Uji Aktivitas Diuretik Crude Ekstrak Etanol Herba Pecut Kuda (Stachytharpheta jamaicensis L.Vahl) Pada Tikus Jantan

Lampiran 1. Identifikasi Tumbuhan

52
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Komite Etik Penelitian Hewan

53
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Tumbuhan Pecut Kuda

Tumbuhan Pecut Kuda

Simplisia Pecut Kuda

54
Universitas Sumatera Utara

Serbuk Simplisia Pecut Kuda

55
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik

1
2

3
4
5

Keterangan:
1. Rambut kelenjar

2.
3.
4.
5.

Stomata tipe diasitik
Epidermis
Lapisan gabus
Pembuluh kayu dengan penebalan jala

56
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia Pecut Kuda
dan Ekstrak Pecut Kuda
1.

Perhitungan Penetapan Kadar Air

a. % Kadar Air =

�

� �

Berat sampel = 5,011 g
Volume air

= 0,4 mL

% Kadar air

=

�

�

X 100%

0,4 ml
x 100% = 7,98%
5,011 g

b. Berat sampel = 5,012 g

Volume air

= 0,5 mL

% Kadar air

=

0,5 ml
x 100% = 9,97%
5,012 g

c. Berat sampel = 5,004 g
Volume air
% Kadar air

= 0,4 mL
=

0,4 ml

x 100% = 7,99%
5,004 g

% Kadar air rata-rata =

7,98%  9,97%  7,99%
= 8,61%
3

57
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (lanjutan)
2.

Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air
% Kadar Sari Larut Dalam Air =

a. Berat sampel = 5,0193 g
Berat sari

b. Berat sampel = 5,0110 g

,

�

�

,

�

�

x

x 100%

x

x 100% = 20,34 %

= 0,2021 g

% Kadar sari larut dalam air =
c. Berat sampel = 5,0187 g
Berat sari

� �

= 0,2042 g

% Kadar sari larut dalam air =

Berat sari

�

�

,

�

,

�

x

x 100% = 20,16 %

= 0,201 g

% Kadar sari larut dalam air =

,

,

�

�

% Kadar sari larut dalam air rata-rata =

x

x 100% = 20,02 %

20,34%  20,13%  20,02%
3

= 20,16%

58
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (lanjutan)

a. Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol
% Kadar Sari Larut Dalam Etanol =
a. Berat sampel = 5,0092 g
Berat sari

b. Berat sampel = 5,0010 g

�

�

x

x 100%

,

,

�

�

x

x 100% = 29,35 %

,

�

x

x 100% = 29,34 %

,

�

x

x 100% = 27,25 %

= 0,294 g

% Kadar sari larut dalam etanol =
c. Berat sampel = 5,0086 g
Berat sari

� �

= 0,284 g

% Kadar sari larut dalam etanol =

Berat sari

�

�

,

�

= 0, 273 g

% Kadar sari larut dalam etanol =

,

�

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =

28,34%  29,34%  27,25%
3

= 28,31%

59
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (lanjutan)
b. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total
% Kadar Abu Total =
a. Berat sampel = 3,06 g
Berat abu

�

�

,

�

,

�

b. Berat sampel = 3,08 g
= 0,18 g

% Kadar abu total =

,

,

c. Berat sampel = 3,04 g
Berat abu

�

X 100%

= 0,16 g

% Kadar abu total =

Berat abu

�

�

,

,

x 100% = 5,22 %

�

�

�

�

x 100% = 5,26 %

x 100% = 5,84 %

= 0,16 g

% Kadar abu total =

,

,

�

�

x 100% = 5,26 %

% Kadar abu total rata-rata =

5,22 %  5,84 %  5,26%
 5,44%
3

60
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (lanjutan)
c. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
% Kadar Abu Tidak Larut Asam =
a. Berat sampel = 3,06 g
Berat abu

�

�

b. Berat sampel = 3,08 g

X 100%

,

,

�

�

X 100% = 0,32 %

,

,

�

�

X 100% = 0,64 %

,

�

X 100% = 0,32 %

= 0,02 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam =
c. Berat sampel = 3,04 g
Berat abu

�

= 0,01 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam =

Berat abu

�

�

= 0,01 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam =

,

�

% Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata
=

0,0,32%  0,64%  0,32%
 0,42%
3

61
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (lanjutan)
d.

