Uji Aktivitas Diuretik Ekstrak Etanol Pecut Kuda (Stachytharpheta jamaicensis L.Vahl) Pada Tikus

63

Lampiran 1. Hasil Determinasi Tumbuhan pecut kuda (Stachytharpheta

64

65

Lampiran 3. Karakteristik Tumbuhan Pecut Kuda

66

Ekstrak etanol pecut kuda

67

Lampiran 4. Hasil Pemeriksaan Mikroskopik

Gambar: Serbuk simplisia pecut kuda

Keterangan: 1. Rambut

2. Rambut kelenjar 3. Jaringan palisade

4. Pembuluh kayu dengan penebalan jala 5. Fragmen mesofil

6. Epidermis

6 4 3

5

2 1

68

Lampiran 5. Perhitungan karakterisasi simplisia dan ekstrak pecut kuda

Perhitungan penetapan kadar air dari serbuk simplisia pecut kuda

No Berat Sampel (g) Volume Awal (ml) Volume Akhir (ml) 1. 2. 3. 5,011 5,012 5,004 2,0 2,4 2,9 2,4 2,9 3,3

% Kadar air =

(g) sampel berat (ml) air volume x 100% a. Berat sampel = 5,011 g

Volume air = 0,4 ml % Kadar air =

g 5,011

ml 0,4

x 100% = 7,98% b. Berat sampel = 5,012 g

Volume air = 0,5 ml % Kadar air =

g 5,012

ml 0,5

x 100% = 9,97% c. Berat sampel = 5,004 g

Volume air = 0,4 ml % Kadar air =

g 5,004

ml 0,4

x 100% = 7,99% % Kadar air rata-rata =

3 7,99% % 97 , 9

7,98%+ +

= 8,61%

Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Air dari Serbuk Simplisia pecut kuda (Lanjutan)

No Berat Sampel (g) Berat Sari (g) 1. 2. 3. 5,0193 5,0190 5,0187 0,2042 0,2021 0,201

% Kadar sari larut dalam air = x 100% 20 100 x (g) simplisia Berat (g) sari Berat a. Berat sampel = 5,0193 g

69

% Kadar sari larut dalam air = x 100% 20,34% 20 100 x g 5,0193 g 0,2042 = b. Berat sampel = 5,0190 g

Berat sari = 0,2021 g

% Kadar sari larut dalam air = x 100% 20,13% 20 100 x g 5,0190 g 0,2021 = c. Berat sampel = 5,0187 g

Berat sari = 0,201 g

% Kadar sari larut dalam air = x 100% 20,02% 20 100 x g 5,0187 g 0,201 =

% Kadar sari larut dalam air rata-rata =

3

20,02% 20,13%

20,34%+ +

= 20,16%

Perhitungan Penetapan Kadar Sari Larut Etanol dari Serbuk Simplisia pecut kuda (Lanjutan)

No Berat Sampel (g) Berat Sari (g) 1. 2. 3. 5,0092 5,010 5,0086 0,284 0,294 0,273

% Kadar sari larut dalam etanol = x 100% 20 100 x (g) simplisia Berat (g) sari Berat a. Berat sampel = 5,0092 g

Berat sari = 0,284 g

% Kadar sari larut dalam etanol = x 100% 28,34% 20 100 x g 5,0092 g 0,284 =

b. Berat sampel = 5,010 g Berat sari = 0,294 g

% Kadar sari larut dalam etanol = x 100% 29,34% 20 100 x g 5,010 g 0,294 =

c. Berat sampel = 5,0086 g Berat sari = 0,273 g

70

% Kadar sari larut dalam etanol = x 100% 27,25% 20 100 x g 5,0086 g 0,273 =

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =

3

27,25% 29,34%

28,34%+ +

= 28,31%

Perhitungan Penetapan Kadar Abu Total dari Serbuk Simplisia pecut kuda (Lanjutan)

No Berat Sampel (g) Berat Abu (g) 1. 2. 3. 3,06 3,08 3,04 0,16 0,18 0,17

% Kadar abu total = x 100%

(g) simplisia Berat (g) abu Berat a. Berat sampel = 3,06 g

Berat abu = 0,16 g

% Kadar abu total = x 100% 5,22% 06 , 3 16 , 0 = g g b. Berat sampel = 3,08 g

Berat abu = 0,18 g

% Kadar abu total = x 100% 5,84% 08 , 3 18 , 0 = g g c. Berat sampel = 3,04 g

Berat abu = 0,17 g

% Kadar abu total = x 100% 5,59% 04 , 3 17 , 0 = g g

% Kadar abu total rata-rata = 5,55% 3 % 59 , 5 5,84% 5,22% = + +

71

Perhitungan Penetapan Kadar Abu tidak Larut Asam dari Serbuk Simplisia pecut kuda (Lanjutan)

No Berat Sampel (g) Berat Abu (g) 1. 2. 3. 3,06 3,08 3,04 0,01 0,02 0,01

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% (g) simplisia Berat (g) abu Berat a. Berat sampel = 3,06 g

Berat abu = 0,01 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% g 3,06 g 01 , 0 = 0,32% b. Berat sampel = 3,08 g

Berat abu = 0,02 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% g 3,08 g 02 , 0 = 0,64% c. Berat sampel = 3,04 g

Berat abu = 0,01 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% g 3,04 g 01 , 0 = 0,32%

% kadar abu tidak larut asam rat-rata = 0,42% 3 % 32 , 0 0,64% 0,32% = + +

Perhitungan penetapan kadar air ekstrak pecut kuda (Lanjutan)

No Berat Sampel (g) Volume Awal (ml) Volume Akhir (ml) 1. 2. 3. 5,110 5,090 5,076 2,0 2,4 2,9 2,4 2,9 3,3 % Kadar air =

(g) sampel berat (ml) air volume x 100% a. Berat sampel = 5,110 g

Volume air = 0,4 ml % Kadar air =

g 5,110

ml 0,4

72 b. Berat sampel = 5,090 g

Volume air = 0,4 ml % Kadar air =

g 5,090

ml 0,4

x 100% = 7,85% c. Berat sampel = 5,076 g

Volume air = 0,4 ml % Kadar air =

g 5,076

ml 0,4

x 100% = 7,80% % Kadar air rata-rata =

3 7,80% % 85 , 7

7,82%+ +

= 7,82% Perhitungan penetapan kadar abu total ekstrak pecut kuda (Lanjutan)

No Berat Sampel (g) Berat Abu (g) 1. 2. 3. 3,04 3,04 3,03 0,08 0,06 0,05 % Kadar abu total = x 100%

(g) simplisia Berat (g) abu Berat a. Berat sampel = 3,04 g

Berat abu = 0,08 g

% Kadar abu total = x 100% g 3,04 g 08 , 0 = 2,63% b. Berat sampel = 3,04 g

Berat abu = 0,06 g

% Kadar abu total = x 100% g 3,04 g 06 , 0 = 1,97% c. Berat sampel = 3,03 g

Berat abu = 0,05 g

% Kadar abu total = x 100% g 3,03 g 05 , 0 = 1,65%

% Kadar abu total rata-rata = 2,08% 3 % 65 , 1 1,97% 2,63% = + +

73

Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut asam ekstrak pecut kuda (Lanjutan) No Berat Sampel (g) Berat Abu (g)

1. 2. 3. 3,04 3,04 3,03 0,04 0,03 0,01

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% (g) simplisia Berat (g) abu Berat a. Berat sampel = 3,04 g

Berat abu = 0,04 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% g 3,04 g 04 , 0 = 1,31% b. Berat sampel = 3,04 g

Berat abu = 0,03 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% g 3,04 g 03 , 0 = 0,98% c. Berat sampel = 3,03 g

Berat abu = 0,01 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = x 100% g 3,03 g 01 , 0 = 0,33%

% Kadar abu yang tidak larut dalam asam rata-rata

= 0,873%

3 % 33 , 0 0,98% 1,31% = + +

74

Lampiran 6. Alat yang digunakan

Modifikasi alat penampung urin

Alat AAS

75

Lampiran 7. Data volume urin (ml), pH urin, kadar natrium, dan kadar kalium

(meq/l) setelah pemberian ekstrak dan furosemid (pembanding) No Parameter Kontrol

CMC Na 0,5%

Furosemid 10 mg/kg

bb

Ekstrak Etanol Pecut Kuda Dosis 100 mg/kg bb Dosis 150 mg/kg bb Dosis 200 mg/kg bb 1 Volume urin

(ml)

1,3 3,8 2,2 3,2 2,8

1,1 4,0 2,9 2,5 4,2

1,4 4,2 2,5 2,8 4,3

1,2 4,5 3,0 2,5 3,5

1,4 4,0 2,2 3,0 5,0

Rata-rata ± Sd 1,28 ± 0,130 4,10 ± 0,264 2,56 ± 0,378 2,80 ± 0,308 3,96 ± 0,838

2 Nilai pH urin 7,3 7,5 7,5 7,6 7,5

7,6 7,6 7,4 7,5 7,7

7,3 7,5 7,5 7,4 7,5

7,4 7,6 7,6 7,5 7,4

7,5 7,7 7,6 7,7 7,7

Rata-rata ± Sd 7,42 ± 0,130 7,6 ± 0,1 7,52 ± 0.08 7,54 ± 0,114 7,56 ± 0,134 3 Kadar

natrium (meq/l)

33,44 80,76 59,79 60,66 75,69 39,16 93,22 65,39 67,40 87,19 31,58 90,87 60,15 60,86 76,32 39,70 98,84 69,67 74,47 89,67 41,78 105.04 78,75 84,44 102,43 Rata-rata ± Sd 37,13 ± 4,38 93,74 ± 9,09 66,75 ± 7,84 69,56 ± 10,06 86,26 ± 9,84 4 Kadar kalium

(meq/l)

22,57 41,23 28,36 30,32 34,05 23,72 50,49 30,12 35,46 44,08 25,65 50,78 32,83 36,33 37,72 23,74 48.23 31,03 33,07 35,40 28,91 54,69 38,41 43,78 50,97 Rata-rata ± Sd 24,91 ± 2,49 49,08 ± 4,96 32,15 ± 3,85 35,79 ± 5,03 40,44 ± 7,03

76

Lampiran 8. Tabel konversi dosis hewan dengan manusia Konversi dosis

antara jenis hewan dengan manusia (Laurence and Bacharach, 1964).

