SDS-PAGE Sodium Dodecyl Sulphate – Polyacrylamid Gel Elektroforesis

commit to user polyacrylamid memiliki keuntungan antara lain stabil pada kisaran pH, suhu, arus listrik, dan jernih Hames dan Rickwood, 1990.

5. SDS-PAGE Sodium Dodecyl Sulphate – Polyacrylamid Gel Elektroforesis

Sodium Dodecyl Sulphate SDS adalah suatu deterjen anionic yang mengikat protein secara kuat. SDS-protein kompleks dapat dipecah-pecah oleh gel penyaring atau elektroforesis dalam buffer system yang berisi SDS. Metode yang secara luas digunakan untuk separasi SDS-protein kompleks adalah elektroforesis dalam gel polyacrylamid, yang terdiri atas polymer poyiakrilamid yang disambung menyilang dengan bisakrilamid Davis et al., 1994. SDS adalah suatu deterjen yang digunakan dalam poliakrilamid gel electrophoresis untuk determinasi berat molekul protein. Ini juga digunakan dalam prosedur ekstraksi asam nukleat untuk pemecahan dinding sel dan pemisahan asam nukleat protein kompleks. Kesederhanaan dan kecepatan dari metode SDS-PAGE, ditambah fakta bahwa hanya beberapa mikrogram sampel protein yang dibutuhkan, menjadikan SDS-PAGE sebagai metode terluas yang digunakan untuk determinasi kompleksitas dan molecular-masses dari polipeptida-polipeptida dalam sampel protein Hames Rickwood, 1990. SDS gel elektroforesis digunakan untuk memisahkan dan mengkarakterisasi jumlah dan ukuran dari setiap rantai protein atau sub-unit protein yang terdapat pada protein yang tersedia. Perlakuan SDS menyebabkan denaturasi protein yang meliputi pemutusan ikatan hydrogen dan ikatan ion yang biasanya mengikat polipeptida satu sama lain. Penggunaan ultrasentrifugasi dan gel SDS, sebagian commit to user besar polipeptida telah terpisahkan dan bobot molekul ditentukan dalam kDa Kilo Dalton Cooper, 1977. Adapun kelemahan dari penggunaan gel akrilamid adalah harganya yang relatif mahal dibanding penggunaan gel pati serta membutuhkan penanganan yang sangat hati-hati karena bersifat toksik Shields et al., 1983. Menurut Widiyanti 2006 gel poliakrilamid memiliki beberapa keuntungan seperti bersifat lentur dan bermuatan netral.

6. Analisis Protein