Perhitungan Penetapan Kadar Air Ekstrak
% Kadar Air =

� �

�

a. Berat sampel = 5,091 g
Volume air

= 0,3 mL

% Kadar air

=

,

,

�

�

,

,

�

x 100%

�

x 100% = 3,92 %

x 100% = 5,89 %

b. Berat sampel = 5,090 g
Volume air

= 0,4 mL

% Kadar air

=

,

,

�

x 100% = 7,85 %

c. Berat sampel = 5,092 g
Volume air

= 0,2 mL

% Kadar air

=

,

,

% Kadar air rata-rata =

�

x 100% = 3,92 %

5,89 %  7,85%  3,92%
= 5,88 %
3

62
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)
e. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total Ekstrak
% Kadar Abu Total =

�

�

a. Berat sampel

= 3,04 g

Berat abu

= 0,07 g

% Kadar abu total

=

,

�

,

�

b. Berat sampel

= 3,03 g

Berat abu

= 0,12 g

% Kadar abu total

=

,

�

,

�

c. Berat sampel

= 3,06 g

Berat abu

= 0,10 g

% Kadar abu total

=

,

,

�

% Kadar abu total rata-rata
=

�

�

�

�

X 100%

X 100% = 2,3 %

X 100% = 3,96 %

X 100% = 3,26 %

2,3%  3,96%  3,26%
 3,17%
3

63
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)
f. Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam Ekstrak
% Kadar Sari Larut Dalam Etanol =
a. Berat sampel = 3,06 g
Berat abu

= 0,02 g

,

,

�

�

�

b. Berat sampel = 3,04 g

�

x

�

x 100%

,

,

�

�

X 100% = 0,65 %

,

,

�

�

X 100% = 0,32 %

,

�

X 100% = 0,65 %

= 0,01 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam =
c. Berat sampel = 3,05 g
Berat abu

� �

X 100% = 0,65 %

% Kadar abu tidak larut dalam asam =

Berat abu

�

= 0,02 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam =

,

�

% Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata



0,65%  0,32%  0,65%
 0,54%
3

64
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Alat yang digunakan

Modifikasi alat penampung urin

Alat AAS

65
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. (Lanjutan)

Alat pH meter

66
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Data volume urin (mL), kadar natrim urin (meq/L), kadar kalium
dalam urin (meq/L), pH dalam urin setelah pemberian ekstrak dan pembanding
(furosemid)
Parameter

1.

Furosemid 10
mg/kg bb

1,5
0,8
1.6
1,2
1,3
1,28 ±
0,31
38,44
27,68
34,35
29,31
26,51
31,25 ±
5,00
15,38
22,86
22,46
20,18
18,93
19,96 ±
3,03

5,0
4,5
3,7
4,0
4,1
4,26 ±
0,50
94,39
98,05
91,22
94,76
87,03
93,09 ±
4,16
47,08
51,34
52,30
45,40
52,83
49,79 ±
3,3

7,1
7,0
7,1
7,5
7,2
7,18 ±
0,19

7,2
6,9
7,4
7,5
6,9
7,18 ±
0,27

Volume
urin (mL)

2.

Rata-rata ±
Sd
Kadar
natrium
(meq/L)

3.

Rata-rata ±
Sd
Kadar
kalium
(meq/L)

Rata-rata ±
Sd
4.