Mencit 20 g

Tikus 200 g

Marmut 400 g

Kelinci 1,2 kg

Kera 4 kg

Anjing 12 kg

Manusia 70 kg Mencit

20g

1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,2 387,9 Tikus

200g

0,14 1,0 1,74 3,9 9,2 17,8 56,0

Marmut 400 g

0,08 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 Kelinci

1,2 kg

0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera 4 kg

0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1 Anjing

12 kg

0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 Manusia

70 kg

77

Lampiran 9. Contoh perhitungan dosis kontrol CMC Na 0,5%

- Pembuatan CMC 0,5% = 500 mg/ 100 ml = 5 mg/ml

- Perhitungan CMC Na 0,5% pada tikus 200 g = 1% × BB Tikus

=

ml 100

g 1

× 200 g = 2 ml

78

Lampiran 10. Contoh Perhitungan Dosis Furosemid

Furosemid yang digunakan = 40 mg

Dosis Furosemid 10 mg/kg bb untuk tikus 200 g Furosemid yang diberikan =

g 1000

bb mg/kg 10

× 200 g = 2 mg

Volume yang diberikan = mg 40

mg 2

× 10 ml = 0,5 ml

79

Lampiran 11. Contoh perhitungan dosis dari ekstrak etanol pecut kuda 1%

1. Untuk dosis 100 mg/kg bb pada tikus 180,2 g =

g 1000

g 180,2

x

100 mg/kg bb = 18,02 mg

Volume yang diberikan =

mg/ml 10

mg 18,02

= 1,802 ml 2. Untuk dosis 150 mg/kg bb pada tikus 179,5 g

=

g 1000

g 179,5

x

150 mg/kg bb = 26,92 mg

Volume yang diberikan =

mg/ml 10

mg 26,92

= 2,692 ml 3. Untuk dosis 200 mg/kg bb pada tikus 188,9 g

=

g 1000

g 188,9

x

200 mg/kg bb = 37,78 mg

Volume yang diberikan =

mg/ml 10

mg 37,78

80

Lampiran 12. Hasil pengujian AAS dari volume urin untuk kadar Na+ dan K+ No Kelompok pengujian Tikus Konsentrasi

Na+ K+

1. Kontrol CMC-Na 0,5%

1 1,5384 3,5221

2 1,8014 3,7006

3 1,4531 4,0022

4 1,8664 3,7044

5 1,9220 4,5113

2. Furosemid dosis 10 mg/kg bb

1 3,7151 6,4331

2 4,2884 8,3544

3 4,1803 7,9225

4 4,5468 7,5239

5 4,8321 8,5321

3. EEPK dosis 100 mg/kg bb

1 2,7504 4,4252

2 3,0080 4,6997

3 3,2051 5,1220

4 2,7671 4,8150

5 3,6228 5,9921

4. EEPK dosis 150 mg/kg bb

1 2,9204 4,7308

2 3,1005 5,5321

3 2,9884 5,6682

4 3,4260 5,1595

5 3,8846 6,8311

5. EEPK dosis 200 mg/kg bb

1 3,4821 5,0330

2 4,0111 6,8766

3 3,3550 5,8850

4 4,1250 6,9236

81

Lampiran 13. Contoh perhitungan kadar elektrolit (Lanjutan)

Kadar Na = x 500

Pembacaan pada AAS = 1,5384 mcg/ml Kadar Na =

ml 1

mcg/ml 1,5384

x 500 = 769,2 mcg/ml = 0,7692 mg/ml

meq/l = x 1 meq

=

23 mg/ml 0,7692

x 1 meq = 0,03344 meq/ml = 33,44 meq/l

82

Lampiran 14. Data kalibrasi natrium dengan AAS, perhitungan persamaan

garis regresi dan koefisien korelasi No. Konsentrasi (µg/ml)

(X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 -0,0004

2. 1,0000 0,1414

3. 2,0000 0,2808

4. 3,0000 0,4164

5. 4,0000 0,5671

6. 5,0000 0,7094

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 -0,0004 0,0000 0,0000 0,00000016

2. 1,0000 0,1414 0,1497 1,0000 0,01999396

3. 2,0000 0,2808 0,5842 4,0000 0,07884864

4. 3,0000 0,4164 1,2666 9,0000 0,17338896

5. 4,0000 0,5671 2,2808 16,0000 0,32160241

6. 5,0000 0,7094 3,4915 25,0000 0,50324836

15,0000 2,1147 7,7676 55,0000 1,09708249 = 2,5 = 0,35245

a = /n) )2 x ( -x2 /n y x -xy

∑

∑

∑

∑

∑

= /6 (15)2 -55 (2,1147)/6 (15) -7,7676 = 0,141763 Y = a X + b b = Y – a X

= 0,35245 – (0,141763 x 2,5) = - 0,00196

Persamaan regresi : Y = 0,141763 x - 0,00196 Dengan nilai r sebagai berikut :

r = /n )2 y ( -y2 ( /n) )2 x ( -x2 ( )/n y ( ) x ( -xy

∑

∑

∑

∑

∑

∑

∑

=

/6 (2,1147)2 -9) (1,0970824 /6) (15)2 -(55 (2,1147)/6 (15) -7,7676 = 0,9999

83

Lampiran 15. Data kalibrasi kalium dengan AAS, perhitungan persamaan

garis regresi dan koefisien korelasi No. Konsentrasi (µg/ml)

(X)

Absorbansi (Y)

1. 0,0000 0,0003

2. 2,0000 0,0818

3. 4,0000 0,1633

4. 6,0000 0,2569

5. 8,0000 0,3391

6. 10,0000 0,4295

No. X Y XY X2 Y2

1. 0,0000 0,0003 0,0000 0,0000 0,00000009

2. 2,0000 0,0818 0,1636 4,0000 0,00669124

3. 4,0000 0,1633 0,6532 16,0000 0,02666689 4. 6,0000 0,2569 1,5414 36,0000 0,06599761 5. 8,0000 0,3391 2,7128 64,0000 0,11498881 6. 10,0000 0,4295 4,2950 100,000 0,18447025 30,0000 1,2709 9,366 220,0000 0,39881489

= 5 = 0,211817 a = /n) )2 x ( -x2 /n y x -xy

∑

∑

∑

∑

∑

= /6 (30)2 -220 (1,2709)/6 (30) -9,366 = 0,043021 Y = a X + b b = Y – a X

= 0,211817 – (0,043021 x 5) = - 0,00329

Persamaan regresi : Y = 0,211817 x - 0,00329 Dengan nilai r sebagai berikut :

r = /n )2 y ( -y2 ( /n) )2 x ( -x2 ( )/n y ( ) x ( -xy

∑

∑

∑

∑

∑

∑

∑

=

/6 (1,2709)2 9) (0,3988148 /6) (30)2 -(220 (1,2709)/6 (30) 9,366 = 0,9998

84

Lampiran 16. Skema pembuatan ekstrak etanol pecut kuda dan uji

aktivitas diuretik

Maserasi dengan etanol 96% selama 5 hari

Didiamkan selama 2 hari

Diuapkan dengan Rotary Evaporator

Dikeringkan dengan Freeze Dryer

Uji aktivitas diuretik

Dikondisikan selama 2 minggu

Dipuasakan selama ± 12 jam

Diberi ekstrak etanol Pecut kuda

(EEPK) dengan dosis berbeda

Diukur Diukur dengan pH meter dengan AAS

Nilai pH

Serbuk simplisia herba pecut kuda

Ampas Maserat

Ekstrak kental Etanol

Ekstrak etanol pecut kuda (EEPK)

Tikus

Urin

Volume urin

Maserat

Elektrolit

Kadar Na+ dan K+ (meq/l) Cek pH

85

Lampiran 17. Hasil data statistik ANAVA dengan Uji Tukey Jam ke 1- 5

ANOVA

Volume_Urin_Jam_1

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 5.286 4 1.321 12.779 .000

Within Groups 2.068 20 .103

Total 7.354 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Volume_Urin_Jam_1 Tukey HSD

(I)

Kelompok_Peng ujian

(J)

Kelompok_Pengujian

Mean Differenc

e (I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

Kontrol CMC Na o.5%

Furosemid 10 mg/kg bb -1.3800* .2034 .000 -1.989 -.771 EEPK 100 mg/kg bb -.9800* .2034 .001 -1.589 -.371 EEPK 150 mg/kg bb -.5800 .2034 .006 -1.189 .029

EEPK 200 mg/kg bb -.8800* .2034 .003 -1.489 -.271 Furosemid 10

mg/kg bb

Kontrol CMC Na o.5% 1.3800* .2034 .000 .771 1.989 EEPK 100 mg/kg bb .4000 .2034 .017 -.209 1.009

EEPK 150 mg/kg bb .8000* .2034 .007 .191 1.409 EEPK 200 mg/kg bb .5000 .2034 .141 -.109 1.109

EEPK 100 mg/kg bb

Kontrol CMC Na o.5% .9800* .2034 .001 .371 1.589 Furosemid 10 mg/kg bb -.4000 .2034 .017 -1.009 .209

EEPK 150 mg/kg bb .4000 .2034 .017 -.209 1.009

EEPK 200 mg/kg bb .1000 .2034 .987 -.509 .709

EEPK 150 mg/kg bb

Kontrol CMC Na o.5% .5800 .2034 .006 -.029 1.189

Furosemid 10 mg/kg bb -.8000* .2034 .007 -1.409 -.191 EEPK 100 mg/kg bb -.4000 .2034 .017 -1.009 .209

EEPK 200 mg/kg bb -.3000 .2034 .589 -.909 .309

86

mg/kg bb Furosemid 10 mg/kg bb -.5000 .2034 .141 -1.109 .109

EEPK 100 mg/kg bb -.1000 .2034 .987 -.709 .509

EEPK 150 mg/kg bb .3000 .2034 .589 -.309 .909

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

ANOVA

Volume_Urin_Jam_Ke_2

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 11.254 4 2.813 13.086 .000

Within Groups 4.300 20 .215

Total 15.554 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Volume_Urin_Jam_Ke_2 Tukey HSD

(I)

Kelompok_Pen

gujian (J) Kelompok_Pengujian

Mean Difference

(I-J)

Std. Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

Kontrol CMC na 0.5%

Furosemid 10 mg/kg bb -2.1000* .2933 .000 -2.978 -1.222 EEPK 100 mg/kg bb -1.1800* .2933 .005 -2.058 -.302 EEPK 150 mg/kg bb -.9400* .2933 .032 -1.818 -.062 EEPK 200 mg/kg bb -1.2000* .2933 .005 -2.078 -.322 Furosemid 10

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.1000* .2933 .000 1.222 2.978 EEPK 100 mg/kg bb .9200* .2933 .037 .042 1.798 EEPK 150 mg/kg bb 1.1600* .2933 .006 .282 2.038 EEPK 200 mg/kg bb .9000* .2933 .053 .022 1.778 EEPK 100

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.1800* .2933 .005 .302 2.058 Furosemid 10 mg/kg bb -.9200* .2933 .037 -1.798 -.042 EEPK 150 mg/kg bb .2400 .2933 .922 -.638 1.118

EEPK 200 mg/kg bb -.0200 .2933 1.000 -.898 .858

87

mg/kg bb Furosemid 10 mg/kg bb -1.1600* .2933 .006 -2.038 -.282 EEPK 100 mg/kg bb -.2400 .2933 .922 -1.118 .638

EEPK 200 mg/kg bb -.2600 .2933 .899 -1.138 .618

EEPK 200 mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.2000* .2933 .005 .322 2.078 Furosemid 10 mg/kg bb -.9000* .2933 .053 -1.778 -.022 EEPK 100 mg/kg bb .0200 .2933 1.000 -.858 .898

EEPK 150 mg/kg bb .2600 .2933 .899 -.618 1.138

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

ANOVA

Volume_Urin_Jam_Ke_3

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 19.728 4 4.932 22.459 .000

Within Groups 4.392 20 .220

Total 24.120 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Volume_Urin_Jam_Ke_3 Tukey HSD

(I)

Kelompok_Peng

ujian (J) Kelompok_Pengujian

Mean Differenc

e (I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

Kontrol CMC na 0.5%

Furosemid 10 mg/kg bb -2.6400* .2964 .000 -3.527 -1.753 EEPK 100 mg/kg bb -1.3200* .2964 .002 -2.207 -.433 EEPK 150 mg/kg bb -1.2000* .2964 .005 -2.087 -.313 EEPK 200 mg/kg bb -2.0400* .2964 .000 -2.927 -1.153 Furosemid 10

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.6400* .2964 .000 1.753 3.527 EEPK 100 mg/kg bb 1.3200* .2964 .002 .433 2.207 EEPK 150 mg/kg bb 1.4400* .2964 .001 .553 2.327 EEPK 200 mg/kg bb .6000 .2964 .291 -.287 1.487

88

mg/kg bb Furosemid 10 mg/kg bb -1.3200* .2964 .002 -2.207 -.433 EEPK 150 mg/kg bb .1200 .2964 .994 -.767 1.007

EEPK 200 mg/kg bb -.7200 .2964 .148 -1.607 .167

EEPK 150 mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.2000* .2964 .005 .313 2.087 Furosemid 10 mg/kg bb -1.4400* .2964 .001 -2.327 -.553 EEPK 100 mg/kg bb -.1200 .2964 .994 -1.007 .767

EEPK 200 mg/kg bb -.8400 .2964 .069 -1.727 .047

EEPK 200 mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.0400* .2964 .000 1.153 2.927 Furosemid 10 mg/kg bb -.6000 .2964 .291 -1.487 .287

