancy and late-onset preeclampsia happen after 34 weeks of pregnancy.
Altered trophoblast invasion caused by non-tolerance maternal immunity play a role in development of early-onset preeclampsia. Whereas, the increasing of maternal vascular susceptibility to normal inflammation condition that happen during the pregnancy or the atherosis of placenta that normally happen at the end of pregnancy were play a role in development of late-onset preeclampsia. Both pathogenesis was associated to maternal immune response, such as imbalance production of IFN-γ and IL-10.
Many study were conducted to compare the IFN-γ and IL-10 level between preeclampsia and normal pregnancy, but the results still controversial, so that we want to compare the IFN-γ and IL-10 levels in maternal serum between early- onset preeclampsia and late-onset preeclampsia.
The aim of this studi is to compare the IFN-γ and IL-10 levels on maternal serum between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia. This study used cross-sectional design, and was held on dr. Mohammad
Soewandhie hospital, Surabaya, East Java province, Indonesia, from June until August 2015. This research involved 13 pregnant women with early-onset of preeclampsia, 13 pregnant women with late-onset of preeclampsia, 13 pregnant woman with gestasional age <34 weeks (control early), and 13 pregnant woman with gestasional age ≥34 weeks (control late), total 52 sample that recruited to this study, the control group were matched. And then, we do ELISA to estimate IFN-γ dan IL-10 levels. Then, we do the statistical analysis.
According to statistical analysis, we got median from IFN-γ levels on early- onset of preeclampsia is 0 pg/ml (0-149,1 pg/ml), late-onset of preeclampsia is 0 pg/ml, control group of early-onset preeclampsia is 0 pg/ml (0-56,6 pg/ml) and control group of late-onset preeclampsia group is 0 pg/ml (0-92,7 pg/ml). This result might be happen because the IFN-γ levels is below than ELISA kit for IFN- γ human (R&D system inc) detection limit threshold. Conversely, median from
IL-10 level on early-onset of preeclampsia is 91 pg/ml (6,2-163,90 pg/ml), late- onset of preeclampsia is 12,9 pg/ml (3,5 – 110,70 pg/ml), control group of early- onset preeclampsia is 8,9 pg/ml (0-36,5 pg/ml), and control group of late-onset preeclampsia is 4,8 pg/ml (0-38,8 pg/ml). Statictically, there is no significant different of IFN-γ levels between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia group, so do the control group (p-value= 0,073). Whereas, there is significant different of IL-10 levels between early-onset preeclampsia and late- onset preeclampsia group, so do the control group (p value<0,0001).
Conclusion, there is no significant different of IFN-γ levels in maternal serum between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia, whereas IL-10 levels in maternal serum with early-onset preeclampsia is higher than late-onset of preeclampsia and IL-10 levels in maternal serum with preeclampsia is higher than normal pregnancies..
In this study, the IFN-γ levels is below than ELISA kit for IFN-γ human (R&D system inc) detection limit threshold. So, we suggest to use ELISA kit for IFN-γ human that have lowest detection limit threshold for further study.
ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan kadar IFN-γ dan IL-10 pada serum maternal antara early-onset preeclampsia dengan late-onset
preeclampsia. Penelitian ini dilakukan di RSUD dr.Mohammad Suwandhie Surabaya sejak Juni – Agustus 2015, menggunakan rancangan cross-sectional.
Didapatkan 13 sampel early-onset preeclampsia, 13 sampel late-onset
preeclampsia, 13 sampel hamil normal <34 minggu dan 13 sampel hamil normal
≥34 minggu, total 52 sampel serum yang kemudian dilakukan pemeriksaan IFN-γ dan IL-10 serum dengan ELISA. Berdasarkah hasil analisis statistik, tidak terdapat perbedaan bermakna kadar IFN-γ baik antara kelompok early-onset
preeclampsia dengan kelompok late-onset preeclampsia, maupun antara
kelompok preeklampsia dengan kelompok kontrol (harga p = 0,073). Sedangkan, menurut statistik didapatkan perbedaan bermakna kadar IL-10 antara kelompok
early-onset preeclampsia dengan kelompok late-onset preeclampsia, begitu pula antara kelompok preeklampsia dengan kelompok kontrol (harga p <0,0001).
Kesimpulan, tidak ada perbedaan bermakna kadar IFN-γ pada serum maternal baik antara kelompok early-onset preeclampsia dengan late-onset preeclampsia, maupun antara kelompok preeklampsia dengan kelompok kontrol dan terdapat perbedaan bermakna kadar IL-10 pada serum maternal baik antara early-onset
preeclampsia dibandingkan late-onset preeclampsia, maupun antara kelompok preeklampsia dibandingkan kelompok kontrol.