Kontrol
CMC-Na
0,5%

pH urin
(mL)

Rata-rata ±
Sd

Ekstrak Crude Etanol Pecut
Kuda
Dosis100 Dosis150 Dosis200
mg/kg
mg/kg bb mg/kg
bb
bb
2,9
3,2
3,9
3,1
3,5
3,7
2,5
3,9
3,6
2,7
3,3
3,3
3,0
3,4
3,6
2,84 ±
3,46 ±
3,62 ±
0,24
0,27
0,21
50,25
60,79
73,31
49,84
69,82
91,11
59,70
63,08
76,28
52,55
61,13
73,25
60,89
61,85
71,77
53,64 ±
63,33 ± 77,14 ±
4,49
3,73
7,97
34,61
35,36
40,06
29,42
36,75
41,50
30,04
37,65
43,19
27,13
30,61
38,47
26,93
36,11
39,06
29,62 ±
35,29 ±
40,4
3,10
2,75
± 1,91
7,0
6,8
7,5
7,3
7,0
7,12 ±
0,27

7,1
7,6
7,4
7,4
7,3
7,36 ±
0,18

7,7
7,3
7,3
7,4
7,6
7,46 ±
0,18

67
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Contoh dosis perhitungan dosis CMC-Na 0,5%
-

Perhitungan CMC-Na 0,5% pada tikus 200 mg

1g
x 200 g
100 ml
-

Volume yang diberikan
= 2mL

68
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Contoh Perhitungan Dosis Furosemid
Furosemid yang digunakan mengandung 40 mg
-

Menurut FI edisi III, penetapan kadar tablet = 20 tablet, maka diambil
20 tablet furosemid, digerus dan ditimbang berat totalnya = 3415,5 mg

-

Berat bahan aktif furosemid dalam 20 tablet furosemid adalah
= 40 mg/tab x 20 tab = 800 mg.

-

-

Serbuk tablet furosemid yang digunakan :
mg

=

X

, mg

Volume yang diberikan =

X = 42,69 mg ≈ 43 mg
x BB

Misal BB tikus = 200 g
Maka volume suspensi furosemid yang diberikan

x 200 g = 2 mL.

69
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Contoh Perhitungan Dosis Dari Crude Ekstrak Etanol Pecut Kuda

-

Untuk dosis 100 mg/kg bb pada tikus 200 g

1 00 mg/kg bb
x 200 g  20 mg
1000 g
Volume yang diberikan =
-

20 mg
x 10 ml  2 ml
100 mg

Untuk dosis 150 mg/kg bb pada tikus 20

150 mg/kg bb
x 200 g  30 mg
1000 g
Volume yang diberikan =
-

30 mg
x 10 ml  2 ml
100 mg

Untuk dosis 200 mg/kg bb pada tikus 200 g

200 mg/kg bb
x 200 g  40 mg
1000 g
Volume yang diberikan =

40 mg
x 10 ml  2 ml
100 mg

70
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Hasil pengujian AAS dari volume urin untuk kadar Na+ dan K+

No

1.

2.

3.

4.

5.

Kelompok pengujian

Kontrol CMC-Na
0,5%

Furosemid dosis 10
mg/kg bb

CEEPK dosis 100
mg/kg bb

CEEPK dosis 150
mg/kg bb

CEEPK dosis 200
mg/kg bb

Tikus

konsentrasi

1

Na+
1,7683

K+
1,2000

2
3
4
5
1

1,2737
1,5801
1,3487
1,2199
4,3421

1,7854
1,7524
1,5741
1,4772
3,6729

2
3
4
5
1

4,5105
4,1963
4,3591
4,0598
2,3118

4,0048
4,0800
3,5415
4,1211
2,7003

2
3
4
5
1

2,2927
2,5163
2,4173
2,3642
2,7966

2,2952
2,3436
2,1168
2,1013
2,7584

2
3
4
5
1

3,2120
2,9020
2,8121
2,8454
3,3726

2,8670
2,9368
2,3882
2,8166
3,1248

2
3
4
5

4,1914
3,5092
3,3698
3,3018

3,2372
3,3690
3,0007
3,0472

71
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Contoh perhitungan kadar elektrolit (lanjutan)
-