EEPK 100 mg/kg bb .7200 .2964 .148 -.167 1.607

EEPK 150 mg/kg bb .8400 .2964 .069 -.047 1.727

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

ANOVA

Volume_Urin_Jam_Ke_4

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 21.956 4 5.489 27.146 .000

Within Groups 4.044 20 .202

Total 26.000 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons Volume_Urin_Jam_Ke_4 Tukey HSD (I) Kelompok_Penguj ian (J) Kelompok_Pengujian Mean Differenc e (I-J) Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

Kontrol CMC na 0.5%

Furosemid 10 mg/kg bb -2.7600* .2844 .000 -3.611 -1.909 EEPK 100 mg/kg bb -1.3000* .2844 .002 -2.151 -.449 EEPK 150 mg/kg bb -1.3400* .2844 .001 -2.191 -.489 EEPK 200 mg/kg bb -2.2000* .2844 .000 -3.051 -1.349 Furosemid 10

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.7600* .2844 .000 1.909 3.611 EEPK 100 mg/kg bb 1.4600* .2844 .000 .609 2.311

89

EEPK 150 mg/kg bb 1.4200* .2844 .001 .569 2.271 EEPK 200 mg/kg bb .5600 .2844 .316 -.291 1.411

EEPK 100 mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.3000* .2844 .002 .449 2.151 Furosemid 10 mg/kg bb -1.4600* .2844 .000 -2.311 -.609 EEPK 150 mg/kg bb -.0400 .2844 1.000 -.891 .811

EEPK 200 mg/kg bb -.9000* .2844 .035 -1.751 -.049 EEPK 150 mg/kg

bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.3400* .2844 .001 .489 2.191 Furosemid 10 mg/kg bb -1.4200* .2844 .001 -2.271 -.569 EEPK 100 mg/kg bb .0400 .2844 1.000 -.811 .891

EEPK 200 mg/kg bb -.8600* .2844 .047 -1.711 -.009 EEPK 200 mg/kg

bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.2000* .2844 .000 1.349 3.051 Furosemid 10 mg/kg bb -.5600 .2844 .316 -1.411 .291

EEPK 100 mg/kg bb .9000* .2844 .035 .049 1.751 EEPK 150 mg/kg bb .8600* .2844 .047 .009 1.711 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

ANOVA

Volume_Urin_Jam_Ke_5

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 26.528 4 6.632 32.257 .000

Within Groups 4.112 20 .206

Total 30.640 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Volume_Urin_Jam_Ke_5 Tukey HSD

(I)

Kelompok_Peng

ujian (J) Kelompok_Pengujian

Mean Differenc

e (I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

Kontrol CMC na 0.5%

Furosemid 10 mg/kg bb -2.8200* .2868 .000 -3.678 -1.962 EEPK 100 mg/kg bb -1.2800* .2868 .002 -2.138 -.422

90

EEPK 150 mg/kg bb -1.5200* .2868 .000 -2.378 -.662 EEPK 200 mg/kg bb -2.6800* .2868 .000 -3.538 -1.822 Furosemid 10

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.8200* .2868 .000 1.962 3.678 EEPK 100 mg/kg bb 1.5400* .2868 .000 .682 2.398 EEPK 150 mg/kg bb 1.3000* .2868 .002 .442 2.158 EEPK 200 mg/kg bb .1400 .2868 .988 -.718 .998

EEPK 100 mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.2800* .2868 .002 .422 2.138 Furosemid 10 mg/kg bb -1.5400* .2868 .000 -2.398 -.682 EEPK 150 mg/kg bb -.2400 .2868 .916 -1.098 .618

EEPK 200 mg/kg bb -1.4000* .2868 .001 -2.258 -.542 EEPK 150

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 1.5200* .2868 .000 .662 2.378 Furosemid 10 mg/kg bb -1.3000* .2868 .002 -2.158 -.442 EEPK 100 mg/kg bb .2400 .2868 .916 -.618 1.098

EEPK 200 mg/kg bb -1.1600* .2868 .005 -2.018 -.302 EEPK 200

mg/kg bb

Kontrol CMC na 0.5% 2.6800* .2868 .000 1.822 3.538 Furosemid 10 mg/kg bb -.1400 .2868 .988 -.998 .718

EEPK 100 mg/kg bb 1.4000* .2868 .001 .542 2.258 EEPK 150 mg/kg bb 1.1600* .2868 .005 .302 2.018 *. The mean difference is significant at the 0.05 level.

91

Lampiran 18. Hasil data statistik ANAVA dengan Uji Tukey

Hasil perhitungan nilai pH urin secara ANAVA ANOVA

Nilai_pH

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups .018 4 .004 .289 .881

Within Groups .304 20 .015

Total .322 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Nilai_pH Tukey HSD

(I)

Kelompok_Peng ujian

(J)

Kelompok_Pengujian

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

CMC-Na 0,5% Furosemid 10 mg/kg bb -.0200 .0780 .999 -.253 .213

EEPK 100 mg/kg bb .0200 .0780 .999 -.213 .253

EEPK 150 mg/kg bb -.0200 .0780 .999 -.253 .213

EEPK 200 mg/kg bb -.0600 .0780 .936 -.293 .173

Furosemid 10 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% .0200 .0780 .999 -.213 .253

EEPK 100 mg/kg bb .0400 .0780 .985 -.193 .273

EEPK 150 mg/kg bb .0000 .0780 1.000 -.233 .233

EEPK 200 mg/kg bb -.0400 .0780 .985 -.273 .193

EEPK 100 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% -.0200 .0780 .999 -.253 .213

Furosemid 10 mg/kg bb -.0400 .0780 .985 -.273 .193

EEPK 150 mg/kg bb -.0400 .0780 .985 -.273 .193

EEPK 200 mg/kg bb -.0800 .0780 .840 -.313 .153

EEPK 150 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% .0200 .0780 .999 -.213 .253

Furosemid 10 mg/kg bb .0000 .0780 1.000 -.233 .233

92

EEPK 200 mg/kg bb -.0400 .0780 .985 -.273 .193

EEPK 200 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% .0600 .0780 .936 -.173 .293

Furosemid 10 mg/kg bb .0400 .0780 .985 -.193 .273

EEPK 100 mg/kg bb .0800 .0780 .840 -.153 .313

EEPK 150 mg/kg bb .0400 .0780 .985 -.193 .273

Hasil perhitungan kadar natrium secara ANAVA ANOVA

Kadar_Natrium

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 9578.435 4 2394.609 32.305 .000

Within Groups 1482.481 20 74.124

Total 11060.916 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Kadar_Natrium Tukey HSD

(I)

Kelompok_Peng ujian

(J)

Kelompok_Pengujian

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

CMC-Na 0,5% Furosemid 10 mg/kg bb -56.61400* 5.44515 .000 -72.9079 -40.3201 EEPK 100mg/kg bb -29.61800* 5.44515 .000 -45.9119 -13.3241 EEPK 150 mg/kg bb -33.19000* 5.44515 .000 -49.4839 -16.8961 EEPK 200 mg/kg bb -49.12800* 5.44515 .000 -65.4219 -32.8341 Furosemid 10

mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 56.61400* 5.44515 .000 40.3201 72.9079 EEPK 100mg/kg bb 26.99600* 5.44515 .001 10.7021 43.2899 EEPK 150 mg/kg bb 23.42400* 5.44515 .003 7.1301 39.7179 EEPK 200 mg/kg bb 7.48600 5.44515 .650 -8.8079 23.7799

EEPK 100mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 29.61800* 5.44515 .000 13.3241 45.9119 Furosemid 10 mg/kg bb -26.99600* 5.44515 .001 -43.2899 -10.7021

93

EEPK 150 mg/kg bb -3.57200 5.44515 .963 -19.8659 12.7219

EEPK 200 mg/kg bb -19.51000* 5.44515 .014 -35.8039 -3.2161 EEPK 150

mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 33.19000* 5.44515 .000 16.8961 49.4839 Furosemid 10 mg/kg bb -23.42400* 5.44515 .003 -39.7179 -7.1301 EEPK 100mg/kg bb 3.57200 5.44515 .963 -12.7219 19.8659

EEPK 200 mg/kg bb -15.93800 5.44515 .057 -32.2319 .3559

EEPK 200 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 49.12800* 5.44515 .000 32.8341 65.4219 Furosemid 10 mg/kg bb -7.48600 5.44515 .650 -23.7799 8.8079

EEPK 100mg/kg bb 19.51000* 5.44515 .014 3.2161 35.8039 EEPK 150 mg/kg bb 15.93800 5.44515 .057 -.3559 32.2319

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Hasil perhitungan kadar kalium secara ANAVA ANOVA

Kadar_Kalium

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 1634.840 4 408.710 16.945 .000

Within Groups 482.386 20 24.119

Total 2117.225 24

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Kadar_Kalium Tukey HSD

(I)

Kelompok_Peng ujian

(J)

Kelompok_Pengujian

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval

Lower Bound

Upper Bound

CMC-Na 0,5% Furosemid 10mg/kg bb -24.14400* 3.10608 .000 -33.4385 -14.8495 EEPK 100 mg/kg bb -7.21000 3.10608 .009 -16.5045 2.0845

EEPK 150 mg/kg bb -10.85200* 3.10608 .017 -20.1465 -1.5575 EEPK 200 mg/kg bb -15.50400* 3.10608 .001 -24.7985 -6.2095 Furosemid CMC-Na 0,5% 24.14400* 3.10608 .000 14.8495 33.4385

94

10mg/kg bb EEPK 100 mg/kg bb 16.93400* 3.10608 .000 7.6395 26.2285 EEPK 150 mg/kg bb 13.29200* 3.10608 .003 3.9975 22.5865 EEPK 200 mg/kg bb 8.64000 3.10608 .076 -.6545 17.9345

EEPK 100 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 7.21000 3.10608 .009 -2.0845 16.5045

Furosemid 10mg/kg bb -16.93400* 3.10608 .000 -26.2285 -7.6395 EEPK 150 mg/kg bb -3.64200 3.10608 .766 -12.9365 5.6525

EEPK 200 mg/kg bb -8.29400 3.10608 .095 -17.5885 1.0005

EEPK 150 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 10.85200* 3.10608 .017 1.5575 20.1465 Furosemid 10mg/kg bb -13.29200* 3.10608 .003 -22.5865 -3.9975 EEPK 100 mg/kg bb 3.64200 3.10608 .766 -5.6525 12.9365

EEPK 200 mg/kg bb -4.65200 3.10608 .576 -13.9465 4.6425

EEPK 200 mg/kg bb

CMC-Na 0,5% 15.50400* 3.10608 .001 6.2095 24.7985 Furosemid 10mg/kg bb -8.64000 3.10608 .076 -17.9345 .6545

EEPK 100 mg/kg bb 8.29400 3.10608 .095 -1.0005 17.5885

EEPK 150 mg/kg bb 4.65200 3.10608 .576 -4.6425 13.9465

60

DAFTAR PUSTAKA

Anna. (2011). Uji Efek Diuretik Ekstrak Etanol 70% Daun Ceplukan (Physalis angulate L.) [Skripsi]. Universitas Muhammadiyah Surakarta, Surakarta. Halaman. 2.

Apandi, F., dan Aminah, D. (2014). Uji Aktifitas Antihipertensi Ekstrak Etanol Daun Legundi (Vitex trifolia L.) Pada Tikus Hipertensi Yang Diinduksi Efinefrin. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman. 2.

Asif, M., Atif, M., Malik, A.S.A., Dan, Z.C., Ahmad, I., Ahmad, A. (2013). Diuretic Activity of Trianthema portulacastrum Crude Extract in Albino Rats. Tropical Journal of Pharmaceutical Research 12(6): 967-972

Basset, J., R. C. Denny, G.H Jeffry, J. Mendhom. (1994). Buku Ajar Vogel: Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Penerjemah: Hadyana, A dan Setiono, L. Jakarta: EGC. Halaman. 234-245.