Kata kunci: early-onset preeclampsia, late-onset preeclampsia, IFN-γ, IL-10
ABSTRACT
This study was conducted to compare the IFN-γ and IL-10 levels on maternal serum between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia. We used cross-sectional design, and was held on dr. Mohammad Soewandhie hospital, Surabaya, East Java province, Indonesia, from June until August 2015. This research involved 13 pregnant women with early-onset of preeclampsia, 13 pregnant women with late-onset of preeclampsia, 13 pregnant woman with gestasional age <34 weeks, and 13 pregnant woman with gestasional age ≥34 weeks, total 52 sample that recruited to this study. The IFN-γ and IL-10 serum levels were estimated with ELISA. According to statistical analysis, we got no significant different of IFN-γ levels neither between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia group, nor between the preeclamptic group and control group (p-value= 0,073). Whereas, there is significant different of IL-10 levels between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia group, so do between the preeclamptic group and control group (p value<0,0001). Conclusions, there is no significant different of IFN-γ levels in maternal serum neither between early-onset preeclampsia and late-onset preeclampsia, nor between the preeclamptic group and control group. There is significant different of IL-10 levels in maternal serum neither between early-onset preeclampsia and late-onset of preeclampsia, nor between the preeclamptic group and control group. Keyword: early-onset preeclampsia, late-onset preeclampsia, IFN-γ, IL-10
DAFTAR ISI
19 2.3 Interleukin-10…………………………………………..
2.2.1 Struktur IFN-γ…………………………………… 2.2.2 Sumber Seluler IFN-γ…………………………….
2.2.3 Aktivitas Biologis IFN-γ………………………… 2.2.4 Peran IFN-γ dalam Kehamilan…………………...
17
17
18
19
2.3.1 Struktur IL-10…………………………………….
10
2.3.2 Sumber Seluler IL-10…………………………….
2.3.3 Aktivitas Biologis IL-10………………………… 2.3.4 Peran IL-10 dalam Kehamilan…………………...
21
21
22
23
24 BAB 3 KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS PENELITIAN………………………………………………………….
16 2.2 Interferon Gamma……………………….……………..
8
Halaman Sampul Depan………………………………………………………….. i Sampul Dalam………………………………………………………….. ii Prasyarat Gelar………………………………………………………..... iii Surat Pernyataan………………………………………………………... iv Persetujuan………..……..………………………………………...…… v Susunan Panitia Penguji………………………………………………... vi Ucapan Terima Kasih…………………………………………………... vii Ringkasan…………………………………………………………...….. x Summary…………………………………………………………...…... xii Abstrak…………………………………………………………………. xiv Abstract………………………………………………………...………. xv DAFTAR ISI............................................................................................ xvi DAFTAR TABEL.................................................................................... xviii DAFTAR GAMBAR...............................................................................
BAB II BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA......................................................... 6 2.1 Preeklampsia…………...……………………................
DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………........ xix xx
DAFTAR SINGKATAN…..…………………………………………… xxi
BAB 1 PENDAHULUAN.................................................................. 1
1.1 Latar Belakang................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah........................................................... 4
1.3 Tujuan Penelitian............................................................. 4
1.4 Manfaat Penelitian........................................................... 5
2.1.1 Definisi………………………...………………… 2.1.2 Epidemiologi……………………………………..
7
2.1.3 Etiologi dan Faktor Risiko……………………….
2.1.4 Proses Implantasi Normal dan Preeklampsia…….
2.1.5 Imunopatogenesis………………………………...
2.1.6 Diagnosis Preeklampsia………………………….
6
6
6
27
BAB 4 METODE PENELITIAN…………………………….......... 30
4.1 Jenis dan Rancangan Penelitian………………………... 30
4.2 Populasi, Sampel, Besar Sampel, dan Teknik Pengambilan sampel………………………………..…...
30
4.2.1 Populasi Target……………………………………
30
4.2.2 Populasi Terjangkau………………………………
30 4.2.3 Sampel…………………………………………….
30 4.2.4 Besar Sampel……………………………………...
31 4.2.5 Teknik Pengambilan Sampel……………………...
32 4.3 Variabel Penelitian ……………………………………..
33 4.3.1 Klasifikasi Variabel……………………………….
33
4.3.2 Batasan Operasional………………………………
33
4.4 Bahan dan Instrumen Penelitian………………………... 34
4.5 Lokasi dan Waktu Penelitian...…………………………. 35
4.6 Prosedur Pengumpulan Data…………………………… 35
4.7 Cara Kerja……………………………………………… 36
4.8 Alur Penelitian….………………………………………. 39
4.9 Cara Pengolahan dan Analisa Data…………………….. 40
BAB 5 HASIL PENELITIAN…………………………………...... 41
5.1 Karakteristik subyek penelitian…………………………. 41
5.2 Perbandingan kadar IFN-γ……………………………… 44
5.3 Perbandingan kadar IL-10……………………………… 45
BAB 6 PEMBAHASAN…………………………………………… 47
6.1 Hubungan karakteristik subyek penelitian dengan kejadian preeklampsia…………………………….…….
47
6.2 Perbandingan kadar IFN-γ………………………………. 49
6.3 Perbandingan kadar IL-10………………………………. 52
BAB 7 PENUTUP………………………………………………… 54
7.1 Kesimpulan……………………………………………… 54
7.2 Saran…………………………………………………….. 54
DAFTAR PUSTAKA
56
DAFTAR TABEL Halaman
Tabel 2.1 Interaksi antara sel NK uterus dengan molekul HLA yang diekspresikan oleh trofoblas……………………....…………11 Tabel 2.2 Kriteria diagnosis preeklampsia…….......…………………… 16
Tabel 5.1 Karakteristik subyek penelitian……………………………… 41Tabel 5.2 Perbandingan kadar IFN-γ antar kelompok………………….. 44Tabel 5.3 Perbandingan kadar IL-10 antar kelompok………………….. 46DAFTAR GAMBAR
Halaman