Kadar Na =

konsentrasi mcg/ml
x volume (ml) x Faktor pengencera n
berat sampel

Pembacaan pada AAS = 1,7683mcg

1,7683 mcg/ml
x 100 ml x 5  884,15 mcg/ml  0,88415
1 ml
Meq/L =

kadar Na (mg/ml)
x 1 meq
BM Na

0,88415 mg/ml
x 1 meq  0,03844 meq/ml  38,44 meq/l
23

-

Kadar K =

konsentrasi mcg/ml
x volume (ml) x Faktor pengencera n
berat sampel

Pembacaan pada AAS = 1,200 0 mcg

1,2000 mcg/ml
x 100 ml x 5  600 mcg/ml  0,6000
1 ml
Meq/L =

kadar K (mg/ml)
x 1 meq
BM Na

0,6000 mg/ml
x 1 meq  0,0153 meq/ml  15,38 meq/l
39

72
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Data Kalibrasi Natrium Dengan AAS, Perhitungan Persamaan
Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi
No

Konsentrasi (µg/mL)
(X)
0,0000
1,0000
2,0000
3,0000
4,0000
5,0000

1.
2.
3.
4.
5.
6.
No
1
2
3
4
5
6

X
0,0000
1,0000
2,0000
3,0000
4,0000
5,0000
∑X=
15,0000
X=
2,5,0000

Absorbansi
(Y)
-0,0006
0,1448
0,2736
0,4153
0,5673
0,7067

Y

XY

X²

Y²

-0,0006
0,1448
0,2736
0,4153
0,5673
0,7067
∑Y=
2,1071
Y=
0,351183

0,0000
0,1448
0,5472
1,2459
2,2692
3,5335
∑ XY =
7,7406

0,0000
1,0000
4,0000
9,0000
16,0000
25,0000

0,00000036
0,02096704
0,07485696
0,17247409
0,32182929
0,49942489
∑ Y² =
1,08955263

∑XY − ∑ Xx ∑ Y / n
∑ X² − ∑ X ² / n
,
−
,
x ,
a=
,
−
,
/
a= ,
a=

∑ X² = 55

/

Y=aX+b
b =Y–aX
= 0,35118 – (0,14131 x 2,5,0000) = -0,00209
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,14131X - 0,00209
-0,00209
r=

r=

r=

∑ XY− [

∑X ∑Y
n

]

√(∑X²– ∑X ² / n ) ∑Y²− ∑Y ² / n
7,7406 –[

√(55,0000−
2,4724

15,0000 2,1071
6

]

2,1071 2
15,0000 2
)(1,08955263−
)
6
6

r = 0,9998

2,4733

73
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Data Kalibrasi Kalium Dengan AAS, Perhitungan Persamaan
Garis Regresi Dan Koefisien Korelasi
No

Konsentrasi (µg/mL)
(X)
0,0000
1,0000
2,0000
3,0000
4,0000
5,0000

1.
2.
3.
4.
5.
6.
No
1
2
3
4
5
6

X
0,0000
1,0000
2,0000
3,0000
4,0000
5,0000
∑X=
15,0000

Y
-0,0007
0,0502
0,1052
0,1593
0,2051
0,2565
∑Y=
0,7756

Absorbansi
(Y)
-0,0007
0,0502
0,1052
0,1593
0,2051
0,2565
XY
0,0000
0,0502
0,2104
0,4779
0,8204
1,2825
∑ XY =
2,8414

X²
0,0000
1,0000
4,0000
9,0000
16,0000
25,0000
∑Y=
55,0000

Y²
0,00000049
0,00252004
0,01106704
0,02537649
0,04206601
0,06579225
∑ Y² =
0,14682232

Y=
0,12926

X=
2,5,0000

∑XY − ∑ Xx ∑ Y / n
∑ X² − ∑ X ² / n
2,8414 − 15,0000 x 0,7756 / 6
a=
55,0000 − 15,00 2 / 6
a = 0,05159
a=