BPOM RI. (2012). Pedoman Teknologi Formulasi Sediaan Berbasis Ekstrak Volume 1. Jakarta: Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI. Halaman 6. 12-14.

Calista. (2010). Ekstraksi senyawa aktif dari tumbuhan liar pecut kuda sebagai obat herbal antikanker menggunakan metode ramah lingkungan. Skripsi. Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Halaman. 2.

Dalimartha, S. (2000). Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jilid 2 Jakarta: Pustaka Bunda. Halaman. 146-148.

Darmono, S. (2011). Buku Ajar Farmakologi Eksperimental. Jakarta: Universitas Indonesia. Halaman 110-115.

Depkes RI. (1979). Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 7. 744.748.

Depkes RI. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman. 9.

Depkes RI. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman. 1-11

Dian, dan Marianne. (2015). Uji Aktivitas Diuretik Ekstrak Etanol Daun Legundi (Vitex trifolia L.) Pada Tikus Putih Jantan. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman. 2.

61

Ditjen POM. (1989). Material Medika Indonesia. Jilid V. Jakarta: Dapartemen Kesehatan RI. Halaman. 169-171. 300-337.

Ditjen POM. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halalaman. 10-11.

Edwin, K.J. (2012). Diuretik Dalam Buku Goodman & Gulman’s Dasar Farmakologi Terapi. Edisi 10. Vol. 2. Jakarta: EGC. Halaman. 744

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and Phytochemical Screenning of Plants. Journal of Pharmaceutical Science. 55(3): 257.

Foda, F.S., dan Aminah, D. (2015). Uji Aktivitas Diuretik Ekstrak Etilasetat Pecut Kuda (Stachytharpheta jamaicensis L.Vahl ) Pada Tikus. Skripsi. Medan : Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman. 25-30.

Foye, W.O. (1995). Prinsip-Prinsip Kimia Medisinal. Jilid II. Yogyakarta: UGM Press. Halaman 145-150.

Ganong, W.F. (2002). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 20. Jakarta: EGC. Halaman. 671-680.

Guyton, A.C. (1994). Fisiologi Manusia dan Mekanisme Penyakit. Edisi III. Jakarta: EGC. Halaman. 287-289.

Guyton., dan Hall. (1997). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi IX. Jakarta: EGC. Halaman. 289-345.

Guyton dan Hall. (2006). Textbook of Medical Physiology. Edisi ke-11. Philadelphia: Elvesier. Halaman. 323-325

Hapsoh., dan Hasanah, Y. (2011). Budidaya Tanaman Obat dan Rempah. Medan: USU Press. Halaman. 4-8.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia Penuntun cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Edisi II. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: ITB. Halaman. 152.

Indrayani, L. (2006). Skrining Fitokimia Dan Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Pecut Kuda (Stachytarpheta jamaicensis L.Val) terhadap larva udang artemia salina leach). Berk. Penel. Hayati: 12. (57 – 61). Universitas Kristen Satya Wacana. Salatiga. Halaman. 2.

Jabar, Z.K.K., Anwar, Z., Aftab, S., Afzal, M., Islam, M., dan Khan, A. (2012). Solanum nigrum as potent theraphy: a review. British journal of Pharmacology and Toxicology. 3(4): 189.

62

Jonad, H., Lacaille-Dubois, M. A, Lyoussi, B dan Edduks, M. 2001. Effect of The Flavonoids Extract from Spregularia purpurea Pers. On Arterial Blood Pressure and Renal Fuction in Normal and Hypertensive Rats. Journal of Ethnopharmacology. (76): 156-163.

Khabibah, N. (2011). Uji Efek Diuretik Ekstrak Buncis (Phaseolus Vulgaris L.) Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar. [Skripsi]. STIKES Ngudi Waluyo. Ungaran. Halaman. 2.

Mukrima. (2008). Uji efek antifungi ekstrak n-Butanol akar Pecut Kuda terhadap Candida albicans dan analisa KLT- Bioautografi. Skripsi. Fakultas MIPA, Universitas Pancasakti, Makassar. Halaman. 2.

Mutschler. E. (1991). Dinamika Obat. Edisi V. Bandung: Institut Teknologi Bandung. Halaman. 565-568.

Idu, M., Ezenwa, C. K., Ovuakporie, O., dan Faustina, K. (2105). Evaluationof diuretic activity of Stachytarpheta Jamaicensis (L.) Vahl on wistar rats. Asian Journal Of Biochemical and Pharmaceutical Research. (5): 12 Parmar, N.S., dan Prakash, S. (2006). Screening Methods in Pharmacology.

Kawali: Institute of Pharmacheutical Science and Technology. Halaman. 241-245.

Permadi, A. (2006). Tanaman Obat Pelancar Air Seni. Cetakan I. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman. 16-20.

Rasyid, A. (2011). Ketidakseimbangan Cairan, Elektrolit dan Eliminasi. Tanggal akses: 4 Januari 2014. http://www.sisrom.blogspot.com/2006/

05/kebutuhan-cairan-dan elektrolit.html.

Rawlins, E.A. (2003). Bentley’s Textbook of Pharmaceutics. London: Bailierre Tindall. Halaman. 201.

Tan, H.J., dan Rahardja, K. (2008). Obat-Obat Penting. Edisi keenam. Jakarta: PT. Elex Media Komputindo. Halaman. 519. 522-52.

Widjayakusuma, H. (2009). Bebas Penyakit Ginjal & Saluran Kemih. Jakarta: Pustaka Bunda. Halaman. 29

World Health Organization. (1998). Quality Control Methods For Medicinal Plant Material. Switzerland: WHO. Halaman 29 -31.

14

BAB III

METODE PENELITIAN

Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan tahapan penelitian yaitu identifikasi sampel, pengumpulan dan pengolahan sampel, pembuatan simplisia, pemeriksaan karakteristik simplisia, pembuatan ekstrak, pemeriksaan skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak, karakteristik ekstrak, pengujian efek diuretik menggunakan rancangan acak lengkap (RAL). Data yang diperoleh dianalisis secara ANAVA (analisis variansi) dan dilanjutkan dengan uji beda rata-rata Tukey menggunakan program statistical and product service solution (SPSS) 17.0.

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat-Alat

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas, lemari pengering, blender, neraca listrik (Chyo 6000), timbangan hewan (Chyo JP2-6000), seperangkat alat destilasi, rotary evaporator (Heidolph vv-2000), waterbath, freeze dryer (Modulyo, Edwards serial no:3985), oral sonde, mortir dan stamper, seperangkat alat pengujian diuresis berupa modifikasi kandang metabolik, spuit, miskroskop (Model L-301), pH meter (Hanna) dan AAS (Shimadzu AA 62000).

3.1.2 Bahan-Bahan

Bahan tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah herba pecut

kuda. Bahan kimia yang digunakan kecuali dinyatakan lain adalah berkualitas pro analisis yaitu etanol 96% (Bratachem-Medan (teknis)), karboksi metil selulosa

15

natrium (CMC Na (Graha Jaya)), tablet furosemid (Indofarma), aqua bidestilata, kloralhidrat.

3.2 Pengumpulan Pecut Kuda

Pengambilan tumbuhan dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan tumbuhan yang sama dari daerah lain. Tumbuhan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pecut kuda (Stachytarpheta jamaicensis L. Vahl). Sampel diperoleh dari daerah Bukit Simarsayang, Kota Padang Sidempuan, Provinsi Sumatera Utara.

3.3 Identifikasi Tumbuhan

Identifikasi tumbuhan dilakukan oleh Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI) Pusat Penelitian dan Pengembangan Biologi Bogor.

3.4 Pembuatan Simplisia

Bahan baku herba pecut kuda yang masih segar dikumpulkan, dibuang bagian yang tidak diperlukan (sortasi basah), dicuci bersih dibawah air mengalir, ditiriskan kemudian dipotong-potong dan ditimbang berat basahnya (2,9 kg). selanjutnya dikeringkan dengan menggunakan lemari pengering dengan tujuan agar tidak membusuk pada saat proses pengeringan. Herba yang kering ditandai dengan seluruh bagian simplisia mudah diremukkan, kemudian herba ditimbang kembali sebagai berat kering (1,1 kg) lalu diblender dan ditimbang sebagai berat serbuk simplisia (800 g). Serbuk simplisia dimasukkan kedalam wadah plastik, diberi etiket dan disimpan ditempat kering terlindung dari cahaya matahari.

16

3.5 Pembuatan Ekstrak Etanol Herba Pecut Kuda

Metode: Maserasi

Ekstrak etanol yang digunakan merupakan hasil dari ekstraksi n-heksan dan ekstrak etilasetat. Pembuatan ekstrak etanol pecut kuda dilakukan dengan cara maserasi bertahap (stepwise maceration) menggunakan pelarut n-heksan, etilasetat dan etanol 96% (Ditjen, POM., 1979).

Ekstraksi dilakukan dengan cara sebagai berikut, sebanyak 600 g serbuk simplisi direndam dengan pelarut etanol 96%, ditutup, dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk, disaring, diperas. Ampas diremaserasi dengan etanol 96% secukupnya. Pindahkan kedalam bejana tertutup, dibiarkan di tempat terlindung dari cahaya selama 2 hari. Enap tuangkan atau saring. Maserat yang diperoleh dipekatkan dengan alat rotary evaporator. Kemudian diuapkan dengan freeze dryer sampai diperoleh ekstrak kental (Ditjen, POM., 1979).

3.6 Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak

Pemeriksaan karakterisasi simplisia dan ekstrak meliputi pemeriksaan makroskopik dan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut dalam air, penetapan kadar sari larut dalam etanol, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu tidak larut dalam asam (Ditjen, POM., 1989).

3.6.1 Pemeriksaan Makroskopik dan organoleptik

Pemeriksaan makroskopik dan organoleptik dilakukan dengan mengamati bentuk, rasa, bau, dan warna dari pecut kuda.

3.6.2 Pemeriksaan Mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik terhadap simplisia dilakukan dengan cara menaburkan serbuk simplisia diatas kaca objek yang telah ditetesi dengan larutan

17

kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup kemudian diamati dibawah mikroskop.

3.6.3 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (destilasi toluen). Alat terdiri dari labu alas bulat 500 ml, alat penampung, pendingin, tabung penyambung dan tabung penerima. Cara penetapannya, yaitu:

Pada labu bulat dimasukkan 200 ml toluen dan 2 ml air suling, didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama 30 menit, kemudian volume air di dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Kemudian ke dalam labu yang berisis toluen jenuh tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama, lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit. Setelah toluen mulai mendidih, kecepatan tetesan diatur lebih kurang 2 tetes per detik hingga sebagian air tersuling. Kemudian kecepatan dinaikkan hingga 4 tetes per detik. Kemudian setelah semua air tersuling, destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin sampai suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO., 1998).

3.6.4 Penetapan kadar sari larut dalam air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1000 ml) dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, lalu disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai

18

kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah ditara dan sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai diperoleh bobot konstan. Kadar sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1979).

3.6.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol

Sebanyak 5 g serbuk simplisia, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring cepat untuk menghindari penguapan etanol. Sejumlah 20 ml filtrat diuapkan sampai kering dalam cawan penguap yang berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105oC sampai diperoleh bobot konstan. Kadar sari yang larut dalam etanol 96% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1979).

3.6.6 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 g serbuk simplisia dimasukkan dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, jika arang masih tidak dapat dihilangkan, ditambahkan air panas, saring melalui kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa dan kertas saring dalam krus yang sama. Masukkan filtrat ke dalam krus, uapkan, pijarkan hingga bobot tetap, timbang. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1995).

3.6.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam

Abu yang diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam klorida 2 N selama 5 menit. Bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring, dipijarkan hingga bobot tetap

19

kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, RI., 1979).

