Penentuan pH dan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq) terhadap Hidrolisis RBDPO (Refined Bleached Deodorized Palm Oil)
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS
EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH BIJI
KELAPA SAWIT (Elaeis guineensis Jacq) TERHADAP
HIDROLISIS RBDPO (Refined Bleached
Deodorized Palm Oil)
SKRIPSI
RIZQI AISYAH AMATURRAHIM
080802026
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN
ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN2012
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS
EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH BIJI
KELAPA SAWIT (Elaeis guineensis Jacq) TERHADAP
HIDROLISIS RBDPO (Refined Bleached
Deodorized Palm Oil)
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains
RIZQI AISYAH AMATURRAHIM
080802026
DEPARTEMEN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN
ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2012
PERSETUJUAN Judul : Penentuan pH dan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq) terhadap Hidrolisis RBDPO (Refined Bleached Deodorized Palm Oil)
Kategori : Skripsi Nama : Rizqi Aisyah Amaturrahim Nomor Induk Mahasiswa : 080802026 Program Studi : Sarjana (S1) Kimia Departemen : Kimia
Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sumatera UtaraDisetujui di Medan, Oktober 2012 Komisi Pembimbing : Pembimbing 2 Pembimbing 1 Drs.Firman Sebayang,MS Dr.Yuniarti Yusak,MS NIP. 195607261985031001 NIP. 194901271980022001 Diketahui/Disetujui Oleh Departemen Kimia FMIPA USU Ketua, Dr. Rumondang Bulan, MS NIP. 1954080301985032001
PERNYATAAN
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS
EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH BIJI
KELAPA SAWIT (Elaeis guineensis Jacq) TERHADAP
HIDROLISIS RBDPO (Refined Bleached
Deodorized Palm Oil)
SKRIPSI
Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa kutipan dari ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.
Medan, Oktober 2012 Rizqi Aisyah Amaturrahim 080802026
PENGHARGAAN
Alhamdulillah,,Puji dan Syukur Penulis ucapkan atas kehadirat ALLAH SWT yang telah memberikan Rahmat dan Hidayah-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan skripsi ini. Pada kesempatan ini, Penulis mengucapkan terima kasih dan penghargaan kepada orangtua penulis Bapak Muslihuddin dan Ibu Siti Minawarsa yang telah membesarkan dengan kasih sayang, mendidik, memberikan segalanya untuk Penulis dan untuk adik-adikku Suci Aisyah Amaturrahim, Boy Attaurazaq, Irgie Attaurazaq yang telah memberikan semangat untuk menyelesaikan skripsi ini.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Ibu Dr.Yuniarti Yusak, MS selaku Dosen Pembimbing I, dan Bapak Drs.Firman Sebayang, MS selaku Dosen Pembimbing II dan Bapak Drs. Johannes H.Simorangkir, MS selaku Dosen Penasehat Akademik yang telah sabar dalam membimbing dan memberikan arahan kepada Penulis selama penelitian dan dalam menyelesaikan skripsi ini. Ketua Departemen Kimia Ibu DR.Rumondang Bulan Nasution dan Sekretaris Departemen Kimia Bapak Drs.Albert Pasaribu, M.Sc dan juga kepada Seluruh Dosen Departemen Kimia F- MIPA USU yang telah memberikan ilmu dan pengetahuan kepada Penulis.
Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada sahabat Penulis Ghina Fadhilla SP, Ratna, Putri, Linda, Dhea, Rizki Amalia Nst, Fenny, Emi, dan teman- teman kimia stambuk 08 yang tidak bisa disebutkan satu persatu dan kepada kak Fitri, kak Riah, kak Mariana, kak Lisma, kak Fia yang telah banyak membantu Penulis dalam melakukan penelitian dan menyelesaikan skripsi ini.
Akhirnya Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu Penulis mengharapkan saran dan masukan yang bersifat membangun dari semua pihak demi terciptanya kesempurnaan dari skripsi ini, semoga Allah Subhanallahu Wataa’la membalas semua kebaikan kita dan memberikan kebahagian bagi kita semua. Amin Ya Rabbal Alamin.
Penulis
ABSTRAK
Telah dilakukan penentuan pH dan suhu optimum untuk aktivitas crude enzim lipase dari kecambah biji kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq). Kecambah biji kelapa sawit dibuat melalui proses pemisahan biji dari buah kelapa sawit, perendaman,
o
pengeringan dan pemanasan, dan perkecambahan biji dilakukan pada suhu 39 – 40 C selama 60 hari, 30ºC selama 21 hari dan 25ºC selama 14 hari Ekstrak kasar enzim lipase diperoleh melalui dua kali proses sentrifugasi selama 30 menit dengan kecepatan putaran 5000 rpm dan 10000 rpm dan dengan penambahan (NH ) SO .