Y=aX+b
b =Y–aX
= 0,12926 – (0,05159 x 2,5,0000) = 0,00029

Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,05159 X + 0,00029
r=
r=

r=

∑ XY− [

∑X ∑Y
n

]

√(∑X²– ∑X ² / n ) ∑Y²− ∑Y ² / n
2,8414 –[

√(55,0000−
0,9024

15,0000 0,7756
6

]

0,7756 2
15,0000 2
)(0,14682232−
)
6
6

0,9026

r = 0,9997

74
Universitas Sumatera Utara

lampiran 15. Skema pembutan ekstrak etanol crude pecut kuda dan uji aktivitas
diuretik
Serbuk simplisia pecut kuda
dimaserasi dengan etanol 96% selama 5 hari

ampas

maserat
didiamkan selama 2 hari
maserat
diuapkan dengan rotary
evaporator
Ekstrak kental etanol
dikeringkan
Ekstrak crude etnaol
pecut kuda
uji aktifitas diuretik
Tikus
dikondisikan selama 2
minggu
dipuasakan selama ± 18 jam
diberi ekstrak crude etanol
pecut kuda
Urin

Volume

Elektrolit

pH urin
Kadar Na+ dan
kadar K+

75
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 16. Hasil data statistik ANAVA dengan uji Tukey
Hasil perhitungan ANAVA dari volume urin

Between
Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
25,626

Df
4

2,112
27,738

Mean
Square
6,407

20
24

F
60,669

Sig.
,000

,106

Hasil volume urin dengan menggunakan perhitungan Tukey
kelompok

Subset for alpha = 0.05
N

Tukey
HSDa

CMC-Na

5

CEEPK 100 mg
CEEPK 150 mg
CEEPK 200 mg
Furosemid 10
mg
Sig.

5
5
5
5

1
1,2800

2

3

4

2,8400
3,4600
3,6200
4,2600
1,000

1,000

,934

1,000

76
Universitas Sumatera Utara

Hasil perhitungan kadar natrium secara ANAVA

Between
Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
10991,067

Df
4

560,592
11551,658

20
24

Mean
Square
2747,767

F
98,031

Sig.
,000

28,030

Hasil kadar natrium dari urin dengan menggunakan perhitungan Tukey
kelompok

Subset for alpha = 0.05
N

Tukey
HSDa

CMC-Na
CEEPK 100 mg
CEEPK 150 mg
CEEPK 200 mg
Furosemid 10
mg
Sig.

1
5 31,2580
5
5
5
5

2

3

4

53,6460
63,3340
77,1440
93,0900
1,000

,061

1,000

1,000

77
Universitas Sumatera Utara

Hasil perhitungan kadar kalium secara ANAVA

Between
Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
2518,088

Df
4

164,754
2682,842

20
24

Mean
Square
629,522

F
76,420

Sig.
,000

8,238

Hasil kadar kalium dari urin dengan menggunakan perhitungan Tukey
Kelompok

Subset for alpha = 0.05
N

Tukey
HSDa

CMC-Na
CEEPK 100 mg
CEEPK 150 mg
CEEPK 200 mg
Furosemid 10
mg
Sig.

1
5 19,9620
5
5
5
5

2

3

4

29,6260
35,2960
40,4560
49,7900
1,000

1,000

,068

1,000

78
Universitas Sumatera Utara

Hasil perhitungan pH urin secara ANAVA

Between
Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
,412
1,028
1,440

Df
4
20
24

Mean
Square
,103

F
2,004

Sig.
,133

,051

Hasil pH dari urin dengan menggunakan perhitungan Tukey
kelompok

Tukey
HSDa

CEEPK 100 mg
CMC-Na
Furosemid 10
mg
CEEPK 150 mg
CEEPK 200 mg
Sig.

Subset for
alpha = 0.05
N
1
5
7,120
5
7,180
5
7,180
5
5

7,360
7,460
,164

79
Universitas Sumatera Utara