3.7 Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia dilakukan menurut Depkes (1995), dan Farnsworth (1966), untuk mengetahui golongan senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida, glikosida antrakuinon, saponin, tanin, dan steroida/triterpenoida. Di mana skrining fitokimia dilakukan terhadap simplisia dan ekstrak etanol pecut kuda.

3.7.1 Pemeriksaan Alkaloida

Simplisia atau ekstrak etanol pecut kuda ditimbang sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring. Filtrat yang diperoleh dipakai untuk uji alkaloida: diambil 3 tabung reaksi, lalu kedalamannya dimasukkan 0,5 ml filtrat.

Pada masing-masing tabung reaksi:

a. ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer b. ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat c. ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendroff

Alkaloida positif jika terjadi endapan atau kekeruhan paling sedikit dua dari tiga percobaan diatas (Depkes, RI., 1995).

3.7.2 Pemeriksaan Flavonoida

Sebanyak 10 g simplisia atau ekstrak etanol pecut kuda ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoida positif

20

jika warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol (Farnsworth, 1966).

3.7.3 Pemeriksaan Glikosida

Simplisia dan ekstrak etanol pecut kuda ditimbang sebanyak 3 g, lalu disari dengan 30 ml campuran etanol 96% dengan air (7:3) dan 10 ml asam klorida 2 N, direfluks selama 2 jam, didinginkan dan disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropil dan kloroform (2:3), dilakukan berulang kali sebanyak 3 kali. Sari air dikumpulkan dan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 50ºC. Sisanya dilarutkan dalam 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molish. Kemudian secara perlahan-lahan ditambahkan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuknya cincin berwarna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan ikatan gula (Depkes, RI., 1995).

3.7.4 Pemeriksaan Saponin

Simplisia atau ekstrak etanol pecut kuda ditimbang sebanyak 0,5 g dan

dimasukkan ke dalam tabung reaksi, lalu ditambahkan 10 ml air panas, dinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Jika terbentuk busa setinggi 1 - 10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Depkes, RI., 1995).

3.7.5 Pemeriksaan Tanin

Simplisia atau ekstrak etanol pecut kuda ditimbang sebanyak 1 g,

dididihkan selama 30 menit dalam 100 ml air suling lalu didinginkan dan disaring. Pada filtrat ditambahkan 1 - 2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi

21

warna biru kehitaman atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

3.7.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida

Sebanyak 1 g simplisia atau ekstrak etanol pecut kuda dimaserasi dengan 20 ml n-heksan selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan beberapa tetes pereaksi Lieberman-Burchard. Timbulnya warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroida, sedangkan warna merah, merah muda atau ungu menunjukkan adanya triterpenoida (Harborne, 1987).

3.8 Penyiapan Bahan Uji, Obat Pembanding dan Kontrol

Ekstrak etanol 96% simplisia pecut kuda dibuat dalam bentuk suspensi menggunakan CMC Na 0,5%. Obat pembanding furosemid dibuat dalam bentuk suspensi menggunakan CMC Na 0,5%. Kontrol negatif yang digunakan adalah suspensi CMC Na 0,5%.

3.8.1 Pembuatan suspensi CMC Na 0,5%

Sebanyak 0,5 g CMC Na ditaburkan dalam lumpang yang berisi 20 ml air

suling panas. Didiamkan selama 15 menit lalu digerus hingga diperoleh massa yang transparan, lalu digerus sampai homogen, diencerkan dengan air suling, dihomogenkan dan dimasukkan ke labu tentukur 100 ml, dicukupkan volumenya dengan air suling hingga 100 ml.

3.8.2 Pembuatan suspensi furosemid dosis 10 mg/kg bb

Ditimbang seksama sejumlah serbuk tablet yang setara dengan lebih kurang 10 mg furosemid, dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml ditambahkan larutan pengencer sampai tanda (Depkes, RI., 1995).

22

3.9 Penyiapan Hewan Percobaan

Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan dengan berat 150 - 200 g. Sebelum pengujian dikondisikan terlebih dahulu selama satu minggu dengan kondisi lingkungan, makanan, dan minuman yang sama. Setelah satu minggu, dipilih tikus yang sehat ditandai dengan berat badan yang stabil atau meningkat.

3.10 Pengujian Efek Diuretik pecut kuda

Hewan yang digunakan sebanyak 25 ekor tikus putih jantan yang setiap

kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Tikus dipuasakan tidak diberi makan selama ± 12 jam dengan tetap diberi minum, kemudian bobot tikus ditimbang. Tikus diberikan NaCl 0,9% secara oral dengan dosis 20 ml/kg bb. Masing-masing tikus diberi perlakuan yang dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif diberikan CMC-Na 0,5%, kontrol positif diberikan furosemid 10 mg/kg bb, dan pemberian bahan obat ekstrak etanol pecut kuda dosis 100, 150, 200 mg/kg bb. Tikus diletakkan di dalam kandang metabolik yang telah dimodifikasi. Volume urin yang diekskresikan dicatat setiap jam dan akumulasinya selama 5 jam sebagai urin total dan cek pH urin serta ditentukan kadar elektrolit natrium dan kalium dalam urin (Parmar dan Prakash, 2006).

3.10.1 Pengukuran pH urin

Pengukuran pH urin dilakukan dengan menggunakan alat pH meter. Caranya: Alat terlebih dahulu dikalibrasi dengan menggunakan larutan dapar standart netral (pH 7,0) dan larutan dapar pH asam (4,0) hingga alat menunjukkan harga pH tersebut. Kemudian elektroda dicuci dengan air suling, lalu dikeringkan dengan tissu. Sampel yang dalam bentuk cairan (urin) dibuat dalam konsentrasi

23

1% yaitu ditimbang 1 gram sampel dan dilarutkan dalam 100 ml air suling. Kemudian elektroda dicelupkan dalam larutan tersebut. Dibiarkan alat menunjukkan harga pH konstan. Angka yang ditunjukkan pH meter merupakan pH sampel (Rawlins, 2003).

3.10.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Kalium

Larutan baku kalium (konsentrasi 1000 µg/ml) dipipet sebanyak 2,5 ml,

dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuabides (konsentrasi 50 µg/ml).

Larutan untuk kurva kalibrasi kalium dibuat dengan memipet (1; 2; 3; 4; dan 5) ml dari larutan baku 50 µg/ml, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuabides larutan ini mengandung (2,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10,0) µg/ml dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 766,5 nm dengan nyala udara-asetilen.

3.10.3 Pembuatan Kurva Kalibrasi Natrium

Larutan baku natrium (konsentrasi 1000 µg/ml) dipipet sebanyak 2,5 ml, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuabides (konsentrasi 50 µg/ml).

Larutan untuk kurva kalibrasi natrium dibuat dengan memipet (0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5) ml dari larutan baku 50 µg/ml, masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml dan dicukupkan hingga garis tanda dengan akuabides (larutan ini mengandung (1,00; 2,00; 3,00; 4,00; 5,00)) µg/ml dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 589,0 nm dengan nyala udara asetilen.

24

3.10.4 Penentuan Kadar Natrium dan Kalium dengan Spektrofotometer Serapan Atom

Sebanyak 1 ml urin dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml kemudian dicukupkan dengan akuades sampai 50 ml. Dipindahkan ke dalam erlemeyer dan ditambahkan 5 ml HNO3 pekat dan beberapa batu didih. Didihkan secara

perlahan-lahan kemudian diuapkan dengan hotplate hingga volume urin total tinggal 20 ml, saring. Filtrat dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml dicukupkan dengan akuades sampai garis tanda. Faktor pengenceran untuk penentuan kadar natrium pada urin adalah 5 kali, faktor pengenceran untuk penentuan kadar kalium pada urin adalah 2,5 kali. Selanjutnya diukur menggunakan alat SSA (SNI, 2004).

3.11 Analisis Data

Data hasil penelitian dianalisis dengan metode analisis variansi (ANAVA) dengan tingkat kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan uji Tukey untuk melihat perbedaan nyata antar perlakuan. Analisis Statistik ini menggunakan program SPSS 17.0.

25

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan di Pusat Penelitian dan Pengembangan LIPI Bogor, menunjukkan bahwa tumbuhan yang diteliti adalah pecut kuda (Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl), suku Verbenaceae (Lampiran 1 halaman 47).

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak

Hasil pemeriksaan makroskopik simplisia pecut kuda menunjukkan simplisia berwarna coklat, tekstur rapuh, berbau khas, berasa sepat, sifatnya pahit. Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia pecut kuda terlihat adanya rambut, rambut kelenjar, jaringan palisade, pembuluh kayu dengan penebalan jala, fragmen mesofil dan epidermis (Lampiran 4 halaman 51).

Menurut Ditjen POM (2000), standarisasi suatu simplisia dan ekstrak adalah pemenuhan terhadap persyaratan sebagai bahan obat dan menjadi penetapan nilai untuk berbagai parameter produk. Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia dan ekstrak pecut kuda dapat dilihat pada Tabel 4.1.

Tabel 4.1 Hasil karakterisasi simplisia dan ekstrak pecut kuda

No Parameter Hasil (%)

Simplisia Ekstrak

1 Kadar air 8,61 7,82

2 Kadar sari larut dalam air 20,16 -

3 Kadar sari larut dalam etanol 28,31 -

4 Kadar abu total 5,44 2,08

5 Kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,42 0,87 Hasil penetapan kadar air simplisia dan ekstrak etanol pecut kuda diperoleh 8,61% dan 7,82%, hal ini sesuai dengan standarisasi kadar air simplisia

26

secara umum dengan syarat yaitu tidak lebih dari 10% (Ditjen, POM., 1995). Penetapan kadar air dilakukan untuk memberikan batasan minimal atau rentang tentang besarnya kandungan air dalam ekstrak karena tingginya kandungan air menyebabkan ketidakstabilan sediaan obat, bakteri dan jamur cepat tumbuh dan bahan aktif yang terkandung didalamnya dapat terurai.

Karakterisasi simplisia lain seperti penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam, penetapan kadar sari yang larut dalam etanol, dan penetapan kadar sari yang larut dalam air khusus untuk simplisia pecut kuda belum ada literatur yang mencantumkannya sehingga tidak mempunyai standarisasi. Penetapan kadar sari yang larut dalam air dan etanol dilakukan untuk mengetahui jumlah senyawa yang dapat tersari dalam air dan dalam etanol dari suatu simplisia. Senyawa yang bersifat polar dan larut dalam air akan tersari oleh air. Sedangkan senyawa-senyawa yang tidak larut dalam air dan larut dalam etanol akan tersari oleh etanol.

Penetapan kadar abu dimaksudkan untuk mengetahui kandungan mineral internal yang terdapat di dalam simplisia yang diteliti serta senyawa organik yang tersisa selama pembakaran. Abu total terbagi dua yang pertama abu fisiologis adalah abu yang berasal dari jaringan tumbuhan itu sendiri dan abu non fisiologis adalah sisa setelah pembakaran yang berasal dari bahan-bahan dari luar yang terdapat pada permukaan simplisia. Kadar abu tidak larut asam untuk menentukan jumlah silika, khususnya pasir yang ada pada simplisia dengan cara melarutkan abu total dalam asam klorida (WHO., 1998).

Penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam ditetapkan untuk melihat kandungan mineral ekstrak. Zat-zat ini dapat berasal dari senyawa

oksida-27

oksida anorganik. Kadar abu total yang tinggi menunjukkan adanya zat anorganik logam-logam (Ca, Mg, Fe, Cd dan Pb) yang sebagian mungkin berasal dari pengotoran. Kadar logam berat yang tinggi dapat membahayakan kesehatan, oleh sebab itu perlu dilakukan penetapan kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam untuk memberikan jaminan bahwa ekstrak tidak mengandung logam berat tertentu melebihi nilai yang ditetapkan karena berbahaya (toksik) bagi kesehatan.

Herba pecut kuda yang digunakan pada penelitian ini sebanyak 2,9 kg, yang selanjutnya dikeringkan dalam lemari pengering pada temperatur ± 40ºC sampai buah kering dan diperoleh berat simplisia sebesar 1,1 kg.