4
2
4 Crude enzim lipase yang dihasilkan dilarutkan dengan buffer fosfat pH 7,0. Uji
aktivitas dari crude enzim lipase dilakukan dengan pengukuran kadar asam lemak bebas yang diperoleh dari proses hidrolisis RBDPO (Refined Bleached Deodorized
Palm Oil ) sebagai substrat dengan metode titrimetri pada variasi suhu 30º; 35º; 40º;
º45º; 50 C dan pH 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; 8,0. Sehingga diperoleh aktivitas tertinggi pada
o pH optimum 7,0 dan suhu optimum 40 C sebesar 9,815 U/mL dan 9,664 U/mL.
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS EKSTRAK
KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH BIJI KELAPA SAWIT (Elaeis
guineensis Jacq) TERHADAP HIDROLISIS RBDPO (Refined Bleached
Deodorized Palm Oil)
ABSTRACT
Determination of optimum pH and temperature for crude lipase enzyme activity from oil
palm seeds germination had been done. Oil palm germination made by separating seed
from palm coconut soaking time process, dried, heated and seed germination in
temperature 39-40ºC during 60 days, 30ºC during 21 days and 25 C during 14 days.
Crude lipase enzyme was obtained by centrifugations during 30 minutes with the speed of
rotation 5000 rpm and 10000 rpm, and addition of (NH ) SO . Crude lipase enzyme
4
2
4
diluted by buffer phosphate pH 7.0. The activity test of crude lipase enzyme doing by
measurement of free fatty acids levels obtained from hydrolysis process of RBDPO
(Refined Bleached Deodorized Palm Oil) as substrate by titrimetric methods with
temperature variations 30 ; 35 ; 40 ; 45 ; 50 C and pH variations 6.0; 6.5; 7.0; 7.5 and
º
pH and temperature by crude lipase enzymes were 7.0 and 40 C with the highest activity
was 9,815 U/mL and 9,664 U/mL.Halaman
Persetujuan
iii
Pernyataan iv Penghargaan
v
Abstrak vi Abstract
vii
Daftar Isi
viii
Daftar Tabel
ix
Daftar Gambar
x
Daftar Lampiran xi
BAB 1 PENDAHULUAN 1.1.
1 Latar Belakang 1.2.
2 Permasalahan 1.3.
3 Pembatasan masalah 1.4.
3 Tujuan penelitian 1.5.
3 Manfaat penelitian 1.6.
4 Metodologi penelitian 1.7.
4 Lokasi penelitian
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Perkecambahan
5
2.2. Perkecambahan Biji Kelapa Sawit
7
2.3. Enzim
10
2.3.1. Sifat – sifat Enzim
11
2.3.2. Faktor – faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Enzim
12
2.3.3. Klasifikasi Enzim
14
2.4. Enzim Lipase
16
2.4.1. Sifat – sifat Enzim Lipase
18
2.4.2. Sumber – sumber Enzim Lipase
19
2.4.3. Aktivitas Enzim Lipase
19
2.5. Isolasi dan Pemurnian Protein
20
2.6. RBDPO sebagai substrat
21 BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1. Alat – alat
24
3.2. Bahan – bahan
35
31 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil Penelitian
32
4.1.1. Penentuan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase terhadap Hidrolisis RBDPO
32
4.1.2. Penentuan pH Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase terhadap Hidrolisis RBDPO
33
4.2. Pembahasan Hasil Penelitian
4.2.1. Isolasi Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit
30
35
4.2.2. Penentuan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase terhadap Hidrolisis RBDPO
35
4.2.3. Penentuan pH Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase terhadap Hidrolisis RBDPO
36 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan
38
5.2. Saran
38 DAFTAR PUSTAKA
3.4.4. Penentuan pH Otimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase pada Hidrolisis RBDPO
3.4.3. Penentuan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase pada Hidrolisis RBDPO
24
3.3.4. Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit
3.3. Prosedur Penelitian
24
3.3.1. Pembuatan Larutan Pereaksi
25
3.3.2. Pembuatan Buffer Fosfat 0,05 M
26
3.3.3. Pembuatan Kecambah dari Biji Kelapa Sawit
26
26
29
3.3.5. Penentuan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase pada Hidrolisis RBDPO
27
3.3.6. Penentuan pH Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase pada Hidrolisis RBDPO
27
3.4. Bagan penelitian
27
3.4.1. Pembuatan Kecambah dari Biji Kelapa Sawit
28
3.4.2. Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit
LAMPIRAN
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1. Komposisi Asam Lemak Minyak Sawit10 Tabel 3.1. Pembuatan Larutan Buffer Fosfat pH 6,0-8,0
25
o
Tabel 4.1. Hasil Perhitungan Aktivitas Crude Enzim Lipase pada Suhu 30-50 C 31Tabel 4.2. Hasil Perhitungan Aktivitas Crude Enzim Lipase pada pH 6,0-8,032
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Buah Kelapa Sawit8 Gambar 2.2. Kecambah Biji Kelapa Sawit
9 Gambar 2.3. Reaksi Hidrolisis Trigliserida oleh Enzim Lipase
35 Gambar 4.7. Grafik Penentuan Suhu Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase terhadap Hidrolisis RBDPO
36 Gambar 4.8. Grafik Penentuan pH Optimum untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase terhadap Hidrolisis RBDPO
37