Hasil penyarian 600 g serbuk simplisia pecut kuda dengan pelarut etanol 96% diperoleh ekstrak kental yang kemudian diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator dan kemudian dikeringkan dengan menggunakan freeze dryer diperoleh 83,15 g ekstrak dengan rendeman sebesar 13,85%.

4.3 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan EEPK

Skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol pecut kuda dilakukan untuk mengetahui senyawa kimia yang terdapat pada simplisia tersebut, dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol pecut kuda

(EEPK)

No Parameter Pecut kuda

Serbuk simplisia Ekstrak Etanol

1 Alkaloida + +

2 Flavonoida + +

3 Saponin - -

4 Tanin + +

5 Glikosida + +

6 Steroida/Triterpenoida + +

28

Berdasarkan hasil skrinning fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak etanol pecut kuda (Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl mengandung alkaloid, flavonoid, tanin, glikosida dan steroida/triterpenoida.

4.4 Hasil Pengujian Efek Diuretik

Pengujian efek diuretik ekstrak etanol pecut kuda dengan parameter volume urin, pH urin, kadar natrium dan kadar kalium dalam urin terhadap tikus putih jantan.

4.4.1 Hasil volume urin

Pengukuran jumlah urin bermanfaat untuk menentukan adanya gangguan faal ginjal dan kelainan dalam keseimbangan cairan tubuh. Volume urin berkaitan erat dengan penggunaan diuretik karena dapat menyebabkan terjadinya diuresis. Menurut Siswandono dan Soekardjo (1995), diuretik adalah senyawa atau obat yang dapat meningkatkan volume urin. Diuresis mempunyai dua pengertian, pertama menunjukkan adanya penambahan volume urin yang diproduksi dan yang kedua menunjukkan pengeluaran zat-zat terlarut dalam urin, dapat dilihat pada Tabel 4.3.

46

Tabel 4.3 Hasil pengukuran volume urin rata-rata setiap jam selama 5 jam Kelompok

pengujian

Rata-rata volume urin total setiap jam (ml) ± SD

1 p 2 P 3 p 4 P 5 P

Kontrol CMC Na 0,5% 0,3 ± 0,16 - 0,000 0,6 ± 0,37 - 0,000 0,78 ± 0,26 - 0,000 1,02 ± 0,37 - 0,000 1,28 ± 0,13 - 0,000 EEPK dosis 100 mg/kg bb 1,3 ± 0,37 0,001 0,017 1,78 ± 0,43 0,005 0,037 2,10 ± 0,18 0,002 0,002 2,32 ± 0,21 0,002 0,000 2,56 ± 0,37 0,002 0,000 EEPK dosis 150 mg/kg bb 0,9 ± 0,29 0,006 0,007 1,5 ± 0,39 0,032 0,006 1,98 ± 0,56 0,005 0,005 2,36 ± 0,52 0,001 0,001 2,8 ± 0,30 0,000 0,002 EEPK dosis 200 mg/kg bb 1,20 ± 0,35 0,003 0,141 1,80 ± 0,57 0,005 0,053 2,82 ± 0,56 0,000 0,291 3,22 ± 0,58 0,000 0,316 3,96 ± 0,83 0,000 0,988 Furosemid 10 mg/kg bb 1,70 ± 0,37 0,000 - 2,70 ± 0,51 0,000 - 3,42 ± 0,58 0,000 - 3,78 ± 0,46 0,000 - 4,10 ± 0,26 0,000 - Keterangan: Nilai p pada baris I dibandingkan dengan kontrol negatif

Nilai p pada baris II dibandingkan dengan kontrol positif p (Signifikan)

Pada Tabel 4.3 menunjukkan bahwa kelompok uji yang diberikan EEPK dosis 100, 150 dan 200 mg/kg bb terjadi peningkatan volume urin dan terdapat perbedaan yang signifikan terhadap kelompok kontrol negatif yang diberikan CMC Na 0,5% dengan nilai signifikan (p < 0,05). Hal ini menunjukkan adanya efek diuretik dari EEPK.

Pada kelompok uji yang diberikan EEPK dosis 100,150 dan 200 mg/kg bb diperoleh hasil yang menunjukkan bahwa peningkatan pemberian dosis EEPK dapat meningkatkan pengeluaran volume urin dan terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok uji dengan nilai signifikan (p < 0,05).

Pada kelompok uji yang diberikan EEPK dosis 100 dan 150 mg/kg bb belum menyamai efek yang ditunjukkan oleh EEPK dosis 200 mg/kg bb. Hasil

47

statistik menunjukkan bahwa EEPK dosis 200 mg/kg bb tidak terdapat perbedaan yang signifikan terhadap kelompok kontrol positif yang diberikan furosemid 10 mg/kg bb dengan nilai signifikan (p ≥ 0,05). Profil volume urin terhadap waktu ditunjukkan pada Gambar 4.1.

Gambar 4.1 Volume urin rata-rata terhadap waktu setiap jam selama 5 jam

Pada Gambar 4.1 menunjukkan bahwa pada jam ke-1 sampai jam ke-5, semua sediaan uji dan kelompok pembanding menunjukkan peningkatan volume urin yang artinya sudah terjadi efek diuretik. EEPK dosis 200 mg/kg bb paling baik dalam pengeluaran urin. Hal tersebut sudah terlihat pada jam ke-3, dimana EEPK dosis 200 mg/kg bb ini mempunyai aktivitas diuretik hampir sama dengan furosemid dosis 10 mg/kg bb tetapi pada jam ke-3 sampai jam ke-5 furosemid dosis 10 mg/kg bb mengalami peningkatan pengeluaran urin yang stabil. Menurut Khan (2005), bahwa furosemid memiliki waktu paruh yang singkat (15 menit) dengan onset 1-2 jam setelah pemberian secara per oral serta durasi 2- 6 jam. Pada EEPK dosis 150 mg/kg bb dengan EEPK dosis 100 mg/kg bb sudah memberikan efek dalam pengeluaran urin pada jam ke-3, dimana EEPK dosis 100 mg/kg bb mempunyai efek diuretik yang paling kecil dibandingkan dengan dosis

48

150 dan 200 mg/kg bb. Pada jam ke-3 terjadi proses dimana senyawa yang ada dalam ekstrak etanol pecut kuda telah berikatan dengan reseptor sehingga menghasilkan efek diuretik. Senyawa yang berpengaruh pada aktivitas diuretik ekstrak etanol pecut kuda ini adalah alkaloid dan flavonoid. Menurut (Jabar, 2011), bahwa alkaloid dan flavonoid dapat meningkatkan pengeluaran volume urin dan pengeluaran elektrolit pada tikus. Selain itu kandungan kalium berfungsi sebagai diuretik sehingga pengeluaran natrium cairan meningkat, jumlah natrium rendah, tekanan darah turun.

Gambar 4.2 Volume total urin pada tikus

Pada Gambar 4.2 dapat dilihat bahwa volume total urin dengan rata- rata untuk kontrol negatif 1,28±0,130 ml, EEPK dosis 100 mg/kg bb 2,56±0,378 ml, EEPK dosis 150 mg/kg bb 2,8±0,308 ml, EEPK dosis 200 mg/kg bb 3,96±0,838 ml, furosemid 10 mg/kg bb 4,10±0,264 ml. Berdasarkan data volume urin total yang dihasilkan maka dapat dikatakan bahwa EEPK memberikan efek diuretika dimana terjadi peningkatan jumlah volume urin yang dikeluarkan oleh tubuh dibandingkan volume urin total kelompok kontrol negatif.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan bahwa pemberian EEPK dengan peningkatan dosis dapat meningkatkan pengeluaran volume urin terhadap tikus.

49

Hal tersebut sesuai dengan hasil yang diperoleh pada penelitian Idu, et. al., (2015) dan Foda, dkk., (2015) bahwa pemberian ekstrak dengan dosis yang meningkat terhadap hewan uji maka semakin banyak mempengaruhi pengeluaran volume urin.

Berdasarkan hasil statistik yang diperoleh, EEPK dengan dosis 100 mg/kg bb, 150 mg/kg bb, dan 200 mg/kg bb menunjukkan efek diuretik terhadap volume urin. Dari ketiga dosis tersebut, EEPK dengan dosis 200 mg/kg bb mempunyai efek diuretik yang paling baik terhadap volume urin dengan nilai signifikan (p ≥ 0,05) dibandingkan dengan kontrol negatif. Peningkatan pemberian dosis EEPK dapat meningkatkan pengeluaran volume urin terhadap tikus.

Pemberian EEPK dengan dosis 100 mg/kg bb, dosis 150 mg/kg bb dan dosis 200 mg/kg bb mempunyai pengeluaran volume urin lebih besar dibandingkan dengan tikus kontrol negatif tetapi tidak lebih banyak daripada kontrol positif. Hal tersebut disebabkan kontrol negatif tidak mempunyai efek diuretik sedangkan furosemid menghasilkan peningkatan volume urin yang lebih besar dari semua kelompok, ini juga membuktikan bahwa furosemid merupakan obat diuretik kuat yang bertitik kerja di lengkungan henle. Furosemid bekerja dengan menghambat reabsorpsi natrium dan kalium sehingga meningkatkan ekskresi air. Peningkatan volume urin yang terjadi sesuai dengan prinsip dari diuretik yaitu obat yang dapat meningkatkan kecepatan pembentukan urin (Foye, 1995). Diuretik bermanfaat dalam pengobatan berbagai penyakit yang berhubungan dengan retensi abnormal garam dan air dalam kompartemen ekstraseluler, dapat disebabkan oleh kegagalan jantung, sirosis hati, gangguan ginjal atau akibat efek samping obat.

50

Indeks diuretik dari hasil penelitian ekstrak etanol pecut kuda dapat ditunjukkan pada Tabel 4.4.

Tabel 4.4 Indeks diuretik ekstrak etanol pecut kuda

Kelompok Pengujian Volume Urin Total (ml)

Aktivitas Diuretik

Indeks Diuretik

Kontrol CMC Na 0,5% 1,28 ± 0,13 0,31 1

EEPK dosis 100 mg/kg bb 2,56 ± 0,37 0,62 2 EEPK dosis 150 mg/kg bb 2,8 ± 0,30 0,68 2,18 EEPK dosis 200 mg/kg bb 3,96 ± 0,83 0,96 3,09 Furosemid dosis 10 mg/kg bb 4,10 ± 0,26 1 3,20

Menurut Asif (2013), bahwa nilai indeks diuretik lebih besar 1,50 adalah aktivitas diuretik kuat. Sedangkan nilai indeks diuretik mulai dari 1,00-1,50 menunjukkan aktivitas diuretik sedang dan 0,72-0,99 menunjukkan aktivitas diuretik ringan, nilai indeks diuretik lebih kecil 0,72 menunjukkan tidak ada aktivitas diuretik. Dalam penelitian ini, nilai indeks diuretik dari ketiga kelompok perlakuan adalah 2, 2,18 dan 3,09 menunjukkan bahwa ekstrak memiliki aktivitas diuretik kuat. Berdasarkan tabel diatas EEPK dosis 200 mg/kg bb menunjukkan aktivitas diuretik sebesar 96% dibandingkan dengan furosemid.

4.4.2 Hasil nilai pH

Tujuan pemeriksaan pH urin adalah untuk mengetahui derajat keasaman atau basa dari urin. Pemeriksaan pH urin menunjukkan hasil yang normal yaitu sekitar 7,3-7,7. Hasil tidak menunjukkan urin menjadi asam ataupun basa (alkalis). Nilai pH dalam urin yang normal bervariasi, tergantung dari Asupan makanan atau minuman ke dalam tubuh dengan angka terendah 4,5 hingga angka tertinggi 8,0 (Widjayakusuma, 2009).

51

Berdasarkan hasil pengukuran nilai pH urin dari volume urin pada jam ke-5 sebagai pH urin total pada setiap kelompok uji dapat dilihat pada Tabel 4.5 dan Gambar 4.3.

Tabel 4.5 Hasil pengukuran nilai pH urin tikus pada kelompok uji

No Kelompok Pengujian

Nilai pH Rata-rata

± SD

Nilai signifikansi

(p) T.I T.II T.III T.IV T.V

1 Kontrol CMCNa

0,5%

7,3 7,6 7,3 7,4 7,5 7,42 ± 0,130

- 0,999 2 EEPK dosis

100 mg/kg bb

7,5 7,4 7,5 7,6 7,6 7,52 ± 0,08 0,999 0,985 3 EEPK dosis

150 mg/kg bb

7,6 7,5 7,4 7,5 7,7 7,54 ± 0,114 0,999 _1,000 4 EEPK dosis

200 mg/kg bb

7,5 7,7 7,5 7,4 7,7 7,56 ± 0,134 0,936 _0,985 5 Furosemid

dosis 10 mg/kg bb

7,5 7,6 7,5 7,6 7,7 7,6 ± 0,1 0,999 - Keterangan: Nilai p pada baris I dibandingkan dengan kontrol negatif Nilai p pada baris II dibandingkan dengan kontrol positif

p (Signifikan)

T.I – T.V (Tikus 1 - Tikus 5)

52

Pada Tabel 4.5 dan Gambar 4.3 dapat dilihat bahwa nilai pH urin rata- rata untuk kontrol negatif 7,42±0,130, EEPK dosis 100 mg/kg bb 7,52±0,08, EEPK dosis 150 mg/kg bb 7,54±0,114, EEPK dosis 200 mg/kg bb 7,56±0,134, furosemid dosis 10 mg/kg bb 7,6±0,1.

Berdasarkan hasil statistik nilai pH urin total yang diperoleh, semua kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif serta kelompok uji menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok dengan nilai signifikansi (p ≥ 0,05), dengan demikian dapat disimpulkan bahwa EEPK memiliki nilai pH yang sama dan tidak ada pengaruh antara kelompok pengujian.

Pada hasil pengukuran pH urin menunjukkan bahwa nilai pH pada semua kelompok pengujian berada dalam rentang pH normal. Pengukuran pH urin dilakukan untuk mengetahui apakah ekstrak yang diuji termasuk dalam golongan diuretik penghambat karbonik anhidrase. Golongan diuretik penghambat karbon anhidrase dapat menyebabkan pH urin menjadi basa. Penghambatan karbon anhidrase menyebabkan ekskresi HCO3- yang cepat di urin. Hal ini seiring dengan

penghambatan terhadap titrable acid dan adanya sekresi ammonia di sistem duktus pengumpul yang mengakibatkan pH urin menjadi basa dan menimbulkan asidosis (Edwin, 2012).

4.4.3 Hasil kadar Natrium

Elektrolit merupakan salah satu unsur yang memegang peranan penting dalam pemeliharaan fungsi tubuh baik tingkat sel, jaringan, organ, maupun fungsi tubuh secara keseluruhan. Natrium adalah kation utama dalam darah dan cairan

53

ekstraseluler. Elektrolit natrium ini akan membantu pengeluaran air seni yang disebut efek diuresis (Rasyid, 2011).

Berdasarkan pengukuran kurva kalibrasi untuk natrium diperoleh persamaaan garis regresi yaitu Y=0,141763x–0,00196 dengan nilai r = 0,9999. Hal ini menunjukkan adanya korelasi linier yang menyatakan adanya hubungan antara X (konsentrasi) dan Y (absorbansi). Hasil pengukuran kadar natrium dapat dilihat pada Tabel 4.6 dan Gambar 4.4.

Tabel 4.6 Kadar natrium dalam urin tikus pada kelompok uji

N o

Kelompok Pengujian

Kadar Natrium (meq/l)

Rata-rata ± SD (meq/ L) Nilai Signif ikansi (p) T.I T.II T.III T.IV T.V

1

Kontrol CMC Na

0,5% 33,44 39,16 31,58 39,7 41,78

37,13 ± 4,38 - 0,000 2 EEPK dosis 100

mg/kg bb 59,79 65,39 60,15 69,67 78,75

64,25 ± 7,84 0,000 0,001 3 EEPK dosis 150

mg/kg bb 60,66 67,40 60,86 74,47 84,44

69,56 ± 10,06 0,000 0,003 4 EEPK dosis 200

mg/kg bb 75,69 76,11 76,32 72,93 71,71

74,55 ± 1,87 0,000 0,650 5 Furosemid Dosis 10

mg/kg bb 80,76 93,22 90,87 98,84 105,04

93,74 ± 9,09

0,000 - Keterangan: Nilai p pada baris I dibandingkan dengan kontrol negatif

Nilai p pada baris II dibandingkan dengan kontrol positif p (Signifikan)

54

Gambar 4.4 Kadar Natrium pada urin tikus putih jantan

Pada Tabel 4.6 dan Gambar 4.4 dapat dilihat bahwa dari hasil rata-rata yang diperoleh untuk CMC Na 0,5% 37,13±4,38 meq/l; EEPK dosis 100 mg/kg bb 64,25±7,84 meq/l, EEPK dosis 150 mg/kg bb 69,56±10,06 meq/l, dan EEPK dosis 200 mg/kg bb 74,55±1,84 meq/l; furosemid dosis 10 mg/kg bb 93,74±9,09 meq/l.

Berdasarkan hasil yang diperoleh, EEPK dengan dosis 100 mg/kg bb, 150 mg/kg bb, dan 200 mg/kg bb menunjukkan efek diuretik terhadap kadar natrium dalam urin. Dari ketiga dosis tersebut, EEPK dengan dosis 200 mg/kg bb mempunyai efek pengeluaran natrium yang paling baik terhadap volume urin dengan nilai signifikan (p ≥ 0,05).

Pemberian EEPK dengan dosis 100, 150, 200 mg/kg bb mempunyai efek diuretik terhadap pengeluaran natrium lebih besar dibandingkan dengan tikus kontrol negatif tetapi tidak lebih banyak daripada kontrol positif dengan nilai signifikansi (p ≥ 0,05). Hal ini menunjukkan bahwa furosemid lebih kuat untuk pengeluaran natrium dalam urin tikus sedangkan CMC Na 0,5% adalah sebagai kontrol negatif dalam penelitian ini. Penelitian ini menunjukkan bahwa semakin banyak dosis ekstrak yang diberikan maka semakin banyak mempengaruhi pengeluaran volume urin dan ekskresi natrium. Peningkatan pengeluaran natrium

55

dalam urin mengindikasikan adanya efek diuretik yang dihasilkan dari ekstrak pecut kuda.

4.4.5 Hasil kadar Kalium

Kalium merupakan salah satu mineral makro yang berperan dalam pengaturan keseimbangan cairan tubuh. Masukan natrium yang tinggi dapat meningkatkan ekskresi kalium. Hubungan ini diperkirakan disebabkan sebagian oleh reabsorbsi kalium secara pasif mengikuti natrium dan air pada tubulus proksimal dan sepanjang lengkung Henle.

Berdasarkan pengukuran kurva kalibrasi untuk kalium diperoleh persamaaan garis regresi yaitu Y=0,211817x-0,00329 dengan nilai r = 0,9998. Hal ini menunjukkan adanya korelasi linier yang menyatakan adanya hubungan antara X (konsentrasi) dan Y (absorbansi). Hasil pengukuran kadar kalium dalam urin tikus putih jantan pada kelompok uji dapat dilihat pada Tabel 4.7 dan Gambar 4.5.

Tabel 4.7 Kadar kalium dalam urin tikus pada kelompok uji

No Kelompok Pengujian

Kadar Kalium (meq/l) Rata-rata ± SD (meq/l) Nilai Signifi kansi (p) T.I T.II T.III T.IV T.V

1

Kontrol CMC-Na

0,5% 22,57 23,72 25,65 23,74 28,91

24,91 ± 2,49 - 0,000 2 EEPK dosis 100

mg/kg bb 28,36 30,12 32,83 31,03 38,41

35,55 ± 3,85 0,009 0,000 3 EEPK dosis 150

mg/kg bb 30,32 35,46 36,33 33,07 43,78

37,99 ± 5,03 0,017 0,003 4 EEPK dosis 200

mg/kg bb 34,05 44,08 37,72 35,40 50,97

40,44 ± 7,03 0,001 0,076 5 Furosemi d Dosis 10 mg/kg bb

41,23 50,49 50,78 48,23 54,69 49,08 ± 4,96

56

Keterangan: Nilai p pada baris I dibandingkan dengan kontrol negatif Nilai p pada baris II dibandingkan dengan kontrol positif

p (Signifikan)

T.I – T.V (Tikus 1 - Tikus 5)

Gambar 4.5 Kadar Kalium pada urin tikus putih jantan

Pada Tabel 4.7 dan Gambar 4.5 dapat dilihat bahwa dari perolehan hasil rata-rata untuk kontrol negatif 24,91±2 , 4 9 meq/l; EEPK dosis 100 mg/kg bb 35,55±3,85 meq/l; EEPK dosis 150 mg/kg bb 37,99±5,03 meq/l; EEPK dosis 200 mg/kg bb 40,44±7,03 meq/l; furosemid 10 mg/kg bb 49,08±4,96 meq/l.

Berdasarkan hasil yang diperoleh, EEPK dengan dosis 100 mg/kg bb, 150 mg/kg bb, dan 200 mg/kg bb menunjukkan efek diuretik terhadap kadar kalium dalam urin. Dari ketiga dosis tersebut, EEPK dengan dosis 200 mg/kg bb mempunyai efek pengeluaran kalium yang paling baik terhadap volume urin dengan nilai signifikansi (p ≥ 0,05).

Pemberian EEPK dengan dosis 100, 150, 200 mg/kg bb mempunyai efek diuretik terhadap pengeluaran kalium lebih besar dibandingkan dengan tikus kontrol negatif tetapi tidak lebih banyak daripada kontrol positif. Hal ini menunjukkan bahwa furosemid lebih kuat untuk pengeluaran natrium dalam urin

57

tikus sedangkan CMC Na 0,5 % adalah sebagai kontrol negatif dalam penelitian ini. Penelitian ini menunjukkan bahwa semakin banyak dosis ekstrak yang diberikan maka semakin banyak mempengaruhi pengeluaran volume urin dan ekskresi kalium sama halnya dengan peneliti sebelumnya bahwa peningkatan dosis dapat mempengaruhi pengeluaran kalium (Foda, dkk., 2015).

Berdasarkan hasil pengukuran kadar elektrolit natrium dan kalium dalam urin yang diekskresikan oleh tikus, maka dapat dihitung rasio Na+/K+. Nilai rasio Na+/K+ dapat dilihat pada Tabel 4.8.

Tabel 4.8 Rasio kadar elektrolit Natrium dan Kalium dalam urin tikus

Kelompok pengujian Elektrolit (meq/l) ± SD

Na+ K+ Na+/ K+

Kontrol CMC Na 0,5% 37,13 ± 4,38 24,91 ± 2,49 1,49 EEPK dosis 100 mg/kg bb 64,25 ± 7,84 35,55 ± 3,85 1,80 EEPK dosis 150 mg/kg bb 69,56 ± 10,06 37,99 ± 5,03 1,83 EEPK dosis 200 mg/kg bb 74,55 ± 1,87 40,44 ± 7,03 1,84 Furosemid dosis 10 mg/kg bb 93,74 ± 9,09 49,08 ± 4,96 1,90

Berdasarkan Tabel 4.8 menunjukkan hasil nilai rasio Na+/K+ dari EEPK dosis 100, 150 dan 200 mg/kg bb adalah 1,80, 1,83, 1,84. Pembanding yang digunakan adalah furosemid yang merupakan golongan diuretik kuat boros kalium, nilai rasio Na+/K+ furosemid adalah 1,90 nilai tersebut lebih besar dari ketiga kelompok perlakuan karena furosemid merupakan diuretik yang menyebabkan pengeluaran natrium yang banyak sehingga air yang diekskresikan juga mengeluarkan kalium yang lebih besar karena merupakan diuretik hemat kalium.

58

Menurut Kebamo, et. al., (2015) rasio Na+/K+ dihitung untuk mengetahui indeks pengeluaran aldosteron (aktivitas natriuretik). Aldosteron berfungsi menjaga keseimbangan ion natrium dalam darah. Menurut Guyton (1994), apabila konsentrasi aldosteron meningkat maka sisa natrium akan direabsorbsi dari bagian dalam tubulus distal dan duktus koligens sehingga pada dasarnya tidak ada natrium keluar ke dalam urin, sebaliknya jika konsentrasi aldosteron dikurangi maka sisa natrium tidak direabsorbsi dari tubulus distal sehingga natrium keluar bersama urin.

Penelitian ini menunjukkan bahwa dengan peningkatan nilai rasio Na+/K+ dari semua kelompok pengujian terjadi peningkatan efek diuretik. Berdasarkan hasil statistik terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok uji dengan nilai signifikan (p < 0,05). Hal ini diduga pemberian ekstrak etanol pecut kuda menyebabkan peningkatan pengeluaran zat-zat terlarut dalam urin akibat adanya kandungan flavonoid.

Flavonoid dapat meningkatkan volume urin dengan cara meningkatkan laju kecepatan glomerulus (Jonad, 2001). Penelitian ini juga menunjukkan bahwa kadar natrium pada urin tikus lebih besar dari kadar kalium sesuai dari fungsi diuretik yang merupakan senyawa yang dapat meningkatkan ekskresi air dan garam-garam (Mutschler, 1991).

59

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol pecut kuda dosis 100, 150 dan 200 mg/kg bb memiliki aktivitas diuretik dengan meningkatkan volume urin, kadar natrium dan kadar kalium dalam urin tikus serta terdapat perbedaan yang signifikan dibandingkan kontrol negatif (p < 0,05). Dosis yang paling baik untuk efek diuretik pada penelitian ini yaitu EEPK dosis 200 mg/kg bb yang tidak berbeda signifikan dengan furosemid dosis 10 mg/kg bb (p ≥ 0,05) serta tidak ada pengaruh terhadap nilai pH. Dengan meningkatnya dosis maka terjadi peningkatan efek diuretik ekstrak etanol pecut kuda pada tikus.

5.2 Saran

Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk meneliti efek farmakologi yang

5

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

Pecut kuda tumbuh liar di tepi jalan, tanah lapang dan tempat-tempat terlantar lainnya. Tanaman yang berasal dari Amerika ini dapat ditemukan di daerah cerah, sedang, terlindung dari sinar matahari dan pada ketinggian 1-1500 m dpl. Pecut kuda merupakan terna tahunan, tumbuh tegak, tinggi ±50 cm, tumbuh liar disisi jalan daerah pinggir kota, tanah kosong yang tidak terawat. Daun letak berhadapan, bentuk bulat telur, tepi bergerigi, tidak berambut. Bunga duduk tanpa tangkai pada bulir-bulir yang berbentuk pecut, panjang 4-20 cm. bunga mekar tidak berbarengan, kecil-kecil warna ungu, putih (Dalimartha, 2000).

2.1.1 Sistematika Tumbuhan

Kedudukan kategori taksa untuk jenis pecut kuda di dalam sistematika tumbuhan adalah sebagai berikut :

Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Class : Dicotyledoneae Ordo : Lamiales Famili : Verbenaceae Genus : Stachytarpheta

Spesies : Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl (Depkes, RI., 2000).

2.1.2 Nama Lokal

Jawa : jarong (Sunda), biron, karomenal, sekar laru, ngadirenggo (jawa) (Dalimartha, 2000).

6

2.1.3 Nama Asing

Yu long Bian (Cina), Snakeweed (Inggris) (Dalimartha, 2000).

2.1.4 Kandungan Kimia

Pecut kuda mengandung glikosida, flavonoid dan alkaloid (Dalimartha, 2000).

2.1.5 Khasiat Tumbuhan

Herba pecut kuda (Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl) digunakan sebagai obat infeksi dan batu saluran kencing, rematik, sakit tenggorokan, pembersih darah, haid tidak teratur, keputihan, hepatitis A. Bunga dan tangkainya untuk pengobatan radang hati sedangkan akarnya untuk pengobatan keputihan (Dalimartha, 2000).

2.2 Metode Ekstraksi

Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan (Depkes, RI., 2000). Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, diluar pengaruh cahaya matahari langsung (BPOM, RI., 2012).

Ekstraksi (dalam istilah farmasi) yaitu proses pemisahan bagian senyawa aktif yang berkhasiat sebagai obat dari jaringan tanaman atau hewan dengan menggunakan pelarut tertentu, sesuai prosedur standart yang akan menghasilkan ekstrak (Depkes, RI., 1979). Zat aktif yang terdapat dalam simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan minyak atsiri, alkaloid, flavonoid dan lain-lain (Ditjen, POM., 2000). Tujuan utama ekstraksi adalah untuk mendapatkan atau

7

memisahkan sebanyak mungkin zat-zat yang memiliki khasiat pengobatan (Syamsuni, 2006).

Metode ekstraksi dapat dilakukan dengan berbagai cara (Ditjen, POM., 2000), yaitu:

a. cara dingin i. maserasi

Maserasi adalah proses ekstraksi dengan cara merendam simplisia dalam pelarut yang sesuai pada temperatur ruangan dan terlindung dari cahaya yang disertai pengocokan atau pengadukan.

ii. perkolasi

Perkolasi adalah penyarian dengan pelarut baru sampi sempurna yang dilakukan pada temperatur ruangan. Proses terdiri dari tahap pengembangan bahan, perendaman dan perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstrak).

b. cara panas i. refluks

Refluks adalah proses penyarian simplisisa dengan menggunakan pelarut pada temperatur titik didihnya selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas relatif konstan dengan adanya pendingin balik.

ii. sokletasi

Sokletasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang dipanaskan hingga mendidih sehingga uap membasahi serbuk simplisia karena adanya

8

pendingin balik dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontiniu dengan jumlah pelarut relatif konstan.

iii. digesti

Digesti merupakan maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinu) pada temperatur yang lebih tinggi dari temperatur kamar, umumnya dilakukan pada suhu 40-50oC. Infus

iv. infundasi

Infundasi merupakan suatu cara ekstraksi dengan menggunakan pelarut air pada temperatur 90oC selama 15 menit.

v. dekoktasi

Dekoktasi merupakan suatu cara ekstraksi pada suhu 90oC dengan menggunakan pelarut air selama 30 menit.

2.3 Ginjal

Ginjal merupakan organ utama untuk membuang produk sisa metabolisme yang tidak diperlukan tubuh. Peran penting ginjal adalah membuang sisa metabolit tubuh dari hasil pencernaan dan fungsi lainnya mengontrol volume dan komposisi cairan tubuh. Fungsi pengaturan ginjal ini untuk memelihara kestabilan lingkungan sel-sel yang diperlukan untuk melakukan berbagai aktivitas (Guyton dan Hall, 1997).

Unit terkecil dari ginjal adalah nefron, yang terdiri dari sebuah glomerolus dan sebuah tubulus. Nefron memiliki fungsi dasar membersihkan atau menjernihkan plasma darah dari substansi yang tidak diinginkan oleh tubuh. Biasanya substansi tersebut berasal dari hasil metabolisme seperti urea, kreatinin,

ix

2.1.4 Kandungan Kimia ... 6

2.1.5 Khasiat Tumbuhan ... 6

2.2 Metode Ekstraksi ... 6

2.3 Ginjal ... 8

2.4 Mekanisme Pembentukan Urin ... 9

2.5 Diuretik ... 10

2.6 Furosemid ... 11

2.7 Spektrofotometri Serapan Atom ... 12

BAB III METODE PENELITIAN ... 14

3.1 Alat dan Bahan ... 14

3.1.1 Alat ... 14

3.1.2 Bahan ... 14

3.2 Pengumpulan Herba Pecut Kuda ... 15

3.3 Identifikasi Tumbuhan ... 15

3.4 Pembuatan Simplisia ... 15

3.5 Pembuatan Ekstrak Etanol Herba Pecut Kuda ... 15

3.6 Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak ... 16

3.6.1 Pemeriksaan makroskopik ... 16

3.6.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 16

3.6.3 Penetapan kadar air ... 17

3.6.4 Penetapan kadar sari larut dalam air ... 17

3.6.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol ... 18

3.6.6 Penetapan kadar abu total ... 18

x

3.7 Skrining Fitokimia ... 19

3.7.1 Pemeriksaan alkaloid ... 19

3.7.2 Pemeriksaan flavonoid ... 19

3.7.3 Pemeriksaan glikosida ... 20

3.7.4 Pemeriksaan saponin ... 20

3.7.5 Pemeriksaan tanin ... 20

3.7.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 21

3.8 Penyiapan Bahab uji, Obat pembanding dan kontrol ... 21

3.8.1 Pembuatan suspensi CMC Na 0,5% ... 21

3.8.2 Pembuatan suspensi furosemid ... 21

3.9 Penyiapan hewan percobaan ... 22

3.10 Pengujian Efek Diuretik pecut kuda ... 22

3.10.1 Pengukuran pH urin ... 22

3.10.2 Pembuatan kurva kalibrasi kalium ... 23

3.10.3 Pembuatan kurva kalibrasi natrium ... 23

3.10.4 Penentuan kadar natrium dan kalium dengan AAS ... 24

3.11 Analisis Data ... 24

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 25

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ... 25

4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak ... 25

4.3 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan EEPK ... 27

4.4 Hasil pengujian efek diuretik ... 28

4.4.1 Hasil volume urin ... 28

xi

4.4.3 Hasil kadar natrium ... 35

4.4.4 Hasil kadar kalium ... 38

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 42

5.1 Kesimpulan ... 42

5.2 Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Diagram kerangka pikir penelitian ... 4

2.1 Organ-organ yang membentuk saluran urin ... 10

4.1 Volume urin terhadap waktu ... 31

4.2 Volume total urin tikus ... 32

4.3 Nilai pH urin pada tikus ... 35

4.4 Kadar natrium rata-rata pada urin tikus ... 37

xiii

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2.1 Penggolongan diuretik berdasarkan mekanisme kerja ... 11

4.1 Hasil karakterisasi simplisia dan ekstrak ... 26

4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia dan ekstrak .... 28

4.3 Hasil Pengukuran Volume Urin Setiap Jam ... 30

4.4 Hasil Indeks Diuretik EEPK ... 34

4.5 Hasil Pengukuran nilai pH ... 35

4.6 Kadar Natrium (meq/l) ... 37

4.7 Kadar Kalium (meq/l) ... 39

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Hasil determinasi tumbuhan pecut kuda ... 46

2 Komite Etik Penelitian Hewan ... 47

3 Karakteristik Tumbuhan Pecut Kuda ... 48

4 Hasil Pemeriksaan Mikroskopik ... 50

5 Perhitungan Karakterisasi ... 51

6 Alat yang digunakan ... 57

7 Data volume urin, pH urin, kadar natrium dan kalium .... 58

8 Tabel konversi dosis hewan dengan manusia ... 59

9 Contoh perhitungan dosis kontrol CMC Na 0,5% ... 60

10 Contoh perhitungan dosis furosemid ... 61

11 Contoh perhitungan dosis dari EEPK ... 62

12 Hasil pengujian AAS ... 63

13 Contoh Perhitungan Kadar Elektrolit ... 64

14 Data Kalibrasi natrium ... 65

15 Data Kalibrasi kalium ... 66

16 Skema pembuatan ekstrak etanol pecut kuda dan uji aktivitas diuretik ... 67

17 Hasil data statistik ANAVA dengan uji Tukey volume urin jam ke 1-5... 68